C12N — Микроорганизмы или ферменты; их композиции

Страница 93

Защитная среда для лиофильного высушивания облигатно анаэробных и микроаэрофильных микроорганизмов

Загрузка...

Номер патента: 1652336

Опубликовано: 30.05.1991

Авторы: Тюрин, Шендеров

МПК: C12N 1/04, C12N 1/20

Метки: анаэробных, высушивания, защитная, лиофильного, микроаэрофильных, микроорганизмов, облигатно, среда

...среды для определения количества живых клеток до лиофилизации. Остальное количество суспензии распределяют по 100 - 300 мкл в стеклянные ампулы, взвешивают для определения среднего веса ампул для каждой культуры и замораживают ампулы в смеси этанол - твердая углекислота в течение 20 мин, Замороженные пробы помещают под вакуум 0,01 - 0,005 атм при минус 20 С и ниже на 16 ч. Высушенные ампулы взвешивают вновь, определяя остаточную влажность как разность между средним весом ампул до лиофилизации и после нее. Ампулы запаивают под вакуумом и хранят при 0-4 С. Остаточная влажность проб не превышает 0,5-3,0 , Результаты представлены в табл.1.П р и м е р 2. Берут белок молока 18 г, для чего 3,0 г сухого порошкового молока разводят в 500...

Способ повышения нефтеотдачи во вторичной добыче нефти

Загрузка...

Номер патента: 1652337

Опубликовано: 30.05.1991

Авторы: Абдуллаев, Двейрин, Исмаилов, Мамедов, Мамедяров, Рзаева, Таирян, Фридман, Шейдаев

МПК: C12N 1/26, E21B 43/22

Метки: вторичной, добыче, нефтеотдачи, нефти, повышения

...и результаты изучения влияния СМП на нефтеиэвлечение,В качестве биоценоза гаэообразующих микроорганизмов используют микроорганизмы, выделенные из пластовых вод Апшерона следующих родов: Созтгбца .астоЬасцз, ОезцочЬго, МетЬапоЬастегцгв, Мейапососсцз, Мейапозагспа, ВасЬз,Микрооэоганизмы вносят в колонки в количестве 10 -10 кл/мл. В качестве субстрата используют сточные воды. Все опыты проводят в трехкратной повторности.Наибольший прирост микроорганизмов наблюдается при концентрации сточных вод 5-15 от объема воды в модели, что согласуется с опытом микробиологической практики, где для культивирования микроорганизмов добавки органических субстратов составляют 1-15 от объема сред.Результаты, представленные в табл,5, показывают что...

Штамм культивируемых клеток почки эмбриона коровы для культивирования вируса лейкоза крупного рогатого скота

Загрузка...

Номер патента: 1652338

Опубликовано: 30.05.1991

Авторы: Адомайтене, Немейкайте, Рачкус, Садаускас

МПК: C12N 5/00, C12N 7/00

Метки: вируса, клеток, коровы, крупного, культивирования, культивируемых, лейкоза, почки, рогатого, скота, штамм, эмбриона

...после 2515 пассажей при определении ревертазной активности вирусной фракции культуральнойжидкости 7-суточной культуры М 18 по методу Ложа и др. обнаружена высокая вируспродуирующая активность, достигающая20 10 -10 вирусных частиц в 1 мл.Вирус лейкоза КРС и его антигены, выделенные клетками М 18 в культуральнуюжидкость, выявляются также с помощьюРИД в агаровом геле в варианте для опре 25 деления титра антигена,Наличие зкстрацеллюлярного вирусалейкоза КРС и его антигенов в культуральной жидкости клеток М 18 регистрируюттакже при помощи иммуноферментного30 анализа (ИФА), После осветления культуральной жидкости (5000 об/мин, 30 мин)вирус лейкоза КРС осаждают в 20-номградиенте плоскости сахарозы ультрацентрифугированием, лиэируют,...

Штамм гибридных культивируемых клеток животных mus мusсulus l продуцент моноклональных антител к мембранному антигену мyсорlаsма arginini

Загрузка...

Номер патента: 1652339

Опубликовано: 30.05.1991

Авторы: Дьяконов, Куликова, Федоров, Феоктистова

МПК: C12N 5/18, C12P 21/08

Метки: arginini, антигену, антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, мyсорlаsма, мембранному, моноклональных, продуцент, штамм

...в 96, 24, 12-луночных плашках, а затем в чашках Петри.Культуральную жидкость исследуют на содержание специфических антител. Титр1652339 Составитель А,МаныкинРедактор М.Петрова Техред М.Моргентал Корректор М.Пожо Заказ 1747 Тираж 380 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 специфических антител в иммуноферментном тесте составляет 1:128-1;256.Препараты моноклональных антителполучают 3-кратным осаждением раствором сульфата аммония 50;-ного насыщения с последующим диализом. Определяютклассовую принадлежность и специфичность моноклональных антител.Штамм клеток обладает следующими,...

