Суджювене
Способ получения днк-полимеразы 1 еsснеriснiа coli
Номер патента: 1622393
Опубликовано: 23.01.1991
Авторы: Баронайте, Вайткявичене, Гаврюченкова, Громова, Марцишаускас, Песлякас, Суджювене
МПК: C12N 9/14
Метки: днк-полимеразы, еsснеriснiа
...баню и перемеаиваютстеклянной палочкой до получениягомогенной суспенэии, Суспеиэии кле"ток обрабатывают экструзиоииьи деэинтеграторои. Обломки клеток осаждают центрифугироваиием при 10000 В 2393 Ьв течение 1 ч. Выпавщий осдлок отбрасывают, центрифугят (560 мл) используют для выделения Фермента.б) фракционнрование ферментногоэкстракта полимином 11 и сульфатомаммония. К центрифугату (1560 ил),полученному нд предьдущей стадии,при постояннои перемещивянии в течение 30 мин добавляют 203-ный растворполимина 11 (48 ил) ло конечной концентрации 0,6 г После добавления всего объема полимина 11 переиещиваниепродолжают еще 30 мин, Экстракт цент Рифугируют в течение 10 иин при5000 е. Супернатант сливают, я полученный осадок суспенлируют в 780...
Способ получения щелочной фосфатазы
Номер патента: 1576563
Опубликовано: 07.07.1990
Авторы: Дайлиденайте, Лакачаускене, Марцишаускас, Песлякас, Суджювене
МПК: C12N 9/14
...буфером.При этом фосфатаза не сорбируется и выходит острым пиком, а нуклеазные примеси сорбируются и могут быть элюированы при повышении ионной силы до 1 М КС 1. Фракции щелочной фосАатазы объединяют и концентрируют. Концентрирование конечного препа-. рата.Объединенные Фракции диализуют против 1 л 0,01 М трис-НС 1 буфера рН 7,5, содержащего 0,001 М МРС 1 , 005 М ИаС 1 и 50% глицерина (по обьему). Диализ продолжают в течение 12 ч, Препарат помещают в предварительно охо лажденную емкость и хранят при -20 С, Выход щелочной АосАатазы Е, со 11 составляет ЗЗЕ с удельной активностью 30 ед/мг белка. Ферментный препарат не содержит нуклеазных примесей и пригоден для использования в генноинженерных экспериментах и молекулярной биологии....
Способ получения большого фрагмента днк-полимеразы i еsснеriснiа coli фрагмента кленова
Номер патента: 1541256
Опубликовано: 07.02.1990
Авторы: Баронайте, Вайткявичене, Марцишаускас, Пасечник, Песлякас, Суджювене, Федорова
МПК: C12N 15/00, C12N 9/00
Метки: большого, днк-полимеразы, еsснеriснiа, кленова, фрагмента
...ферментного экстракта полимином Р и сульфатом аммония. К центрифугату (215 мл), полу5 15412 ченному на предыдущей стадии, при постоянном перемешивании в течение 30 мин добавляют 107.-ный (13,7 мл) раствор полимина Р до конечной концентрации 0,67, После добавления 5 всего объема полимина перемешивание продолжают еще 30 мин. Экстракт центрифугируют в течение 15 минпри 4000 Полученный осадок используют для получения фрагмента Кленова. Фермент экстрагируют из осадка 100 мл 0,1 М калий-фосфатным буфером рН 7,0, содержащим 0,001 М /ь-меркаптоэтанол, 0,002 М ЭДТА, 0,1 М ЯаС 1. Процедуру повторяют еще раз. Супернатанты объединяют, Экстракт центрифугируют в течение 15 мин при 4000 я. К супернатанту (230 мп), медленно перемеши вая,...
