C12N — Микроорганизмы или ферменты; их композиции

Номер патента: 1423585

Опубликовано: 15.09.1988

Авторы: Затолокин, Куликов, Наумова, Селивановская

МПК: C02F 3/34, C12N 1/20

Метки: fluorescens, ароматических, бактерий, биологической, вод, используемый, нитросоединений, рsеudомоnаs, сточных, штамм

...газовожидкостной хроматографии на прибореСЬгогп 4 с пламенно-ионизациоццым детектором с использована,м 10 Я Ена Хромосорбе 100-20 меш, Газ носитель - гелий.Скорость газовых потоков, мл/мин: водород35; гелий 30. Температура термостата 200 С,испарителя 300 С.Способ, условия и состав сред для длительного хранения штамма: пересев 1 разв год ца столбик МПА. Рост в течение 2 сут.Хранить под вазелиновым маслом,Способ, условия и состав сред для размножения штамма: культивирование в колбах на 100 мл и с 30 мл МПБ в течение1 сут. Изобретение заключается в том, что новый селекционированный штамм С 9 в анаэробных условиях при 20 - 30 С, иммобилизованный на стекловолокне в количестве 80 Я от общего количества находящихся на нем микроорганизмов...

Номер патента: 1423586

Опубликовано: 15.09.1988

Авторы: Гаврилова, Гребеньков, Захаренко, Пятаева, Шарапов

МПК: A23K 3/00, C12N 1/20

Метки: закваски, казахсил, кормов, приготовления, силосования

...бактерий, углерод не вносят, так как для ПКБ источником углерода45 служит молочная кислота.Введение дополнительного питания для культур представлейо в табл. 3.Подготовленчые таким образом фугаты стерилизуют, охлаждают, засе вают соответствующей культурой и выращивают при оптимальных режимах,Результаты опытов представлены в табл. 4. Данные свидетельствуют о том., что жидкие фугаты исследуемых штаммов не универсальны. Их можно использовать преимущественно по следующей схеме: фугаты АМС для выращивания ПКБ и ПМБ, ПКБ - для ПМБ и АМС, ПМБ - для АМС, ПКБ, ПМБ.Таким образом, производство бакконцентрата "Каэахсилп осуществляют по замкнутому циклу; сначала выращивают кульп уру ЛМС, фугат которой используют для выращивания ПКБ, фугат...

Номер патента: 1423587

Опубликовано: 15.09.1988

Авторы: Перуанский, Савич, Тажибаева

МПК: C12N 9/42, G01N 33/48

Метки: активности, изопероксидаз

...геле удельную актив- ость изопероксидаз и содержание в нихлка определяют десинтометрически после бработки соответствующими реагентами и асчет удельной активности проводят на осове калибровочных графиков, построенных о стандартному препарату пероксидазы,Пример (. Навеску 0,2 г растительного атериала растирают в 1 мл холодного трисицинового буфера, рН 8,3, содержащего 00 сахарозы, в фарфоровой ступке в теение 3 мин, выдерживают в холодильние (4 - 6"С) в течение 30 мин и центрифугиуют при 10000 д в течение 20 мин. Полученную вытяжку используют для электрофоретического разделения изопероксидаз,В карман геля наносят строго определенное количество белкового материала (в пределах 25 - 35 мкг). После электрофореза гель разрезают так, чтобы две...

Номер патента: 1425542

Опубликовано: 23.09.1988

Авторы: Бачинский, Децина, Кондрахин, Распопина

МПК: C12N 5/00, G01N 33/48

Метки: клеточных, культур, питательных, ростовой, сред, характеристики

...токсичности и ростовых своиств сырья 9 титательньтх сред и Добавок к ним,255424ние ИП, , равное 0,3, что свидетельствует о токсичности этой пита 50О5тательной среды ( --- (0,25). ЭтаИП,величина также удовлетворительносогласуется с экспериментальным значением ИППриведенные данные подтверждаютприменимость предлагаемого способадля определения ростовых характеристик питательных сред,314П р и м е р. Измеряют содержание карбонильных соединений в анализируемой питательной среде по их реакции с 2,4-динитрофенилгидразином. Для этого в пробирку, содержащую 0,6 мл анализируемой среды, добавляют 0,5 мл 0,27.-ного раствора 2,4- .динитрофенилгидразина в 1 н раствора соляной кислоты, затем 2 мл 0,4 н. ИаОН, Пробу выдерживают оба раза при комнатной...

