C12N — Микроорганизмы или ферменты; их композиции
Штамм бактерий paracoccus dеniтrifiсаns-продуцент эндонуклеазы рестрикции р 121
Номер патента: 1532583
Опубликовано: 30.12.1989
Авторы: Галимбаева, Дегтярев, Новожилова, Речкунова, Семенченко
МПК: C12N 9/14
Метки: dеniтrifiсаns-продуцент, paracoccus, бактерий, рестрикции, штамм, эндонуклеазы
...узнает и специфическ расщепляет последовательность нукле 0тидов ССМСС; оптимальное значение рНя действия рестриктазы 7,5-9,0;птимальная температура действия 37 С;я активности рестриктазы требуютсяОны МО Оптимальная концентрация-15 мМ.Для культивирования Раг.реп В рименяют питательную среду следуюего состава, г/л дистиллированной воы; триптон 10, дрожжевой экстракт 40соКультивирование проводят при 30 С( хорошей аэрацией в течение 2 сут.1 ыход биомассы 2-3 г/л культуральнойжидкости. Выход рестриктазы Рйе 12 1: 45:000 ед/г биомассы. П р и м е р , Клетки Раг. Йеп., :ранящиеся в 50 .-ном глицерине в Ь- бульоне при-20 С высевают на чаш- У с 1. А. После 2 сут инкубирования50 1 ри 30 С клетки собирают петлей и носят в 100 мл В и выращивают до...
Штамм бактерий вrеviвастеriuм iммотuм продуцент эндонуклеазы рестрикции в 1
Номер патента: 1532584
Опубликовано: 30.12.1989
Авторы: Галимбаева, Дегтярев, Новожилова, Речкунова, Семенченко
МПК: C12N 9/14
Метки: iммотuм, бактерий, вrеviвастеriuм, продуцент, рестрикции, штамм, эндонуклеазы
...Натана и Смита,Штамм также содержит рестриктазу ш 11, которая является изошизомеом Взр В. Т.Ферменты Вып 1 и Впп 11 хорошо тделяются друг от друга при хроатографии на фосфоцеллюлозе Р, то позволяет получить препараты бонх ферментов без взаимных примеей.Сравнение электрофоретической одвижности фрагментов, получаемых ри гидролизе ДНК фага Ь рестриктазой 40 ып 1 с электрофоретической подвижностью фрагментов известной длины ,(Игц 1 гидролизат ДНК фага ) позволяет определить длину фрагментов Мв 1 гидролизата. Получаемый набор врагментов совпадает с набором фрагМентов, соответствующим гидролизу ДНК фагапо последовательности ТТССАА.Таким образом, фермент Вш 1 , узнает и гидролизует пбследователь,ность нуклеотидов ТТССАА и являетсяизошизомером...
Рекомбинантная плазмидная днк 33, кодирующая метилазу s 11, и штамм бактерий еsснеriснiа coli продуцент метилазы s 11
Номер патента: 1532585
Опубликовано: 30.12.1989
Авторы: Грубер, Дебов, Карягина, Лопатина, Лунин, Никольская-Санович, Поляченко
МПК: C12N 15/00
Метки: бактерий, днк, еsснеriснiа, кодирующая, метилазу, метилазы, плазмидная, продуцент, рекомбинантная, штамм
...Бяо 11 в клетках, несущих плазмиду с 1 33, не происходит.Плазмидную ДНК о 33 подвергают рестрикционному анализу.Характеристика штамма.2585 6Е. со 1, трансФормированных плазми"дой й 33.ШтаммТ 15 чения характера метилирования Яяо 11 20 25 30 40 45 50 55 5 153Клетки прямые, палочковидные, неподвижные, грамотрицательные, лактозопозитивные. При рассеве на чашкис 1,3%-ным МПА рост в виде отдельных,колонии, иногда в К-форме с неровными5краями. Хорошо растет на плотных ижидких питательных средах (МПА, МЛБ,1.В-бульон и ЬВ-агар).Физиолого-биохимические признаки,сКлетки растут в пределах 4-45 Спри оптимуме рН 6,8-7,5. Штамм разлагает глюкозу, лактозу, маннит с образованием кислоты, не .разлагаетсахарозу, сбраживает мальтозу, ксилозу,...
