Патенты с меткой «еsснеriснiа»

Номер патента: 861399

Опубликовано: 07.09.1981

Авторы: Ансберга, Хейслере, Шмите, Ясюкевича

МПК: C12N 1/08

Метки: биомассы, днк, еsснеriснiа

...А, Ач Корректор Е. Рашко Редактор Г, Бельская РЗаказ 6456/7 Тираж 528ВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж - 35, Раушская наб., д. 4/5 Подписное Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул, Проектная, 4 Очистку фага проводят в 33 мл градиентаСвС (д 1,4; д 1,5; О 1,3), Осадок центрифугируют.Полученную массу фага диализируют 2 раза. по часу против 2 л буфера, содержащего0,05 М йаС 1, 0,01 М трис, рН 7,9, 0,01 МЕДТА - йа. К массе фага прибавляют 3,5 мл10%.ного додецилсульфата натрия. Раствор нагревают до 48 С.Для удаления белка к раствору, содержащему 10фаговый ДНК, прибавляют. фенол. Осадокцентрифугируют, Операцию повторяют, к центрифугату прибавляют равный объем смесихлороформ-изоамиловый...

Номер патента: 907067

Опубликовано: 23.02.1982

Авторы: Жирнов, Клюшин, Кривушкина, Нелюбин, Угодчиков

МПК: C12N 1/00

Метки: биомассы, еsснеriснiа, м-17

...Москва, Ж, Раушская наб д, 4/5 Филиал 111 ГП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 тер вводят необходимую дозу стерильного раствора ионов двухвалентногожелеза, которую рассчитывают с учетом того, чтобы ее концентрация вферментере была 2 О -810 М. Купьтивирование ведут 7 ч при темпераратуре 37 С, скорости вращения мео,шапки 500-700 об/мин, аэрации стерильным воздухом, поддерживая рН впределах 7,6-7,9. Причем для коррегирования рН среды используют 40%раствор глюкозы, поддерживая рН вначале выращивания (первые 2,5 ч)в пределах 7,6-7,7 и 7,8-7,9 в конце выращивания, не допуская резкихколебаний рН.Общее количество бактерий Е,.со 11Мв процессе культивирования определяют обычными способами по оп. тической плотности, а количество живых,...

Номер патента: 908793

Опубликовано: 28.02.1982

Авторы: Баев, Бурьянов, Косых

МПК: C12N 1/02

Метки: 2124, ecor11, в834, еsснеriснiа, несущий, плазмиду, рестрикционной, субстрат, тест, штамм, эндонуклеазы

...так в органической форме в виде пептона, аминокислот, Нитраты восстанавливает донитритов.40Желантину не разжижает.Урсазная активность не обнаруживается.Индол не образует,Проявляет устойчивость к антибиотикам -ампициллину (25 мкг/мл).П р и м е р 1. Выледение плазмидной45ДНК,Клетки, содержащие плазмиду, выращиваютв 500 мл бульона до плотности 0,6 (ФЭК,светофильтр Мф 6, кювета 0,5 см). Затемклетки собирают центрифугированием (600020 мин) суспещируют в 4 мл 25%-нойсахарозы в 50 мм трис-НС 1, РН 3,0,добавляюз 1,2 мл лизоцима (1 О мг/мл) иинкубируют И мин во льду при перемешивании,К смеси добавляют 2,4 мл 0.25 М ЭЛТА55(р Н 8,01, оставляют во льду на 10 мин, аэмем попзяляюг последовательно 2,6 мл 5 МРастдора ЧаС и 1,2 чл А-ного расгвора...

Номер патента: 918304

Опубликовано: 07.04.1982

Авторы: Баев, Бурьянов, Косых

МПК: C12N 15/00

Метки: еsснеriснiа, штамм

...жгутиками, грамочрйцательные . инеспороносные,Культурные признаки, Хорошо растут . 6на простых питательных средах. При рооте на мясо-пептонном агаре,. питательномагаре Йифко минимальном агаре Дэвиса с глюкозой и каэаминовыми кислотами - колонии гладкие, круглые, првка-,тые, блестящие, серые, край ровныймучные (на синтетических средах - болееслизистые и мучные). При росте в жид 04 4кйх средах: мясо аептащый булыж, бульон Дйфкоф минимальная среда М 93 с глюкозой и казаминовыми кислотами образуют ровную, интенсивную муть,.ФФизиолого-.биохимические,признаки. Растет в пределах.от 4 до 45 С при оптимум рН 68-75В качестве источника углерода используют многие углеводы, спирты, органические кислоты, в часчности: О-глюкозу Д-фруктоэу,...

