Патенты с меткой «синтез»

Номер патента: 79278

Опубликовано: 01.01.1949

Автор: Будницкая-Павлова

МПК: C07C 403/08

Метки: активного, биологически, витамина, синтез

...экстракт отделяют от водного слоя и сушат над прокаленным серно- кислым натрием в ампуле. из кот 1- ройдалсн воздух.Через 24 ча:а содержпмос амг, - лы подвергают хроматографическому анализу. Раствор испытуемой смеси пропускают через стеклянную труоку, наполненную окисью алюминия, применяемой в качестве адсорбента, (гтаилучшие результаты дает двухкратное хроматографирование). Отдельные компоненты смеси располагаются в виде полос в верхней части столба адсорбента. Полученная таким образом хроматограмма проявляется, Для этой цели через колонку с адсороентом79278 пропускают 250 мл петролсйцого эфира. (Обычно получается пять зон, которые после промывания растворителем смещакгся книзу).После расслаивания хроматограммы столб адсорбецта...

Номер патента: 201350

Опубликовано: 01.01.1967

Авторы: Антонова, Белов, Бирюкова, Каневский, Каратаева, Красильщиков, Сунов

МПК: C01C 1/04

Метки: аммиака, синтез

...синтеза аммиака на никелеВом катализаторе являются следующие: давление 30 - 50 атл температура 80 С. При давлениях 30 - 50 ать выход аммиака в 3 - 4 раза выше, чем при атмосферном давлении исоставляет 2 - 5% от количества пропускаемого азота. Опыты проводят при стехиометрическом соотношении азото-водородной смеси. 25 2Основное накопление аммиака имеет место пс в газовой фазе, а в растворе электролита: количество аммиака, удерживаемое раствором, примерно, в 8 - 10 раз выше содержания его в газовой фазе.Извлекают аммиак из раствора электролита одним из известных способов.Предлагаемый способ синтеза аммиака проводят по следующей схеме: предварительно очищенную азото-водородную смесь вводят в реактор, который находится под давлением...

Номер патента: 269931

Опубликовано: 01.01.1970

Авторы: Мельников, Низ, Хмель

МПК: C07C 273/04

Метки: аммиака, жидкого, мочевины, подаваемого, синтез

...тарелками. Стекая по насадке, жидкий аммиак вступает в массообмен с аммиачным паром, движущимся в противотоке, В результате этого азот и водород десорбируются из жидкого аммиака, а аммиачный пар обогащается компонентами азото-водородной смеси. Чистый жидкий аммиак выводят из нижней части аппарата, а инертные (сдувочные) газы в смеси с газообразным аммиаком из верхней части аппарата. Аппарат снабжен подогревателем, которым создается поток аммиачных паров. Процесс можно вести при давлении от 1 б до 112 ати (критического давления чистого аммиака). Чем выше давление, тем меньше содержание аммиака в сдувочных газах, выводимых из аппарата, и выше температура 10 внизу аппарата.Получаемые в результате процесса сдувочные газы...

Номер патента: 662103

Опубликовано: 15.05.1979

Авторы: Безвершенко, Гюллинг

МПК: A61K 37/00

Метки: подавляющего, препарата, реагинов, синтез, тимуса

...и сорбируют балластные вещества, не удаленные послеосаждения ионами ртути при указанныхусловиях, с помощью КМ-целлюлозыи ДЕАЕ-целлюлозы. После отделенияКМ- и ДЕАЕ-целлюлозы надосадочнуюжидкость подкисляют и пропускаютгазообразный азот для удаления избытка сероводорода, с помощью которогобыли ранее удалены ионы ртути из надосадочной жидкости. Затем доводятрН надосадочной жидкости до 6,0 иосаждают активную фракцию (неполипеп662103 100 "17 0 едлагае Следовательно, активн гаемого препарата выше и. 5-20 раз,. Предлагае получить преп стью,предл ного в мый способ позволяет арат с высокой актив рмула изобретения соб поляющегомогеннзажденият л ицельюата, диотив 2 учения препарата тиму синтез реагинов .путе ации, диализа гомогеочйстки и...

Номер патента: 873866

Опубликовано: 15.10.1981

Авторы: Йозеф, Юрген

МПК: B01D 46/00

Метки: газа, извлечения, синтез, углеродосодержащего

...торый содержит 8% золы.П р и.м е р 4. Повторяют пример 3с той разницей, что воцную суспенэкюсгущают до 500 г/л, смешивают с 20%от веса твераого вещества сгущенной мас 1 о сы торгового мазута и классификацию проводят с применением сита размером ячеек 5 мм. При этом в качестве отсева поФлучают углероцсоаержащий материал, который. соцержит 5,5% эолы.1 П р и м е р Й. Повторяют пример 3с той разницей, что перец смешением смазутом сгущенную массу измельчают цо, 60 мк. При этом в качестве отсева получают углеродсоцержаший материал, который содержит 6,5% эолы,ФФ 1 Если классификацию проводят при пом щи сита размером ячеек 0,03 мм (в слу чае непосредственной классификации воцной суспенэин) или при помощи сита размером ячеек 0,3 мм (в случае...

