Патенты с меткой «метилазы»

Номер патента: 852939

Опубликовано: 07.08.1981

Авторы: Баев, Бурьянов, Косых

МПК: C12N 15/00

Метки: гены, метилазы, плазмидной, рекомбинантнойднк, рестриктазыи, содержащей

...устойчивость к антибиотику сульФаниламиду, это дало возможность клонировать этот фрагмент в векторер 1 Ь 203, который не имеет селекциипри встройке чужеродных Е В 1 фрагментов, если эти Фрагментй не несутселектируемых маркеров. Вектор р 3 Ь203 получен на основе плазмиды РВВи ВавН 1-Е В 1 Фрагмента Фага лямбда,в котором находятся левый и правыйпромоторы, кроме того, в этом Фрагменте содержится температуроччвствиЭффективность рестрикции и модификации фага % клетками Б,со) ффективность размноения фага на клетках Специфичность фага Ф1 1 9.80рЯК 32 Выделения плазмида ДНК из этого ф клона после рестрикции эндонуклеаэой Е В 1 образуют два фрагмента при электрофорезе, соответствующие по молекулярному весу вектору р 1 Ь 203 и фрагменту плаэмиды...

Номер патента: 929705

Опубликовано: 23.05.1982

Авторы: Баев, Глухов, Фодор

МПК: C12N 1/02

Метки: выделения, еsснеriснiа, есо, метилазы

...эк.зонуклеаз, на что указывает полноесохранение дезоксинуклеотидной последовательности ДНК и суперспиральной (ОФормы плазмидной ДНК при длительнойинкубации (10 ч) избыточных количествфермента (10-20 ед,) с фрагментамиДНК (1 мкг) и плазмидной ДНК (рВК 322)в условиях, способствующих действиюнуклеаз .(в присутствии ионов Мф )Это позволяет использовать его в эк-, ,спериментах по молекулярно-биологичес.кому конструированию рекомбинатныхДНК Хп У 11 го,П р и м е р. Еясйег 1 сМа со 11К29 выращивают до .титра 6-7 х 10 бактериальных тел в мл при 37 ОС с интенсивной .аэрацией на среде следующего состава, г/л: пептон; дрожжевой экстракт 5; БаС 1 10; глюкоза 2. Клеткиотделяют центрифугированием. Все дальнейшие операции проводят на холодуот 0 до 5...

Номер патента: 941423

Опубликовано: 07.07.1982

Авторы: Баев, Бурьянов, Косых

МПК: C12N 15/00

Метки: coli-продуцентов, еsснеriснiа, конструирования, метилазы, рестриктазы, штаммов

...и нитратной форме, так в органи- фОческой форме в виде пептона, аминокислот, Нитраты восстанавливает донитритов. Белатину не разжижает,Уреазйая активность не обнаруживается,. Ийдол не образуетУстойчивость к антибиотикам. Проявляет устойчивость к тетрациклину(30 мкг/мл) .Штамм Еясйег 1 сЫа со 11.В 834 (г,а )/И 3 характеризуется теми же морфо ЯВлогическими, культуральными и Физиологоб иохим ическими и риз на ками,Устойчивость к антибиотикам. Проявляет устойчивость и стрептомицину:тонногобульона вносят 1 мл культуры 3 фЕ. со 11 В 834 и выращивают до плотности 0,4 (ФЭК, светофильтр 6, кювета0,5 см). После охлаждения клетки собирают центрифугированием и ресуспендируют в равном объеме 10 мИ ИаС 1,После 20-минутной инкубации во...

Номер патента: 1532585

Опубликовано: 30.12.1989

Авторы: Грубер, Дебов, Карягина, Лопатина, Лунин, Никольская-Санович, Поляченко

МПК: C12N 15/00

Метки: бактерий, днк, еsснеriснiа, кодирующая, метилазу, метилазы, плазмидная, продуцент, рекомбинантная, штамм

...Бяо 11 в клетках, несущих плазмиду с 1 33, не происходит.Плазмидную ДНК о 33 подвергают рестрикционному анализу.Характеристика штамма.2585 6Е. со 1, трансФормированных плазми"дой й 33.ШтаммТ 15 чения характера метилирования Яяо 11 20 25 30 40 45 50 55 5 153Клетки прямые, палочковидные, неподвижные, грамотрицательные, лактозопозитивные. При рассеве на чашкис 1,3%-ным МПА рост в виде отдельных,колонии, иногда в К-форме с неровными5краями. Хорошо растет на плотных ижидких питательных средах (МПА, МЛБ,1.В-бульон и ЬВ-агар).Физиолого-биохимические признаки,сКлетки растут в пределах 4-45 Спри оптимуме рН 6,8-7,5. Штамм разлагает глюкозу, лактозу, маннит с образованием кислоты, не .разлагаетсахарозу, сбраживает мальтозу, ксилозу,...