Штамм гибридных культивируемых клеток животных mus мusсulus l продуцент моноклональных антител к м белку вируса гриппа типа а

Загрузка...

Номер патента: 1652340

Опубликовано: 30.05.1991

Авторы: Криворутченко, Кривошеин, Попов, Червонский

МПК: A61K 39/395, C12N 5/18, C12P 21/08 ...

Метки: антител, белку, вируса, гибридных, гриппа, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, типа, штамм

...и посевах на питательной среде. Заражениямикоплазмой не выявлено по окрашиваниюкрасителями на ДНК и тимидиновой метке вкультуральной среде,Криоконсервирование.Клетки штамма ресуспендируют в культуральной бычьей сйворотке, содержащей10 длиметилсульфоксида (концентрацияклеток 5 х 10 - 10 в 1 мл), разливают в пла 5 6стиковые ампулы при 4 С, помещают в толстостенную коробку иэ полипеноуретана ипереносят на 24 ч в холодильник (70 С), Затем клетки хранят в жидком азоте. Возможно программное замораживание соснижением температуры на 1 С в 1 миндо - 40 С с последующим переносом в жидкий азот. Размораживание осуществляют втечение 3 мин при 37 С, Клетки разводят в10 мл среды для культивирования, осаждают центрифугированием, ресуспендируют в5...

Штамм бактерий рsеudомоnаs sтuтzеri продуцент рестриктазы psu i

Загрузка...

Номер патента: 1652341

Опубликовано: 30.05.1991

Авторы: Бойков, Виестуре, Дегтярев, Репин

МПК: C12N 9/14

Метки: sтuтzеri, бактерий, продуцент, рsеudомоnаs, рестриктазы, штамм

...растет на жидкой питательной среде, содержащей 50 г/л рыбного гидролиэата и до 1,0 л воды, рН 7,2-7,4. Нв такой питательной среде штамм растет при температуре 25-27 ОС, аэрации 2 обьемв воздуха на 1 обьем питательной среды в течение 5 - 6 ч. При выращивании штамма на питательной среде данного состава происходит помутнение среды, что свидетельствует о сильном росте культуры. Рост глубинный и пленки на поверхности не образуется, Осадок, состоящий из клеток Рзецбоеопаз з 1 ц 1 аег 131, тягучий, при воздействии нв него лиэоцимом быстро происходит лиэис клеток, Количество осадка обильное, цвет осадка светло-серый.Штамм фагоустойчив, Не лиэируется в присутствии фагов СЬ 4 А,А, МЗ 2, 0 Р.Штамм чувствителен к ампициллину в концентрации...

Способ получения пепсина рыб

Загрузка...

Номер патента: 1652342

Опубликовано: 30.05.1991

Авторы: Сахаров, Сухова

МПК: C12N 9/50

Метки: пепсина, рыб

...активности целевого продукта и его выхода.Время инкубации пепсина при кислых рН выбрано на основании того факта, что при инкубации меньше 15 мин удельная активность пепсина невысока. Вместе с теминкубация в течение более 300 мин (по-видимому, за счет инактивации) понижает величину активности целевого продукта.П р и м е р 1. 175 г внутренних органов мойвы гомогенизируют в 500 мл 5 мМ ацетатного буфера, рН 5, Гомогенат инкубируют в течение 20 ч при комнатной температуре, а затем центрифугируют в те, чение 30 мин при 19000 9, 4 С, Для активации пепсиногена рН гомогената доводят до 2 с помощью 2 н. НС и инкубируют 30 мин при комнатной температуре. Для окончания реакции активации рН поднимают до 4,4 с помощью 4 М раствора ацетата натрия,...

Способ обнаружения неклассического вируса

Загрузка...

Номер патента: 1654333

Опубликовано: 07.06.1991

Авторы: Игнатьев, Квачева, Полещук, Рытик

МПК: A61K 39/12, C12N 7/00, G01N 33/48 ...