Номер патента: 1425204

Опубликовано: 23.09.1988

Авторы: Грушко, Спыну

МПК: C12N 7/00

Метки: вирусов, внутригрупповой, дифференциации, коксаки

...0,5% гидролизата лактапьбумина и 10% сыворотки крупного рогатого скота, За 3 ч до внесения вируса проводят смену на среду того же состава без сыворотки, но с добавле нием аморфного трипсина в конечной концентрации 50 мкг/мл, Вируссодержащий материал вносят на монослой после удаления среды из расчета 0,1 мп10 ЦПД /мл на 250 тыс, клеток и после часового контакта культуру заливают средой, содержащей трипсин в такой же концентрации (50 мкг/мл) иоинкубируют при 37 С. Аналогичным образом инфицируют культуру ФЭЧ в питательной среде, в которую не добавлен трипсин. Инфицированные пробирки инкубируют при 37 С в течение 48-72 ч. Результат оценивают по ЦПД вируса,Штамм пределение типов кишечных вирусов Размножение в ФЭЧ в при сутствии...

Номер патента: 1428765

Опубликовано: 07.10.1988

Авторы: Богомолова, Коптяева, Унанов, Юминова

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, вирусу, выявления, клеток, кори, культивируемых, человека, штамм

...цитоплазме 90-95% клеток хронически инфицированной культуры ВСКК(П)8 1 ДМФА определяется антиген вируса кори ЗОв виде мелких и крупных гранул. Хранят в замороженном состоянии в присутствии среды 199 с 10% сывороткикрупного рогатого скота и 10% глицерина.35П р и м е р. Клетки ВСКК(П)81 Дкультивируют в среде 199 с добавлением 10% сыворотки крупного рогатогоскота в 1-литровых матрасах. Клеткипересевают каждые 4-6 дней в соотношении, 1:3, Начиная с 2-3-го пассажа зараженной культуры количествоантигенсодержащих клеток стабилизи -руется на уровне 90-95%, и клеткииспользуют для приготовления препаратов для МФА, С этой целью клеткис поверхности матраса снимают механически и суспендируют в среде 199таким образом, чтобы...

Номер патента: 1429938

Опубликовано: 07.10.1988

Авторы: Алэн, Жан-Пьер

МПК: C12N 1/02, C12P 19/06

Метки: жидкости, культуральной, полисахарид, самреsтris, содержащей, хаnтномоnаs

...обладает улучшенными свойствами по вязкости,Термическая обработка в кислой.среде в сочетании с энзиматическойобработкой позволяет улучшить показатели ультрафильтрации по сравнениюс необработанным термически суслом,или с суслом, которое подвергнуто обработке в условиях нейтрального или щелочного рН. В частности, при той же потере напряжения на контактах ультра- .;фильтрата термическая обработка вкислой среде позволяет получить более 25,концентрированные растворы биополиме;ра при более значительных расходахпитания, Таким образом, можно полу-.чить концентрацию 200 и даже 300 г па1 кг сусла. 3011 р и м е р 1, Используют бродильное сусло с содержанием ксантено- .вой смолы 18 г/л, полученное в результате брожения Хатт 1 топтопав сашревт...

Номер патента: 1430402

Опубликовано: 15.10.1988

Авторы: Ваакс, Вадецкий, Гирис, Гуща, Здор, Иванов, Коломиец, Орлова, Романовская, Стахеев

МПК: C12N 1/16

Метки: белковой, биогил, биомассы, дрожжей, источник, сuтаnеuм, тriсноsроrоn, штамм

...легкоусвояемого углерода, азота, фосфора в среде.Полученный после выращивания штамма ВКПМ Уна предлагаемой среде белковый продукт пБиогил" имеет химический состав, приведенный в табл,2По сравнению с исходным субстра- том "Биогил" обогащен фосфором, содер жит в 10-13 раз большебелка и значи 30 40 тельно меньше трудногидролизуемых компонентов - лигнина Класона и целлюлозы. В связи в этим перевариваемостьлигнобиомассы почти в 4 раза вьппе перевариваемости гидролизного лигнина идостигает 407. По содержанию нуклеиновых кислот (до 1,27.) "Бногил", приближается к обычным продуктам питания (мясу, печени), и его использование в кормовых рационах не создаетопасности нарушения пуринового обмена у животных. Кормовая ценность лигнобиомассы...

