Патенты с меткой «кленова»
Рекомбинантная плазмидная днк рсек 10, кодирующая синтез фрагмента кленова днк-полимеразы 1 е. coli, и способ ее конструирования
Номер патента: 1392094
Опубликовано: 30.04.1988
Авторы: Дегтярев, Кравченко, Кузнеделов, Нетесова, Петренко, Ривкин
МПК: C12N 15/00
Метки: coli, днк, днк-полимеразы, кленова, кодирующая, конструирования, плазмидная, рекомбинантная, рсек, синтез, фрагмента
...фрагменты ДНК электрофорезом в 47.-ном полиакриламидном геле. Гель окрашивают в растворе бромистого этидия 2 мкг/мл, вырезают из геля зону, содержащую векторную часть ДНК плазмиды рСЕЕ 12, и выделяют ДНК из геля методом электроэлюции. 10 мкг плазмидной ДНК рС 155 гидролизуют 20 ед. рестрикционной эндонуклеазы ВашН 1 в 100 мкл буфера для гидролиза, содержащего 20 мМ трис-НС 1 рН 7,8, 10 мМ МяС 1, 50 мМ МаС 1, 2 мМ 2-меркаптоэтанола, при 37 С 1 ч. В полученную реакционную смесь добавляют 25 ЙАТР, ВСТР, ЙСТР и ТТР, до 0,05 мМ каждого, 10 ед. ДНК-полимеразы 1 и инкубируют 30 мин при 12 С. Реакцию останавливают добавлением Иа ЭДТА до концентрации 20 мМ, белок удаляют экстракцией водным фенолом, рН 8,0 и ДНК трижды переосаждают...
Способ получения большого фрагмента днк-полимеразы i еsснеriснiа coli фрагмента кленова
Номер патента: 1541256
Опубликовано: 07.02.1990
Авторы: Баронайте, Вайткявичене, Марцишаускас, Пасечник, Песлякас, Суджювене, Федорова
МПК: C12N 15/00, C12N 9/00
Метки: большого, днк-полимеразы, еsснеriснiа, кленова, фрагмента
...ферментного экстракта полимином Р и сульфатом аммония. К центрифугату (215 мл), полу5 15412 ченному на предыдущей стадии, при постоянном перемешивании в течение 30 мин добавляют 107.-ный (13,7 мл) раствор полимина Р до конечной концентрации 0,67, После добавления 5 всего объема полимина перемешивание продолжают еще 30 мин. Экстракт центрифугируют в течение 15 минпри 4000 Полученный осадок используют для получения фрагмента Кленова. Фермент экстрагируют из осадка 100 мл 0,1 М калий-фосфатным буфером рН 7,0, содержащим 0,001 М /ь-меркаптоэтанол, 0,002 М ЭДТА, 0,1 М ЯаС 1. Процедуру повторяют еще раз. Супернатанты объединяют, Экстракт центрифугируют в течение 15 мин при 4000 я. К супернатанту (230 мп), медленно перемеши вая,...
Штамм бактерий escherichia coli-продуцент фрагмента кленова
Номер патента: 1602055
Опубликовано: 30.10.1994
Авторы: Дегтярев, Загребельный, Кравченко, Петренко, Ривкин, Хомов
МПК: C12N 1/21
Метки: coli-продуцент, escherichia, бактерий, кленова, фрагмента, штамм
Штамм бактерий Escherichia coli ВКПМ В-3825 - продуцент фрагмента Кленова.