Номер патента: 929705

Опубликовано: 23.05.1982

Авторы: Баев, Глухов, Фодор

МПК: C12N 1/02

Метки: выделения, еsснеriснiа, есо, метилазы

...эк.зонуклеаз, на что указывает полноесохранение дезоксинуклеотидной последовательности ДНК и суперспиральной (ОФормы плазмидной ДНК при длительнойинкубации (10 ч) избыточных количествфермента (10-20 ед,) с фрагментамиДНК (1 мкг) и плазмидной ДНК (рВК 322)в условиях, способствующих действиюнуклеаз .(в присутствии ионов Мф )Это позволяет использовать его в эк-, ,спериментах по молекулярно-биологичес.кому конструированию рекомбинатныхДНК Хп У 11 го,П р и м е р. Еясйег 1 сМа со 11К29 выращивают до .титра 6-7 х 10 бактериальных тел в мл при 37 ОС с интенсивной .аэрацией на среде следующего состава, г/л: пептон; дрожжевой экстракт 5; БаС 1 10; глюкоза 2. Клеткиотделяют центрифугированием. Все дальнейшие операции проводят на холодуот 0 до 5...

Номер патента: 941423

Опубликовано: 07.07.1982

Авторы: Баев, Бурьянов, Косых

МПК: C12N 15/00

Метки: coli-продуцентов, еsснеriснiа, конструирования, метилазы, рестриктазы, штаммов

...и нитратной форме, так в органи- фОческой форме в виде пептона, аминокислот, Нитраты восстанавливает донитритов. Белатину не разжижает,Уреазйая активность не обнаруживается,. Ийдол не образуетУстойчивость к антибиотикам. Проявляет устойчивость к тетрациклину(30 мкг/мл) .Штамм Еясйег 1 сЫа со 11.В 834 (г,а )/И 3 характеризуется теми же морфо ЯВлогическими, культуральными и Физиологоб иохим ическими и риз на ками,Устойчивость к антибиотикам. Проявляет устойчивость и стрептомицину:тонногобульона вносят 1 мл культуры 3 фЕ. со 11 В 834 и выращивают до плотности 0,4 (ФЭК, светофильтр 6, кювета0,5 см). После охлаждения клетки собирают центрифугированием и ресуспендируют в равном объеме 10 мИ ИаС 1,После 20-минутной инкубации во...

Номер патента: 996436

Опубликовано: 15.02.1983

Авторы: Кажоян, Оганесян

МПК: C12N 15/00

Метки: биоорганических, еsснеriснiа, количественного, пролина, р-69-тест-культура, смесях, штамм

...признаки,Оптимальная температура для роста,37 С, Оптимальная рН среды 7,0-7,4,Расщепляет лактозу, глюкозу, мальтозу,Иарабинозу, ксилозу, маннит с образованием кислоты и газа, продуцирует индоли сероводород, Разжижения желатины неВ 996436 й ные количества 1, -пролина. По резуль- М 9, содержащую 10 мкг/мл ), -продитвгвм таких определений строится кривая на и инкубируют стационарно- в течение зависимости, оптической плотности расту-; 16 ч при 37 о С. Титр культуры.доджен щегоштамма от содержания пролина в достигнуть 1,0 5,0-10Йо начала9 образце. Кривая строится путем внесенияопределения кудьтуруцентрифугируюг и- определенного холйчества клеток штамма ресуспендируют в стерильной минимвльв качестве тест-культуры в пробирки, . ной...

Номер патента: 1328377

Опубликовано: 07.08.1987

Авторы: Андреева, Савкова, Свентицкий, Сергеев

МПК: C12Q 1/02

Метки: бактериальных, еsснеriснiа, клеток, препарате, состояния, физиологического

...Ь-тип 34%, С-тип 52 , Б-тип 14 ,. Устойчивость препара та к высушиванию 14 . определяется со. держанием клеток Б-типа.П р и м е р 3. Препарат лиофилизированной культуры готовят и микро" скопируют аналогично примеру 1По данным биологического контроля бактериальный препарат характеризуется жизнеспособностью 7%. Затраты времени, необходимого для проведения ана" лиза, около 28 ч. В поле зрения микроскопа определяют относительное содержание клеток с определенными оптическими признаками: Ь"тип 53%, С-тип 40 ., Б-тип 7%. Устойчивость препарата к высушиванию 7% определяется содержанием клеток Б-типа. Затраты времени 5-б мин,В табл,1 представлены результаты определения жизнеспособности и устой чивости к высушиванию различных...

