Патенты с меткой «рестриктазы»

Номер патента: 941423

Опубликовано: 07.07.1982

Авторы: Баев, Бурьянов, Косых

МПК: C12N 15/00

Метки: coli-продуцентов, еsснеriснiа, конструирования, метилазы, рестриктазы, штаммов

...и нитратной форме, так в органи- фОческой форме в виде пептона, аминокислот, Нитраты восстанавливает донитритов. Белатину не разжижает,Уреазйая активность не обнаруживается,. Ийдол не образуетУстойчивость к антибиотикам. Проявляет устойчивость к тетрациклину(30 мкг/мл) .Штамм Еясйег 1 сЫа со 11.В 834 (г,а )/И 3 характеризуется теми же морфо ЯВлогическими, культуральными и Физиологоб иохим ическими и риз на ками,Устойчивость к антибиотикам. Проявляет устойчивость и стрептомицину:тонногобульона вносят 1 мл культуры 3 фЕ. со 11 В 834 и выращивают до плотности 0,4 (ФЭК, светофильтр 6, кювета0,5 см). После охлаждения клетки собирают центрифугированием и ресуспендируют в равном объеме 10 мИ ИаС 1,После 20-минутной инкубации во...

Номер патента: 988866

Опубликовано: 15.01.1983

Авторы: Амбросов, Попов

МПК: C12N 9/00

Метки: ry-13, вsснеriснiq, культивирования, продуцента, рестриктазы

...Е. со 11НВ 1100 КУпроводят на несбалансированной питательной среде в ферментере с рабочим объемом 350 мл,оснащенном рН и р 02 датчиком прио37 С. Величину рН в процессе ростапродуцента поддерживают автоматичес"аоки на уровне 7,2 добавлением 0,1 МаОН,Азрация составляет 1. объем воздухана 1 объем культуральной жидкости вминуту. Число оборотов выбирают таким, чтобы кислород не был лимитирующим фактором роста микроорганизма. В опыте это значение находитсяв пределах 400-700 об/мин, Ростбиомассы оценивают по измерению оптической плотности на фотокалориметре ФЭКИ с последующим пересчетом на сухой вес по калибровочнойкРиВОЙ Подпитку проводят растворомглюкозы с концентрацией 140 г/л придостижении концентрации растворенного кислорода 704 от...

Номер патента: 1067041

Опубликовано: 15.01.1984

Авторы: Грубер, Дебов, Народицкий, Никольская-Санович, Рубцова, Тихоненко, Упорова, Худяков

МПК: C12N 15/00

Метки: рестриктазы

...и АМН СССР, Ивановского льский ин , И, Мечни щим следую ост 3979, 5,9-18,б СеИ В 1 о.СЬ АНИЕ ИЗО фСИОМУ ОВИДИЕЛ(71) Лаборатория энзимологии Институт вирусологии им. Д. И и Московский научно-исследоват ститут вакцин и сывороток им. кона(54) (57) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РЕСТРИКТА ЗЫ, включающий культивирование клеток штамма .СОВ, -продуцента рестриктазы, раз рушение клеток, осаждение клеточных облом ков, получение экстракта и последующую хроматографию, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью расширения ассортимента эффективных рестриктаз и сокращения вре мени их получения, в качестве штамма 8 с используют штамм Е Со 1,Ы, продуцирую. щий рестриктазу Е. со СК с сайтом, имеющую нуклеотидную последователь причем хроматографию...

Номер патента: 1402615

Опубликовано: 15.06.1988

Авторы: Бунина, Смольянинов

МПК: C12N 1/20, C12N 9/16

Метки: бактерий, в-1823, вкпм, кlевsiеllа, крп, культивирования, питательная, продуцента, рnеuмоniае, рестриктазы, среда

...табл. 2 видно, что .рост клеток на предлагаемой среде вФормула изобретения Питательная среда для культивиро" вания бактерий К 1 еЬве 11 а рпецшоп 1 ае ВКПМ В- продуцента рестриктазы Крп 1, содержащая глюкозу, пептон, дрожжевой экстракт, минеральный источник натрия и хлора и дистиллированную воду, о т л и ч а ю щ а я с я тем, что, с целью повышения выхода биомассы, она дополнительно содержит сернокислый семиводный магний, в качестве источника натрия - двузамещенный фосфорнокислый натрий, а источника хлора - хлористый аммоний, при следующем соотношении компонентов, мас, 7,: 0,60-0,65 1,6-1,7два раза лучше, чем на известной.Кроме того, эксперименты показалипрямую корреляционную зависимостьмежду ростом клеток и накоплением...