Номер патента: 1430403

Опубликовано: 15.10.1988

Авторы: Дмитриева, Исаенко, Машукова, Царева, Юрченко

МПК: C12N 5/00

Метки: вируса, гриппа, изучения, используемый, качестве, клеток, культивируемых, мини-свиньи, почки, репродукции, тест-системы, штамм

...через 8, третийчерез 6 сут. Ввиду увеличения скорости роста к пятому пассажу клеткипересевают через 3-4 сут. Коэффициентрассева 1/3, В дальнейшем клетки культивируют в монослое с применениемсреды Игла МЕМ, содержащей 107. сывороткикрупного рогатого скота,нативной илиобработанной полиэтиленгликолем.Клетки снимают со стекла смесью 0,027-ного версена (1/2-2/3) и 0,257-ногораствора трипсина (1/2-1/3) беэ центрифугирования, дважды обмыв монослой прогретой до 36,5 С смесью ипроинкубировав в течение 5-10 мин.Далее клетки ресуспендируют в свежей среде и рассевают в сосуды длякультивирования с концентрацией100 тыс. кл. в 1 мл. Пересевы осуществляют через 3-5 сут с кратностьюрассева 1:4-1:5,Полученная линия перевинаемых клеток ПСМ имеет следующие...

Номер патента: 1431681

Опубликовано: 15.10.1988

Авторы: Клаус, Ральф

МПК: C12N 15/00, C12N 9/38

Метки: coli-продуцент, бактерий, галактозидазы, еsснеriснiа, штамм

...колонии. Все колонии собирают, 1 О очищают и отделяют.Каждая из полученных указанным способом колоний обладает способностью использовать рафинозу в качестве единственного источника углерода и одно временно была устойчива к действию ампициллина. Таким образом, они обладают иными свойствами по сравнению со штаммом, который был применен в качестве организма-хозяина. 20Из полученных колоний в каждом случае выделяют плазмидную РБА.Отбирают плазмиду из колоний, которые после обработки ферментом Есо В 1 или Нпй 111 дают меньший второй фрагмент, чем плазмиды других колоний. Бактерии, которые несут эту плазмиду, могут использовать рафинозу в качестве единственного источника углерода и про изводить все ферменты-оперона. По 10 мкг РБА рВТ 100 иэ...

Номер патента: 1433956

Опубликовано: 30.10.1988

Авторы: Новик, Ступарь, Томашевский

МПК: C05F 11/08, C12N 1/20

Метки: frаnкiа, актиномицета, облепихи, препарата, рост, стимулирующего, штамм

...Г 11/08, С 12 У /2,;5, //(Г 121/20 г 1; Р , с 01) ЛКТИВ Н 51 Г ЬС; 51 ОСТЛ Об пГ;с: . стиномпст с . глг та Яр, вь:;.:ге :скорне вы:, куогнс кс 1 в ЯисЧ 1:Г.гс. (л 1;Г ел и сс оспсро "ли во 11 Г сГ ",Кон:СС;СЦ 5 И Мнкро, с,- сс",С С С Р ) пс О."и О с 1 е р с .; АГ - , с9 6 ,НИГ ПрЕПЛрЛ ГЛ, Попу:ЕНПОГО НЛ 51 стпопессссмс с 10969 сГОГ 1 Г П 5образование лзогс;.П,Ов сссспсх к .сгнс,"ков ня корнях Ос пеппхи и УГко 1 епв,ОООТЯ 3-МЕОЯНСЫХ ПЯОТЕН 1 П В с б рЛЗЛ.1 тлб:т.: ".г: .;: полив ежедневныйрастения имели следу:.; кие параметрм ви.; гтенце,: длина стебляклубе явками 100 Х, к. ; .:. ов 3,3, объем кл: -, бций вес растения1 р ра 1 урные,Р дак- о Ц, Кип;. ули:и Заказ Тираж 425 Подлис.ное ВНЛИПИ Государственного комитета СССР ло делам...