Номер патента: 1346048

Опубликовано: 15.10.1987

Авторы: Герхард, Гюнтер, Марк-Брус, Петер, Эва

МПК: C12N 15/00

Метки: coli, pbr322, бактерий, вставку, еsснеriснiа, интерферон, клона, кодирующую, плазмидой, рсть, содержащей, трансформированного

...позиции 1 С 12,1 Р 12, Е 52 Е 1. Кпоны Р 1 А 6 и Р 2310 анализируют таким же методом,П р и м е р 6. Поли(А) РНК отделяют от индуцированных и неиндуцированных клеток намальва, денатурируют в результате инкубации в течение 1 ч при 50 С в 1 моль глиоксаля, 50 .-ном диметилсульфоксиде, 10 ммоль буфера фосфата натрия, рН , разделяют на 1,4 -ном плавающем агаре, переносят на нитроцеллюлозный фильтр и гибридизируют с плазмидной ДНК, Р-меченной с помощьв никтрансляции. Плазмидную ДНК, которая произошла от индуцированного гена, гибридизируют вэтой серии опытов только РНК из индуцированных клеток, но не РНК иэ неиндуцированных клеток. Применяемые для гибридизации плазмиды-ДНК являются Р 1 Н 1 (А), Р 1 У 12 (В,1), Р 2 Н 10(С), Р 1 А 6 (Е), Р 2 В 10...

Номер патента: 1366528

Опубликовано: 15.01.1988

Авторы: Андреева, Захарова, Омельянец, Рыбальская, Скрипник, Федоровская

МПК: C12P 19/04

Метки: coli-продуцент, активностью, бактерий, еsснеriснiа, липополисахарида, митогенной, обладающего, штамм

...митогеннымфактором в иммунологической реакциибласттрансформации лимфоцитов,Штамм Е. со 1 д ИМВ, обладаю"щий этими свойствами, выделен из ки- .шечника здорового человека общепринятым методом с помощью элективнойпитательной среды Эндо и отобран врезультате селекции из многих штаммов Е. со 1 по признаку наибольшеймитогенной активности.20Депонирован в коллекции Государственного НИИ стандартизации и контроля медицинских биологических пре"паратов им. Л, А. Тарасевича МЗ СССРи имеет регистрационный номер 137. 25Штамм имеет следующие культурально-морфологические и физиолого-биохимические признаки.Морфологические признаки. Клетки - мелкие палочки 1,1-1,5 х 2,0- 306,0 ммк. Спор не образуют, грамотрицательные, подвижные,...

Номер патента: 1390241

Опубликовано: 23.04.1988

Авторы: Смирнова, Усманова, Федорова, Хайтлина

МПК: C12N 9/50

Метки: бактерий, еsснеriснiа, нейтральной, продуцент, протеиназы, штамм

...среде, из расчета 1 млкультуры на 100 мл свежей среды. Культивирование проводят в термостатепри 37 С в течение 5 дней,Ежедневно из колбы отбирают 10 млбактериальной культуры для определения количества клеток и ферментативной активности, О количестве бактерий в отобранных пробах судят по оптической плотности суспенэии приЯ ==600 нм, количеству колоний, выросшихи;, твердой среде, и концентрации об"щего белка в бактериальном экстракте.Для определения ферментативнойактивности клетки осаждают центрифугированием при 5000 об/мин в течение 20 мин, суспендируют в 3 мл раствора для экстракции актина (0,5 мМАТФ, 0,2 мМ СаС 1 , рН 7,5) и разрушают 3 циклами замораживания - размораживания, Полученный экстракт осветляют центрифугированием при 12000...

Номер патента: 1431681

Опубликовано: 15.10.1988

Авторы: Клаус, Ральф

МПК: C12N 15/00, C12N 9/38

Метки: coli-продуцент, бактерий, галактозидазы, еsснеriснiа, штамм

...колонии. Все колонии собирают, 1 О очищают и отделяют.Каждая из полученных указанным способом колоний обладает способностью использовать рафинозу в качестве единственного источника углерода и одно временно была устойчива к действию ампициллина. Таким образом, они обладают иными свойствами по сравнению со штаммом, который был применен в качестве организма-хозяина. 20Из полученных колоний в каждом случае выделяют плазмидную РБА.Отбирают плазмиду из колоний, которые после обработки ферментом Есо В 1 или Нпй 111 дают меньший второй фрагмент, чем плазмиды других колоний. Бактерии, которые несут эту плазмиду, могут использовать рафинозу в качестве единственного источника углерода и про изводить все ферменты-оперона. По 10 мкг РБА рВТ 100 иэ...