Метки: вируса, неклассического, обнаружения

...материал (нервнаяткань людей, животных, культура клеток и т.п.) гомогенизируют, добавляютфизраствор, центрифугируют при60)О об/мин 15 мин и удаляют осадок.Надосадок обрабатывают в водянойбане при 1 О С в течение 15 мин.В 45 плоскодонных лунок пластиковой панели вносят взвесь астроцитонв объеме 0,1 кп ростовой среды, содержащей 2 1) клеток и инкубируют. Ьв термостатах при +3/ С с 5 Х содержанием СГ,Через 2 ч в первые 15 лунок вносятпо ),05 мл обработанного вируссодержащего материала и сразу же в нихдобавляют по О, мл Кон-А в дозе20-25 мкг/мл . Во вторые 15 лунок(контроль митогена) вносят ло ),05 млсреды культивирования и О, 1 мл Кон-Ав дозе 20-25 мкг/мл. В оставшиеся15 лунок (контроль опыта) вносяттолько по ,05 мл среды...

Фаг ро29, лизирующий бактерии рrотеus мirавilis и рrотеus vulgaris

Загрузка...

Номер патента: 1654334

Опубликовано: 07.06.1991

Авторы: Баларджишвили, Гачечиладзе, Дзулиашвили, Чанишвили, Чолокашвили

МПК: C12N 7/00

Метки: vulgaris, бактерии, лизирующий, мirавilis, рrотеus, ро29, фаг

...Фрейнда), а затем через1 мес вводят внутривенно 2 мл фага110 ц БОЕ/мп, а на 10-й день послепоследней инъекции кроликов обескров 5лнвают и иэ крови получают сыворотку.Кинетику скорости нейтрализации определяют по методу М.Адамса, равна К=1400 1/мин.Морфологические признаки. Посредством электронного микроскопа устанавливают морфологию и размеры фаговых частиц. Вактериофаг Р 029 имеет гексогональную головку и сократимый отросток.На конце отростка отмечается наличиенекоторого утолщения. Размеры фаговойголовки 78 нм х 78 нм. Отростка340 нм х 22 нм, отростка в сокращенном виде 140 нм х 26 нм, свободногостержня 178 нм х 13 нм, шейки 17 нм.Фаг Р 029 обладает широким спектромлитического действия на бактерииРгоеоз ш 1 гаЬ 111 в и Ргосецз чи 18...

Способ выделения ферментных препаратов аминоацилазы, амилазы и протеаз из aspergillus oryzae

Загрузка...

Номер патента: 1654335

Опубликовано: 07.06.1991

Авторы: Амирханян, Еланян, Миневич, Степанов, Степанян, Субботин

МПК: C12N 9/00

Метки: oryzae, амилазы, аминоацилазы, аспергиллус, выделения, препаратов, протеаз, ферментных

...в течение16 ч. Выпавший осадок отделяют центрифугированием при 3000 об/мин, растворяют в минимальном объеме воды и переносят в целлофановую пленку (сосисочную) и осуществляют диализ противхолодной воды до полного удалениясульфат-иона. Отсутствие сульфат-ионапроверяют 20% хлористого бария. Содержимое диалиэиого мешка сушат лиофил ьноПротеолитическая активность Ферментного препарата 29,0 ед/г. Выходпо активности 23,0%.Супернатант переносят в аппарати в описанных условиях добавляютсульфат аммония до получения 60% насьпцения последнего.Отключают мешалку и оставляют при2-5 С в течение 16 ч.Выпавший осадок, представлякипийсобой ферментный препарат аминоацилазы, подвергают диализу и сушат лио-.фильно, как описано выше.5 165433Аминоацилазная...

Способ определения активности амилолитических ферментов

Загрузка...

Номер патента: 1654336

Опубликовано: 07.06.1991

Авторы: Абрамова, Воробьева, Пискарева, Рухлядева, Чередниченко

МПК: C12N 9/34

Метки: активности, амилолитических, ферментов

...производят по Формуле0 0439 ЬП 10 33 70 6 ДПМС д ---- , --- д- -- ед/г,л 60 342 а а 40где МС- мальтаэная (М-глюкозидазная)активность, определеннаяполяриметрическим методомна мальтоэе и выраженная в 45единицах на 1 г дрожжей;0,0439 - коэффициент, определяющийколичество мальтозы, прогидролиэованной для глюкозы исброженной дрожжами, равное 50разности между начальнойконцентрацией мальтозы ипосле Ферментативного гидролиэа, г;ДП - изменение угла поворота55плоскости поляризации, рав"ное разности поляризацийконтрольного и опытногорастворов, град; 10 - коэФФициент перевода граммов в микрограммы,33 - объем раствора, который подвергается поляриметрированию, см;60 - продолжительность действияФермента, мин;342 - молекулярная масса мальтозы,г (для...

