Песлякене

Номер патента: 1615179

Опубликовано: 23.12.1990

Авторы: Кулис, Лауринавичюс, Матялене, Песлякене

МПК: C12N 11/08

Метки: алкогольоксидазы, иммобилизации

...концентрациях азида натрия становится менее жестким, а следовательно, ухудшаются механические свойства получаемых ферментных мембран, При эксплуатации менее жесткой Ферментной мембраны фермент начинает вымываться из геля, Таким образом, оптимальные концентрации азида натрия при изготовлении ферментной алкогольоксидазной мембраны 0,25-500 ммоль.Активность иммобилизованной алкогольоксидазы зависит от рН буферного раствора, в котором проводятся измерения. При наличии в буферном растворе, 10 мМ этилового спирта и используя ферментную мембрану, приготовленную по примеру 1 с азидом натрия в гелевой структуре 100 ммоль, при рН 6,0 ток электрода равен 12 нА, при рН 7,0 - 22 нА, при рН 7,5 - 27 нА, при рН 8,0 - 32,5 нА, при рН 8,5 35 нА, при рН...

Номер патента: 1535892

Опубликовано: 15.01.1990

Авторы: Гурявичене, Кулис, Лауринавичюс, Песлякене

МПК: C12N 11/00, C12N 11/08

Метки: мембран, ферментных

...нелинеен уже приконцентрации 2,5 мМ.П р и м е р 3. Аналогично примеру 1 изготавливают ферментную мембрану для определения лактата. Для приготовления ферментного слоя 50 ед, 10 40 45 50 55 Наибольший диапазон линейности градуировочного графика наблюдается при использовании ядерного фильтра с пористостью 0,023, однако при этом чувствительность электрода уменьшается до 0,05 нА/мМ. Аналогичная взаимосвязь между диапазоном линейности и чувствительностью следует также из макрокинетического уравнения. Таким образом, оптимальными параметрами с практической точки зрения обладают мембраны, в которых используются ядерные фильтры с пористостью 0,05-33. Они обладают линейностью в практицески важном диапазоне концентрации глю 15 20 25лактатоксидазы...

Номер патента: 1395677

Опубликовано: 15.05.1988

Авторы: Бахматова, Бойко, Браженас, Киприанова, Лауринавичюс, Марцинкявичене, Песлякене

МПК: C12Q 1/44, G01N 27/26

Метки: активности, холестеролэстеразы

...вычислить также из построенного калибровочного графика(концентрация фермента - скоростьферментативной реакции). После измерения тока ячейка в течение 1,5 минпромывается буферным раствором, после чего можно проводить следующее измерение.П р и м е р 1. Определение зависимости величины тока от концентрации холестеролоксидазы.Электролиз проводят в присутствии0,2 мМ холестерина в ячейке в 0,05 Мфосфатном буфере, рН 7,2 и разных количеств холестеролоксидазы,Полученные данные приведены втабл. 1.Данные показывают, что зависимостьтока от концентрации холестеролоксидазы наблюдается до 0,33 ед/мп.,П р и м е р 2, Определение зависимости величины изменения тока отконцентрации холестерололеата.Электролиз проводят в 0,05 М фосфатном буфере, рН 7,5, в...

Номер патента: 1395671

Опубликовано: 15.05.1988

Авторы: Бахматова, Бойко, Браженас, Киприанова, Марцинкявичене, Песлякене

МПК: C12N 9/16

Метки: холестеролэстеразы

...ЦВРпри 10000об/мин в течение 10 мин. Надосадоч 35ную жидкость оставляют, а осадок удаляют. К надосядочной жидкости порциями при постоянном перемешивании иотемпературе +4 С добавляют перекристаллизованный измельченный сульфатаммония до конечной концентрации507. и оставляют стоять в холодильниоке 1-2 ч при +5 С, Появившийся осадокотделяют центрифугированием при техже условиях, Надосадочную жидкостьудаляют, Полученный осадок суспендируют в минимальном количестве 0,05 МФосфатного буфера, рН 7,0, и проводятдиализ против того же буфера в течение 20-24 ч,Определение активности холестеролэстеразы. А ед/мл = .а2нА/мин.,1 210 Э 1000где нА/мин- р 10 -1,2 -Получают За единицу активности холестеролэстеразы принимают количество фермен ,та,...