Номер патента: 1122003

Опубликовано: 15.12.1985

Авторы: Баев, Солонин, Таняшин, Трояновский

МПК: C12N 15/00

Метки: в-1449-продуцент, вкм, днк, днк-лигазыфага, кодирующая, конструирования, лигазы, плазмидная, рекомбинантная, синтез, фага, штамм

...Е.со 1 С 600 с множественностью 1 в среде ЬВ (1 О г бактотриптона, 5 г дрожжевого экстракта, 10 г 11 аС 1 нал воды),зсодержащей 10 М МАЗО, Ливис клеток завершают добавлением в среду хлоро7 11 форма (1;100). После удаления обломков клеток центрифугированием (6000, 30 мин, 4 С) клеточные ДНК и РНК лизата гидролизуют одновременно панкреатическими ДНКазой и РНКазой (по 10 мкг/мл) при 20 С, 1 ч, Первичную очистку и концентрирование фага проводят с помощью полиэтиленгликоля 6000 (Зошашого К, Р ег а 1., Чт.го 1 огу, 40, 734-744, 1970). Окончательную очистку Фага проводят равновесным центрифугированием в 4 М СяС 1, 10 мМ трис-НС 1, рН 8,0, 0,01 М МяС 1 (И 1 яоп С. С. ег а 1., Мо 1 ес.Сеп.Сепег 156,203-214, 1977). Очищенный препарат фага АМ...

Номер патента: 1144376

Опубликовано: 07.02.1986

Авторы: Аспетов, Ефимов, Жданов, Зайцева, Кавсан, Кузнецов, Монастырская, Новохатский, Овчинников, Саломатина, Свердлов, Соловьев, Царев, Чахмахчева

МПК: A61K 38/21

Метки: интерферона, кодирующие, лейкоцитарного, плазмиды, продуценты, рекомбинатные, синтез, типа, человека, штаммы

...научно-исследовательского института генетики и селекции промышленных микроорганизмов "ВНИИ 1Изобретение относится к микро биологической промышленности, молекулярной биологии и генетической инженерии и представляет собой серию сконструированных Ы чего рекомби ф нантных плаэмид,обуславливающих син тез одного из интерферонов челове" ка - лейкоцитарного интерферона типа Ф Р в клетках кишечной, палочки Е.со 1., и штаммы Е,со 1 - проду центы данного интерферона,Известна рекомбинантная плаз,мида, кодирующая синтез лейкоцитар ного интерферона типао -А человека и штаммы Е.со 15., содержащие эту плазмиду - продуценты интерферона типао 1 -А человека. ФУказанная рекомбинантная плазмида состоит из гена интерферонай-А и триптофанового промотора,...

Номер патента: 1337408

Опубликовано: 15.09.1987

Авторы: Баев, Брантл, Ланг, Розенталь, Рослер, Скрябин, Эльдаров

МПК: C12N 15/00

Метки: cererrial-продуцент, psg94, sасснаrомuсеs, белка, вируса, днк, дрожжей, кодирующая, конструирования, крупного, лейкоза, оболочки, плазмидная, производ, производного, рекомбинантная, рогатого, синтез, скота, штамм

...пентрцфуировлттця аглдокклеток сусценпцруют в том ж суфрав концентрации 3 х 10 клток/ьтцц,К 200 мл сусцензиц к:теток прибавляют 20 мкг плдзмидной ПНК УЕр 809 тк тОО мкл 507, раствора П.Э.1 . 4000выдерживают 1 ч при 30 мин. Пос.те0инкубируют 5 миц при 42 С. Суспензгттоосаждают пентрцфугированием 1 О с прц1 О тыс. аб./мин. Осадок сусцендцруют в 300 ыкл воды и высевяют цо100 мкл на часики с твердой се:тектив - )Внай средой (0,67 Х дрожжевых азотистых оснований, 2 Ж глюкозы, 20 мпт/лгистидицл, 22 бактолгара),Колонии трансформацтов поятляютсяца 2- децт пос:те пасетов)тот:. - 20чг.кую стлбклтность плазмцдь тЕРВС 94в трацсформацтах определяют клк процент клеток, сохранивших плазктдупри росте в селективных условкяхминимальной среде без лейпкттд,...

Номер патента: 1392094

Опубликовано: 30.04.1988

Авторы: Дегтярев, Кравченко, Кузнеделов, Нетесова, Петренко, Ривкин

МПК: C12N 15/00

Метки: coli, днк, днк-полимеразы, кленова, кодирующая, конструирования, плазмидная, рекомбинантная, рсек, синтез, фрагмента

...фрагменты ДНК электрофорезом в 47.-ном полиакриламидном геле. Гель окрашивают в растворе бромистого этидия 2 мкг/мл, вырезают из геля зону, содержащую векторную часть ДНК плазмиды рСЕЕ 12, и выделяют ДНК из геля методом электроэлюции. 10 мкг плазмидной ДНК рС 155 гидролизуют 20 ед. рестрикционной эндонуклеазы ВашН 1 в 100 мкл буфера для гидролиза, содержащего 20 мМ трис-НС 1 рН 7,8, 10 мМ МяС 1, 50 мМ МаС 1, 2 мМ 2-меркаптоэтанола, при 37 С 1 ч. В полученную реакционную смесь добавляют 25 ЙАТР, ВСТР, ЙСТР и ТТР, до 0,05 мМ каждого, 10 ед. ДНК-полимеразы 1 и инкубируют 30 мин при 12 С. Реакцию останавливают добавлением Иа ЭДТА до концентрации 20 мМ, белок удаляют экстракцией водным фенолом, рН 8,0 и ДНК трижды переосаждают...