Номер патента: 1433975

Опубликовано: 30.10.1988

Авторы: Абакумова, Цыганова

МПК: A21D 8/02, C12N 1/38

Метки: активации, дрожжей, прессованных, хлебопекарных

...32,54 мг %, сахаров . 05,47 мг 7., кальция 11,88 мг %.Характеристики дрожжей представлеы в табл. 1,П р и м е р 3. Способ осуществляютналогично примеру 1, но используют42 мл воды и 21,6 г плазмы (127 от ассы муки).Показатели плазмы; активная кисотность 8,85; содержание сухого статка 8,707,белка 7,19%; остаточого азота 32,79 мг %, сахаров 105,15 мг 7., кальция 11,97 мг 7Характеристики дрожжей представЛены в табл.П р и м е р 4. Способ осуществляМт аналогично примеру 1, но используют 252 мл воды и 10,8 г плазмы (б% от массы муки).Характеристики дрожжей приведены в табл. 1. П р и м е р 5. Способ осуществляют аналогично примеру 1, но используют 238 мл воды и 25,2 г плазмы(14% от массы муки).Характеристики дрожжей приведеныв табл, 1.Нативную...

Номер патента: 1433976

Опубликовано: 30.10.1988

Авторы: Вишневецкий, Мирошников

МПК: C12N 5/00

Метки: клеток, культивируемых, млекопитающих, роста, стимуляции

...,и 10 Е стерильной лошадиной сыворотки ,(ростовая среда й" 2).30Перед разливом в матрасы в ростовую среду с клетками добавляют лиофи 1 пизированный препарат альфа-фетопротеин, разведенный на 2 мл того же раствора из расчета 1 ампула эмбриональ,ного белка на 250 мл среды. Матрасы ;,помещают в термостат и клетки выращи- . вают в общепринятых условиях.П р и м е р 2. В гинекологическом отделении больницы в стерильные баночки получают эмбриональный материалот абразий на сроках 8-10 недель беременности. Производят отбор и из" мельчение кожно-мьппечной ткани зародьппей для извлечения фибробластов. Ткань неоднократно тщательно промывают раствором Хенкса с добавлением антибиотиков и подвергают трипсинизации до полного ее расслоения, Из...

Номер патента: 1433977

Опубликовано: 30.10.1988

Авторы: Денисова, Желудов, Климович, Пашкова, Самойлович, Сирота

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, пероксидазе, хрена, штамм

...условия культивирования штамма следующие; температура 37 С, воздушная атмосфера при выращивании клеток в герметично закрытых флаконах или атмосфера с 7,57 СО в5 воздухе со 1007-ной влажностью при выращивании в открытой системе. Питательной средой служит смесь среды Игла в оригинальной прописи или в модификации Дульбекко (903) и сыворотки крупного рогатого скота (107).Культура представляет собой взвесь одиночных клеток или рыхлых агрегатов по 4-16 и более клеток, легко раэъединяющихся при встряхивании. Оптимальная посевная доза - 2 х 105 клеток в 1 мп среды. Для поддержания культуры в пролиферирующем состоянии клетки рассевают 2 раза в неделю с коэффициентом 1:2 - 1:4. Максимальная плотность культуры с сохранением6...

Номер патента: 1433978

Опубликовано: 30.10.1988

Авторы: Богомолова, Коптяева, Унанов, Юминова

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, вирусу, выявления, используемый, клеток, кори, культивируемых, человека, штамм

...- создание штамма культивируемых клеток человека, хронически инфицированных вирусом кори.Штамм используется в качестве субстрата при использовании метода флю оресцирующих антител (МФА) для выявления антител к вирусу кори.Штамм депонирован в специализированной коллекции перевиваемых клеток при Институте цитологии АН СССР под номером ВСКК(П) 79 Д.Штамм ВСКК(П) 79 Д получен путем заражения клеток НЕрвирусом кори, штамм Ленинград- при множественности инфекции 0,001 .ТЦД /клетка. Единичные клетки, выкившие;,после пер. вичного заражения дали начало хронически инфицированной культуре. Использование клеток ВСКК(П) 79 Д Культуральные свойства, 25позволяет стандартизировать и ускаТип роста смешанный, перевивка рить получение результатов...

