Аавиксаар
Способ определения антикоагулянта протеина с в плазме крови животных
Номер патента: 1659486
Опубликовано: 30.06.1991
Авторы: Аавиксаар, Коган, Струкова, Тара
МПК: C12Q 1/37
Метки: антикоагулянта, животных, крови, плазме, протеина
...0,07 мл 0,2 М раствора цитрата натрия, добавляют 20 мкл (150 мкг/мл) активатора из яда щитомордника АцЮз 1 гобоп Ьауз и инкубируют 10 мин при 37 С. К смеси добавляют 1,2 мл физиологического раствора, затем аликвоту ее смешивают с равным количеством тестирующей плазмы, добавляют равное количество каолин-кефалинового реактива, инкубируют 1 мин и определяют время сверты вания тестирующей плазмы. Пол уча ют 100; протеина С, содержащегося в плазме крови.10 0,23 М раствора цитратэ натрия, добавляют 30 мкл (170 мкг/мл) активатора иэ яда щито 20 25 20. мкл (150 мкг/мл) активатора из яда щитомордника АцЫзтго 1 оп Ьа 1 уз и инкубируют 10 30 мин при 37 С. К смеси добавляют 1,2 мл 35 40 45 50 55 П р и м е р 4. Берут осадок протромбинового...
Способ выделения эндонуклеазы из яда кобры
Номер патента: 1203902
Опубликовано: 30.11.1990
Авторы: Аавиксаар, Сийгур, Таре, Ярве
МПК: A61K 35/58, C12N 9/22
Метки: выделения, кобры, эндонуклеазы, яда
...,ки 111110 см наносят раствор ядра.Колонку элюируют 0,19 М раствором уксуснокислого аммония с удельной электропроводностью 14,5 10 8 см, рН 64 со скоростью 180 мп/ч и соби рают фракции по 30 мп, Оптическую ппотность.элюата регистрируют непрерывно с помощью "Увикорд. Получают 5 белковых пиков. В 1 дике фракции, которые имеют активность энда нуклеазы, объединяют (объем 930 мп),Раствор эндонукпеазы,.при рН 7,7 наносят на кананку ДНК"агарозы, уравновеаениую 0,19 М раствором уксусно-"кислого аммония с удельной электропроводностью 4,5-108 см , рН:7,7. Че-рез колонку пропускают 1,0 л раствора0,19 М уксуснокислого аммония с рН7,7 (удельная электропроводность раствора 14,510 8 см ). Скорость элюций10 мп/ч, собирают фракции по 15 мп,Оптическую...
Способ лиофильного высушивания оксидазы l-аминокислот из яда гюрзы
Номер патента: 1307849
Опубликовано: 30.11.1990
Авторы: Аавиксаар, Сийгур, Тара
МПК: C12N 9/02
Метки: высушивания, гюрзы, л-аминокислот, лиофильного, оксидазы, яда
...(до 80 . остаточной активности),Влияние добавки фракции яда гюрзыс мол.м. 1000-1300 является исключи"тельной - уже при низком весовомсоотношении 17;1 наблюдается практи 40 чески 100%-ный выход целевого продукта при лиофилизации, а оптимальнымявляется соотношение 1031. При этомважно отметить, что введение в препарат оксидазы Ь-аминокислот неболь 45 шого количества инертного пептидного стабилизатора не мешает определению активности и использованию этогофермента, .При соотношении 33:1 стабилизирующий эффект уменьшается.Иэ таблицы видно, что другие фракции яда гюрзы, в частности фракции.с мол.м. 2000 и 5000, не имеют ста-билизирующего эффекта. Модельный пептяд с мол,м, 1060, брадикияин, такжене имел стабилизирующего эффекта,сравнимого с...