Номер патента: 1491346

Опубликовано: 30.06.1989

Авторы: Бригитте, Рональд

МПК: C12N 15/00

Метки: бычьего, гормона, днк, кодирующей, плазмидной, рекомбинантной, роста, синтез, человеческого

...Абс ТТС ТСС ВСС СТС ТТТ ЮСС ААС ССТ СТССТ Ю ААС А 66 ССС САС ААА СБС ГТС ССА С 5 Конструируют указанную линкерную последовательность в соответствии с обычной методикой.Целевые трансформанты, обозначенные Е.со 1 д К 12 КЧ 309/рСЕ 112,2, помещают на ТЧ агар, содержащий соответствующие антибтотики, а затем обычным способом культивируют до получения и выделения плазмиды рСЕ 112,2. Эти трансформанты как показано по дан ным гель-электрофореза, К 1 А и других тестов, экспрессируют шей-ЬСН с вы 6 АС, ОЛТ ТДД АТС ттт сст ССТ в 1 111 111 11 Т 11 . 111, 11 СТС СТА АТТ ТАС ддд ОСА ССЯ ДАС ССТ СТ 6 СТ 311 111 1ТГО ССА С У 5 СТДОД 666 ТАТТЛЛТА, 1.1 11 1111 3 ТСССЯТЯАТТДТ АТВ ТСС ТТС ТСС СРС 111 11 11111 11 тдс АСС ДЯС АСС СССАТС фАТ 1 САС111 1 1....

Номер патента: 1539205

Опубликовано: 30.01.1990

Авторы: Грубер, Дебов, Карягина, Лопатина, Лунин, Никольская-Санович, Поляченко

МПК: C12N 15/00

Метки: бактерий, днк, еsснеriснiа, кодирующая, метилазы, плазмидная, продуцент, рекомбинантная, рестриктазы, синтез, штамм

...при 10000 я 15 мин, затем 1 О мкл супернатанта добавляют впробу, содержащую 1 мкг бактериофага 3 в 10 мкл буфера А. Пробу инкубируют 1 ч при 37 С, после чегоанализируют электрофорезом в 1,2 Еном агарозном геле. Картина рестрикции в случае штамма Е, со 1 Р 8200,несущего плазмиду с 1 24, характерназля рестриктазы Бзо 11.1 мкг плазмидной ДНК й 24, выделенной из штамма Е.со 1 Р 8200, обрабатывают 1 О ед. рестриктирующей эндонуклеазы Бво 11 в буфере А в течение 2 ч при 37 С. Электрофорез показывает, что ДНК плазмиды й 24 при такой обработке не фрагментируется, вто время как плаэмида р 11 С 19 даеткартину гидролиза, типичную для плазмиды рЦС 19, обработанной рестриктаэой Бво 11. Эти данные свидетельствуют о защите мест узнавания...

Номер патента: 1573026

Опубликовано: 23.06.1990

Авторы: Васюренко, Глатман, Кравец, Кузьмин, Солонин, Тарутина, Фролов

МПК: C12N 15/00

Метки: днк, определяющая, плазмидная, рекомбинантная, рестрикции, синтез, эндонуклеазы

...штамма Е. со 11К 802, трансформанты подращивают 2 чв бульоне 1,В инфицируют фагом р 801 г9с множественностью заражения 10 ивысевают на агаризованную среду, содержащую 50 мкг/мл ампициллина, Изклонов, резистентных к ампициллину,выделяют плазмидную ДНК рВС МЗ известными способами,Проведен анализ наличия рестриктазы сГгВ 1 в клетках Е, со 1 ь.Для этого клетки Е. со 11 К 802//рВС МЗ выращивают в 10 мМ 1,В бульона до поздней логарифмической стадиироста, собирают центрифугированием,ресуспендируют в 5 мл буфера В, (10 мМтрис НС 1, рН 7,5, 50 мМ НаС 1, 10 мМЭДТА 10 мМ 2-меркгптоэтанола), раз-.рушают ультразвуком, центрифугируютпри 6000 об/мин 1 ч для освобожденияот клеточных обломков,Для определения активности готовятразведения экстракта в...