Номер патента: 1539205

Опубликовано: 30.01.1990

Авторы: Грубер, Дебов, Карягина, Лопатина, Лунин, Никольская-Санович, Поляченко

МПК: C12N 15/00

Метки: бактерий, днк, еsснеriснiа, кодирующая, метилазы, плазмидная, продуцент, рекомбинантная, рестриктазы, синтез, штамм

...при 10000 я 15 мин, затем 1 О мкл супернатанта добавляют впробу, содержащую 1 мкг бактериофага 3 в 10 мкл буфера А. Пробу инкубируют 1 ч при 37 С, после чегоанализируют электрофорезом в 1,2 Еном агарозном геле. Картина рестрикции в случае штамма Е, со 1 Р 8200,несущего плазмиду с 1 24, характерназля рестриктазы Бзо 11.1 мкг плазмидной ДНК й 24, выделенной из штамма Е.со 1 Р 8200, обрабатывают 1 О ед. рестриктирующей эндонуклеазы Бво 11 в буфере А в течение 2 ч при 37 С. Электрофорез показывает, что ДНК плазмиды й 24 при такой обработке не фрагментируется, вто время как плаэмида р 11 С 19 даеткартину гидролиза, типичную для плазмиды рЦС 19, обработанной рестриктаэой Бво 11. Эти данные свидетельствуют о защите мест узнавания...

Номер патента: 1453896

Опубликовано: 30.09.1990

Авторы: Бурьянов, Витенене, Косых

МПК: C12N 15/00

Метки: corii, бактерий, днк, еsснеriснiа, кодирующая, конструирования, метилазу, метилазы, плазмидная, продуцент, рекомбинантная, рестриктазу, рестриктазы, рук11, штамм

...штаммаЕ, соН В 834(рС 857),обусловлен тем,что штамм не содержит интерферируюих с ферментами Есо КП примесей исодержит плаэмиду с геном термочувст Овительного репрессора с 1 фага ляйбда,Содержаний рестриктаэы и метилазцЕсо К 11 в сконструированном штаммеравно 500000 ед, каждого фермента наг сырой биомассы клеток,Штами ЕвсИехсЫа со 1. ВКИ СК 2889 характеризуется следующими признаками;Иорфологические признаки.6 6ную как р 7 К 11 и содержащую в своем . составе трк фрагмента, которые обра,зуются при гидролизе плазмидной ДНК эндокуклеаэой рестрикции Рве 1Выделенную .ДНК р 7 К 11 трансформируют в штамм Е. со 11 В 834/рС 1857 Трансформаиты отбирают на среде, содержащей ампицкплин (50 мкг/мл) и канамкцин (25 мкг/мл). Плаэмида РС 1857 несет...

Номер патента: 1311253

Опубликовано: 10.03.1995

Авторы: Баев, Бурьянов, Зеидака, Косых, Миериня, Шпрунка

МПК: C12N 9/16

Метки: метилазы

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ МЕТИЛАЗЫ E CO R11, предусматривающий культивирование продуцента Escherichia coli, инкубацию и дезинтеграцию клеток ультразвуком, получение бесклеточного экстракта, осаждение фермента сульфатом аммония, хроматографию на диэтиламиноэтилцеллюлозе и фосфоцеллюлозе и последующее концентрирование, отличающийся тем, что, с целью повышения выхода и удельной активности фермента, в качестве продуцента используют штамм Escherichia coli суспензию клеток инкубируют в присутствии лизоцима, фермент осаждают полиэтиленимином, который добавляют к бесклеточному экстакту до концентрации 0,3 - 0,4% с последующей элюацией метилазы из осадка 0,4 - 0,5 М хлористым калием,...

Номер патента: 1026407

Опубликовано: 10.06.2000

Авторы: Баев, Бурьянов, Косых

МПК: C12N 1/20

Метки: escherichia, mb-)psk, метилазы, продуцент, рестриктазы, штамм, •рб

Штамм Escherichia coli B 834 (rB-, mB-)/pSK 323 (Всесоюзная коллекция микроорганизмов при Институте биохимии и физиологии микроорганизмов АН СССР, коллекционный номер ВКМ В-1445Д)-продуцент рестриктазы и метилазы Eco RII.