Способ выделения фосфолипазы а2 из яда кобры
Номер патента: 1188948
Опубликовано: 30.11.1990
Авторы: Аавиксаар, Сийгур, Тара
МПК: A61K 38/46
Метки: выделения, кобры, фосфолипазы, яда
...комбинат "Патент", г.Ужгород, ул, Гагарина,101 кислого аммония 0,45 М с удельнойФщ.1электропроводносты 32-10 Б смрН 7,4. Фракции, имеющие фосфолипаэ-.ную активность, объединяют (выход92 мл) и лиофилизируют дважды.Характеристика препарата: выход65,1 ., Степень очистки 25 раз.П р и м е р 2, К 1,0 г яда кобрыдобавляют 8,0 мл раствора 0,050 Муксусно-кислого аммония с удельной-Ээлектропроводностью 4,510 Я смрН 7,5, смесь медленно перемешиваютв течение 4 ч при 4 С, Растворенныйояд центрифугируют при 5000 об/минпри 40 С в течение 30 мин. Осадоквыбрасывают, надосадочную жидкостьиспользуют для хроматографии. Науравновешенную с 0;050 М растворомуксусно-кислого аммония (удельнаяэлектропроводность 4,510 Я смрН 7,5) колонку...
Способ получения экзогенного активатора протеина с
Номер патента: 1565889
Опубликовано: 23.05.1990
Авторы: Аавиксаар, Коган, Струкова, Тара
МПК: C12N 9/50
Метки: активатора, протеина, экзогенного
...не активирует плазминоген и не обладает фибринолитической (плазменно-подобной) активностью. Таким образом, препарат является селективным и эффективным активатором протеина С, так как не активирует другие белки при их физиологической концентрации. О 0 5 0 45 50 55 Препарат можно использовать вкачестве экзогенного активатора протеина С в определении его функциональной активности в крови.П р и м е р 1. К 1,0 г яда щитомордника добавляют 5 мл 0,19 М раствора уксуснокислого аммония, смесьмедленно перемешивают в течение 4 чопри 4 С, Растворенный яд центрифуги"руют при 5000 об/мин при 4 С в течение 30 мин, Осадок выбрасывают, надосадочную жидкость используют длягель-фильтрации. Гель-Фильтрацию проводят на колонке сефадекса 6-100тонкий, размеры...
Способ выделения 5 -нуклеотидазы из яда кобры
Номер патента: 1544801
Опубликовано: 23.02.1990
Авторы: Аавиксаар, Тара
МПК: C12N 9/22
Метки: выделения, кобры, нуклеотидазы, яда
...основного белка 0,35-0,45 М раствором серно 55 кислого аммония(рН 6,5-7,5), Полученный йермент концентрируется при помощи ультрайильтрации.Характеристика препарата: выход 90%, степень очистки -в 25 раз Содержание фосфодиэ.теразы и неспецифической и Ьосйомоноэстеразы ниже 0,05 от активности 5 -нуклеотидазы,П р и м е р 1. К, 0,5 г яда кобрыдобавляют 4 мп раствора 0,35 М сернокислого аммония (рН 6,5), смесь медленно перемешивают в течение 4 чопри 4 С. Растворенный яд центрифугируют при 5000 об/мин при 4 С в течение 30 мин. Осадок выбрасывают, надосадочную жидкость используют для хроматографии, На уравновешенную 0,35 Мраствором сернокислого аммония (рН6,5), колонку с гептил-агарозой (размеры колонки 2,1 ю 2,6 см) наносят раствор яда,...
Способ получения тромбина
Номер патента: 1527261
Опубликовано: 07.12.1989
Авторы: Аавиксаар, Кибирев, Пояркова, Раба, Хага, Швачко
МПК: C12N 9/74
Метки: тромбина
...суспензии тромопластина э приссутствии СаС 1 при 37 С в течение 30 мин, рН 7,4. Затем нерастворимую часть отделяют на ультрацентрифуге УАСпри 15000 об/мин в течение 26 мин. Полученный раствор диализуют против 0,05 М и трис-НС 1 с О,1 М БаС 1,55 рН 8,0 и наносят на колонку. После нанесения пробы колонки промывают 0,05 М и трис-НС 1 буфером, содержащим 0,5 М ИаС 1, рН 8,0, Адсорбированный тромбин вымывают из колонок с совместными градиентами хлористого натрия (0,5-1,0 М) и изопропилового спирта (О) на 100 мл 0,05 М трис-НС 1 с 0,5 М НаС 1, рН 8,0 и 100 мл 0,05 М трис-НС 1 с 1,О М НаС 1 в 50 -ном иэопропиловом спирте, рН 8,0, Собирают фракции по 6 мл. АкС тивность тромбина в первоначальном растворе и во фракциях определяют по скорости...