Способ отбора регуляторных мутантов фотосинтезирующих микроводорослей и штамм водоросли снlоrеllа sp-продуцент углеводов

Загрузка...

Номер патента: 1654337

Опубликовано: 07.06.1991

Авторы: Семененко, Шитова

МПК: A01G 33/00, C12N 1/12, C12N 15/01 ...

Метки: sp-продуцент, водоросли, микроводорослей, мутантов, отбора, регуляторных, снlоrеllа, углеводов, фотосинтезирующих, штамм

...на агаризованной среде Тамийя при 27-28 С, освещенности 4 эрг/си . Хранят при 1012 С, освещенности 0,4 эрг/см .П р и и е р 1. Суспенэию клеток СЫ.оге 11 а вр. К с концентрацией 2 х х 10 кл./мл наносят на агаризованную среду Тамийя с добавлением 0,25- 0,52 дДГ, которая полностью подавляет рост исходной культуры, и равномерно распределяют по поверхности шпателем. Такой же гаэоновый засев делают на контрольной чашке, те. без2 дДГ. Появившиеся на опьггной чашке колонии рассевают на агариэованную питательную среду Тамийя с глюкозой(1 Х) и помещают в темноту в териостатпри 36 С. Колонии, растущие в этихоусловиях в течение 3-5 сут, анализируют затем на способность к накоплению продуктов фотосинтеза.В данном случае иэ 11 реэнстентньм...

Питательная среда для восстановления после криоконсервации гибридных клеток животных mus мusсulus l. продуцентов противогриппозных моноклональных антител

Загрузка...

Номер патента: 1654338

Опубликовано: 07.06.1991

Авторы: Ветласенин, Ершов, Карпухина, Милованов

МПК: C12N 5/02, C12P 21/08

Метки: антител, восстановления, гибридных, животных, клеток, криоконсервации, мusсulus, моноклональных, питательная, после, продуцентов, противогриппозных, среда

...криопротектора, 15 размороженную суспензию центрифугируют 10 мин при 1000 об/мин, осадок ресуспендируют в 1,0 мп охлажденной среды КРМ 1-1640 и проводят подсчет жизнеспособных клеток путем окраши вания 1 Х-ным трипановым синим в камере Горяева (доля живых клеток 18 Х). Затем клетки разбавляют в известной среде КРМ 1-1640 и в разработанной среде в равных количествах до конечной 25 концентрации 0,8 х 10 кл/мл и разливают в 24-луночные пластины с двухдневной культурой макрофагов из брюшной полости мыши. Культивирование проводят при 37 С в атмосфере с 5 Х СО. На 30 третий день после размораживания подсчитывают число клеток в лунках и определяют коэффициент прироста, Культивирование осуществляют до формирования монослоя, после чего...

Способ выделения уреаплазм птиц

Загрузка...

Номер патента: 1653782

Опубликовано: 07.06.1991

Авторы: Грошева, Худякова

МПК: A61K 39/00, C12N 1/00, C12Q 1/02 ...

Метки: выделения, птиц, уреаплазм

...среда содержит в своем составе фракцию плевропневмониеподобных организмов, сыворотку крови птиц, дрожжевой экстракт, мочевину, фенол-рот, дистиллированную воду. Способ позволяет выделить уреэплазм и может найти применение в диагностических лабораториях. 1 табл. рез фильтр Зейтца. Из полученного фильт- ( Г)рата делали посев на питательную среду,состоящую из следующих компонентов,.об,0: фракция ППЛО 1; сыворотка кровиптиц 10; дрожжевой экстракт 9; 25-ныйраствор мочевины 1,3; индикатор фенол-рот0,001; дистиллированная вода - остальное. дРезультаты представлены в таблице. СЬП р и м е р 3. Использовано:50 проб (Лпатологического материала от больной пти- ( )цы (почки - 25 проб, легкие - 25 проб). Готовили суспензию 1:9,5 на МПБ,...

Способ приготовления плотной питательной среды для культивирования микроорганизмов

Загрузка...

Номер патента: 1654332

Опубликовано: 07.06.1991

Авторы: Войцеховский, Гашинский, Крайнюкова, Марченко, Онищенко, Широбоков

МПК: C12N 1/20

Метки: культивирования, микроорганизмов, питательной, плотной, приготовления, среды

...с последующей отмывкой полученного геля и пропиткой его жидкой питательной средой, о т л ич а ю щ и й с я тем, что, с целью ускорения способа, для пропитки геля используют жидкую питательную среду, дополнительно содержащую 0,02- 0,2 г/л среды полиэтиленоксида. Составитель Г,СмирноваТехред Л.Олийнык Корректор М.Самборская Редактор Н.Гунько Заказ 1930 Тираж 381 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж, Раушская наб., д, 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина, 101 Пропитку дисков осуществляют трип.тическим переваром по Хоттингеру, содержащем 400 мг 7. аминного азота и 0,2 г/л полиэтиленоксида, в течение 3 ч при 56 С, Пропитанные...