Номер патента: 1442546

Опубликовано: 07.12.1988

Авторы: Дегтярев, Жилкина, Репин

МПК: C12N 15/00, C12N 9/14

Метки: cgtagn, gcatcn, нуклеотидов, последовательность, расщеплять, рестриктазы, способной, узнавать

...проводят при 4 С, Биомассу ресуспендируют в буфере А (0,05 М трис-НС 1, рН 75; 5,4 10 М ЭДТА, О, 1 М 2-меркаптоэтанол, 0,2 Х ИР) в соотношении 6 г биомассы на 20 мл буфера. Разрушают ультразвуком в ультразвуковом дезинтеграторе МБЕ три раза по 40 с на частоте 20 кГц, амплитуда 12 мкм, Осаждают клеточные остатки при 16 тыс, об/мин в течение 30 мин, Осветленный супернатант наносят на колонку с фосфоцеллюлозой Р, предварительно уравновешенную буфером В (0,02 М КНРО, рН 7,5; 5,4 10 М ЭДТА, 0,1 М 2-меркаптоэтанол), колонку промывают этим же буфером, объем которого равняется двум объемам смолы. Сорбированный на Фосфоцеллюлозе белок смывают 1 М ИаС 1 в буфере, собранный белок диализуют 3 ч против 3 л буфера и.наносят на колонку с...

Номер патента: 1449579

Опубликовано: 07.01.1989

Авторы: Божко, Бойков, Виестуре, Репин, Хейслере

МПК: C12N 1/20, C12N 9/14

Метки: luтеus, аrтнrовастеr, выращивания, питательная, продуцента, рестриктазы, среда

...10 мМ 2-меркаптоэтанол, 1 мМ аэид натрия, 1 мМ трилон Б (буфер А) и доводят этим же буфером до объема 150 мл. К суспензии добавляют 1,5 мл 107-ного тритона Хи 150 мг ливоцима. Лизис проводят 1 ч при постоянном перемешивании, Дальнейшее фракционирование лизата проводят в системе двухфазного разделения.Полученный лиэат добавляют к смеси, состоящей из 37,0 мл 152-ного водного раствора декстрана Т, 56 мл ЗОБ-ного ,водного раствора полиэтиленгликоля и 35 мл 4,0 М хлористого натрия (рН смеси 6,5). Тщательно перемешивают в течение 15 мин и центрифугируют на центрифуге "НхдЬ зреес 1" (20000 х я, 20 мин). Верхнюю ПЭГ-фазу объемом 120 мл, содержащую фермент, отбирают, разбавляют двукратным объемом буфера А, добавляют тритон Х(О, 1 Е) и...

Номер патента: 1449582

Опубликовано: 07.01.1989

Авторы: Божко, Бойков, Дегтярев, Репин, Хейслере

МПК: C12N 9/14

Метки: рестриктазы

...1.Выход рестриктазы А 1 ц 1 50000 ед//10 мл активность 5000 ед/мл, выход5000 ед/г биомассы.П р и м е р 5. Суспендированиебиомассы проводят аналогично примеру 1. К 30 мл суспензии добавляют 5 мл 9%-ного раствора яичного масла в толуоле, Отношение яичного маслак толуолу 1,0: 10,0. Дезинтеграцию клеток и последующее выделение рестриктаэы А 1 ц 1 проводят аналогично примеру 1,Выход рестриктаэы А 1 ц 1 55000 ед//10 мл, активность 5500 ед/мл, выход 5500 ед/г биомассы.П р и м е р 6, 10 г .биомассы Ат"спгоЬасйег 1 цецз ВКПМ Вразмораживают и суспендируют в 20 мл ра1449582 5О 15 20 25 30 35 40 45 50 бочего буфера (трис"НС 1 ,0,0 М, рН 7,2-7,6; 2-меркаптоэтанол 0,0 М). К 30 мл суспензии добавляют 5 мл концентрированного толуола, Во...