Номер патента: 1433019

Опубликовано: 15.09.1990

Авторы: Арсенян, Аспетов, Виноградова, Ершов, Крыкбаев, Кузнецов, Мелков, Монастырская, Новохатский, Овчинников, Ростапшов, Свердлов, Царев, Чернов, Честухин

МПК: A61K 38/21

Метки: днк, иммунного, интерферона, кодирующая, плазмидная, рекомбинантная, синтез, т"рр, человеческого

...буфере.Х 1 мкг полученного фрагмента до 50бавляют 0,1 мкг синтетических олигодезоксирибонуклеотидов, полученныхпутем химического синтеза, 2 мкг выделенного электроэлюцией большого, ЕсоВ 1-Рв 1 фрагмента рВВ 322 с триптофановым промотором и лигируют вприсутствии .10 ед ДНЕ"лигазы Фага Т 4в растворе, содержащем 0,5 мМ АТР и,буФер, состав которого был приведен вьппе .Лнгазной смесью трансформируют компетентные клетки Е,со 11 К 12, которые высевают на чашки, содержащие ЬВ-агар с тетрациклипом. Из полученных клонов выделяют плаэмиды и структура встроенных генов подтверждается рестриктным анализом н спквенсом.Полученную генно-инженерную конструкцию анализируют по эффективности синтеза иммунного интерферона после трансФормации...

Номер патента: 1469856

Опубликовано: 30.09.1990

Авторы: Ажикина, Анджапаридзе, Антонова, Арсенян, Балаян, Блинов, Вальяно, Василенко, Дроздов, Коврига, Кравченко, Кусов, Маркова, Насташенко, Овчинников, Петров, Приходько, Ростапшов, Рохлина, Свердлов, Серпинский, Снешков, Урманов, Фролов, Царев, Чернос, Чижиков

МПК: A61K 39/29, C12N 15/00

Метки: гепатита, днк, кодирующей, конструирования, плазмидной, полипептидных, против, рекомбинантной, синтез, субстанций

...эндонуклеазой рестрикции Вя 11 и затем Рз 1, как описанов примере 1, Полученный больший фрагмент лигируют с Вя 11 - (ЛРцц 11)Рзг.фрагментом длиной 1243 п.о., вьделенным из плазмиды рНА 123. Лигазной смесью трансформируют компетентные клетки штамма Е,.со 1 НВ 101 и в клонах, содержащих плазмиду со встроенным фрагментом, определяют ориентацию последнего с помощью эндонуклеаз рестрикции ЕсоВ. и Ваш 1,Клоны, содержащие плазмиды с нужной ориентацией фрагмента, наращиваютв среде Мс, тетрациклином и р -индЬ- дилакриловой кислотой, синтезируемый гибридный белок, содержащий полный 7 ф-интерферон человека и фрагменты белков ОРЗ (со 11 О по 23,а.к.) и УР5 (спо 271 а.к.) ВГА, выделяют из бактериальных клеток и используют дпя иммунизации морских...

Номер патента: 1552645

Опубликовано: 15.01.1991

Авторы: Горн, Зарытова, Коваленко, Мартвецов

МПК: C12N 15/00

Метки: ангиогенин, белка, галактозидазы, днк, кодирующая, конструирования, мз», пептид, рекомбинантная, синтез, слитого, фаговая

...для трансфекции.Компетентные клетки для трансфекции готовят следующим образом, Клетки Е,со 11 Л(103 иэ 50 мп среды 2 х УТ (16 г триптона, 10 г дроскеного экстракта, 5 г МаС 1 на 1 л воды) при тит-Мре 5;10 кл/мл осаждают центрифугированием, ресуспендируют в 25 мл сте-, рильного 50 пИ СаС 1 при 0 С, вновь Осаждают 10 мии 5000 я при +40 С, ре" суепендируют н 3,6 мп 50 11 СаС 1 при ОС, инкубрунт 30 мин при 0 С. К 200 мкл клеток добавляют 20 нг геТЕРОДУПЛЕКСНОй ДИ:(, инкубируют ЗО мин при 0 С, затем прогренают 2 мнп при 42 С, добавляют 200 мкл экспоненциальной Л 1103, 40 мкл 2% 7-яа 1 и 10 мкл 0,1 И 1 РТС и с 3 мл верхнего агара высенают на чашку с нижним ага" ром. Чеоез 12 ч образонынаются синие и белые колонии, Среди 603 белых колоний было...

Номер патента: 1661215

Опубликовано: 07.07.1991

Авторы: Малыгин, Муравлев, Рязанкина, Чешенко, Чикаев, Щелкунов

МПК: C12N 1/20, C12N 15/38

Метки: 36к-pvh, бактерий, белка, вируса, днк, еsснеriснiа, иммуногенного, кодирующая, ливп, осповакцины, плазмидная, продуцент, рекомбинантная, синтез, штамм, штамма, этого

...от 35 вет в гибридизации с Р-зондом, выделяют32плазмидную ДНК, обозначенную 36 К-рчН,содержащую в своем составе фрагмент вирусной ДНК 1029 п.н. с геном белка 36 К,Анализ совпадения рамок трансляции40 гена ас 7 и гена белка 36 К в клонах, содержащих рекомбинатную плазмидную ДНК,осуществляют с помощью доказательствасинтеза этими клонами химерного белка смол, м. 145 - 150 КД, Для этого клетки из45 отдельных клонов, дающих положительныйответ в реакции гибридизации с Р-зондом,32высевают в 5 мл .В, содержащего 40 мкг/млампициллина, и растят в течение 16 ч. Затем0,35 мл ночной культуры вносят в 0,5 мл50 свежего ЬВ, содержащего 40 мкг/мл ампициллина, растят до плотности суспензии0,6-0,7 ОЕ/мл при 600 нм и добавляют...