Штамм микромицета aspergillus ruвеr konig, sрiескеrм, and вrемеr тном and снurсн, используемый для оценки микробиологической стойкости полимерных материалов и покрытий
Номер патента: 1534051
Опубликовано: 07.01.1990
Авторы: Григайтите, Казакявичюте, Лугаускас, Мотеюнайте, Пячюлите
Метки: konig, ruвеr, sрiескеrм, аспергиллус, вrемеr, используемый, микробиологической, микромицета, оценки, покрытий, полимерных, снurсн, стойкости, тном, штамм
...ингредиенты, г".Калий фосфорнокислыйоднозамещенный 0,7Калий фосфорнокислыйдвухзамещенный 0,3Магний сернокислый 0,5Натрий азотнокислыйКалий хлористый 0,5Железо сернокислое15 001 30,0 20,0 закисноеСахарозаАгарВода дистиллированная До 1000,0 млКультуру гриба выращивают 2 неде.ли при 29+1 С,Суспензию спор с концентрацией1-2 млн/мл готовят в дистиллированной воде,П р и м е р 1. Сравнивают активность предлагаемого штамма и двухнаборов грибов: набор тест"культурпо ГОСТ 9.048-81 и набор тест-культур по ГОСТ 9.049-81 с добавлениемштамма АврегдИ 1 цв гцЬег (КопЦ,ЯрхесКегш, ать Вгешег) Т 1 иш апдС 1 шгсЬ ВКМ гР. Испытания нро"+2 С, относительной влажности 902.Образцы всех материалов поделенына две партии, Каждая партия заражена одним иэ...
Способ получения ферментных мембран
Номер патента: 1535892
Опубликовано: 15.01.1990
Авторы: Гурявичене, Кулис, Лауринавичюс, Песлякене
МПК: C12N 11/00, C12N 11/08
Метки: мембран, ферментных
...нелинеен уже приконцентрации 2,5 мМ.П р и м е р 3. Аналогично примеру 1 изготавливают ферментную мембрану для определения лактата. Для приготовления ферментного слоя 50 ед, 10 40 45 50 55 Наибольший диапазон линейности градуировочного графика наблюдается при использовании ядерного фильтра с пористостью 0,023, однако при этом чувствительность электрода уменьшается до 0,05 нА/мМ. Аналогичная взаимосвязь между диапазоном линейности и чувствительностью следует также из макрокинетического уравнения. Таким образом, оптимальными параметрами с практической точки зрения обладают мембраны, в которых используются ядерные фильтры с пористостью 0,05-33. Они обладают линейностью в практицески важном диапазоне концентрации глю 15 20 25лактатоксидазы...
Штамм бактерий рsеudомоnаs sp., используемый в качестве тест-культуры для определения никотиновой кислоты
Номер патента: 1535893
Опубликовано: 15.01.1990
Авторы: Максимова, Олехнович, Фомичев
МПК: C12N 1/20, C12N 15/00, C12Q 1/00 ...
Метки: бактерий, используемый, качестве, кислоты, никотиновой, рsеudомоnаs, тест-культуры, штамм
...размеров зоны роста идикгторной тест-культуры от количества никотиновой кислоты.Однако даже в этом дсасве размеры зоны роста индикатвой тт-куль 153589 1тури цд дгдрц пдццой с 1 е 2 е мо Утварьцровдт двцс 2 цмастц От ц.отцос - тц ц марки д дрд ц других факторов.Поэтому 12 я 112 учсц 15 Г иЗадукцц ци(сти5 новой кислоты цд плотных средах рекалеСд(вдцо цспа;ьзовдть шгдмм толькодля качественного анализа, причем 11 зоцчкгГ 2 ГГГ а ГГГцгс с ."1 а.га гг 1,;гГО регис Г 21 с пп , 1 дч д а О,.кгл Г. 0Прц .к"цс рцмецтд" .Ом д ,2.цэе здвисигсс Гц размеров в ны роста Г 5 дикдторг го ГТкма ОГ КЗЗИЧ:стад 1 цкатцн воц кс,ты прц исОльзовдцц агаврц за. дцзых сред, с г;гг;21 х в кдчес.тве(5.:ОЧ ГИ г , 12 О.ГД " РГП 3 ТсЦОЛ ИЛИ ГС Г;2 НС,д.1 ГГс Н,с ЛГс...
Штамм бактерий кlевsiеllа рnеuмоniае, используемый в качестве референс-штамма при определении антилизоцимной активности бактерий, и способ определения антилизоцимной активности бактерий
Номер патента: 1537689
Опубликовано: 23.01.1990
Авторы: Бондаренко, Петровская, Яблочков
МПК: C12N 15/00, C12Q 1/00
Метки: активности, антилизоцимной, бактерий, используемый, кlевsiеllа, качестве, определении, рnеuмоniае, референс-штамма, штамм
...отделяют культуральную жилкость от клеток центрифугированнем. Надосадочную жидкость смешивают с суспензией клеток микрококка и раствором лизоцима. Выдерживают при комнатной температуре в течение 25-30 мин и измеряют оптическую плотность при длине волны 400+20 нм,Активность антилизоцимного фактора прямо пропорциональна оптической плотности. В качестве контролей используют смеси: беэ лизоцима (К )1 ее оптическую плотность принимают за плотность образца с полным подавлением действия лизоцима; без культуральной жидкости (замененной стерильной минимальной средой) - после 30 мин инкубации при комнатной температуре (К ) этот контроль соответствует пол 2ному отсутствию антилизоцнмной активности (полное просветление).Антилизоцимную...