Номер патента: 1439123

Опубликовано: 23.11.1988

Авторы: Бабичев, Коротяев

МПК: C12N 15/00

Метки: nb-4065, r-фактора, бактерий, вкпм, еsснеriснiа, идентификации, штамм

...(3000 мкг/мл).Штамм Е.со 11 К 12 С 600 Кхй (рКМК 334) используют в.качестве донора в коньюгационном скрещивании. В качестве реципиента используют штамм Е.со 1 д К 12 153 шей рго Ба 1 Устойчивость к тетрациклину, стрептомицину и сульфаниламидам у трансконь югантов соответствует таковой у донор- ного штамма. Частота переноса рКМК 334 в бесплазмидный штамм сос тавляет 1,510 при 20-часовой конь" югации. При. 5-минутной коньюгации передачи плазмиды в бесплазмидный штамм не происходит,П р и м е р 1. Плазмидную ДНК из штамма Е.со 1 К 12 С 600 КхЕ " (рКМК 334) выделяют по методу ВхгпЪохш, Эо 1 у. Молекулярный,вес определяют по элект рофоретической подвижности ДНК плазмиды рКМК 334 в 0,8 Х-ном агарозном геле в трис-боратном буфере (рН...

Номер патента: 1442544

Опубликовано: 07.12.1988

Авторы: Голимбет, Калакуцкий, Сидякина

МПК: C12N 1/04

Метки: coli, бактерий, еsснеriснiа, консервации, несущих, низкотемпературной, плазмиды, подготовки, рекомбинантные

...10/-ное обезжиренное молоков соотношении 1:1 и перемешивают, Суспензию охлаждают в холодильнике при4-6 С в течение 4 ч, а затем в чашке Петри наносят,на стерильные гранулы обезвоженного силикагеля, Гранулыподсушивают в эксикаторе над осушителем (хлористый кальций) при 4-6 Св течение 12 ч. В пластмассовую 25стерильную ампулу (фирма "Нунк ) помещают на дно несколько зерен прокаленного индикатора влажности (силикагель с хлористым кобальтом), покрывают его кружком стерильной фильтровальной бумаги. В асептических условиях гранулы силикагеля (20 шт.) пе-реносят в ампулу. Поверх гранул помещают небольшой комочек стерильной ваты, после чего завинчивают крышку ампулы до упора. Ампулы хранят притемпературе -70 С. Через 28 мес хранения...

Номер патента: 1446154

Опубликовано: 23.12.1988

Авторы: Войтенок, Осипович, Панютич, Циманис

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, белку, гибридных, еsснеriснiа, животных, интерлейкина-2, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, мембранному, моноклональных, препарате, рекомбинантного, человека, штамм

...частично очищенным РИЛ(иммуноферментный анализ).Продукция МКА сохраняется как ми) нимум до 10 пассажей п ч 11 о, В асцитной форме штамм не пассируется более одного раза.Контаминация, Бактерии и грибы в культуре .:не обнаружены при длительном наблюдении и посевах на пита" тельные среды. Заражение микоплазмой не выявлено по характеру включения тимидиновой меткиКриоконсервирование, Для длительного хранения клетки штамма замораживают в эмбриональной телячьей сыво" ротке с добавлением 10 диметилсульфо оксида. Режим замораживания: 1 С в 1 мин до -70 С. После замораживания клетки переносят в жидкий азот, Раэморажйвание - на водяной бале при +3 С. Жизнеспособность клеток послеоразмораживания 70-80 , по окрашиванию трипановым синим,П р...

Номер патента: 1446157

Опубликовано: 23.12.1988

Авторы: Бундулис, Войтенок, Панютич, Скривелис, Циманис

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, белку, гибридных, еsснеriснiа, животных, интерлейкина-2, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, мембранному, моноклональных, препарате, рекомбинантного, человека, штамм

...в препарате РИЛчеловека, Методы оценки сохранения специфичности: тест на связыва" ние МКА с иммобилизованным частично очищенным РИЛ(иммуноферментный анализ), Продукция МКА сохраняется как минимум до 10 пассажей 1 п чдС- то. В асцитной форме штамм не пассируется более одного раза,Контаминация. Бактерии и грибы в культуре не обнаружены при длительном наблюдении и посевах на питательные среды. Заражение микоплаэмой не выявлено по характеру включения тимидиновой метки.. Криоконсервирование. Для длительного хранения клетки штамма замораживают в эмбриональной телячьей сыворотке с добавлением 10 диметилсульфоксида, Режим замораживания;1 С в 1 мин до -70 С, После замораживания клетки переносят в жидкий . азот, Размораживание - на водяной...