Номер патента: 1505022

Опубликовано: 15.10.1991

Авторы: Ильина, Ливанова, Смирнов, Смирнова

МПК: C12N 15/00

Метки: viвriо, бактерий, в-субъединицы, днк, кодирующая, конструирования, плазмидная, продуцент, р1емз, рекомбинантная, синтез, сноlеrае, субъединицы, токсина, холерного, штамм

...инкубируот 18 ч гГи 37 С, В каче-. зеконтроля используют исходный штамм /, 1505022С 1)01 егае С 197 сегрупп д )акже )/ эгилбензтидзолин-сульфанд. Через 30с 1)оегде 569 В н качестве этдл.,с ого штал 1- мин экспозиции при комнаной тепеГ)д)ума - продуцента холерного то:синд. ре при постоянном встряхивании измеряютКолонии штаммов С 197, КМ 93 и 569 В оптическу 0 плотность раствора при 405 нмпереносят методом реплик на чашки с 1%- 5 Чувствительность метода в данной серииным отмытым синкдзным дгаром, содержа- опытов составляет 1 нг, В соответствии сощим 1/ отмытых в синкдз Ом бульоне установленной чунс)вигР. ьностью и ГооФ%эритроциее бард д;"осРГ)ы инкубируст 13 с етом числя ныро ших о процессе культи 011) 39 С )дл, еают ггое 10,5;, СинказнО-...

Номер патента: 1703690

Опубликовано: 07.01.1992

Авторы: Долганов, Евдонина, Еремашвили, Козлов, Монастырская, Народицкая, Свердлов, Скворцова, Стеркин, Стронгин, Царев, Цыганков, Чистосердов, Юрин

МПК: A61K 37/66, C12N 1/21, C12N 15/21 ...

Метки: бактерии, днк, интерферона, кодирующая, плазмидная, продуцентинтерферона, рsеudомоnаs, рекомбинантная, синтез, человека, штамм

...вводят плазмиду 8751, которая обеспечивает устойчивость к триметаприму,Высев конъюгатов производят на минимальную агаризованную солевую среду Адамса, содержащую следующие компоненты: глюкоза 4 мг/мл; тизмингидрохло 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 рид 5 мкг/мл; треонин 50 мкг/мл; лейцин 50 мкг/мл; ампициллин 75 мкг/мл; стрептомицин 75 мкг/мл; триметаприм 75 мкг/мл, В этих условиях вырастают только коньюгаты Е.со 1 С 600 (К 751, рИЧ 22), Затем проводят коньюгацию между Е,со 1 С 600(В 751, рЧМ 22) и Рзеобоаопаз зр, 31 с дефектным геном йг А Коньюгаты вырастают на минимальной агариэованной солевой среде следующего состава: глюкоза 4 мг/мл; тиамингидрохлорид 5 мкг/мл; треонин 50 мкг/мл; ампициллин 75 мкг/мл, стрептомицин 200 мкг/мл,...

Номер патента: 1703692

Опубликовано: 07.01.1992

Авторы: Алексенко, Болотин, Борухов, Бумялис, Гервинскас, Дебабов, Евдонина, Изотова, Козлов, Костров, Лапидус, Лебедева, Лившиц, Машко, Мочульский, Носовская, Плотникова, Подковыров, Рыжавская, Скворцова, Стеркин, Стронгин, Трухан, Юрин, Янулайтис

МПК: C12N 1/21, C12N 15/23, C12P 21/00 ...

Метки: 1-13, i-интерферона, бактерий, днк, еsснеriснiа, интерферона, кодирующая, конструирования, плазмидная, продуцент, рекомбинантная, синтез, фибробластного, человека, штамм

...в 20 мкл -20, 4 мкг полученного таким образом препарата ДНК обрабатывают Кленовским фрагментом ДНК-полимеразы 1 Е.со в указанных условиях для достройки возможно имеющихся одноцепочечных концов молекул до двухцепочечных. Реакцию останавливают фенольной депротеинизацией, нуклеиновые кислоты осаждают этанолом и растворяют в 20 мкл Н 20,Лигирование линейных молекул ДНК с двуцепочечными концами проводят при 16 С в пробе объемом 50 мкл, содержащей 60 мМ трис-НС, рН 7,6, 10 мМ М 9 С 2, 10 мМ дитиотреитол, 4 мМ АТФ, 8 -ный полиэтиленгликоль - 6000, 4 мкг ДНК, 100 ед, ДНК- лигазы Т 4. После завершения реакции пробу разбавляют водой в четыре раза и проводят осаждение нуклеиновых кислот этанолом, 2 мкг растворенной в Н 20 ДНК обрабатывают...