Номер патента: 1472493

Опубликовано: 15.04.1989

Авторы: Бойков, Виестуре, Дегтярев, Репин, Стенгревицс

МПК: C12N 1/14

Метки: providencia, sтuаrтii, бактерий, продуцент, рестриктазы, штамм

...37 С; аэрации5540 л/мин йерментацию ведут до достижения значения рН 8,0, Выход биомассы: 7,5-8,0 г/л культуральной жидкости. Выход рестриктазы Рят;3 420000-22500 ед/г биомассы; 150000 - 180000 ед/л культуральной жидкости.Сравнение стабильности содержания рестриктазы Ря 1 1 при хранении представлено в таблице. СтабильШтамм-продуцент ностьгод Рго.кЫепсхая 1 пагСИРгочЫепсхаяЙцагЫ 3. ВКПМ В5 164 ВКПМВИзвестный П р и м е р 1. Для полученияштамма с высоким содержанием рестрик тазы Р я 1 1 велась непрерывнаяселекционная работа с отбором вариантов, имеющих высокую продуктивность рестриктазы Ря 1 1.Селекция велась в чашках Петрипо твердой среде, содержащей 3,5 Хагара сухого питательного и воду,Проверка продуктивности штаммаРгоЫецса яСчаг...

Номер патента: 1502616

Опубликовано: 23.08.1989

Авторы: Бойков, Репин

МПК: C12N 1/20, C12N 9/14

Метки: providencia, sтuаrтii, бактерий, культивирования, питательная, продуцента, рестриктазы, рсть, среда

...фермента, которое требуетсядля полного расщепления 1 мкг ДНКо,фагав течение 1 ч при 37 С,Выделение фермента проводят следующим образом,50 г биомассы бактерий суспендируют в 100 мл 10 мМ трис-НС 1, буфера, рН 7,2, содержащем 10 мМ 2-меркаптоэтанола, 1 мМ азид натрия, 1 мМтрилона Б (буфер А) и доводят этимже буфером до объема 150 мл. К суспензии добавляют 1,5 мл 10%-ного45,0 1,5 тритона Хи 150 мг лизоцима,Лизис проводятч при постоянномперемешивании, Дальнейшее фракционирование лизата проводят в системедвухфазного разделения.Полученный лизат добавляют к смеси, состоящем иэ 37,0 мл 15%-ноговодного раствора декстрана Т,56 мл 30%-ного водного раствора полиэтиленгликоля (ПЭГ) и 35 мл 4,0 Мхлористого натрия (рН смеси 6,5).Тщательно...

Номер патента: 1539205

Опубликовано: 30.01.1990

Авторы: Грубер, Дебов, Карягина, Лопатина, Лунин, Никольская-Санович, Поляченко

МПК: C12N 15/00

Метки: бактерий, днк, еsснеriснiа, кодирующая, метилазы, плазмидная, продуцент, рекомбинантная, рестриктазы, синтез, штамм

...при 10000 я 15 мин, затем 1 О мкл супернатанта добавляют впробу, содержащую 1 мкг бактериофага 3 в 10 мкл буфера А. Пробу инкубируют 1 ч при 37 С, после чегоанализируют электрофорезом в 1,2 Еном агарозном геле. Картина рестрикции в случае штамма Е, со 1 Р 8200,несущего плазмиду с 1 24, характерназля рестриктазы Бзо 11.1 мкг плазмидной ДНК й 24, выделенной из штамма Е.со 1 Р 8200, обрабатывают 1 О ед. рестриктирующей эндонуклеазы Бво 11 в буфере А в течение 2 ч при 37 С. Электрофорез показывает, что ДНК плазмиды й 24 при такой обработке не фрагментируется, вто время как плаэмида р 11 С 19 даеткартину гидролиза, типичную для плазмиды рЦС 19, обработанной рестриктаэой Бво 11. Эти данные свидетельствуют о защите мест узнавания...

Номер патента: 1544802

Опубликовано: 23.02.1990

Авторы: Азизбекян, Нетыкса, Ребентиш

МПК: C12N 9/14, C12N 9/22

Метки: bacillus, бактерий, изошизомера, продуцент, рестриктазы, тнuringiеnsis, штамм

...действия рестриктазыо37-40 С, для активности фермента требуются ионы Мр (5-10 мМ). Ферментактивизируется небольшими концентрациями ИаС 1 (25-50 мМ), За единицу ак.;ивности принимается количество Фермента, вызывающее полное расщепление1 мкг ДНК бага лямбда за 1 ч инкубации при 37 дС. Состав буфера: 1 О мМ трис-НС 1, 50 мМ ИаС 1, 10 мМ МЕС 1 10 мМ 2-МЭ, рН 7,5. Для определения последовательности нуклеотидов, узнаваемых рестриктазой Вц, проводили гидролиз ею ДНК различного происхождения, для которой известна нуклеотидная последовательность: бактериофага лямбда ( Ъ ), ф Х 174 РФ, М 13, вируса БЧ 40, плазмиды РВР 322., Расщепление ДНК проводят в реакционной среде следующего состава: 10 мМ трисНС 1 (рН 7,5) б мМ 2-мерпатоэтанола, 6...