Номер патента: 1472495

Опубликовано: 15.04.1989

Авторы: Волынец, Павлов, Семко, Степанюк

МПК: C12N 1/20

Метки: адгезивных, антигенов, еsснеriснiа, к-99, накопления, питательная, среда

...80 мл; вода водопроводная до 1 л.Стимуляцию роста и увеличение на 5копления адгезивных антигенов определяют по плотности микробных тел в1 мл смыва с агаровой среды при культивировании штаммов Е. со 1 с нали"чием пилей адгезии К. При культивировании штаммов Е, со 1 на указанном варианте среды плотность микробных тел в 1 мл составляет 1,51,б млрд.15П р и м е р 2. Для культивирова"ния продуцента используют питательнуюсреду следующего состава, г/л: гидролиэат казеина 1,75; фосфорнокислыйкалий однозамещенный 1,36; фосфорнокислый натрий двуэамещенный 1,05;глюкоза 12,5; очищенный агар-агар 28фильтрат культуральной жидкости пекарских дрожжей 90; вода водопроводная до 1 л, 25Плотность микробных тел в 1 млсоставляет 1,4-1,7 млрд.П р и м е р 3,...

Номер патента: 1472497

Опубликовано: 15.04.1989

Авторы: Бундулис, Войтенок, Панютич, Скривелис, Циманис

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, еsснеriснiа, животных, используемый, клеток, культивируемых, липополисахариду, мusсulus, моноклональных, штамм

...клетки пассировали один раз в 2-3 дня, кратностьрассева - 1:б - 1:8. Культура суспенэионная,Культивирование в организме животных. Для выращивания асцита пригоднымыши Ва 1 в/с. Мышам эа 7-30 дней доинъекции клетокштамма вводят внутрибрюшинно по 0,5 мл пристана, Клетки инъецируют внутрибрюшинно по 2-5 х 10 клеток в 1 мл среды 1 МДМ. Асцит формируется через 12-14 дней.Продуктивность штамма.Секреция моноклонального антитела(МкАТ) на 2-3 день культивированиясоставляет 40-45 мкг в 1 мл культуральной среды и 15-20 мг в 1 мл асцитной жидкости при определении иммуноферментным методом.Характеристика полученного продукта. Штамм продуцирует моноклональноеантитело с изотипом 1 Ы. Специфичность - антиген Е.со 1 небелковойприроды,.содержащийся в...

Номер патента: 1479516

Опубликовано: 15.05.1989

Авторы: Коротяев, Шишкина

МПК: C12N 15/00

Метки: coli, r-плазмид, бактерий, еsснеriснiа, идентификации, предназначенный, штамм

...прямых палочек.величиной 1,5-3,0 х 0,3-0,5 мкм,слабо подвижны перитрихи, спор икапсул не образуют, грамотрицательны,Культуральные признаки. На мясопептонном агаре колонии слегка выпуклые, полупрозрачные, с ровными краями, диаметр колоний 1-3 мм, на кровяном МПА круглые колонии без зоны гемолиза, полупрозрачные, на среде 15Энда круглые колонии, окрашенные втемно-красный цвет с металлическимблеском, на голодной среде с метионином и пролином плоские, полупрозрачные колонии размером 1-3 мм (ауксотроф по метионину и пролину),на мясопептонном бульоне образует равномерное помутнение и осадок.Физиологические признаки. Е,со 1Вне образует оксидаэу, расщепляет глюкозу с образованием кислотыи газа, ферментирует арабинозу, лактозу, мальтозу, манноэу,...