Номер патента: 1703693

Опубликовано: 07.01.1992

Авторы: Авот, Грен, Дебабов, Козлов, Косиков, Костров, Мазель, Машко, Мочульский, Носовская, Романчикова, Скворцова, Стеркин, Стронгин, Трухан, Циманис, Черновская, Юрин

МПК: C12N 1/21, C12N 15/26

Метки: 2-19, бактерий, днк, еsснеriснiа, интерлейкина-2, кодирующая, конструирования, плазмидная, продуцент, рекомбинантная, синтез, человека, штамм

...ДНК длиной =750 п.нвырезает и проводят элюцию ДНК. Для достройки о,;ноцепочечных концов ДНК с помощью Кленовского фрагмента ДНК-полимеразы 1 Е со, выделенный из геля фрагмент обоа;э; .пгают в пробе объемом 20 мкл, содер,кэ.,ей 10 мМ трис-НС 1, рН 8,0, 10 мМ МдС 1:, по ЗО мкМ дезоксирибонуклеозидтрифосфатов Реакцию останавливают прогреванием, ДНК из смеси переосаждают этанолом и растворяют в 20 мкл,Полученный препарат фрагмента плазмиды рАА 1213-23 В используют на дальнейших этапах конструирования для интеграции кодирующей части интерлейкиначеловека в векторную плазмиду рВВ 124 В.3 мкг ДНК плазмиды рВВ 124 В расщепляют рестриктазой ВагпН в пробе обьемс . 12 мкл, содержащей буфер для рестрикци:- Реакцию останавливают фенольной...

Номер патента: 1708848

Опубликовано: 30.01.1992

Авторы: Бобков, Бобкова, Гараев, Казеннова, Колот

МПК: C12N 15/48, C12N 15/70

Метки: pga9, антигенными, бактерий, белка,обладающего, вируса, днк, еsснеriснiа, иммунодефицита, кодирующая, конструирования, первого, плазмидная, продуцент, рекомбинантная, свойствами, синтез, типа, человека, штамм

...ген устойчивости к канамицину, и раг-участок СоА выделяют из плазмиды рАК 25. Для этого рАК 25 подвергают гидролизу рестриктазой Е,сой 1, ин кубируя 20 мкг ДН К рАК 25 с 20 ед, 10 фермента в присутствии 50 мМ МаС 3, 10 мММцС 32 10 мМ трис-НС 3, рН 7,5, 1 мМ ДТТ в течение 2 ч г.ри 37 С с последующим прогреванием при 75 С в течение 15 мии. Далее гидрслизовзииую ДНК разделяют в 0,8% 15 дгзрозном геле и выделяют нужный фрагмент ДНК, используя бумагу ДЕ 81.В качестве вектора используют плазмиду р 630, полученную следующим образом.Клетки бактерий Е.со 3 НВ 101, содержа щие плазмидную ДНК рОВ 290 выращиваютв 200 мл бульона до титра 1 х 10 клеток/мл. Клетки осаждают центрифугирсванием(5000 ц,5 мии,4 С) и ресуспендируют в 35 мл раствора,...

Номер патента: 1717633

Опубликовано: 07.03.1992

Авторы: Баев, Болотин, Вольфович, Дебабов, Йомантас, Козлов, Народицкая, Орлова, Попов, Рябченко, Сорокин, Стеркин, Стронгин

МПК: C12N 15/18

Метки: bacillus, suвтilis, альфа-амилазы, бактерий, днк, кодирующий, конструирования, продуцент, синтез, фрагмент, штамм

...ТемпераДНК А Ч произведена оптимальная под- турный оптимум для а-амилазы, кодируе.стыковкапоследовательностиДНК,кодиру- мой фрагментом ДНК А 1.Ч, составляет5 10 15 20 30 40 45 50 55 75-85"С. Меньшая продуктивность штамма, синтезирующего термостабильную а -амилазу связана с меньшей удельной активностью термостабильного белка из В.ИсЬепИогглз. измеренной в неоптимальных условиях (37 С).Б р и м е р 1, Конструирование фрагмента ДНК АУ/7, кодирующего синтез термостабильной а -амилазы,Клетки бактерий В.мЬИз (рЧ 31), содержащие плазмидную ДНК рЧЯ 1, выращивают в 10 мл 1-бульона (триптон 10 г/л; дрожжевой экстракт 5 г/л; ЙаС 10 г/л; рН 7,5) с добавлением эзоитромицина (0,02 мг/мл) до титра 1 х 10 кл/мл, Клетки осаждают центрифугированием...

Номер патента: 1730150

Опубликовано: 30.04.1992

Авторы: Баев, Горбулев, Рубцов, Сагадиев, Садиев, Скрябин, Шульга

МПК: C12N 1/21, C12N 15/18

Метки: бактерий, гормон, гормона, днк, еsснеriснiа, кодирующая, кодирующий, овцы, плазмидная, продуцент, рекомбинантная, роgнтrр11, роста, синтез, фрагмент, штамм

...работы отобрали плазмиду, содержащую Есой 1-Н 1 пб И 1-фрагмент с геном ГР КРС размером 601 п.ообозначенную рВОН Ва 112;П р и.м е р 2. Получение фрагмента ДНК,кодирующего ГР овцы.А) Клонирование фрагмента ДНК, коди рующего ГР КРС, в векторе М 13(фиг, 6).10 мкг плазмидной ДНК рВОНВа 12гидролизовали рестриктазами Есой 1 и НпбИ 1 в 50 мкл инкубационной смеси следующего состава: 50 вМ йаС 1, 10 вМ 5 трисНС 1. рН 7,5,10 вМ МяС 2, 1 еМ дитиот-рейтола(ДТТ), 10 ед; рестриктазы Есойи 10 ед. рестриктазы Н 1 пбИ, в течение 2 ч при 37 С.Проводили разделениефрагментов ДНКв 1агарозном геле и выделяли из геля фрагмент раз мером 601 п,оиспользуя стандартный метод.5.мкг ДНК репликативной формы бактериофага М 13 вр 8 гидролизовалирестриктазами...