Номер патента: 1386883

Опубликовано: 07.04.1988

Авторы: Кулис, Лауринавичюс, Песлякене

МПК: C12P 13/04, G01N 27/46

Метки: л-аминокислот

...проводят в 0,01 М фосфатном бу 5фере рН 7,5, содержащем 0,1 М КС 1и 2 мМ ферроцианида калия, потенциалграфитного электрода 0,0 В относительно А/АдС 1 электрода.10Данные изменения катодного токапри изменении концентрации добавленного Ь-лейцина приведены в табл. 1.Из табл, 1 видно, что прямолинейность калибровочного графика наблюдается до 0,8 мМ Ь-лейцина.П р и м е р 2, Определение концентрации различных аминокислот.Ферментная мембрана и ферментныйэлектрод изготавливаются аналогичнопримеру 1, Определяется ток в буферном растворе, содержащем разные аминокислоты; 0,01 М фосфатный буферрН 8,0, 0,1 М КС 1, концентрация ферроцианида калия 1,5 мМ, концентрация аминокислот 0,5 мМ. Условия определения, как в примере 1.Результаты...

Номер патента: 1379738

Опубликовано: 07.03.1988

Авторы: Глубоковская, Кулис, Лауринавичюс, Песлякене, Петрова, Селезнева

МПК: G01N 33/48

Метки: крови, холестерина

...не превышает 1-27. 55Поэтому концентрацию холестерина вкрови определяют по калибровочномуграфику для чистого раствора. После анализа ячеика промывается в течение 1,5 мин струей буфера, после чего можно проводить следующее измерение.П р и м е р 1. Определение зависимости величины стационарного тока электрода от концентрации холестеролоксидззы. Электролиз раствора проводят в присутствии 0,2 мМ холестерина в ячейке в 0,01 М фосфатном буфере (рН 7,2), содержащем 0,1 М КС 1, 1 мМ ЭДТА, 0,27. дезоксихолата натрия и 5 мМ азида натрия. Полученные результаты приведены в табл. 1.Данные табл. 1 показывают, что резкая зависимость тока от концентрации ферме н та н а блюд ае тс я до О, 3 3 ед/ мл,П р и м е р 2. Определение зависимости стационарного...

Номер патента: 1326978

Опубликовано: 30.07.1987

Авторы: Арцукевич, Кулис, Лауринавичюс, Островский, Песлякене

МПК: G01N 27/46

Метки: спирта, ферментный, электрод, электрохимического, этилового

...1 электрода.Увеличение селективности способа обусловлено тем, что при использовании электрода из стеклоугперода, содержащего в алкогольоксидазной мембране пероксидазу, и в присутствии в буферном растворе Феррициачида калия электролиз проводят при потенциале 4 п 0,0 В отн, Ац/АрС 1 электрода, при котором не окисляются. другие компоненты биологических растворов: аскорбиновая и мочевая кислоты, аминокислоты, кислород и т.д. 45П р и м е р 1. В 0,2 мл 0,1 М фосФатного буферного раствора (рН 7,2) растворяют 16 мг альбумина, 10 мг пероксидазы и 0,2 мг алкоголъоксидазы. Смесь перемешивают, добавляют 12 мкл 5 Е-ного раствора глутарового альдегида в том же буфере и выливают на диализную мембрану с площадью поверхности 3 см. Высушенную мембрану...

Номер патента: 1236378

Опубликовано: 07.06.1986

Авторы: Авакян, Кулис, Лауринавичюс, Песлякене, Симонян, Татикян, Хачатрян

МПК: G01N 33/62

Метки: кислоты, мочевой

...рН 8,8 - 9,2является оптимальным для действия 4системы.1 мг Х - 1,25 мкА/см Х - 05 мкА/см К = 0,4 мг ХКонцентрация мочевой кислоты висследуемом растворе будет равна0,4 мг Х х 100 (степень разбавления)=- 40 мг Х,П р и м е р 2. Определение мочевой кислоты в сыворотке крови проводят с помощью стеклоуглеродногоэлектрода, 0,0 В, при концентрацииКГе(СИ) 1 1 мМ, 0,1 М боратныйбуФер, рН 9,2, п = 5. Степень разбавления сыворотки 50 раз,В табл. 1 дана зависимость величины тока от концентрации мочевой кислоты Таблица 1 Ток,нА/см Концентрация мочевой кислоты в сыворотке, мг % 43 86 129 177 260 78 2центрации введенной мочевой кислоты линейна до 6 мг Х.П р и и е р 1.При концентрации в ячейке мочевой кислоты 1 мг Х (в 198 мл буфера вводится 0,2...

Номер патента: 1125249

Опубликовано: 23.11.1984

Авторы: Гурявичене, Кузнецов, Кулис, Лауринавичюс, Песлякене, Файнгерш, Чирков

МПК: C12N 11/08

Метки: мембран, ферментных

...ч. Разре- зают на куски диаметром 2 см и накладывают на РФ электрод с И электродом контактирует гидратцеллюлозная мембрана)для определения Ферментативной активности. Толщина полученной мембраны 45 мкм.П р и м е р 2. Готовят смесь аналогично примеру 1 и наносят на лавсановую мембрану диаметром 6 мм, которая предварительно прикреплена к резиновому кольцу. Прикосновением микропипеткой наносятмкл смеси и накладьвают гидратцеллюлозную мембрану толщиной 10 мкм. Оставляют в течение 2 ч при комнатной температуре, наливают на Р 1 электрод и определяют ферментативную активность.П р и м е р 3. Мембрану готовят аналогично примеру 2, однако используют макропористую мембрану, толщина которой 9,5 мкм, проницаемость 114 и диаметр пор 0,13 мкм.П р и м...