Штамм гибридных культивируемых клеток животных мus мusсulus, используемый для получения моноклональных антител к 1g а человека и высших обезьян
Номер патента: 1460994
Опубликовано: 30.01.1990
Авторы: Воеводин, Зоделава, Клоц, Оганян, Размадзе
МПК: A61K 39/395, C12N 5/00
Метки: антител, высших, гибридных, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, обезьян, человека, штамм
...присутствии ПЭГ(реакциявстречной и радиальной иммунодиффузии). Константа ассоциации МКА с1 яА человека составляет 2,2 10 М,с 1 яА обезьян - 510М.Контаминация.Бактерии, грибы и микоплазмы .отсутствуют. Родительская линия Х 63-Ар8.653 продуцирует эндогенный ретровирус С-типа мышей.Криоконсервирование.5-6 млн. кл, замораживают в жидком азоте в присутствии 90% сыворотки плода коровы и 10% ЭМЯО. Жизнеспособность клеток после размораживания составляет 90% (по включениютрипанового синего).Использование штамма иллюстрируется следующими поимерами.Пример 1,Навески иммуноглобулинов всехклассов человека в количестве 15 мкг50на трек кипятят в течение 5 мин наводяной бане в буфере для нанесениясодержащем меркаптоэтанол. При этомпроисходит...
Рекомбинантная плазмидная днк 24, кодирующая синтез рестриктазы и метилазы s 11 и штамм бактерий еsснеriснiа coli продуцент рестриктазы и метилазы s 11
Номер патента: 1539205
Опубликовано: 30.01.1990
Авторы: Грубер, Дебов, Карягина, Лопатина, Лунин, Никольская-Санович, Поляченко
МПК: C12N 15/00
Метки: бактерий, днк, еsснеriснiа, кодирующая, метилазы, плазмидная, продуцент, рекомбинантная, рестриктазы, синтез, штамм
...при 10000 я 15 мин, затем 1 О мкл супернатанта добавляют впробу, содержащую 1 мкг бактериофага 3 в 10 мкл буфера А. Пробу инкубируют 1 ч при 37 С, после чегоанализируют электрофорезом в 1,2 Еном агарозном геле. Картина рестрикции в случае штамма Е, со 1 Р 8200,несущего плазмиду с 1 24, характерназля рестриктазы Бзо 11.1 мкг плазмидной ДНК й 24, выделенной из штамма Е.со 1 Р 8200, обрабатывают 1 О ед. рестриктирующей эндонуклеазы Бво 11 в буфере А в течение 2 ч при 37 С. Электрофорез показывает, что ДНК плазмиды й 24 при такой обработке не фрагментируется, вто время как плаэмида р 11 С 19 даеткартину гидролиза, типичную для плазмиды рЦС 19, обработанной рестриктаэой Бво 11. Эти данные свидетельствуют о защите мест узнавания...
Штамм дрожжей liромyсеs sтаrкеyi источник липидов
Номер патента: 1541249
Опубликовано: 07.02.1990
Авторы: Залашко, Романова, Стигайло
Метки: liромyсеs, sтаrкеyi, дрожжей, источник, липидов, штамм
...биомасса имеетсветло-бежевый цвет, матовую поверхность и вязкую консистенцию, Отдельнаяколония имеет гладкую матовую поверхность, профиль выпуклый, край ровный,Рост культуры на пластинках с картофельным агаром: мицелий или псевдомицелий не образуетОбразование аскоспор: аскоспорыобразует,Йизиолого-биохимицеские признаки.Штамм непатогенен, нетоксицен, таккак полуцен иэ исходного нетоксичногоштамма 1,тротпусея. ягяг 1;еут ВКМ без применения мутагенных факторов.Отношение к киспороду: аэроб.Отношение к рН; растет в широкихпределах рН ст 3,0 дс 7,0 с оптимумом 5,0-5,5.5 15412Отношение к температуре; оптимумдля роста 28-30 С, максимум - 36 С.Брожение сахаров: сахара не сбраживает.5Ассимиляция источников углерода:глюкоза + инулин + галактиол...
Питательная среда для культивирования рубцовой микробной ассоциации вниисхм n 1-32
Номер патента: 1541250
Опубликовано: 07.02.1990
Авторы: Прокопьева, Солдатова, Федулина, Чеверда
МПК: C12N 1/20
Метки: ассоциации, вниисхм, культивирования, микробной, питательная, рубцовой, среда
...Омепянского (контроль)Грела по лри 408 250 81,0 ЗО мер 1484,051 83 92 407,0 394,О 55 45 щей микроорганизмы Кцоппососсцявр М 35 1.асгоЬас 111 ця вр Р 35, Аяошзпоя яр Р 35 в процентном соотношении 88,7:10,15:1,15, меняется соотношение микроорганизмов в ассоциациив пользу целлюлолитических и повышается способность ассоциации гидролизовать клетчатку.П р и м е р 1. Готовят питатель,ную среду следующего состава, г/л:однозамещенный Аосйорнокислый калий0,9; сернокислый магний 0,9 хлористый натрий 0,9, сернокислый аммоний1,8; мел 1,8; пептон 0,1; аммиак0,1, фильтровальная бумага 6,0, рубцовая жидкость 50,0, водопроводнаявода - до 1 л. В среде устанавливаютрН 6,8. В колбы емкостью 250 мл разливают. по 200 мл простерилизованнойсреды и в каждую...