Способ получения l-лизин -оксидазы
Номер патента: 1454846
Опубликовано: 30.01.1989
Авторы: Березов, Веса, Лаугалене, Песлякас, Пуоджюте, Суджювене, Тиминскене, Хадуев, Янкевич
...400 мл дистиллированной воды, 500 мл 0,1 М ЭДТА,300 мл воды, 500 мл 0,1 М карбонатом натрия и 400 мл воды,Получение бесклеточной культуральМ.ной жидкости, содержащей Ь"лизин- --оксидазу.Продуцент лизиноксидазы Тгхс 1 поЙегша Ьаггапцш ЫЕа культивируютглубинным способол на питательнойсреде следующего состава г/л: 50пшеничных отрубей и 50 НН 4 Ю, при28 С на качалке в течение 6 сут.оКлетки микроорганизмов и твсрдыеосадки отделяют центрифугированиемпри 3000 об/мин в течение 0,5 ч.В центрифугате определяют удельную1.-лизин-( -оксидазную активность,которая составляет 107 Е/мг белка(1170 мл).Осахдение примесей аммоний сульфатом,В бесклеточную культуральную жидкость в объеме 1170 мл (рН 7,1) судельной активностью 1,28 Е/мг белкапри перемешивании...
Способ получения альбумина
Номер патента: 1113125
Опубликовано: 15.09.1984
Авторы: Глемжа, Кадушявичюс, Котова, Ляхова, Мигунов, Песлякас, Позина, Суджювене
МПК: A61K 35/14
Метки: альбумина
...а именно к способам получения альбумина из сыворотки плацентарной крови и может быть использовано в вакцинно-сывороточном производстве.Известен способ получения алъбумина путем фракционирорания сыворотки плацентарной крови этиловым спиртом при отрицательных температурах 110Недостатком этого способа получения альбумина является значительное содержание в препарате гонадотропного гормона - хорионического гонадотропина. 15Цель изобретения - повышение степени очистки целевого продукта от хорионического гонадотропина.Указанная цель достигается тем, что согласно способу получения аль бумина из плацентарной сыворотки путем многократной обработки этанолом на холоду и центрифугирования, центрифугат после второго осаждения этанолом обрабатывают...
Способ получения сорбента для очистки белков
Номер патента: 1061828
Опубликовано: 23.12.1983
Авторы: Кадушявичюс, Песлякас, Суджювене
МПК: B01D 15/08
...водой и высушивают. Количество присоединенного декстрана состав-.ляет 92,1 мг/г носителя.Присоединение активного красителя красно-коричневого 2 КТ к декстраном модифицированноглу силохрому 40СХ,5.К 20,0 г силохрома СХ,5, модифицированного декстраном 80000,прибавляют 50 мл воды, температурусмеси поднимают до 60 С и при перемешивании прибавляют раствор 1,65 гкрасителя, например, красно-коричневого 2 КТ в 140 мл воды, Перемешивание продолжают в течение 0,5 ч,после чего прибавляют 20,8 г хлористого натрия и реакционную смесь перемешивают при 60 С в течение 1 ч.Температуру смеси поднимают до 80 оС,прибавляют 1,8 г натрия углекислогои перемешивают при 80 С в течение 552,5-3 ч. Продукт реакции отфильтровывают и промывают водой до прекг 1...
Способ получения сорбента для очистки белков
Номер патента: 1060217
Опубликовано: 15.12.1983
Авторы: Башкевичюте, Глемжа, Гумаускайте, Кадушявичюс, Песлякас, Суджювене, Флаксайте
МПК: B01J 20/22
...используют аминопропилсилохроммы Сили СХ,5, модифицированные глутаровым альдегидом или водорастворимыми полисахаридами.Использование в качестве лигандов ароматических азосоединений,которые содержат в своей структуре реакционноспособные винилсульфоновые группировки, позволяет получать сорбенты с высокой устойчивостью к кислым значениям рН за счет образования связи между винилсульфоновой группировкой и носителем. Наличие иона меди с одной стороны повышает устойчивость связи лиганд-носитель, с другой стороны ион меди является дополнительным центром селективности по отношению белков или ферментов, что в свою очередь расширяет области использования сорбентов, включая Ферменты класса оксндо-редуктаз, трансфераз, обмена нуклеиновых кислот и...
