Патенты с меткой «люциферазы»

Номер патента: 741858

Опубликовано: 25.06.1980

Авторы: Кратасюк, Фиш, Шендеров

МПК: A61B 10/00, A61K 38/55

Метки: ингибитора, люциферазы

...Уменьшение скорости элюции ниже 2 мл/см в час нецелесообразно, так как это увеличивает время опыта.Увеличение скорости элюции .выше 4 мл/см в час приводит к уменьшению разрешающей способности колонки и фракция ингибитора не отделяется от побочных загрязняющих фракций.фракцию ингибитора, выходяэцую с колонки в объеме от 200 до 250 мл, собирают и концентрируют до 15 мл с помощью диализа на ВО- Г 1 ЪЕ.-,20, ВеаКе) (ЪсИОд, США) против 15% ного раство4вания 1,28 10 Ь, Очщиенньй препл 11 ат ингибитора при электрофорезе выявляет -ся в виде одной узкой полосы.Предлагаемый способ позволяет получить ингибитор люциферазы, который можетнайти применение для определения микроколичеств веществ, таких как аденозитрифосфат, нпотинадениндинуклеотид,...

Номер патента: 785318

Опубликовано: 07.12.1980

Авторы: Данилов, Егоров, Малков, Шумихин

МПК: C07G 7/02

Метки: бактериальной, люциферазы, препарата

...0,6 А, прибор УДЗ). Буфер добавляют в соотношении 4:1 (объем/вес клеток). Крупные частицы клеток удаляют центрифугированием при 105000 д х 1 ч, затем провадят дробное осаждение белков сульфатом аммония: первая часть белков, неактивных, осаждают при насыщении 25, раствор центрифугируют при 105000 д х 1 ч, осаждают активную часть белков при насыщении 80 и центрифугируют в тех же условиях.Вся люцифераза высаливается при насыщении 80, этот осадок растворяют в 150 мл К/Ма-фосфатного буфера (состав тот же) и наносят на колонку с сефадексом 6=10 для быстрого диализа, затем активную Фракцию наносят на колонку с сефадексом 6=75 для окончательного диализа и очистки от балласта низко- и высокомолекулярных соединений. Полученный препарат наносят на...

Номер патента: 660378

Опубликовано: 23.12.1982

Авторы: Березин, Бровко, Угарова

МПК: A61K 38/44, C12N 11/02

Метки: иммобилизации, люциферазы, светляков

...в частности с субстратами люциферазы люциферином и АТФ. В 25 за 35 н 40 результате помимо иммобилизациипроисходит также очистка люциферазыот сопуствующих низко- и высокьмолекулярных примесей. П р и м е р 1. 60 мг предварительно высушенных над Са С 1 в вакуумелампочек светляков растирают в тонкий порошок и экстрагируют 3 млтрис-ацетатного 0,02 М буфера, 2 мМЭДТА, (этилендиаминтетрауксуснаякислота) 0,1 М Иа С , рН 7,9 при5 С в течение 30 мин. Полученную суспензию центрифугируют (15000 об/ми 5 С) в течение 10 мин, Раствор отделяют, а осадок промывают 2 мй тогоже буфера и вновь центрифугируют. Ксоединенным водным фракциям (5 мл)добавляют набухший порошок (283 мг)ВкСН актифированной сефарозы. Суспензию встряхивают при 4 фС в течение 25 ч....

Номер патента: 1035062

Опубликовано: 15.08.1983

Авторы: Высоцкий, Заворуев, Межевикин, Родичева

МПК: C12N 9/02

Метки: бактериальной, люциферазы, препарата

...импортные материалы, что значительно5 удорожает получение люциферазыЦель, изобретения - упрощениеспособа.Указанная цель достигается тем,что согласно способу получения препарата бактериальной люциферазы,включающему выращивание культурысветящихся бактерий рода РЬоСоЬас 1 ег 1 цщ на жидкой питательной среде,содержащей источники, углерода,азота, кислорода и минеральные соли,в аэробных условиях, отделение клеток, их разрушение, отделение клеточньв оболочек и колоночную хроматографию ферментсодержащего раствора, в качестве наполнителя для ко 30 лонок используют СаНРО 4 НО ( брушит),полученный после хроматографии элюат концентрируют и хроматографируют повторно,Элюцию люциферазы при хроматогра 35 фии обычно осуществляют...