Номер патента: 1546485

Опубликовано: 28.02.1990

Автор: Лебенка

МПК: C12N 9/14

Метки: рестриктазы

...для электрофореза, источник питания УИП, ультрафиолетовый осветитель.ДНК рВВ 322 выделена по известнойметодике.ФФормула и з о б р е т е н и яСпссоб получения рестриктазы СГц 1, предусматривающий культивирование продуцирующего микроорганизмаСаы 1 оЬасгег ГцзЫогппз ВКПМ Вна пи" тательной среде, содержащей пептон, дрожжевой экстракт, воду и сульфат магния, с последующим разрушением клеток ультразвуком и очисткой Фермента путем хроматографии, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью упрощения процесса очистки и повышения выхода целевого продукта, хроматографию ведут на колонке фосфоцеллюлозы с элюцией градиентом хлористого натрия от 0,1 до 1,0 М и затем на системе колонок ДЭАЭ-сефацел-гепарин-сефарозы с нанесением образца при...

Номер патента: 1453896

Опубликовано: 30.09.1990

Авторы: Бурьянов, Витенене, Косых

МПК: C12N 15/00

Метки: corii, бактерий, днк, еsснеriснiа, кодирующая, конструирования, метилазу, метилазы, плазмидная, продуцент, рекомбинантная, рестриктазу, рестриктазы, рук11, штамм

...штаммаЕ, соН В 834(рС 857),обусловлен тем,что штамм не содержит интерферируюих с ферментами Есо КП примесей исодержит плаэмиду с геном термочувст Овительного репрессора с 1 фага ляйбда,Содержаний рестриктаэы и метилазцЕсо К 11 в сконструированном штаммеравно 500000 ед, каждого фермента наг сырой биомассы клеток,Штами ЕвсИехсЫа со 1. ВКИ СК 2889 характеризуется следующими признаками;Иорфологические признаки.6 6ную как р 7 К 11 и содержащую в своем . составе трк фрагмента, которые обра,зуются при гидролизе плазмидной ДНК эндокуклеаэой рестрикции Рве 1Выделенную .ДНК р 7 К 11 трансформируют в штамм Е. со 11 В 834/рС 1857 Трансформаиты отбирают на среде, содержащей ампицкплин (50 мкг/мл) и канамкцин (25 мкг/мл). Плаэмида РС 1857 несет...

Номер патента: 1618760

Опубликовано: 07.01.1991

Авторы: Буткус, Вайткявичюс, Кундротене, Кюдулене, Науряцкене, Падягимене, Янулайтис

МПК: C12N 1/20, C12N 9/14

Метки: coli-продуцент, бактерий, еsснеriснiа, рестриктазы, со130, штамм

...волны540 нм составляет 6,0 о,е. Полученныйинокулят засевают в лабораторныйферментер "Биолайит", содержащий 10 лсреды Р 2,Культуру ЕзсЬег 1 сЬ 1 а со 11 КР 1, 130выращивают при 37 С, рН 7,0, со ско-ростью перемешивания в первый часкультивирования 200 об/мин и далеедо 400 об/мин, а также подачей стериального воздуха 4 л/мин в первыйчас роста с постепенным увеличениемдо 7 л/мин на третьем часу роста .Заданный рН во время Аерментацииподдерживают добавлением в среду 1 МортоАосАорной кислоты, Во.время культивирования периодически отбираютпробы и измеряют оптическую плотностьсуспензии клеток, Культивирование штамма проводят до поздней логариАмической Фазы роста - оптическая плотность суспензии клеток составляет3,7 о.е. (длина волны 540 нм,...

Номер патента: 1631080

Опубликовано: 28.02.1991

Авторы: Андреева, Лебедев, Пустошилова, Серов

МПК: C12N 1/20, C12N 9/14

Метки: bacillus, бактерий, вме, меgатеriuм, продуцент, рестриктазы, штамм

...нуклеотидов ВЕССС;оптимальное значение рН дпя действиярестриктазы 75-9,0; оптимальная температура действия 37 оС; для активности рестриктазы требуются ионы М 8+Фс оптимальной концентрацией 5-10 мМ;оптимальная концентрация ИаС 1 0"50 мМ.Для культивирования В.ше 8 аСегхцш35361 применяют питательную среду следующего состава, г/л дистиллированной воды;Пептон 10Дрожжев ойэкстракт 5БаС 1 10 ры В.шеяагегцш в 10 раз выше, чем с 1 л культуры В.враегсцвП р и м е р. Клетки В,шеаегдцш 36 1, хранящиеся в 15 Х-ном глицерине в Ь-бульоне при минус 60 оС, размораживают и высевают для оживления в Ь-бульон, инкубируют 24 ч при 30 оС. Полученную жидкую культуру высевают на чашки РПА для получения отдельных колоний, инкубируют 24 ч при 30 С,...