Номер патента: 1523055

Опубликовано: 15.11.1989

Авторы: Гюнтер, Клаус, Петер

МПК: C12N 15/00, C12N 9/78

Метки: бактерий, еsснеriснiа, креатинамидиногидролазы, рsеudомоnаs, рuтidа-продуцентов, штаммов

...ЕЭ и клоны ис- дазы представляет степень синтезиро-. пытывают на высокую экспрессивность ванной в колониях креатинамидиногидрогена. лазы. Тест-принцип: креатинамидиноКреатии + Н О гидролаза саркозии е моиезииа Яагс - СЭ Саркозин + ОО + Н О глицин + Формальдегид + Н О РОЭ НсОе + 4 ААР + ЕБР краситель + 2 НеОСостав системы Фильтрующей активности креатинамидиногидролазы показан в табл.1, ЗО П р и м е р 4. Определение актив-. ности креатинамидиногидролазы производят обнаружением образованных в результате реакций с уреазой ионов аммония с тест-комбинацией "мочевина".Дикий тип Рзецйошопав рцэр.Ыа 2440 для определения активности креатинамидиногидролазы инкубируют при 30 С в течение ночи в В-среде (5 мл)) которая содержит 1 Е креатина....

Номер патента: 1532585

Опубликовано: 30.12.1989

Авторы: Грубер, Дебов, Карягина, Лопатина, Лунин, Никольская-Санович, Поляченко

МПК: C12N 15/00

Метки: бактерий, днк, еsснеriснiа, кодирующая, метилазу, метилазы, плазмидная, продуцент, рекомбинантная, штамм

...Бяо 11 в клетках, несущих плазмиду с 1 33, не происходит.Плазмидную ДНК о 33 подвергают рестрикционному анализу.Характеристика штамма.2585 6Е. со 1, трансФормированных плазми"дой й 33.ШтаммТ 15 чения характера метилирования Яяо 11 20 25 30 40 45 50 55 5 153Клетки прямые, палочковидные, неподвижные, грамотрицательные, лактозопозитивные. При рассеве на чашкис 1,3%-ным МПА рост в виде отдельных,колонии, иногда в К-форме с неровными5краями. Хорошо растет на плотных ижидких питательных средах (МПА, МЛБ,1.В-бульон и ЬВ-агар).Физиолого-биохимические признаки,сКлетки растут в пределах 4-45 Спри оптимуме рН 6,8-7,5. Штамм разлагает глюкозу, лактозу, маннит с образованием кислоты, не .разлагаетсахарозу, сбраживает мальтозу, ксилозу,...

Номер патента: 1539205

Опубликовано: 30.01.1990

Авторы: Грубер, Дебов, Карягина, Лопатина, Лунин, Никольская-Санович, Поляченко

МПК: C12N 15/00

Метки: бактерий, днк, еsснеriснiа, кодирующая, метилазы, плазмидная, продуцент, рекомбинантная, рестриктазы, синтез, штамм

...при 10000 я 15 мин, затем 1 О мкл супернатанта добавляют впробу, содержащую 1 мкг бактериофага 3 в 10 мкл буфера А. Пробу инкубируют 1 ч при 37 С, после чегоанализируют электрофорезом в 1,2 Еном агарозном геле. Картина рестрикции в случае штамма Е, со 1 Р 8200,несущего плазмиду с 1 24, характерназля рестриктазы Бзо 11.1 мкг плазмидной ДНК й 24, выделенной из штамма Е.со 1 Р 8200, обрабатывают 1 О ед. рестриктирующей эндонуклеазы Бво 11 в буфере А в течение 2 ч при 37 С. Электрофорез показывает, что ДНК плазмиды й 24 при такой обработке не фрагментируется, вто время как плаэмида р 11 С 19 даеткартину гидролиза, типичную для плазмиды рЦС 19, обработанной рестриктаэой Бво 11. Эти данные свидетельствуют о защите мест узнавания...

Номер патента: 1541256

Опубликовано: 07.02.1990

Авторы: Баронайте, Вайткявичене, Марцишаускас, Пасечник, Песлякас, Суджювене, Федорова

МПК: C12N 15/00, C12N 9/00

Метки: большого, днк-полимеразы, еsснеriснiа, кленова, фрагмента

...ферментного экстракта полимином Р и сульфатом аммония. К центрифугату (215 мл), полу5 15412 ченному на предыдущей стадии, при постоянном перемешивании в течение 30 мин добавляют 107.-ный (13,7 мл) раствор полимина Р до конечной концентрации 0,67, После добавления 5 всего объема полимина перемешивание продолжают еще 30 мин. Экстракт центрифугируют в течение 15 минпри 4000 Полученный осадок используют для получения фрагмента Кленова. Фермент экстрагируют из осадка 100 мл 0,1 М калий-фосфатным буфером рН 7,0, содержащим 0,001 М /ь-меркаптоэтанол, 0,002 М ЭДТА, 0,1 М ЯаС 1. Процедуру повторяют еще раз. Супернатанты объединяют, Экстракт центрифугируют в течение 15 мин при 4000 я. К супернатанту (230 мп), медленно перемеши вая,...