Номер патента: 1433979

Опубликовано: 30.10.1988

Авторы: Банников, Гельштейн, Крутовских, Трояновский, Чипышева

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, используемый, кератину, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, человека, штамм

...число хромосом - 51.Характеристика полезного продукта.МКА относятся к классу 1 яС 2 Ь(Н).В реакции иммуноблоттинга с кератинами из культуры клеток НеЬа и срезов органов человека МКА реагируютодной полосой с кератином м.м. 46 К 0(й. 17),Контаминация.ьактерии и грибы в культуре придлительном наблюдении и посевах напитательные среды не обнаружены.Криоконсервирование. Клетки штамма ресуспендируют в эмбриональнойтелячьей сыворотке, содержащей 107.диметилсульфоксида в концентрации61-Зх 10 клеток в 1 мл, разливают в стерильные пластиковые ампулы при 4 Си замораживают в жидком азоте по программе со снижением температуры нао1 С в минуту с последующим переносомв жидкий азот, Размораживание: 1 минпри 37 С.Клетки разводят в 5-10 млполной среды,...

Номер патента: 1433980

Опубликовано: 30.10.1988

Авторы: Ермакова, Ильченко, Моргунов

МПК: C12N 9/12

Метки: глицеролкиназы

...мМ глицерина, 1 мМ ЭДТА (буфер А)в соотношении 10 мл буфера на 1 гдрожжей. Клетки разрушают путем продавливания на прессе из замороженного состояния. Неразрушенные клетки иклеточные стенки удаляют центрифугированием. Бесклеточный экстракт прогревают 10 мин при 60 С на водянойбане, коагулированный белок отделяютцентрифугированием (4000 я, 20 мин).Супернатант (5 мл) наносят на колонку (2,5 20 см), заполненную сефарозой 4 Б со связанным красителем активным ярко-голубым КХ и уравновешенную буфером А.Краситель связывается с сефарозойследующим образом. К 150 мл сефароэыдобавляют 2,5 ИаСОз в 50 мл дистиллированной воды и 50 мл 2 -ного раствора красителя, затем смесь инкубируют 40 ч при 45 С с перемешиванием,После инкубации гель переносят...

Номер патента: 1433981

Опубликовано: 30.10.1988

Авторы: Берецкене, Казлаускас, Паулюконис, Рагавичюс, Рузгене, Тарасова, Тихонов, Шебека, Янушявичюте

МПК: C12N 9/88, C12N 9/96

Метки: лизиндекарбоксилазы, препарата, ферментного

...суспензии;в которую при перемешивании приливаОют 350 мл охлажденного до +4 С ацетона, перемешивают,10 мин, фильтруютна вакуум-фильтре и высушивают на 15воздухе.Необходимые комоненты аналитической композиции в количестве 33 г ацетонированных клеток, 124,8 г натрияфосфорнокислого однозамещенного, 208,1 г фосфорнокислого двузамещенного,83,6 г растворимого крахмала, 22 гглюкозы, 2,75 г стеарата кальция перемешивают до образования однородноймассы и таблетируют на прессе ПЛТ25с пресс-инструментом 5 мм. Применяется такое давление прессования, прикотором время распадаемости таблеткиов 1 мл воды при 42 С и перемешиваниине превышало 1,0 мин, 30Значение рН образовавшейся суспензии соответствует 5,5 лизиндекарбоксилазная активность - 13...

Номер патента: 1433982

Опубликовано: 30.10.1988

Авторы: Ашубаева, Даванков, Манаев, Ямсков

МПК: C12N 11/04

Метки: иммобилизованного, панкреатина

...раствора ИаОН в течение 1 ч на водяной бане с температурой 59 С. Реакция продолжается еще 1,5 ч при периодическом перемешивании и температуре, понижающейся с 59 до 35 С, Полученный продукт промывают дистиллированной водой до нейтральной реакции, сушат, Выход 101,6 от исходного веса пектина. Продукт не растворяется в воде, 0,1 н. растворах НС 1 и ИаОН, содержит 19,8 . эпоксигрупп.Сшитое эпихлоргидрином производное пектина (ПЭГ) подвергают взаимодействию 15 мг панкреатина (соотноо шение ПЭГ:панкреатин 1:О, 15) при 22 С в течение 3 ч, отфильтровывают и про" мывают водойП р и м е р 3Сшивку пектина производят эпихлоргидрином в щелочной среде при соотношении компонентов 1 г пектина и 4,5 мл ЭХГ в 2 мл 25 - ного раствора ИаОН при...