Номер патента: 1631081

Опубликовано: 28.02.1991

Авторы: Буткус, Кюдулене, Манелене, Пятрушите, Степонавичене, Янулайтис

МПК: C12N 1/20, C12N 9/14

Метки: бактерий, еsснеriснiа, продуцент, рестриктазы, штамм

...мМ КаС 1 5 мМ МяС 1., 10 мМ 2-меркаптоэтанол, 100 мкг/мл альбуминабычьей сыворотки, 2 мкг ДНК фага 9в 40 мкл смеси и 1 мкл фермента, Реакцию проводят при 37 С 10 мин, Электорофорез проводят в 0,1 М натрийборатном буфере (рН 8,2) 2 мМ трилон Б,в течение 1,5 ч при напряжении 100 Ви силе тока 100 мА. Окрашенные этидийбромидом (1 мкг/мл) гели просматривают в УФ-свете,За условную единицу принимаетсято количество фермента, которое воптимальных условиях за 1 ч полностьюрасщепляют 1 мкг ДНК фага Я Все операции по выделению и очистке фермента проводят при +4 С.10 г влажной биомассы суспендируют в 20 мл буфера А (10 мМ трис-НС 1-буфер, рН 7,8, содержащий 10 мМ 2-меркаптоэтанола), озвучивают на дезинтеграторе, В полученный бесклеточный...

Номер патента: 1632974

Опубликовано: 07.03.1991

Авторы: Дегтярев, Репин, Речкунова

МПК: C12N 1/20, C12N 9/14

Метки: vulgaris-продуцент, бактерий, рrотеus, рестриктазы, штамм

...р 1. Клетки Ргогеця чц 1 вагя 84 бактериологической петлейпересевают на чашки Петри с агаризованной средой (на основе 3,5%-ногорыбного гидролизата), содержащей1% ную Донорскую кровь Чашки с за 40сеянной культурой инкубируют в термостате при 30 С 16 ч. Подросшую культуру переносят в жидкую питательнуюсреду следующего состава: рыбный гидролизат 3,5%, вода дистиллированная 45остальное, рН 7; 2. Культивированиеосуществляют в термостатированныхкачалках при 30 С; .200 об./мин, достационарной фазы роста,Глубинное культивирование проводят вферментере "МсгоГегш" в анаологичной среде при 30 С, аэрации 1объем в минуту, 200 об./мин мешалки.В течение культивирования следят заподдержанием рН и оптической плотностью, При достижении ранней стацио...

Номер патента: 1645293

Опубликовано: 30.04.1991

Авторы: Дегтярев, Корсун, Пучкова, Речкунова, Серов

МПК: C12N 1/20, C12N 9/14

Метки: faecalis, sтrертососсus, бактерий, продуцент, рестриктазы, штамм

...при температуре 30 С с хорошей аэрацией допоздней логарифмической фазы роста.Выход влажных клеток составляет 2,43,0 г/л питательной среды,Выход фермента составляет 2000 ед.акт./г сырой биомассы, что более чемв 3 раза выше, чем известногоПолученная рестриктаза Бйа Б 1характеризуется следуккнми свойствами,"узнает и специфически расщепляет 45последовательность нуклеотидов ССАТС%/ 9 фоптимальное значение рН для действия рестриктазы 7,2;оптимальная температура действия37 С;оптимальная концентрация ионовИаС 1 - 150 шИ, М 8 С 1 - 5-15 шИ.Фермент стабилен в течение не менее 6 мес,. при температуре -20 С, своо55боден от примесей неспецифическихэкэо- и эидонуклеаз, фосфатаз.Изобретение иллюстрируется следующими примерами. П р и м е р 1....