Номер патента: 1070166

Опубликовано: 30.01.1984

Авторы: Кулене, Кулис, Лауринавичюс, Песлякене

МПК: C12Q 1/00

Метки: аденозинтрифосфат, активности, разлагающих, синтезирующих, ферментов

...ан нА/мин ) и ответа АТФ -чувствительного электрода на стандартную концентрацию АТФ (0,1 мМ)вычисляется скорость ферментативнойреакции (скорость образования АТФ 40 мкмоль/мин 1 и удельная активностьпируваткинаэы в ячейке. Из построен-.ного калибровочного графика (концентрация фермента - скорость ферментативной реакции можно высчитать оп"ределяемую активность ферментногопрепарата (Е/мг белка 1 .Ацетаткиназная реакция аналогичнапируваткинаэной, только в качестведонора фосфатной группы выступает 50 ацетатфосфат. Определение ферментатив.ной активности аналогично.Для определения ферментативнойактивности,гексокиназы используетсязначение ответа д 1(нА) глюкозного 55 электрода на 0,1 мМ глюкозы.При определении активности в реакционную смесь...

Номер патента: 1035498

Опубликовано: 15.08.1983

Авторы: Кулис, Лауринавичюс, Песлякене, Травкина

МПК: G01N 27/52

Метки: активных, веществ, концентрации, физиологически

...является существен" ным, если аденозинтрифосфат присутст" вует в небольших концентрациях. Так, например, при уменьшении концентрации гексокиназы до 2 ф 10 ед/см чувстви-. тельность устройства уменьшается и нижнюю концентрацию АТФ - 0,035 мМ . определить невозможно. При выходе из верхнего предела концентрации гексокиназы увеличивается толщина мембранного слоя, чувствительность элект" рода уменьшается и определить минимальную концентрацию аденозинтрифосФата невозможно.По аналогичным причинам нельзя выходить .за указанные пределы концентраций глюкозооксидазы.От рН зависит активность Ферментов, а соответственно и чувствительность электрода. Выход за пределы данного интервала значений рН приводит к уменьшению активности электрода и...

Номер патента: 1032401

Опубликовано: 30.07.1983

Авторы: Галицкий, Гурявичене, Калихман, Кулис, Лауринавичюс, Песлякене, Чирков

МПК: G01N 27/46

Метки: глюкозы

...колицество глюкозыдесятикратно разбавленной 0,01 мМ фосФатным буферомрН 7,2; 0,1 М КС 1)крови, Для определения остатоцноготока в крови 2 мл десятикратно разбавленной крови обрабатывают 1 мгглюкооксидазы и 1 мг каталазы дополного удаления глюкозы в течение20 мин, Определение глюкозы проводяткак в других примерах.Результаты определения глюкозыв кровистеклоуглеродный электрод,ОВ, концентрация КГе (СМ)1 мМ;0,01 М Фосфатный буФер рН 7,2;и = 5) представлены в табл.3,Из табл,3 видно, что величинаостаточного тока не превышает 1,так как основные электрохимическиактивные вещества - аскорбиновая,мочевая кислоты - не окисляютсяпри нулевом потенциале, Способопределения глюкозы обладает высо1032 ЙО 1 15 когда электролит выполняется при25 ЗО 35...

Номер патента: 891774

Опубликовано: 23.12.1981

Авторы: Кулис, Лауринавичюс, Малинаускас, Песлякене, Самалюс, Швирмицкас

МПК: C12N 9/02

Метки: метаболитам, ферментных, чувствительных, электродов

...е р 2. Электрод изготавливают иэ 26 мг комплекса состава ЙМФ ТЦХВГ и погружают в раствор высокоочищенной пероксидаэы иэ хрене в 0,1 М фосфатном буфере. Концентрация фермента 1(Гмоль/л (4 10 фмг/мл). Адсорбция проводится в течение 25- 30 мин при 20 С. Ферментный электрод пропитывают фосфатньм буфером и про" . водят определение тока электрода в зависимости от концентрации перекиси водорода.Зависимость катодного тока восстановления перекиси водорода адсорбированной на комплексе МИФ ТЦХИ пероксидазой (20 оСрКш 7,0,; О, 1 И фосфатный буфер) показана в табл,3Электрод сохраняет работоспособ;ность в течение суток. Когда на комплексе захватывается раствор пер" .оксидазы (0,1 мг/мл) при помощи ди- Зз ализной мембраны, электрод сохраняет активность...