Способ получения сорбента
Номер патента: 979354
Опубликовано: 07.12.1982
Авторы: Гумаускайте, Кюдулас, Лауцюс, Песлякас, Суджювене, Флаксайте
МПК: C07F 7/18
Метки: сорбента
...вымыго 0,2-0,3 БаВН 4,в течение 2 ч водой. вают балластные белки; Активная гекК влажному модифицированному стеклу сокиназа десорбируется линейным граприбавляют 10 мл воды и при пере- диентом хлористого натрия от 0 мешивании при 60 С вводят по каплям 35 1,0 М в исходном буФере, Удельная акраствор 660, 1 мг (613,9 мкМ) ци-тивность гексокинаэы после десорбциибакРон голУбого Рз СА, Далее Реакцию 82,0 ед/мг белка, выход по активноспроводят по примеру 1, но количество ти 100. Емкость сорбента 225 ед/мл.прибавляемых БаС 6 и НаСОЗсоотве П р н м е р Зб. В хроматографивенно 5,5 г и 493 мг. о ц р цческую колонку (как в примере 3) эаон гол бого 25 мкМ/г сухогогружают 1,0 мл сорбента, полученного сорбента.по примеру 1 при использовании 50 п е...
Способ очистки дрожжевой гексокиназы
Номер патента: 874754
Опубликовано: 23.10.1981
Авторы: Веса, Глемжа, Песлякас, Суджювене, Травкина
МПК: C12N 9/00
Метки: гексокиназы, дрожжевой
...Паневежеского опытного спиртового завода, базовый препарат дрожжевой.гексокиназы удельной активностью 30-40 ед/мг фирмы "Флука" ( Швейцария), Сг 2(С 04)36 Н 10, янтарную, уксусную и борную кислоты, натрий уксуснокислый, натрий тетраборнокислый и натрий хлористый,П р и м е р 1, Получение сорбента. В круглодонную колбу, снабженную механической мешалкой, вводят5, 0 г сульфата хрома (1 Н ) С г 1 ( 5 04 )ххбн 10 800 мл 0,1 М ацетатного буферного раствора рН 5,6 и 10,0 гфосфатцеллюлозы(ОЗХР). Содержимоеколбы перемешивают в течение 20-24 ч.По окончании реакции сорбент отфильтронынают, промывают водой, 0,1 Мраствором янтарной кислоты для удаления избыточного хрома (И),Концентрацию ионов хрома 00) в сорбенте определяют из разницы его...
Способ получения сорбента для очистки дрожжевой гексокиназы
Номер патента: 857145
Опубликовано: 23.08.1981
Авторы: Веса, Глемжа, Песлякас, Суджювене, Травкина
МПК: C08B 37/00
Метки: гексокиназы, дрожжевой, сорбента
...до полного отсутствия сорбции на незаряженной ионами с+ ФосФатделлюлОзеС ДРУГОЙ стОРоныр пРи дальнейшем увеличении концентрации ионов хрома выше 800 мкИ/г сорбентапроисхоцит необратимая сорбция Фермента. П р и и е р 2. Очистка дрожжевойГЕКСОКИНаЭЫда) 2,0 г комплекса Фосфатцелллюлозы с ионами хрома (111) загружают в хроматографическую колонку (1 х 20 см) уравновешивают 5 МИ сукцинатиым буФерным раствором рН 6,0, содержащим 05 мИ ЭДТЛ и наносят 4,0 им Фермент- ного раствора дрожжевбй гексокиназы фирмы "Флука" (Швейцария). Концентрация белка 145 мг/мл, удельная активность 28,0 ед/мг белка. При злюции 330 мл исходного буФерного раствора рН 6,0 вымываются балластные белки.Элюирование активной гексокиназы про Водят градиентом...