Номер патента: 1645300

Опубликовано: 30.04.1991

Авторы: Андреева, Дегтярев, Кривопалова, Пучкова, Речкунова, Селина, Серов

МПК: C12N 1/14, C12N 9/14

Метки: fradiae, sтrертомyсеs, продуцент, рестриктазы, штамм

...нуклеотидов ССССО;оптимальное значение рН для действиярестриктазы 7,5-8,0; оптимальная температура действия 37 С, активностьо сохраняется также при 50 С; оптимальоная концентрацияионов Ия ф 5-15 мИ.БаС 1 50 мИ.Электрофореграмма продуктов гидролиза ДНК фага Ф С 1 857 рестриктазамиБЕг 1 и Бас 11 и Бас 11 показывает,что картина гидролиэа полностью совпадает как при параллельном, так исовместном гидролизе. Следовательно,рестриктаэа Бйг 1 является изошиэоме,ром рестриктаэы Бас 11, узнает и расцепляет последовательность нуклеотидов СССССС,П р и м е р 1. Получение биомассыБ. йгаЫае 303, Клетки Б. йгайае 303,храняциеся в ЗОХ-ном растворе глицерина в, питательной среде при -20 С,овысевают на чашку с плотной питательной...

Номер патента: 1648976

Опубликовано: 15.05.1991

Авторы: Аникейчева, Калугин, Самко, Соколов, Фицнер, Фодор, Хорошутина, Эльдаров

МПК: C12N 1/20, C12N 9/14

Метки: agile, аснrомовастеr, бактерий, продуцент, рестриктазы, штамм

...с мясопептонным агаром мелкие, блестящие, края ровные. На мясопептонном бульоне на дне пробирки осадок, среда прозрачная.Отношение к кислороду: строгий аэроб.Желатина уколом - очень медленное разжижение.Чувствительность к антибиотикам: культура чувствительности ко многим антибиотикам, резистентна к пенициллину, стрептомицину, полимиксину,Условия выращивания и хранения Культура хорошо растет на твердых и жидких полноценных питательных средах: бульоне Хоттингера, среде 1 В. При культивировании на среде 1 В наблюдается продолжительная лаг-фазаОптимум роста при,37 С. Зона рН роста культуры лежит впределах 4,6-9;5. Оптимум роста культурыи образования фермента при рН среды7,2 - 7,4, При рН 10,0 культура не растет,адИе.Наибольший выход...

Номер патента: 1650697

Опубликовано: 23.05.1991

Авторы: Дегтярев, Дедков, Речкунова

МПК: C12N 1/20, C12N 9/14

Метки: bacillus, fоrмis, liснеni, бактерий, продуцент, рестриктазы, штамм

...е ./г биомассы1000 5000 Составитель И,ПриваловаТехред М.Моргентал Корректор М,Демчик Редактор Н,Гунько Заказ 1583 Тираж 374 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж. Раушская наб 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул. Гагарина, 101 глюкозы образуют кислоту, Гидролиэует крахмал, казеин, желатин, твин, Дезаминирует аргинин. Сероводород и индол не образует. Восстанавливает нитрат в нитрит, Чувствителен к ампилициллину, хрорамфениколу, канамицину, стрептомицину, тетрациклину (100 мкг/мл среды 1), Используют глюкозу в качестве единственного источника углерода и энергии для роста, Растет при 10 - 55 С, оптимум 37 С, рН среды 6 - 8, оптимум рН...

Номер патента: 1652341

Опубликовано: 30.05.1991

Авторы: Бойков, Виестуре, Дегтярев, Репин

МПК: C12N 9/14

Метки: sтuтzеri, бактерий, продуцент, рsеudомоnаs, рестриктазы, штамм

...растет на жидкой питательной среде, содержащей 50 г/л рыбного гидролиэата и до 1,0 л воды, рН 7,2-7,4. Нв такой питательной среде штамм растет при температуре 25-27 ОС, аэрации 2 обьемв воздуха на 1 обьем питательной среды в течение 5 - 6 ч. При выращивании штамма на питательной среде данного состава происходит помутнение среды, что свидетельствует о сильном росте культуры. Рост глубинный и пленки на поверхности не образуется, Осадок, состоящий из клеток Рзецбоеопаз з 1 ц 1 аег 131, тягучий, при воздействии нв него лиэоцимом быстро происходит лиэис клеток, Количество осадка обильное, цвет осадка светло-серый.Штамм фагоустойчив, Не лиэируется в присутствии фагов СЬ 4 А,А, МЗ 2, 0 Р.Штамм чувствителен к ампициллину в концентрации...