Способ получения аффинного сорбента для фракционирования нуклеиновых кислот

Загрузка...

Номер патента: 1655534

Опубликовано: 15.06.1991

Авторы: Гинзбург, Глибин, Зеров, Коршунова, Мартюшин

МПК: B01D 15/08, C12N 11/10

Метки: аффинного, кислот, нуклеиновых, сорбента, фракционирования

...представлены в таблице.П р и м е р 6. Хроматография ДНК, На 10 колонку размером 10 х 30 мм, содержащую4 см аффинного сорбента, полученного в соответствии с примером 1, наносят 0,2 см раствора ДНК из молоки лосося (фирма Яцва, США) в 0,1 М натрий-фосфатном бу фере рН 7,8 (содержание нативной ДНК 7,7О,Е. или 380 мкг ДНК), Несвязавшийся материал смывают тем ке буфером (50 см ).ДНК элюируют буферным раствором, содержащим.0,5 ододецилсульфата натрия, 20 0,5 лаурилсаркозината натрия (150 см ).Собирают фракции объемом по 4 см . Измеряют УФ - поглощение каждой фракции при 260 нм. фракции, содержащее УФ-поглощающий материал, объединяют и осаждают 25 добавлением 2,5 объемом этанола на холоде, Осадок отделяют центрифугированием, растворяют...

Способ отбора волов-продуцентов противосальмонеллезной сыворотки

Загрузка...

Номер патента: 1655979

Опубликовано: 15.06.1991

Автор: Медведев

МПК: A61K 39/112, A61K 39/40, C12N 1/00 ...

Метки: волов-продуцентов, отбора, противосальмонеллезной, сыворотки

...Составитель А. ФедоровГ,Редактор Т. Лазоренко Техред М.Моргентал Корректор Т. Палий Заказ 2030 Тираж 393 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул.Гагарина, 101 активность сыворотки ИД 5 о офволов, отобранных по старому способу, составила для лабораторных животных: голубей в отношении Я.сй, зц 1 з - ИД 5 о=0,025 см, в отношении Я,бцЫи для морских свинок ИД 5 о=0,022 см . отношении Ял. вцг 1 цв -зИД 5 о=0,25 см, в отношении Я,аЬопцз оч 1 зз- ИД 5 о=0,026 смз,Превентивная активность сыворотки отобранных по предложенному способу волов составила соответственно; 0,012; 0,013;0,008; 0,010...

Способ получения биомассы микроорганизмов

Загрузка...

Номер патента: 1655980

Опубликовано: 15.06.1991

Авторы: Войнов, Марков, Николаев

МПК: C12N 1/12, C12N 1/16

Метки: биомассы, микроорганизмов

...этом углекислого газа. Для получения биомассы 1 кг хлореллы требуется 2 кг СО 2 при дыха тельном коэффициенте, равном единице.Ориентировочно для насыщения культуральной жидкости кислородом, выработанным хлореллой, необходимо, чтобы количество полученных в единицу времени кормовых дрожжей было в 2/0,6 - 2/0,8=3,3 - 2,5 больше, чем количество выработанной хлореллы. В случае, если отношение 61/623,3, кислорода, выработанного хлореллой, недостаточно для проведения процесса, что приводит к снижению производительности или требует дополнительных зл грат кислорода, что нецелесообразно. В случае, если отношение 61/622,5, снижается расход углекислого газа, выделяемого дрожжами, что приводит к снижению выхода биомассы хлореллы,Проведение дегазации...

Способ получения кормовых дрожжей

Загрузка...

Номер патента: 1655981

Опубликовано: 15.06.1991

Авторы: Баринова, Величко, Голивец, Форсов

МПК: C12N 1/16, C12N 1/22

Метки: дрожжей, кормовых

...разбавляют водой до концентрации редуцирующих веществ 1,5 и вносят морскую соль в количестве 0,2 г на 1 л, т,е. 0,02 мас,.Подготовленное таким образом сусло в количестве 1 л подают в ферментер вместимостью 3 л, задают чистую культуру СапбЫа тгорса 1 э и подают воздух из расчета на 1 литр среды в минуту и включают мешалку. Процесс выращивания ведут при температуре 37 + 1 С и рН 4, 5, рН среды поддерживают путем добавления аммиачной воды. После накопительной стадии процесс ведут непрерывно в течение 48 ч при постоянной скорости притока свежего сусла и отбора дрожжевой суспензии в количестве 250 мл/ч, Полученные дрожжи концентрируют, сушат и определяют выход, содержание общего и истинного белка, общих и незаменимых аминокислот на...