Номер патента: 1362021

Опубликовано: 23.08.1990

Авторы: Бачина, Беларева, Гусятинер, Дебабов, Жданова, Козлов, Соколов, Хургес, Шакалис

МПК: C12N 1/20, C12P 13/08

Метки: бактерии, в-3420, вкпм, еsснеriснiа, продуцент, треонина, штамм

...уколу в мясо-пептонном агаре хороший рост по всему уколу,Физиолого-биохимические признаки,Желатину не разжижает. Хороший ростс коагуляцией молока, Инцол образует.Хорошо растет на сахарозе, глюкозе,55лактозе, маннозе, галактозе, ксилоэе, фруктозе, глицерине, маопте с1образ ованием кислоты и газ а,Устойчив к пенициллину и капамициНуеКлетки содержат многокопийную плазмиду рУИ 7 (мол,мас, 5,8 мегадальтон),обеспечивающую устойчивость к пенициллину и несущую гены треонинового оперона,Устойчив к Ь-треонину и Ь-гемосериНу еПри росте в присутствии 1.-треонинааминоацетон не образует,Получение 1.-треонина с использованием нового штамма-продуцента осуществляется следующим образом,Клетки штамма-продуцента Е. со 11выращивают на агаризованной...

Номер патента: 1476896

Опубликовано: 23.09.1990

Авторы: Добрица, Шевченко

МПК: C12N 15/00

Метки: bacillus, polya15, spp, векторная, генов, днк, еsснеriснiа, клетках, клонирования, конструирования, плазмидная, предназначенная, чужеродных

...0 С. На следую- тов, Зля трансформации берут в рабощнй день О, мл Са ф -клеток смешиваютту 0,5 мл суспензин полученных прото"с 0,05 мп ДНК (10 мкг/мп), инкубируют пластов, смешивают с ДНК, растворен-.1 ч при температуре ОС и 5 мин ной в ЯММР буфере,н добавляют 1,5 мппри температуре 42 С и затем перено- полиэтиленгликоля (ПЭГ). После разсят в пробирку с 1,5 мп среды ЬВ. 1 О бавления в 5 мп БММР буфера клеткиПосле 2 ч инкубации в этой среде при центрифугируют и ресуспендируют в37 С со встряхиванием клетки высева мл ЯММР буфера. Через 1,5 ч суспенют на чашки с индикаторными (Ьас) зию высевают на чашки Петри со средойсредами, содержащими тетрациклин ДМЗ. Чашки инкубируют при температурео(15 мкг/мл). В качестве индикаторных 5 37 С в течение 2...

Номер патента: 1453896

Опубликовано: 30.09.1990

Авторы: Бурьянов, Витенене, Косых

МПК: C12N 15/00

Метки: corii, бактерий, днк, еsснеriснiа, кодирующая, конструирования, метилазу, метилазы, плазмидная, продуцент, рекомбинантная, рестриктазу, рестриктазы, рук11, штамм

...штаммаЕ, соН В 834(рС 857),обусловлен тем,что штамм не содержит интерферируюих с ферментами Есо КП примесей исодержит плаэмиду с геном термочувст Овительного репрессора с 1 фага ляйбда,Содержаний рестриктаэы и метилазцЕсо К 11 в сконструированном штаммеравно 500000 ед, каждого фермента наг сырой биомассы клеток,Штами ЕвсИехсЫа со 1. ВКИ СК 2889 характеризуется следующими признаками;Иорфологические признаки.6 6ную как р 7 К 11 и содержащую в своем . составе трк фрагмента, которые обра,зуются при гидролизе плазмидной ДНК эндокуклеаэой рестрикции Рве 1Выделенную .ДНК р 7 К 11 трансформируют в штамм Е. со 11 В 834/рС 1857 Трансформаиты отбирают на среде, содержащей ампицкплин (50 мкг/мл) и канамкцин (25 мкг/мл). Плаэмида РС 1857 несет...

Номер патента: 1597727

Опубликовано: 07.10.1990

Авторы: Баннов, Попов, Светоч, Торский, Тугаринов

МПК: A61K 39/02, C12Q 1/00, G01N 33/534 ...