Способ контроля питательных сред, используемых для вибриоцинотипирования холерных вибрионов
Номер патента: 1541251
Опубликовано: 07.02.1990
Авторы: Воронежская, Иванова, Сомова
МПК: C12N 1/20
Метки: вибрионов, вибриоцинотипирования, используемых, питательных, сред, холерных
...яоппех М(31); 6 - БМце 11 аяоппе 17(2); 7 - ЕясЬегс 1 п.а со 1 хС(1 ); 8 - ЕясЬегзсМа со 13. 6( );9 - ЕясЬегсИа со 1 К; 1 0 - ЧИгхо сйо 1 егае 541 (54); 11 - ЧУгюсЬо 1 егае 296/,1 (20); 12 - ЧуосЬо 1 егае 24 БЬеьп 1077.35Посевы инкубируют в течение 18 чЧувс твительность индикаторных культур к вибриоцииам регистрируют поотсутствию их роста на полосе илиза пределами роста тест-штаммов,40Спектр чувствительности устанавливают по табл.Испытуемый агар считают пригодньидля вибриоцинотипироваиия при воспроизведении спектра ингибирующейактивности тест-штаммов по отношениок индикаторным культурам в соответ"ствии с табл. 1,П р и м е р 1. Контроль 1,5 Х-но-.го агара Мартена, рН 7,6, серия 1550на пригодность для вибриоцинотипирования. По результатам...
Способ получения растений-регенерантов риса
Номер патента: 1541252
Опубликовано: 07.02.1990
Автор: Кучеренко
МПК: C12N 5/00
Метки: растений-регенерантов, риса
...не способствует увеличению корнеобра. 40 зования у регенерантов. Образовавшиеся на регенерационной среде нормальные проростки переносят в почву, а стеблевые регенеЯнты икаллусы со . с теблевыми почками, п рек ратившие ра з в итие, извлекают из проб ирок или колб, разделяют на отдельные проростки, а каллусы - на кусочки величиной 2-3 мм, после чего проводят их обра-ботку ауксином о(-НУК в концентрации 10 мг/л. Каллусы с почками, а также проростки высотой, не превышающей 1 см, помещают в чашки Петри на фильтровальную бумагу, смоченную раствором ауксина с-НУК (слой не бо 55 лее 1 мм). Чашки закрывают и оставляют в стерильном боксе при комнатной температуре на 1-2 ч. Это время необходимо и достаточно для проникнове, приведены результаты...
Штамм гибридных культивируемых клеток животных mus мusсulus, используемый для получения моноклональных антител к поверхностному антигену возбудителя туляремии голарктической расы
Номер патента: 1541253
Опубликовано: 07.02.1990
Авторы: Алексеева, Козловский, Новохатский, Соколов, Черепахина
МПК: A61K 39/395, C12N 5/00
Метки: антигену, антител, возбудителя, гибридных, голарктической, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, поверхностному, расы, туляремии, штамм
...при 37 С в пластиковой или стеклянной посуде при посевной дозе 150200 тыс./мл в течение 3-4 дней доплотности насыщения 800 тыс./мл.Клетки пассируют один раз в 3-4 днятой же дозой Коэффициент рассева1;4-1;5. Культивирование ведут напитательной среде ВРМ 1 1640 илиДМЕМ, содержащей 10 Е эмбриональной телячьей сыворотки, 2 мМ глютамина,8-10 мМ буфера НЕРЕЯ. Культивирование штамма в организме экспериментальных животных, Индукцию асцитных опухолей у интактных беспородных белых мышей и инбредныхмышей линии Ва 1 Ь/с, внутрибрюшиннопраймированных за 14 дней до введения гибридомы пристаном в дозе0,5 мл/мышь осуществляют путем ино/кулирования 10 10 гибридных клеток на одно животное в 3 мл среды. Иммунную асцитическую жидкость собирают по мере...