Номер патента: 1770359

Опубликовано: 23.10.1992

Авторы: Авот, Грен, Мясников, Романчикова, Смирнов, Циманис

МПК: C12N 1/19, C12N 15/26

Метки: cereuisial, msil, sасснаrомuсеs, sасснаrомyсеs, днк, дрожжей, интерлейкина-2, клетках, обеспечивающая, плазмидная, продуцент, рекомбинантная, синтез, человека, штамм

...фаза Т 4 и проводят инкубацию в течение ночи при 4 С, 20 25 30 ампициллина Из полученных описанным способом отдельных клонов трансформантов выделяют плазмидную ДНК методом, аналогичным методу выделения плазмиды рМЯ 46, с тем отличием, что выращивание клетокЕ,сове; дут в 10 мл питательной среды и все объемы растворов соответственно уменьшают в 50 раз по сравнению с указанными. Кроме того, вместо центрифугирования в растворе 35 40 50 55 51015 Полученной таким образом лигазной смесью трансформируют клетки Е.со НВ 101. Для этого клетки Е,со выращивают в 100 мл средыВ при 37 С и интенсивном перемешивании до достижения оптической плотности при 600 нм 0,4 - 0,5. Культуру охлаждают на льду, центрифугируют при 3000 об/мин в течение 10...

Номер патента: 1811538

Опубликовано: 23.04.1993

Авторы: Курепина, Метлицкая, Хмель

МПК: C12N 15/03, C12N 15/30, C12N 15/41 ...

Метки: днк, кодирующая, микроцина, плазмидная, рекомбинантная, синтез

...смеси 50 мкл (состав описан, выше) в 25течение 1 часа при 37 С. После обработкифенолом и переосаждения ДНК этаноломсмесь растворяют в БО мкл буФера, содержащего 6 аМ трис-НС рН 7,9,6 аМ МцСг, 150вМ 0;02 тритона Х 1 ОО, и инкубируют с 10 30ед, рестриктазы ВавН 1 час при 37 С.Фрагмент ДНК размером 5,3 т.п,н. элюируют после фракциоиирования злектрофорезом в.0,7% геле легкоплаакой агарозы, ДНКрастворяит в 10 мкл воды, , 353 мкл раствора ДНК линеаризомнойплазмиды рВВ 325 сливают с 10 мкл раствора фрагмента плазмиды р 1, содержащегогены синтеза микроцина, добавляют 1,5 мклбуфера (0,5 М трис-НС рН 7,9, 0,1 М МоСг, 400,1 М ОТТ, 1 гпМ АТР) и 1 мкл липазы иинкубируют 3 чзса при 16 С,,Плазмиду передают методом трансформации в клети штамма Е....

Номер патента: 1816797

Опубликовано: 23.05.1993

Авторы: Бобков, Гараев, Шуленин

МПК: C12N 1/21, C12N 15/48

Метки: антигенными, бактерий, белка,обладающего, вируса, гибридного, днк, еsснеriснiа, иммунодефицита, конструирования, определяющая, плазмидная, продуцент, рекомбинантная, рр1, свойствами, синтез, человека, штамм

...ДНК проводят методом равновесного центрифугирования в градиенте плотности СзС 1 с бромистым этидием (1 мкг/мл),Для получения плазмиды рР 1 фрагмент Н 1 пб 111 - Е.сой 1 плазмиды рйТЗ переклонируют в вектор рцй 290 по сайту Нпб 111, С этой целью 10 мкг ДНК плазмиды инкубируют с 30 ед. эндонуклеазы Е.соЯ в буфере, содержащем 100 мМ йаС 1, 10 тМ МдМ 12, 10 аМ трис-НС 1 рН 7,5, 1 щМ ДТТ, в течение 1 ч при 37 С. Затем добавляют 1/10 объема ЗМ ацетата йэ и осаждают ДНК 2,5 объемами этилового спирта на ценрифуге (10000 д, 10 мин, 4 С). Осадок высушивают и растворяют в буфере 10 мМ трис-НС 1 рН 8,0 и 5 мМ ЭДТА. Полученный препарат лигируют с 50 мМ адаптора Е.сой-Нпд 11 с помощью ДНК-лигазы фага Т 4 (30000 единиц/мл),из расчета 1 мкл...