Способ деконтаминации перевиваемых культур клеток животных от микоплазм

Загрузка...

Номер патента: 1655982

Опубликовано: 15.06.1991

Авторы: Гальнбек, Дьяконов, Куликова, Лобунцова

МПК: C12N 5/00

Метки: деконтаминации, животных, клеток, культур, микоплазм, перевиваемых

...ОТ М 11 КО1655982 формула из обретения Составитель А, МаныкинТехред Л,Сердюкова Редактор Т. Лазоренко Корректор С. Иекмар Заказ 3523 тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/ВПроизводственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул, Гагарина,101 нейшем культивировании на протяжении 2 мес (20 пассажей) без препаратов клетки свободны от микоплазм (срок наблюдения).5П р и м е р 2, Перевиваемую линию клеток ПТв концентрации 80 тыс,/мп высевают в 250 мл матрасики, Клетки культивируют на среде 199 и ГЛА (0,5 -ный раствор .гидролизата лактальбумина) в равных соотношениях с 10 . сыворотки крупного рогатого скота. Б ростовую среду добавляют...

Способ культивирования респираторно-синцитиального вируса

Загрузка...

Номер патента: 1655983

Опубликовано: 15.06.1991

Авторы: Красильников, Макарьян

МПК: C12N 5/00, C12N 7/00

Метки: вируса, культивирования, респираторно-синцитиального

...15 мин при скорости вращения 60 об/мин,Полученный пул клеток вносят в клеточно-культуральную среду, титр РСВ определяют только в клеточно-культуральнойсреде.Определение титров РСВ в клеточнокультуральной среде проводят классическим методом РСК. Результаты приведеныв табл,1,П р и м е р 2, Способ проводят аналогично примеру 1, однако используют сывороткуКРС, размещая ее слоем толЩиной 1 см вемкости на расстоянии 15 см от лампы УФ 30. Время экспозиции 60 мин.Экспонированную сыворотку КРС вносят в клеточно-культуральную среду в концентрации 10-ь. Обработку триптоксидомсостава: 2,8 ч (70 мл) 0,25-ного растворатрипсина 128 ЕД 1,2 ч (30 мл) ДМСО проводят за 2 ч до инокуляции вирусом при соотношении состав-ткань 0,8:100 - 4 мл составана 500 мл...

Способ консервирования вируса инфекционного ринотрахеита

Загрузка...

Номер патента: 1655984

Опубликовано: 15.06.1991

Авторы: Петренко, Стегний, Цуцаева

МПК: C12N 7/00

Метки: вируса, инфекционного, консервирования, ринотрахеита

...ИНФЕКЦИОННОГО РИНОТРАХЕИТА. (57) Изобретение относится к биотехнологии, а именно к культивированию и долгосрочной стабилизации биологических свойств вирусов, и может быть использовано в биологической промышленности, медицине и ветеринарии. Целью изобретения является повышение сохранности вируса. Для этого замораживание осуществляют со скоростью 0,2 - 0,8 С/мин, после чего погружают в жидкий азот и замораживает до -196 С. зуют среду 199. После полнои дегенерации монослоя клеток полученную вирусосодержащую суспензию очищают от клеточно- р го детрига центрифугированием при 16000 об/мин. После этого вирусную суспензию расфасовывают в контейнеры из нержавеющей стали и с помощью программного замораживателя охлаждают от+6 до -70 С со...

Штамм 47s вируса гриппа а(нз n2) для получения живой гриппозной интраназальной вакцины для детей

Загрузка...