Штамм гибридных культивируемых клеток животных mus мusсulus, используемый для получения моноклональных антител к термостабильному о-антигену холерного вибриона серовара огава
Номер патента: 1541254
Опубликовано: 07.02.1990
Авторы: Алексеева, Бичуль, Бурлакова, Новохатский
МПК: A61K 39/395, C12N 5/00
Метки: антител, вибриона, гибридных, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, о-антигену, огава, серовара, термостабильному, холерного, штамм
...клетки ГХ-В 7/Ог представляют собой крупные оКруглые клетки с узким ободком базофильной цитоплазмы. Ядрагиперхромные, неправильно-овальнойформы, крупные, с грубой структурой ядерного хроматина, В значительной части клеток цитоплазма имеетвыросты.Культуральные признаки типичныдля перевиваемых клеток мышиныхплазмоцитом. Клетки ГХ-В 7/Ог культивируют в виде стационарной суспензииопри 37 С в пластиковой или стеклянной посуде при посевной дозе 1001500 тыс./мл в течение 3-4 дней доплотности насыщения 800-900 тыс.кл./мл,Клетки пассируют один раэ в 3-4 дня.той же дозой. 1(оэффициент рассева1:4-1:5, Культивирование ведут на питательной среде ВРМХ 1640 или ДМЕМ,содержащей,10 эмбриональной телячьейсыворотки, 2 мМ глютамина, 8-10 мМбуфера...
Способ получения пируватдекарбоксилазы из пивных дрожжей
Номер патента: 1541255
Опубликовано: 07.02.1990
Авторы: Баум, Гриценко, Черникевич
МПК: C12N 9/88
Метки: дрожжей, пивных, пируватдекарбоксилазы
...пируватдекарбоксилазы достигает 8,3 Е, однако присутствующие в препарате незначительные остаточные концентрации НАД Н-зависимых оксидаз приво 1541 255дят к самопроизвольному окислениюНАЛ На.Заключительную очистку проводят методами адсорбционной хроматографиина оксиапатите и ионного обмена наКМ-целлюлозе. Для достижения гомогенности 1 г грубой сульфо-аммонийной пасты растворяют в 1,5 мл0,005 М Ба-Фосфатного буфера, рН6,8 с 2 мМ Мд, 1 мМ ЭДТА, 0,5 мМтиаминдифосфатом и 5 мМ цистеингидрохлоркдом и пропускают через колонку (З,б 30 см, 48 мл/ч) с сефадексом С, уравновешенную исходнымбуфером, Значение рН и ионной силыуравновешивающего буфера подобраныэкспериментально, при которых пируватдекарбоксилаэа не связываетсяоксиапатитом и...
Способ получения большого фрагмента днк-полимеразы i еsснеriснiа coli фрагмента кленова
Номер патента: 1541256
Опубликовано: 07.02.1990
Авторы: Баронайте, Вайткявичене, Марцишаускас, Пасечник, Песлякас, Суджювене, Федорова
МПК: C12N 15/00, C12N 9/00
Метки: большого, днк-полимеразы, еsснеriснiа, кленова, фрагмента
...ферментного экстракта полимином Р и сульфатом аммония. К центрифугату (215 мл), полу5 15412 ченному на предыдущей стадии, при постоянном перемешивании в течение 30 мин добавляют 107.-ный (13,7 мл) раствор полимина Р до конечной концентрации 0,67, После добавления 5 всего объема полимина перемешивание продолжают еще 30 мин. Экстракт центрифугируют в течение 15 минпри 4000 Полученный осадок используют для получения фрагмента Кленова. Фермент экстрагируют из осадка 100 мл 0,1 М калий-фосфатным буфером рН 7,0, содержащим 0,001 М /ь-меркаптоэтанол, 0,002 М ЭДТА, 0,1 М ЯаС 1. Процедуру повторяют еще раз. Супернатанты объединяют, Экстракт центрифугируют в течение 15 мин при 4000 я. К супернатанту (230 мп), медленно перемеши вая,...
Способ выращивания дрожжей
Номер патента: 1544796
Опубликовано: 23.02.1990
Авторы: Беленикина, Рубин, Страховская, Фрайкин
МПК: C12N 1/38
Метки: выращивания, дрожжей
...дрожжей добавляют в начальный момент и каждые последующие 4 ч роста культуры 2 10мас. СКС, Инкубацию осуществляют на качалке (230 об/мин) при 30 С, Концентрацию клеток дрожжей определяют путем подсчета их в каме- ре Горяева, Биомассу определяют повеличине светорассеивания на фотоэлек тр ока лори метре (с ветофил ь тр 6) .В течение всего роста культурыдрожжей получают увеличение концентрации клеток дрожжей по сравнению сконтрольными на 60-701 и прирост биомассы на 40-503 (фиг.1, кривая 3) посравнению с контролем (фиг.1, кривая 1),10П р и м е р 2. Опыт проводят аналогично примеру 1, но периодичностьдобавления стимулятора составляеткаждые 1-8 ч. Получают зависимостьвеличины эффекта стимуляции от периодичности добавления стимулятора...