Номер патента: 1659479

Опубликовано: 30.06.1991

Авторы: Крамаров, Матвиенко, Резник, Смирнов, Смольянинов, Сорокулова

МПК: C12N 1/20, C12N 9/14

Метки: bacillus, liснеnifоrмis-продуцент, бактерий, рестриктазы, штамм

...среде характеризуется равномерным помутнением.Физиолого-биологические признаки - грамположительные аэробные спорообразующие палочки. Продуцируют каталазу. Культура ферментирует глюкозу, арабинозу, маннит с образованием кислоты, ксилозу не использует, Утилизирует цитрат и пропионат, гидролизует крахмал, редуцирует нит1659479 Составитель И, ПриваловаРедактор Л, Герасимова Техред М.Моргентал Корректор Т.Колб. Заказ 1821 Тираж 378 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул,Гагарина, 101 раты, в аэробных условиях из нитратов образует газ, дает положительную реакциюФогес-Проскацэра. Растет в анаэробных...

Номер патента: 1659480

Опубликовано: 30.06.1991

Авторы: Андреева, Афиногенова, Зернов, Лебедев, Пустошилова

МПК: C12N 1/20, C12N 9/14

Метки: бактерий, кlевsiеllа, рnеuмоniае-продуцент, рестриктазы, штамм

...жидкости,Выходрестриктазы Крп 3781:40000 ед,акт/г биомассы,П р и м е р, Культивирование штамма иполучение биомассы,Клетки КеЬзеа рпеипопае 378 размораживают при 37 С и высевают в жид 5 кую питательную среду, содержащуюпептон (10 г), экстракт (5 г), йаС (5 г) идистиллированную воду до 1 л. Глюкозу добавляют перед засевом до 1 , После 24 чинкубирования в термостате при 30 С10 штамм высевают на плотную среду с РПАдля получения отдельных колоний, Выращивают при тех же условиях. Выросшие клеткипереносят петлей с агара в колбы с 50 млжидкой питательной среды для получения15 инокулята, Инкубируют на качалке (200 -220 об/мин) 24 ч при 30 С.Полученным инокулятом засевают объем среды (качалочные колбы по 250 мл среды), предназначенный...

Номер патента: 1661212

Опубликовано: 07.07.1991

Авторы: Верхозина, Виноградова, Дегтярев, Дедков, Репин, Речкунова

МПК: C12N 1/20, C12N 9/14

Метки: асinетовастеr, аса, бактерий, продуцент, рестриктазы, саlсоасетiсus, штамм

...6 С вДН К% (по плавучей плотности).Культуральные признаки. 10Дает рост на МПА, при температурномдиапазоне от 5 до 30 С. Оптимальнаятемпература 25 С. Оптимальный рН 7. Растет при 0,5 - 30 йаС. Оптимальная для роста О,б 1 чаС 1. Требователен к аэрации. 15Хранение осуществляют под вазелиновыммаслом в 30%-ном глицерине при 70 С.П р и м е р 1. Получение биомассы ивыделение рестриктазы,Ночную культуру штамма 20А.са 1 соасебсоз засевают в свежую питательную среду, состоящую из 10 г/л триптона ("ОИсо"); 5 г/л дрожжевого экстракта1,"Зегча"); 6 г/л йаС 1; остальное вода. Культивируют при 25 С в термостатированной 25качалке в двухлитровых колбах с 200 млпитательной среды при 200 об/мин до достижения логарифмической фазы роста,Клетки осаждают...

Номер патента: 1661213

Опубликовано: 07.07.1991

Авторы: Верхозина, Виноградова, Дегтярев, Дедков, Репин, Речкунова

МПК: C12N 1/20, C12N 9/14

Метки: flаvовастеriuм, аquатilе, бактерий, продуцент, рестриктазы, штамм

...нить. ОбнаруживаЬтся рост при 15 - 30 С, Оптимальной дляЬоста является 25-30 С. Наблюдается ростпри концентрациях КаС 0 - 1,5 О/ оптимальные значения 0-0,7 О. Оптимальными являются нейтральные значения рН. При рН 5 и9 роста не обнаруживается.Дает активный рост на бульоне Хоттинегра. Требователен к аэрации.Хранение штамма осуществляют подваэелиновым маслом в ЗОО-ном глицеринепри -70 С,Штамм Е,ароайе Всодержит уникальную рестриктазу с ранее неизвестнойспецифичностьо5 -ССС 6 С 3 -666 С 6-5Изобретение иллюстрируется следующими примерами,П р и м е р, Получение биомассы и выделение фермента,Ночную культура Е,/азиате засевают всвежую питательную среду МПБ. Культивируют при 25 С с аэрацией два объема вминуту при 2000 об/мин мешалки до...