Способ получения афинного сорбента
Номер патента: 1479511
Опубликовано: 15.05.1989
Авторы: Аавиксаар, Андрюшина, Аренс, Арукаэву, Варламов, Рогожин, Хага
МПК: B01J 20/22, C12N 9/00
...В течение 30 мин поддерживают на рН-метре рН 4,5, а затем1479511 Удельная УдельнаяСтепеньактивность активностьочисткисырья продуктаед.акт./мг ед.акт./мг Опыт Сорбент Выход конц, гепарина мг/гсорбента 74 74 74 74 74 74 74 32 80 25 77 25 72 26 76 23 74 2,8 641,8 75 2350 1880 1850 2100 1730 211118 1 СН-агар-геп2 сил.СООН-геп3 сил.СООН-геп4 сил,СООН-геп5 сил.акрил-гепб . АН-агар-геп7 ВгСГ 1.-агар-геп 2 10 20 15 реакционную массу перемешивают 1 б ч,Полученный сорбент промывают на пористом Фильтре 1 Г 1 Г 1 аС 1. (200 мл),О, 1 М Г 1 аНСОэ (200 мл) и водой (300 мл).Концентрация гепарина в полученномсорбенте 8 мг/мп.П р и м е р 2. Способ осуществляют аналогично примеру 1, но в качестве карбоксилсодержашего сорбентаиспользуют...
Способ получения бактериальной биомассы
Номер патента: 1067038
Опубликовано: 15.01.1984
Авторы: Аавиксаар, Арукаеву, Микельсаар, Хага
МПК: C12N 1/20
Метки: бактериальной, биомассы
...следующим образом.Выращивание проводится в ферментере в проточном режиме с непрерывной аэрацией при рН 3,2 в среде указанного состава. Про. дувание воздуха, обогащенного углекислым газом (не более.чем 10%), проводят со скоростью, обеспечивающей концентрацию кисло-рода в культууальной жидкости в пределах 10 - 20% от насыщения, рй культуральной жидкости поддерживают автоматически при помощи 1 М раствора карбоната калия, равным 3,2. Темпеувтура выращивания бактерий 28 С. Скорость разбавления в проточном режиме, т,е, соотношение потока питатеяьной среды в час и общего обьема культуральиой жндкоети в ферментере, находится в пределах 0,1-0,15, Скорость перемешивани 100 а 00 об/мин.Интенсивный рост бактерий характеризует. ся...
Способ выделения оксидазы -аминокислот из яда гюрзы
Номер патента: 1055769
Опубликовано: 23.11.1983
Авторы: Аавиксаар, Сийгур, Тара, Ярве
МПК: C12N 9/06
Метки: аминокислот, выделения, гюрзы, оксидазы, яда
...р водностью (14,5-15,5 ) 10 зБ см-, рН 6,4-6,6. Полученную фракцию оксидазы Ь-аминокислот с приблизитель но одинаковым молекулярным весом обессоливают и концентрируют при по мощи диализа с полиэтиленгликолем до удельной электропроводности (1,6-1,8) -10 З Б сМ-", (0,019-0,021 И) Полученный раствор фермента, рН 5,3-5,5, наносят на колонку с карбоксиметилцеллюлозой. Оксидаза Ь-аминокислот проходит катионит, а остальные белки (фосфодиэстераза, щелочная фосфатаза, 5-нуклеотидаза) связываются катионитом при рН 5,3-5,5 и удельной электропроводности раствора (1,6-1,8) 10Б см, ф, (0,019- 0,021 М). Фракции оксидаэы Ь-аминокислот собирают и концентрируют при помощи диализа с полиэтиленгликолем, Выход = 85. Степень очистки - 25 раз.66...