Номер патента: 987976

Опубликовано: 23.02.1984

Авторы: Беляева, Березин, Бровко, Иванова, Угарова

МПК: C12N 9/02

Метки: иммобилизованной, люциферазы

...при реализацииописываемого способа получения иммобилиэованной люцифераэы снетлякон,включающим экстракцию фермента иэлампочек светляков буферным раствором и последующую обработку полученного экстракта полимерным полисахаридным носителем, актинированнымбромцианом, причем экстракцию осуществляют Фосфатным бубером с ионной силой 0,5 М при весовом соотношении лампочки светляков:буфер1:40-10и обработку экстракта полимером проводят при весовом соотношении лампочки светляков:полимер1:1-3. Обычно в качестве полисахаридного носителя используют сефарозу, сефадекс, ультрагель (смешанный полимер, полиакриламида иагарозы ), ультрадекс (гель декстрана) целлофановую пленку, целлюлозу,С целью экономии Фермента отработанный Ферментный экстракт...

Номер патента: 1339128

Опубликовано: 23.09.1987

Авторы: Букатина, Духович, Угарова, Филиппова

МПК: C12N 9/02

Метки: люциферазы, светляков

...при 3000 д 10 мин, отделяютраствор, к осадку добавляют 20 млсвежего буферного раствора того жесостава, инкубируют 30 мин, вновьцентрифугируют, Последнюю операциюинкубирования и центрифугиронанияповторяют, Три порции полученногонадосадочного раствора объединяют ицентрифугируют 30 мин при 25000 я,осадок отбрасывают, а надосадочнуюжидкость центрифугируют при 1400001,5 ч, Получают надосадочный раствор,который содержит люциферазу с активностью 1,0 10 мВ/мл и удельной ак 9тивностью 131 О мВ/мг белка, Степеньочистки исходного экстракта последифференциального ультрацентрифугирования состанляет 16 раз. При хранеонии при 4 С в растворе 30 сут, препарат сохраняет 50% актинности, По известному способу получают препаратлюцифераэы с...

Номер патента: 1341189

Опубликовано: 30.09.1987

Авторы: Березин, Духович, Угарова, Филиппова, Швец

МПК: C12N 11/12, C12N 11/14

Метки: иммобилизованной, люциферазы, светляков

...хранят в 0,1 М трис-ацетатном буферном растворе, содержащем 0,3 моль КС 1 и 0,8 мг/мл дитиотреитола, рН 7,8 при 4 С в течение 10 дней, измеряя каждый день активность люциферазы. Через 10 дней хранения мембрана сохраняет 70% от исходной активности.П р и м е р 2. Нитроцеллюлозную мембрану площадью 1,5 см погружают в 10%-ный раствор лецитина в спирте, инкубируют смесь в течение 0,5 ч, затем мембрану извлекают из раствора, высушивают в токе воздуха в течение 15 мин и погружают в раствор люциферазы с активностью 10 10 мВ/мл. Раствор люциферазы готовят в 0,1 М трис-ацетатном буферном растворе, рН 7,8, содержащем О,б моль КС 1, 20% глицерина, 1 мг/мл дитиотреитола.ОСмесь инкубируют 20 ч при 4 С. Затем мембрану извлекают из раствора и...

Номер патента: 1546484

Опубликовано: 28.02.1990

Авторы: Букатина, Дементьева, Кутузова, Угарова

МПК: C12N 9/02

Метки: luciola, люциферазы, мingrеliса, светляков

...1:30 1:30 5" 1 О 0,01 В, ,Гомогенный препарат,0 2 10 2 1 О 0 тем же буфером для удаления с носителя,несвяэавшихся веществ. Люцифераэу элюируют тем же буфером, но содержащим 60 мМ МАЗО,. Во Фракциях, содер-жащих люциферазу спектрофотометрическим методом определяют концентрациюбелка, и полученные фракции наносятна колонку с голубой агарозой в соотношении белок:носитель 1:30. Несвязав шиеся белки смывают 0,05 М трис-ацетатным буфером, рН 7,8,. содержащим2 мМ ЭДТА 60 мМ ИМБО. Злюцию люциферазы проводят тем же буфером, содержащим 15 мК АТФ. Получают раствор люцифераэы с концентрацией белка0,05 мг/мл и удельной активностью2 10 мВ/мг, Выход по активности сос 9тавляет 1004 от исходной.Раствор люциферазы после аффиннойхроматографии на...