Номер патента: 1655985

Опубликовано: 15.06.1991

Авторы: Александрова, Бардина, Григорьева, Грунис, Гущина, Дорошенко, Климов, Лисовская, Ломанова, Медведева, Меркурьева, Руденко, Сладкова, Чудина

МПК: C12N 7/00

Метки: а(нз, вакцины, вируса, гриппа, гриппозной, детей, живой, интраназальной, штамм

...антисыворотки А/Ленинград/134/47/57 (Н 2 Я 2). Штамм депонирован в Государстенной коллекции вирусов под М 2185.Штамм 47/5 (НЗ М 2) унаследовал от донора аттенуации гены 1, 2, 5, 7, 8, кодирующие белки РВ 2, РВ 1, АР, М, МЗ соответственно и 2 гена, кодирующие поверхностные антигены (гемагглютинин и нейраминидазу) от эпидемического вируса.Температурочувствительный холодоадаптированный рекомбинант 47 й унаследовал 5 сз-мутаций в генах 1, 2, 5, 7, 8 от донора аттенуации, которые обеспечивают высокую степень ареактогенности и генетической стабильности (разность титров репродукции штамма 47/3 при 32 и 400 С -7,75 19 ЭИД 50/0,2 мл).Таким образом, представленный вакцинный штамм 47/8 характеризуется сочетанием полезных признаков...

Способ выделения эндонуклеазы рестрикции ара 1

Загрузка...

Номер патента: 1655986

Опубликовано: 15.06.1991

Авторы: Гладченко, Зернов

МПК: C12N 9/14

Метки: ара, выделения, рестрикции, эндонуклеазы

...форез). Для разделения Ара 1 рестриктов ДНК фага Л и нативной ДН К фаза Л используется пульсирующее поле с периодом 1, 2 с в прямом и 0,6 с в обратном направлениях. Реакционная смесь для гидролиза содержит 10 ММ трис-НС 1 рН 7,9; 6 мМ М 9 С 12; б мМ КС 1;10 мМ 2-меркаптоэтанол; 1 мкг ДНК фага Л и 1 мкл фермента. Реакцию проводят при 37 С 10 мин. Электрофорез проводят в 0,06 М трис-ацетатном буфере, рН 7,9, 2 мМ ЭДТА в течение 5 ч при напряжении 100 В, Окрашенные этидий-бромидом (1 мкгlмл) гели просматривают в Уф-свете.За единицу активности принимают количество фермента, которое в оптимальных условиях за 1 ч полностью расщепляет 1 мкг ДНК фага Л, 2 г биомассы АсетоЬассег раз 1 ецг 1 апцз суспендируют в 4 мл буфера экстракции,...

Способ получения очищенной нейраминидазы холерного вибриона

Загрузка...

Номер патента: 1655987

Опубликовано: 15.06.1991

Авторы: Мишанкин, Шиманюк

МПК: C12N 9/24

Метки: вибриона, нейраминидазы, очищенной, холерного

...рНа фиг.1 показан профиль элюцмента при фильтрации культуральнкости Е соП 124 через ультрагели Ас- оптическая плотность при 280 нм,раминидазная активность,П р и м е р 1. Культивированиепродуцента осуществляют глубиннсабом в колбах на 3000 мл, соде500 мл бульона Хоттингера с 0,1ватага кальция, рН 7,2 при шуттелир30 С в течение 8 - 10 ч. В питательнувносят 5 об.18- часового посевного материала Е.соН М 124, выросшего на среде этого же состава, После выращивания клетки отбрасывают центрифугированием, а культуральную жидкость диализуют против дистиллированной воды и лиофилизируют или концентрируют любым доступным способом в 7 - 10 раз,Для очистки 3 г лиофильно высушенного фильтрата Е,со М 124 растворяют в минимальномколичестве...

Штамм гибридных культивируемых клеток животных mus мusсulus l продуцент моноклональных антител к вирусу гепатита а человека

Загрузка...

Номер патента: 1657527

Опубликовано: 23.06.1991

Авторы: Балаян, Беркова, Иванов, Кожич, Кусов, Насташенко, Шамборант

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, вирусу, гепатита, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, человека, штамм

...1,6 х 10 М тимидина, 20 еМ .-глутамина, суспендируют 55клетки пинетированием и распределяют в96-луночные плейты по 50 х 10 клеток в 100мкл среды в лунки, в которые эа день догибридизации высаживают мышиные перитонеальные макрофаги (5 х 10 клеток в лунку). Клоны гибридных клеток становятся заметными через 10-12 дней. Тестирование клонов проводят, когда клоны заполняют лунку на 207 ь. Положительные культуры клонируют методом предельного разведения в 96-луночных панелях на фидерном слое перитониальных макрофагов, внося по 30. 300 и 30000 клеток на панель.Для получения асцитов самкам мышей ВаЬ/с за 10 - 14 дней до инъекции гибридных клеток внутрибрюшинно вводят по 0,5 мл пристана.При введении (2 - 4)х 10 гибридных клебток у мышей...

Питательная среда для выращивания микробактерий

Загрузка...