Метки: антигена, еsснеriснiа, отбора, продуцентов, штаммов

...в буАере А. Затем в пробы добавляют антиген К 88 вколичестве от 0 до 400 мкг и буАерА до общего объема 500 мкл, Смесьперемешивают и выдерживают 15 минпри комнатной температуре. Затемдобавляют по 100 мкл меченных 1а нти-К 188 иммуно глоб ули нов . Смес ьинкубируют 1 ч при комнатной темпе1597727 ратуре, Отмывание клетом от несвязявшихся иммуноглобулинов и определение их радиоактивности проводят как описано при получении рядиоак 5 тнвно меченных иммуноглобулинов. Количество меченных антител н пробе (100 мкл) подбирают тяк, чтобы все молекулы специАических иммуноглобулинов могли связаться с антигенами бактериальных клеток. Учитывая баланс н пробе иммуноглобулина и антигена К 88, получают следующие зависимости числа...

Номер патента: 1378370

Опубликовано: 30.10.1990

Автор: Тец

МПК: A61K 39/395, C12N 1/20

Метки: 2240, бактерий, диагностической, еsснеriснiа, используемый, о-сыворотки, серовара, штамм, эшерихиям

...агаром, Полонину чашкиоблучают Уф н дозе 20 Дж/м и послеэтого инкубнруют в темноте при37,0 С в течение 18 ч. Трансдуктанты, приобретшие ген гес А 56, не дают роста на облученной стороне чашки, В то же время клетки, несущиеисходный гес А ген, малочувствительны в данной дозе Кф и дают нормальный рост ца облучецной и необлученной сторонах чашки ПетриОтобранный таким образом штамм повышеннойчувствительности к Уф обозначенЧТ 2240,Штамм депонирован в коллекциимикроорганизмов ГИСК им. Л. А. Тарасевича под Ф 135 и характеризуется следующими свойствами.Культурально-морФологические ифизиолого-биохимические признаки .Грамотрицательная неподвижнаяпалочка, находящаяся н форме, дающая положительную реакцию с метилротом и отрицательную с...

Номер патента: 1615181

Опубликовано: 23.12.1990

Авторы: Булгакова, Попов

МПК: C12N 15/31, C12Q 1/68

Метки: бактерий, днк, днк-зонда, еsснеriснiа, иде, идентификации, конструирования, микроба,несущих, пестициногенности, плазмидная, плазмиду, продуцент, рек-7-днк-зонд, рекомбинантная, чумного, штамм, штаммов

...Злюат экстрагиру ют Фечолом, хлороформом и обрабатываю эфиром. ДНК плазмиды рАТ 153(10 мкг) подвергают гидролизу рестриктазами Ипд 111 и ВапН 1 по методике, описанной ныше. Больший 15 (3,3 т.п,н,) из двух полученных в результате гидролиза фрагментов извлекают из геля. электроэлюцией. Злюаточищают от примесей агарозы и смешивают с злюатом, содержащим Нлпс 1 111- 20 "ВапН 1 - ррагмент рРзс, ДНК осаждают 96 Е-ным этаколом, промывают 70 Еньм зтанолом и подсушивают, Осадокрастворяют н буфере для легирования(5 ец,), Легирование проводят 1012 ч при 16 С.В. Анализ рекомбннактных плазмид 30 и получение штамма - продуцента Р 1- зонда для диагностики штаммов чумногомикроба,хлорамфениколом (С = 20 мкг/мл).ДНК плазмид рРзС и рАТ вьделяют.Клетки...

Номер патента: 1618760

Опубликовано: 07.01.1991

Авторы: Буткус, Вайткявичюс, Кундротене, Кюдулене, Науряцкене, Падягимене, Янулайтис

МПК: C12N 1/20, C12N 9/14

Метки: coli-продуцент, бактерий, еsснеriснiа, рестриктазы, со130, штамм

...волны540 нм составляет 6,0 о,е. Полученныйинокулят засевают в лабораторныйферментер "Биолайит", содержащий 10 лсреды Р 2,Культуру ЕзсЬег 1 сЬ 1 а со 11 КР 1, 130выращивают при 37 С, рН 7,0, со ско-ростью перемешивания в первый часкультивирования 200 об/мин и далеедо 400 об/мин, а также подачей стериального воздуха 4 л/мин в первыйчас роста с постепенным увеличениемдо 7 л/мин на третьем часу роста .Заданный рН во время Аерментацииподдерживают добавлением в среду 1 МортоАосАорной кислоты, Во.время культивирования периодически отбираютпробы и измеряют оптическую плотностьсуспензии клеток, Культивирование штамма проводят до поздней логариАмической Фазы роста - оптическая плотность суспензии клеток составляет3,7 о.е. (длина волны 540 нм,...