Штамм культивируемых перевиваемых клеток кожно-мышечной ткани эмбриона кролика, используемый для выделения и накопления вирусов
Номер патента: 1544797
Опубликовано: 23.02.1990
Авторы: Гвозденко, Дьяконов, Михайлова, Пухова, Соловьев
МПК: C12N 5/00
Метки: вирусов, выделения, используемый, клеток, кожно-мышечной, кролика, культивируемых, накопления, перевиваемых, ткани, штамм, эмбриона
...45 от 1 до нескольких в ядре. Питоплазма мелкосетчатая. Кариология линии на уровне 51 пассажа. Кариотип соответствует виду (2 п=44). Модальный класс 88-89 хромосом. Клетки имеют50 околотетраплоидный кариотип, отличаются большим разбросом числа хромосом. Имеется 3-4 микрохромосомы и непарная длинная субметацентрическая маркерная хромосома.Контаминанты.Бактерии, грибы, микоплаэмы и вирусы не обнаружены.Чувствительность к вирусам. Линия клеток представляет собой высокопродуктивный субстрат для кульивирования вирусов ринопневмонни (три штамма), артериита лошадей, реовирусу 3-го типа, инфекционного ринотрахеита, диареи крупного рогатого скота, парагриппа.П р и м е р 1. Культивирование вируса инфекционного ринотрахеита крупного рогатого...
Стимулятор эмбриогенеза в культуре растительной ткани
Номер патента: 1544798
Опубликовано: 23.02.1990
Авторы: Захленюк, Костенюк, Кузовкина, Кунах, Рабинович
МПК: C12N 5/00
Метки: культуре, растительной, стимулятор, ткани, эмбриогенеза
...Для выращиваниякультуры тканей мака прицветниковогоготовят модифицированную питательнуюсреду Мурасиге-Скуга (индекс средыРФ так, чтобы в 1 л ее содержалось,мг/л: 10 1 1 30000 8000До 1 л Среду разливают в пробирки по 5 мл в каждую. Стерилизуют 15 мин при 1 атм. После застывания среды ткань мака рассаживают по 0,3-0,5 г на пробирку и культивируют, пересаживая каж дые 15 сут на свежую среду.Затем готовят эмбриогенную питательную среду как описано, исключая из ее состава 2,4-дихлорфеноксиуксусную кислоту и кинетин и добавляя пара 45 11 Н 41103СаС 1Мазо 7 Н ОКНРОН,во,Ип 50 4 Н ОСоС 1 6 Н гОСц 80 5 НОЕПБО 4 7 Н 70Ма Мо 02 Н тОКЛРеБО 7 НО1 ЧаЕВТА . 2 НОТиаминМезоинозитПиридоксинНикотиновая кислотаГидролиэат...
Способ получения гибридных культур грибов
Номер патента: 1544799
Опубликовано: 23.02.1990
Авторы: Демина, Джафарова, Клесов, Нуцубидзе, Образцова, Прабакаран
МПК: C12N 5/00
Метки: гибридных, грибов, культур
...дгц цри .10 т;, После 2 Г)-чдслнгл 1 стд мицелии лтделянт Ьистьтрсцдццем, днаж ги ц р лмьтн сттст дистис Ни)тдтттЙ водой, здтем 0,05 Г 1 сЬОСдттп,пт буфером с рН б,5, слдс.рждщим 0,7 Г 11:41 (лсмлтцческий стстбиттдтлр ) с гтрец тсмитнтцгульЬдт н клнцецтрдцтти 250 мкг/мл (буфер Л), 100 мг цромьттого мицелия (гтст сыр му весусусттендирутпт н т мл буЬерд Л, слдерждщегст также 50 мг лцирунппей смеси, сстоящей из техтптчегких фермецтцьгх препаратов целллнирцдцнд и пектофледица, взятых в сллтцсппеции 1:1, Плгпе часовой ицкубдции получетцппе протоц тдс тОтгегтятпт От церд рутпеццых клеток ЬттптттЯдцттеьт через стекпяц - цый си.тт,тр, ттрлмындют несколько раз буфером г. ц коццецтрцруспт фильтр;тт цецтрттЬуги 1 лндцием при 1000 Г, н течение 15...
Способ получения сыворотки крови животных для культивирования клеток
Номер патента: 1544800
Опубликовано: 23.02.1990
МПК: C12N 7/02
Метки: животных, клеток, крови, культивирования, сыворотки
...из вени илисердца, сполау здкрытуо систему, исключдояуо коцтдкт с внешним ицфици ронялл ноздухол, Объем сосуда для взятия крови и ее количество определяются потребцостью в сыворотке, Отдеение сыворотки методом отстоя производят при 7 С. Отстоявщуося сыворотку собираот по закрытой системе н сосуд-сборцик под отрицательным давлением (02 дтл. Сбор сыворотки производят специаьной стеклянной трубкой диаметром0 мм, изогнутой гд котине под угоы 90 , открытый конец прикрыт стеклянной реиетчдтой пластиной с размером отверстий 0,5-1,0 мм, Гдгодаря этому ссос гьворотки н трубку происходит г.верху, а це снизу со40 стороны г.густкд, Такое рдсполс 1 жециезасагьдсщего отверстия предотвращаетпоступление мелких сгустков и осевшихна понерхцогти сгустка...