Номер патента: 1435159

Опубликовано: 30.10.1988

Авторы: Павел, Ханс

МПК: C12N 1/20, C12P 23/00

Метки: l-карнитина

...изглюкозы аэробноанаэробноФруктозы аэробноАБЯ глюкозыксилозытрегалозыэтанолаОбразование газа изглюкозыОЫРСОбразование,аргининдигидролазылизиндекарбоксилазы435159Продолжание колонки 2 тир озинатвина 80ДНКэскулинаИспользование субстратаацетатацнтратамалонатаглицинанорлейцинаксилоэыфруктозыглюкозыАвтотрофный ростна Н 13"кетолактозаРост набетаинеЬ-карнитинеВ целях осуществления предлагаемого способа получения Ь-карнитина целесообразно сначала выращивать предварительную культуру микроорганизма на стерилизованной среде при 20-40 фС при рН 6-8 в течение 20-50 ч. Эта предварительная культура должна содержать в качестве субстрата роста О, 1-10 мас,Х -бутиробетаина и кро. тонобетаина, считая на реакционную среду.-Бутиробетаин или кротонобетаин...

Номер патента: 1436887

Опубликовано: 07.11.1988

Авторы: Аксель, Вильям, Говард, Джон, Питер, Рэймонд

МПК: C12N 15/00

Метки: гормон, днк, кодирующей, крысы, плазмидной, рекомбинантной, роста, человека

...0,1 ммоль ЭДТКдо 25 смоль и тДНК,После экстрагирования этанолом реакционной смеси и хроматографического анализа на БерЬайех С, 32 ркДНК, элюированную в пустой объем,осаждают при помощи этанола. В результате такой обработки обеспечивается высокий выход молекул кДНК, концы которой связаны основанием, Линкер Ыпй 111 лигируют с кДНК осущестовляют при помощи инкубации при 14 Св смеси бб ммоль трис-НС 1, рН 7,6,6,6 ммоль хлорида магния, 1 ммольАТФ, 10 ммоль дитиотрейтола, 3 ммольдекамера Нпй ТТТ с показателем 105отсчетов в 1 мин/мол и лигазы ДНК Т 4,приблизительно 500 ед./мл, в течение1 ч. Чтобы дезактивировать лигазу,ореакционную смесь нагревают до 65 С;которуи поддерживают в течение 5 мин,Предварительно к ферментам, содержащим...

Номер патента: 1437391

Опубликовано: 15.11.1988

Авторы: Меледина, Разуваев, Саркисян

МПК: C12N 1/18

Метки: дрожжей, производства, сухих

...35-40 С до влажности 8-10/,.;3 актины с Гас сбсм при .Я уУ С гонля).:,нссти 8О -.рсулссгг 1 1 сел.гусс , -уд т 3 нр 1 Я 5 ясс, яьуяет у (с, ". с. уьгсопгуссЙ )"г 7Ро:,Егта Г ОК Уст )г Я К, Ега", Н - -.Е -.)аСпособ троизнсдстна сухих Драя)сей предусматругняюпий получение зясенньтх дро)ежей, внесение их в питатРльну 30 среду "адерждщутО мелс 1 ссу вкачестве источника углерода,. источнуки азота, фссора, минеральные соли, микроэлементы и стимулятор роста, ньгращинау 3 ие н условиях аэрациии прнтока компонентов питательной141 среды, выделение биомассы, промывку,прессование, измельчение и сушку,о т л и ч а ю щ и й с я тем, что,с целью повьшения выхода дрожжей, атакже ускорения и удешевления процесса, засевные дрожжи получают в проТаблица...