Номер патента: 1659472

Опубликовано: 30.06.1991

Авторы: Валихова, Головкина, Корягин, Косенко, Овдиенко, Устинова, Шкоп

МПК: C12N 1/20

Метки: выращивания, микробактерий, питательная, среда

...4,0; калий фосфорнокислый, двузамещенный 6,0; лимонная кислота 6,0; магнийсернокислый 0,6; железо сернокислое 0,08;цинк сернокислый 0,3; глицерин 53,1; лизатгалобактерий 0,015; дистиллированная вода - до 1 л, рН 7,4,Выоащивают культуры в термостатепри 37 С в течение 55 дней,Выход биомассы микобактерий возбудителя туберкулеза бычьего, человеческогои птичьего видов представлен в таблице 1 исоставляет соответственно 41,2, 40,9 и 41,6г/л АСВ. Выход бактериальных клеток кислотоустойчивых и атипичных микобактерийпредставлен соответственно в таблицах 2 и3 и составляет 40,4 и 39,5 г/л АСВ.При осуществлении выращивания попрототипу выход биомассы составляет 13г/л АСВ.П р и м е р 4. Возбудитель туберкулезабычьего вида выращивают в колбах...

Штамм бактерий bacillus suвтilis деструктор поликапроамидных волокнистых материалов на уровне макро-и микроструктуры

Загрузка...

Номер патента: 1659473

Опубликовано: 30.06.1991

Авторы: Ермилова, Пехташева

МПК: C12N 1/20, C12Q 1/18

Метки: bacillus, suвтilis, бактерий, волокнистых, деструктор, макро-и, микроструктуры, поликапроамидных, уровне, штамм

...в определенных условиях может прогрессировать.Повреждения класса В обьединяют более сильные проявления деструкции: глубокую испещренность, вэдутия, утонения, повреждения стенки. Подобные повреждения влияют не только на изменение структуры, но и на изменение свойств волокна: падает механическая прочность, увеличивается удлинение при разрыве.Для повреждений класса С характерны такие виды, как расслоение, глубокое местное повреждение стенки, распад до отдельных конгломератов. Появление таких повреждений свидетельствует о глубокой биологической деструкции структуры волокна на всех ее уровнях.Изменение показателя биодеструкции в интервале 0 К 0,3 соответствует начальным изменениям поверхности волокон; в интервале О,З К 3,55 - деструкции не...

Способ культивирования ооцитов коров

Загрузка...

Номер патента: 1659474

Опубликовано: 30.06.1991

Авторы: Гойло, Голубев, Гончарова, Завертяев, Кузьмина, Романюк

МПК: C12N 5/00

Метки: коров, культивирования, ооцитов

...время, необходимоедля протекания каждой иэ стадий мейоза.Кроме того, низкий процент дегенерированнцх ооцитов в присутствии МНСБ свиде 25 тельствует также о положительном влиянииМНСБ на культуру ооцитов, на созреваниеэтих клеток.В табл, 2 приводятся данные по резуль.татам культивировачия в присутствии30 МНСБ и без него. В примерах 7 и 8 показаныстадии созревания, процент их созревания(выход созревших ооцитов) и процент дегенерированных ооцитов (по состоянию хромосом),35 П р и м е р 7, В данном экспериментечерез 30 ч культивирования почти все ооциты (88,6 оь) достигают завершающей стадиимейоза (метафазц ) в присутствии оптимальной концентрации МНСБ, причем с40 низким уровнем дегенерации (в 2,3 раза ниже, чем в контроле: 33,9 ОД в контроле...

Способ культивирования вируса висна-мэди

Загрузка...

Номер патента: 1659475

Опубликовано: 30.06.1991

Авторы: Гладышева, Молявкин, Поздеева, Сисягин, Сочнев

МПК: C12N 5/00, C12N 7/00

Метки: вируса, висна-мэди, культивирования

...монослоя половину жидкости сливают, матрасы помещают в термостат на 5 - 10 мин при 37 С. После отделения клеток от стекла во флаконы вносят питательную среду с добавлением 10-15 сыворотки крупного рогатого скота и антибиотиков, Сыворотку предварительно инактивируют при 56 С в течение 30 мин, Полученную суспензию клеток пересевают бесцентрифужным способом с коэффициентом пересева 1:1,5 - 1:2.При субкультивировании используют концентрацию клеток 200 - 250 тыс,/мл. Монослой формируется через 3 - 5 сут.Первично трипсинизированные клетки тестикулов ягнят не обнаруживают резких различий по структу;.е монослоя и представ- лень. клетками зпителио- и фибробластоподобнэго типа, На окрашенных препаратах эпителиоподобные клетки имеют...