Номер патента: 1678832

Опубликовано: 23.09.1991

Авторы: Аникейчева, Калугин, Коваленко, Самко, Соколов, Фицнер, Фодор, Хорошутина, Эльдаров

МПК: C12N 1/20, C12N 9/14

Метки: lастовасillus, бактерий, продуцент, рlаnтаruм, рестриктазы, штамм

...и сеооводород - не образует.)Келатина уколом - разжижения нет,4 увствитель ность к антибиотикам,Культура чувствительна ко многим антибиотикам: пенициллину, стрептомицину, канамицину, тетрациклину, хлорамфениколу,эритромицину, олеандомицину, неомицину,карбенициллину, линкомицину, гентамицину, метициклину, оксациллину, нистатину,ампициллину; резистентна к полимиксину.Оптимальные условия выращивания ихранения, Культура хорошо растет на МПБ,бульоне Хоттингера, средеВ и среде ч. 7,без аэрации, при 30-37 С.Наибольший выход биомассы, содержащей рестриктазург 1, получают при выращивании на питательной среде, котораясодержит в 1 л, г; дрожжевой экстракт 5;пептон 10; глюкоза 5; йа 2 НРОп 12 Н 20 2,2;МаС з; М 980 0,5; СаС 20,25.Существенным...

Номер патента: 1678833

Опубликовано: 23.09.1991

Авторы: Аникейчева, Калугин, Самко, Соколов, Фицнер, Фодор, Хорошутина, Эльдаров

МПК: C12N 1/20, C12N 9/14

Метки: alvei, bacillus, бактерий, продуцент, рестриктазы, штамм

...в течение 4 - 5 ч додостижения конца логарифмической фазыроста, 40На среде "рыбный экстракт" культурарастет медленно, а активность рестриктазыв биомассе значительно ниже, чем при культивировании на средах Хоттингера иВ.Оптимальная температура роста 37 ОС, 45но растет и при 40-45 С,Рабочие культуры пересевают иа бульон Хоттиигера один раз в 7 - 10 дн, Храняткультуру в полужидком агаре под вазелиновым маслом или в лиофилизированном состоянии в ампулах,Культура непатогенна для мышей.Существенным фактором культивирования является аэрация, В анаэробных условиях выход рестриктазы Вачснижается, 55Инкубационная смесь для определенияактивности рестриктазы Вач 6751 обьемом25 - 50 мкм содержит 0,01 М трис-НС 1, рН7,5, 0,01 МсС 2, 0,001 М...

Номер патента: 1686000

Опубликовано: 23.10.1991

Авторы: Дегтярев, Пучкова, Речкунова, Серов, Терещенко

МПК: C12N 1/20, C12N 9/14

Метки: bacillus, sтеаrотнеrморнilus, бактерий, продуцент, рестриктазы, штамм

...Выход фермента Взз Т не менее 10000 ед, акт,/г влажной биомассы.Полученная рестриктаза Взз Т характеризуется следующими свойствами; узнает и специфически расщепляет последовательность нуклеотидов СС(А/Т)(А/Т)86, оптимальное значение рН для действия рестриктазы 7,5 - 8,0, оптимальная температура действия 50-55 С, оптимальная концентрация МаС 50 мМ.Определяющие отличия предлагаемого штамма В. зееагойегаорЫцз (360) В: высокое содержание рестриктазы Взз Т 1, составляющей 10000 ед.акт./г влажной биомассы (в 5 раз выше), отсутствие патогенности штамма, использование для культивирования микроорганизмов простой дешевой среды.П р и м е р 1. Получение биомассы.Клетки В. з 1 еагойепворЫЬз (360), хранящиеся под слоем вазелинового масла при 40 С,...

Номер патента: 1687614

Опубликовано: 30.10.1991

Авторы: Богданова, Дегтярев, Каравайко, Приходько, Речкунова, Цаплина

МПК: C12N 1/20, C12N 9/14

Метки: ruвеr-продуцент, бактерий, рестриктазы, тнеrмus, штамм

...молоко, разбавленное в 5 раэ, свертывают и пептонизируют, гидролизуют желатин в концентрации 10 и 50%, сероводород, индол и ацетоин не образуют, серу и тиосульфат не окисляют, Бактерии чувствительны к ИаС в среде (1% йаС в среде ингибирует рост бактерий), образуют каталаэу, антибиотики не образуют. Культура способна растворять клеточные стенки грамположительных и грамотрицательных бактерий. Минимальная температура роста на агариэованной картофельной среде 40 С, оптимальная 60 С, максимальная 70 С.Культуру хранят в лиофильно высушенном состоянии,Для культивирования Т,гцЬег 9 применяют питательную среду следующего состава, %:Картофельный отвар 20Пептон 0,5Дрожжевой экстракт 0,02рН 7,8 - 8,2, Культивирование проводят при 60 С в течение...