Способ выделения 5 -нуклеотидазы из яда кобры
Номер патента: 1544801
Опубликовано: 23.02.1990
МПК: C12N 9/22
Метки: выделения, кобры, нуклеотидазы, яда
...основного белка 0,35-0,45 М раствором серно 55 кислого аммония(рН 6,5-7,5), Полученный йермент концентрируется при помощи ультрайильтрации.Характеристика препарата: выход 90%, степень очистки -в 25 раз Содержание фосфодиэ.теразы и неспецифической и Ьосйомоноэстеразы ниже 0,05 от активности 5 -нуклеотидазы,П р и м е р 1. К, 0,5 г яда кобрыдобавляют 4 мп раствора 0,35 М сернокислого аммония (рН 6,5), смесь медленно перемешивают в течение 4 чопри 4 С. Растворенный яд центрифугируют при 5000 об/мин при 4 С в течение 30 мин. Осадок выбрасывают, надосадочную жидкость используют для хроматографии, На уравновешенную 0,35 Мраствором сернокислого аммония (рН6,5), колонку с гептил-агарозой (размеры колонки 2,1 ю 2,6 см) наносят раствор яда,...
Штамм бактерий bacillus тнuringiеnsis продуцент рестриктазы изошизомера
Номер патента: 1544802
Опубликовано: 23.02.1990
Авторы: Азизбекян, Нетыкса, Ребентиш
Метки: bacillus, бактерий, изошизомера, продуцент, рестриктазы, тнuringiеnsis, штамм
...действия рестриктазыо37-40 С, для активности фермента требуются ионы Мр (5-10 мМ). Ферментактивизируется небольшими концентрациями ИаС 1 (25-50 мМ), За единицу ак.;ивности принимается количество Фермента, вызывающее полное расщепление1 мкг ДНК бага лямбда за 1 ч инкубации при 37 дС. Состав буфера: 1 О мМ трис-НС 1, 50 мМ ИаС 1, 10 мМ МЕС 1 10 мМ 2-МЭ, рН 7,5. Для определения последовательности нуклеотидов, узнаваемых рестриктазой Вц, проводили гидролиз ею ДНК различного происхождения, для которой известна нуклеотидная последовательность: бактериофага лямбда ( Ъ ), ф Х 174 РФ, М 13, вируса БЧ 40, плазмиды РВР 322., Расщепление ДНК проводят в реакционной среде следующего состава: 10 мМ трисНС 1 (рН 7,5) б мМ 2-мерпатоэтанола, 6...
Штамм дрожжей rноdотоrilа gluтinis var. gluтinis, используемый для кормления гидробионтов
Номер патента: 1544803
Опубликовано: 23.02.1990
Авторы: Алиева, Курмангалиева, Мукашев, Новожилова, Сарсембаев
МПК: C12N 15/00
Метки: gluтinis, rноdотоrilа, гидробионтов, дрожжей, используемый, кормления, штамм
...составляет 56 ,. При этом аминокислотный состав протеина следующий: аспарагин 4,059; треонин 2,074; серии 2,064; глутамин 7,295; пролин 2,158; глицин 2,369; алании 3,623; валин 2,619; метионин 0,973; изолейцин 1,956; лейцин 3,562; тирозин 3,751; фениллаланин 2,410; гистидин 1,173; лизин 3,737; аргинин 5,298; цистин 1,400. После ферментации полученную биомассу лиофильно .высушивают, Количество живых клеток в препарате составляет 60-70П р и м е р 2. Штамм КЬойоСогц 1 а 811 гдпя чаг. 81 цг.п 1 я ВКПМ Увью ращивают в ферментере при 28 С и рН 5,0-6,0 в условиях периодического культивирования с этанолом в качестве источника углерода на среде 8-Е.Выход абсолютно сухих веществ от заданного этанола составляет 70%, содержание сырого протеина...
Штамм гриба claviceps purpurea-продуцент пептидных эргоалкалоидов
Номер патента: 1342011
Опубликовано: 23.02.1990
Автор: Саркисова
МПК: C12N 1/14, C12P 33/20
Метки: claviceps, purpurea-продуцент, гриба, пептидных, штамм, эргоалкалоидов
...а 20 ал Р и м е Р 3 а Штамм а Ряба С 18", ерз рцгрцгея ВНИР 1 А Р 312-А выра"щивяют в течение 9 дней на агаризованной питательной среде Т 2, Затеиа ОЛОНИИ аОМОГЕНРаЭИРУЮТ Н ПЕРЕНОСЯТв колбы Эрленмейера объемом 500 см,содержащих 50 см питательной средыТО следующего состава, г/л: глюкоза.:Л 50 7 Н 0 0,006, дистиллированнаяВова 1000 см рН До 5 2 аммиакомКультуру Выряцивакт ня качалкахоВ темноте при темпевятуре 24 С в те 6 дНЕ, 5 Мл Полунанаиой у(ауЛЬту.,ры инокулируют и колбы таКого жеобъема с 50 см среды Т 25 следующего состава и/л; сахароза 30.(мч(Юаня кислота 1 3 а иН РО О - 3 а1 ф О 7 Н, О О, 25, дрожжевой экстракт 0;1 КС 1 О,2, Ге 507 НО0007, 2 Л 50 7 НО 0,006, дисткплированная Вода - 1000 см -, рН -До 5,2.аммиаком....