Номер патента: 1437392

Опубликовано: 15.11.1988

Авторы: Катковская, Мекшенков, Серегина

МПК: C12N 5/00

Метки: в-лимфоцитов, гибридных, используемый, клеток, культивируемых, человека, штамм

...50 мкг/мллипополисахарида из Е.со 1 и Роедееа Мгояеп (РММ) в разведении 1:100и инкубируют 48 ч при 37 С, в атмосфере 57 СО. Обработку РйМ и липополисахаридом проводят для активацииЛПК и увеличения частоты слияния,2 10 клеток НСИ.ТК .6410 с, находящихся в середине логаримической фазыроста смешивают с 2 10 .ЛПК. Смесь7клеток трижды отмывают от РСБ, центрифугируя их при 160 ц. После центрифугирования супернатант удаляютполностью и к осадку добавляют 1 мл457-ного (ПЧ) ПЭГ (м.м. = 4000).ПЭГ добавляют постепенно, осторожновзвешивая в нем клеточный осадок.Процедура добавления ПЭГ занимает1 мин, Еще 1 мин клетки инкубируют сПЭГ при комнатной температуреЗатемк инкубационной смеси медленно постенке центрифужной пробирки добавляют 1 мл КРМ...

Номер патента: 1437393

Опубликовано: 15.11.1988

Авторы: Бундулис, Войтенок, Панютич, Скривелис, Циманис

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, интерлейкину-2, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, рекомбинантному, человека, штамм

...не пассируетсяболее одного раза.Контаминация, Бактерии и грибы вкультуре не обнаружены при длительном наблюдении и посевах на питатель.ные среды. Заражение микоплаэмой невыявлено при окрашивании красителямина ДК Н и по характеру включения тимидиновой метки,Криоконсервирование, Для длительного хранения клетки штамма замораживают в эмбриональной телячьейсыворотке с добавлением 107 диметилсульфоксида. Режим заморажния: 1 С/минОдо -70 С. После замораживания клеткипереносят в жидкий азот. Размораживание - на водяной бане при 37 С.Жизнеспособность клеток после размораживания 70-807. по окрашиванию трипановым синим.Использование штамма иллюстрируется следующими примерами.П р и м е р 1. Гибридомные клеткипомещают в стеклянный флакон объемом50...

Номер патента: 1437394

Опубликовано: 15.11.1988

Авторы: Грубер, Дебов, Лопатина, Никольская-Санович, Поляченко

МПК: C12N 9/88

Метки: метилаз, модифицирующих

...эа 2 дня получитьферменты с удельной активностью7000 ед/мг белка, Ферментные препараоты хранятся при -10 С в течение 12 мес,(срок наблюдения) без потери активности (см, табл, 2). При получении препаратов Ферментов по прототипу метилазная активность сохранялась в течение 1-.2 сут, активность составляла3000-4000 ед/мг белка,За единицу активности принимащтколичество фермента, необходимое дляпереноса. 1 ршо 1 метильной группы Баденозилметионина на ДНК в течение1 мин при 37 С,Активность метилаз определяетсяс помощью радиоизотопного метода.Инкубационная смесь объемом 50 мклсодержит 8-10 мкг белка, 5 мкг акцепторной ДНК и 0,5 мкКи Н-БАИ, Пробыоинкубируют 1 ч при 37 С, наносят нафильтры СР/С, осаждают 20%-ной трихлоруксусной кислотой...

Номер патента: 1437395

Опубликовано: 15.11.1988

Авторы: Багдасарьян, Гукасян, Пасоян

МПК: C12N 9/88

Метки: flavipes, аспергиллус, грибов, продуцент, тирозиназы, штамм

...не образует,Физиологические и биохимическиепризнаки, Усваивает следующие источники углерода: глюкозу, галактозу,сахароэу, мальтозу, фруктоэу, арабиноэу, ксилозу, крахмал, инулин, сорбит,манит и органические кислоты, Хорошорастет на нитритном, нитратном и ам Пример 2, С ферментного раствора яь.11 пя Г 1 ачхрея ВКПМ ют, как в примере 1. целью получениякультуру АярегРвыращиваПосле 4 сут куль. миачном азоте. Из органических источников азота ассимилируют аминокислоты. Растет в широких пределах кислотности среды (рН 2,0-9,0). Штамм нетоксичен,Исследование субстратной специфичности выделенной из штамма Аяреге 111 пя Г 1 ач 1 рея ВКПМ Ртирозиназыпоказало, что фермент окисляет следующий ряд фенолов: тирозин, п-креэол, фенол, пирокатехин,...