Номер патента: 1490963

Опубликовано: 07.07.1993

Авторы: Беляев, Вторушина, Данилюк, Добрикова, Куличков, Малыгин, Мамаев, Матвеев, Плетнев, Прессман, Приходько, Путинцева, Синяков, Хромых, Шевлягина, Ямщиков

МПК: C12N 15/00

Метки: вакцины, днк, живой, клещевого, кодирующая, конструирования, плазмидная, полипептидов, против, р28сме, рекомбинантная, рекомбинантной, синтез, энцефалита

...Ввш Н 1 зндонуклеаз рестрикции, Из полученной таким образомплазмиды р 2823, содержащей правильно состыкованные 28 к промотор иструктурные гены ВКЭ, выделяют ВвпН 1 ЕсоК 1 фрагмент ДНК длиной 2304 п.о,Фрагмент состоит из ВапН 1-НдпйШфрагмента ДНК плвзмиды рВК 322 длиной 346 п.о., НпйП 1-ЕсоК 1 синтетического Фрагмента ДНК длиной74 п.о, и ЕсоК 1-ЕсоК 1 фрагментаДНК длиной 1784 и.о содержащегогены ВКЭ, Для окружения промотораи генов ВКЭ участками ТК-геня ВОВвыделенный ВвшН 1-ЕсоКЕ Фрвгмент лигируют с большии ВвпН 1-ЕсоК 1 фрагментом ДНК вектора р ЧАК 15 и лигазной смесью трансФормируют компвтентные клетки Е. со 11. НВ 101. Искомые клоны идентифицирует методомДНК - ДНК гибридизации на Р-мечез 2ный Рьс 1-РвС 1 фрагмент к ДНК ВКЭ,Наличие в...

Номер патента: 1633817

Опубликовано: 15.03.1994

Авторы: Горская, Курепина, Липасова, Поспелова, Рахимова, Соколова, Хмель, Чеснокова

МПК: C12N 15/30, C12N 15/70

Метки: coli, escherichia, активностью, антибактериальной, бактерий, микроцина, обладающий, определяющая, плазмида, синтез, штамм

1. Плазмида p74, определяющая синтез микроцина, мол. м. 54,7 Мд, содержащая:ДНК плазмиды p1 штамма Enterobacter sp. ;траспозон Tn 5;при расшеплении рестриктазой Bg1 11 образуются 12 фрагментов с размерами 21; 12; 7,8; 7,0; 6,8; 5,8; 5,3; 3,8; 2,6; 2,5; 2,2; 2,1; т. п. н. ;- при расщеплении EcoRI-7 фрагментов с размерами 25, 23, 14, 9,6; 6,0; 2,3; 0,8 т. п. н. - при расщеплении CIaI - II фрагментов с размерами 14,5; 13; 9,6; 9,0; 8,2; 6,8; 6,0; 5,8; 4,8; 3,4; 3,2 т. п. н. ;- при расщеплении HindIII - 9 фрагментов с размерами: 25; 15; 14; 13; 6,2; 3,4; 2,7; 2,4 т. п. н. ;- при расщеплении PwII - 11 фрагментов с размерами 23; 13; 9; 6,5; 5; 4,8; 4,2; 4; 3,8; 3,4; 3,2; 2,6 т. п. н. ;- при расщеплении...

Номер патента: 1312961

Опубликовано: 30.12.1994

Авторы: Арсенян, Беляев, Берзин, Грен, Долганов, Зайцева, Кузнецов, Монастырская, Овчинников, Поздняков, Саломатина, Свердлов, Соловьев, Царев

МПК: C12N 15/19

Метки: plfn-a-p2, интерферона, кодирующая, лейкоцитарного, плазмида, продуценты, рекомбинантная, синтез, человека, штаммы

1. Рекомбинантная плазмида pIFN- A-P2 , кодирующая синтез лейкоцитарного интерферона A человека, характеризуется следующими признаками: имеет длину 5200 п.о.; состоит из: EcoRI-RstI большого фрагмента плазмидного вектора pBR 322, регуляторной области гена D бактериофага X174, включающей промотор, участок связывания рибосом и инициирующий кодон ATG гена D, которая локализована с 1 по 216 п.о. и присоединена к EcoRI-сайту pBR 322, гена зрелого лейкоцитарного интерферона A...

Номер патента: 1312962

Опубликовано: 30.12.1994

Авторы: Арсенян, Беляев, Берзин, Грен, Долганов, Зайцева, Кузнецов, Монастырская, Овчинников, Поздняков, Саломатина, Свердлов, Соловьев, Царев

МПК: C12N 15/19

Метки: plfn-f-pa, интерферона, кодирующая, лейкоцитарного, плазмида, продуцент, рекомбинантная, синтез, человека, штамм

1. Рекомбинантная плазмида pIFN- A-P2 , кодирующая синтез лейкоцитарного интерферона F человека, характеризуется следующими признаками: имеет длину 4850 пар оснований (п.о.); состоит из Hind III - BamHI большого фрагмента плазмидного вектора pBR 322, регуляторной области гена D бактериофага X174, включающей промотор, участок связывания рибосом и инициирующий кодон ATG гена D, которая локализована с 1 по 216 п.о. и присоединена к Hind III-сайту плазмиды pBR 322, гена зрелого лейкоцитарного интерферона