Штамм молочнокислых бактерий sтrертососсus сrемоris, используемый в заквасках для кисломолочных продуктов
Номер патента: 1546482
Опубликовано: 28.02.1990
Метки: sтrертососсus, бактерий, заквасках, используемый, кисломолочных, молочнокислых, продуктов, сrемоris, штамм
...свойства за" квасок, повысить их молокосвертывающую, протеолитическую активность закваски приобретают способность к накоплению слизистых веществ, повышающих вязкость молочного сгустка, и к биосинтеэу ароматических веществ, обогащающих вкус сквашенного молока.Сравнительная характеристика кисломолочных продуктов, приготовленных с использованием заквасок, включающих штаммы Бггергососсця сгешогз ВНи Бггергососсцз стешог 1 з Н, приведе" на в табл, 3.П р и м е р 1. Производство ряженки реэервуарным способом с использованием закваски, в состав которой входит предлагаемый штамм Бгтер 1 ососсцз сгешогхя ВН.Готовят закваску следующего состава; Бггерсососсця СЬегшорЬПця и Бггергососсцз сгешог 1 я РН.Для приготовления лабораторной закваски в...
Способ получения растений-регенерантов ноrdеuм vulgare, устойчивых к токсическому действию ai в кислой среде
Номер патента: 1546483
Опубликовано: 28.02.1990
МПК: C12N 5/00
Метки: vulgare, действию, кислой, ноrdеuм, растений-регенерантов, среде, токсическому, устойчивых
...витамины по В : тидмин 10 миоинОзитОл 100; пиридоксин - НС 1 1; никотиновая кислота 1; 2,4 Д 2 (среда для инициации каллуса) или РНУ 0,5; кинетин 1,25 ЗО т 35 40 45 50 Эту среду в дальнейшем называют основной. На основную среду накладываются предлагаемые факторы: А 1" и желатин при разных значениях рН.П р и м е р 2. Проводят культивирование незрелых зародышей ячменя на кислой селективной среде 1 с токсическим действием алюминия следующего состава, мг/л: основная среда, желатин 3600; А 1" 9; рН 4,8 (готовой среды); рН 3,75 (перед автоклавированием).На эту среду высаживают незрелые зародыши тех же 6 селекционных образцов ячменя щитком вверх в воэрасте 10-14 дней после опыления в количестве около 240 зародышей каждого образца. В зависимости...
Способ получения люциферазы светляков luciola мingrеliса
Номер патента: 1546484
Опубликовано: 28.02.1990
Авторы: Букатина, Дементьева, Кутузова, Угарова
МПК: C12N 9/02
Метки: luciola, люциферазы, мingrеliса, светляков
...1:30 1:30 5" 1 О 0,01 В, ,Гомогенный препарат,0 2 10 2 1 О 0 тем же буфером для удаления с носителя,несвяэавшихся веществ. Люцифераэу элюируют тем же буфером, но содержащим 60 мМ МАЗО,. Во Фракциях, содер-жащих люциферазу спектрофотометрическим методом определяют концентрациюбелка, и полученные фракции наносятна колонку с голубой агарозой в соотношении белок:носитель 1:30. Несвязав шиеся белки смывают 0,05 М трис-ацетатным буфером, рН 7,8,. содержащим2 мМ ЭДТА 60 мМ ИМБО. Злюцию люциферазы проводят тем же буфером, содержащим 15 мК АТФ. Получают раствор люцифераэы с концентрацией белка0,05 мг/мл и удельной активностью2 10 мВ/мг, Выход по активности сос 9тавляет 1004 от исходной.Раствор люциферазы после аффиннойхроматографии на...
Способ получения рестриктазы с i
Номер патента: 1546485
Опубликовано: 28.02.1990
Автор: Лебенка
МПК: C12N 9/14
Метки: рестриктазы
...для электрофореза, источник питания УИП, ультрафиолетовый осветитель.ДНК рВВ 322 выделена по известнойметодике.ФФормула и з о б р е т е н и яСпссоб получения рестриктазы СГц 1, предусматривающий культивирование продуцирующего микроорганизмаСаы 1 оЬасгег ГцзЫогппз ВКПМ Вна пи" тательной среде, содержащей пептон, дрожжевой экстракт, воду и сульфат магния, с последующим разрушением клеток ультразвуком и очисткой Фермента путем хроматографии, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью упрощения процесса очистки и повышения выхода целевого продукта, хроматографию ведут на колонке фосфоцеллюлозы с элюцией градиентом хлористого натрия от 0,1 до 1,0 М и затем на системе колонок ДЭАЭ-сефацел-гепарин-сефарозы с нанесением образца при...