Способ получения бромистого циана
Номер патента: 977388
Опубликовано: 30.11.1982
Авторы: Аавиксаар, Парис, Рийкоя, Хага
МПК: C01C 3/00
Метки: бромистого, циана
...кривой найдено, что молярный коэффициент экстинкции при 580 нм для бромнстого циана составляет 6730 л/моль ам, При этом установлено, что примесь 1,4-диоксана не мешает определению бромистого циана.П р и м е р. В двухлитровую трехгорлую колбу, снабженную механическрй мешалкой, термометром и капельной воронкой, помещают 250 мл 780 г) брома и 100 мл воды. Колбуаждают смесью льда и соли. Через капельную воронку прибавляют при постоянном перемешивании раствор 335 г цианистого калия в 560 мл воды. Раствор цианистого калия добавляют 60 с такой скоростью, чтобы температурареакционной смеси не превышала 25 С, По окончании реакции желтый цвет реакционной смеси переходит в коричневый. В реакционную смесь 65 нии больших количеств названного...
Способ получения фосфодиэстеразы
Номер патента: 942759
Опубликовано: 15.07.1982
Авторы: Аавиксаар, Вина, Зариня, Миериня, Сийгур, Тара
МПК: A61K 35/58
Метки: фосфодиэстеразы
...фосфодиэстеразу, объединяют (11 пик выход 170 мл)и высушивают лиофильно.Выход лиофилизированного препарата31 мг; степень очистки 30 раз; примесьэндонуклеазы отсутствует; активностьфосфодиэстеразы 0,39 ед/мг препарата;примеси 5-нуклеотидазы 2,6 .10 ед/мгпримеси неспецифической Фосфомоноэстеразы 2,910 5 ед/мг препарата; содержание белка 793.25 П р и м е р 2. К 5,0 г яда гюрзы добавляют 50 мл раствора уксуснокислого аммония с удельной электропроводностью 16,010Б см , смесьмедленно перемешивают в течение 4 ч,зО Растворенный яд центрифугируют при5000 об/мин в течение 30 мин при 4 ОС.Осадок выбрасывают, надосадочную жидкость используют для гельфильтрации,На уравновешенную раствором уксуснокислого аммония (удельная электропроводность 15,9-10 з...
Способ получения иммобилизованных холинэстераз
Номер патента: 707923
Опубликовано: 05.01.1980
Авторы: Аавиксаар, Ляэне, Пеэнема, Хага
МПК: A61K 38/46, C12N 11/14
Метки: иммобилизованных, холинэстераз
...по приеру 1, содержит 2,8 мкмоля хлористого цианура на 1 г носителя, Связысвязывания при комнатной температуре составляет 6-48 ч.Полученные препараты дважды промывают буфером связывания и обрабатывают 0,2 М раствором гидроксиламина при рН 8,0-9,0 в течение 2-6 ч . Благодаря этой обработке удаляют непрореагировавшие атомы хлора и существенно повышается стабильность полученных иммобилизованных холинэстераэ.Полученные препараты многократно промывают 1,0 М раствором хлористого натрия и хранят в холодильнике во влажном состоянии.П р и м е р 1. Навеску окиси алюминия (5,0 г) суспендируют в 20 мл 5 раствора хлористого цианура в диоксан. Через 3 ч избыток раствора дикантируют, препарат промывают дважды диоксаном, дважды 20...
Способ получения -рибулозо-1, 5дифосфата
Номер патента: 667558
Опубликовано: 15.06.1979
Авторы: Аавиксаар, Ляэне, Микельсаар, Хага
МПК: A61K 38/43
Метки: 5дифосфата, рибулозо-1
...на выращивание микроорганизмов и выделение ферментного нрепарата, применение твердого биокатализатора позволяет увеличить выход 33 -рибулозо 1,5-дифосфата-в 1,8 раз по сравнению с растворимым ферментным чрепаратом,П р и м е р. Исходное сырье: 10 г пористого стекла обрабатывают в течение 30 ч 5 Ъным раствором-аминопропил триэтоксисилана в абсолютном толуоле (100 мл) при температуре кипения раст вора, После охлаждения стекло цромъща ют толуолом и обрабатывают в течение 2 ч 0,25 М раствором фосгена в абсолютеАнализ препарата на содержание шелочнолабильного фосфора показывает что пре парат содержит 75% Э -рибулоэо 1,5- -дифосфата,Проверку способности препарата акцеп тироватьуглекислоту проводят с 14 С ме ченным бикарбонатом натрия .в...