Номер патента: 1439121

Опубликовано: 23.11.1988

Авторы: Алексеева, Кишко, Митько, Петухова, Солонтай, Спивак, Чернецкий

МПК: C12N 1/00

Метки: бактериальных, культур, предотвращения, фаголизиса

...раствором в соотношении 1:1 и посевную дозу опытной культуры Егю.п 1 а саго 1 оуога, которую предварительно синхро 15 ниэируют, вЫцерживая в течение 1 чопри 4 С, В опытные колбы вносят также 6-азацитидин в концентрациях 1,5, 10, 50 мкг/мл, Колбы с материалом помещают на качалки и культивируют прио30 С, Через различные промежутки времени после начала культивирования для определения динамики роста бактерий и присутствия спонтанно продуцнруемого культурой бактериофага отбирают пробы культуры. Динамику ро; ста бактерий определяют по оптической плотности бактериальной суспензии и , по количеству жизнеспособных микроорганизмов (серийные разведения мик, роорганизмов высевают на твердую пи -тательную среду). Количество свободных Фаговых частиц в...

Номер патента: 1439122

Опубликовано: 23.11.1988

Авторы: Гончарова, Заренков

МПК: C12N 15/00

Метки: антигена, дефектных, микроба, мутантов, оболоченного, синтезу, фракции, чумного

...сохраняется. Выделения и гель-электроФорез у плазмидной ДНК обнаруживают делецию плазмид рУТ. Реверсии к Рга 1 -фенотипу не наблюдают в течениео года при хранении штаммов при +4 С.П р и м е р 2. 10 клеток У,рея 5+1 я 377 (рУТ, рУРТп 10) высевают на пластинку 1,57-ного агара 1 В с 20 мМ оксалата Еа, рН 7,2. Посевы инкубируют при 37 С 3 сут. Частота появления крупных колоний -1 О . 10 таких клонов исследуют на продукцию "Фракции 1", "мышиного" токсина и проводят гель-электрофорез выделенной из них плазмидной ДНК. В восьми из них имеется делеция рУТ-плаэмиды с потерей "фракции ", но с сохраненной продукцией мышиного токсина.П р и м е р 3. 10 клеток штамма У.резня 377 (рУТТп, рУ 7, рУРТп 10) высевают на агар, содержащий 25 мм оксалата Иа,...

Номер патента: 1439123

Опубликовано: 23.11.1988

Авторы: Бабичев, Коротяев

МПК: C12N 15/00

Метки: nb-4065, r-фактора, бактерий, вкпм, еsснеriснiа, идентификации, штамм

...(3000 мкг/мл).Штамм Е.со 11 К 12 С 600 Кхй (рКМК 334) используют в.качестве донора в коньюгационном скрещивании. В качестве реципиента используют штамм Е.со 1 д К 12 153 шей рго Ба 1 Устойчивость к тетрациклину, стрептомицину и сульфаниламидам у трансконь югантов соответствует таковой у донор- ного штамма. Частота переноса рКМК 334 в бесплазмидный штамм сос тавляет 1,510 при 20-часовой конь" югации. При. 5-минутной коньюгации передачи плазмиды в бесплазмидный штамм не происходит,П р и м е р 1. Плазмидную ДНК из штамма Е.со 1 К 12 С 600 КхЕ " (рКМК 334) выделяют по методу ВхгпЪохш, Эо 1 у. Молекулярный,вес определяют по элект рофоретической подвижности ДНК плазмиды рКМК 334 в 0,8 Х-ном агарозном геле в трис-боратном буфере (рН...

Номер патента: 1439124

Опубликовано: 23.11.1988

Авторы: Анисимов, Дроздов, Можаров

МПК: C12N 15/00

Метки: бактериальной, выделения, днк

...на освободившуюся ДНК. В результате применения указанного методического приема получаемый продукт содержит меньше по.45 вреждений и в меньшей степени, чем в случае использования известного способа, загрязнен примесями ДНК и белкаПредлагаемый способ позволяет регулировать полноту лизиса путем изменения времени инкубации клеток с лизирующей смесью, а следовательно, в отличие от известного может быть использован не только для получения плаэмид, но и для выделения хромосомной ДНК, Дополнительное обогащение продукта нужным типом ДНК (хромосомной или плазмидной) осуществляется за счет изменения температурногорежима при центрифугировании,П р и м е р 1. Вьщеление плазмидыр 11 Г 4 К иэ ЕвсЬег 1 сМа со 11 НВ 101,Культуру бактериальных клеток...