Патенты с меткой «светляков»

Номер патента: 660378

Опубликовано: 23.12.1982

Авторы: Березин, Бровко, Угарова

МПК: A61K 38/44, C12N 11/02

Метки: иммобилизации, люциферазы, светляков

...в частности с субстратами люциферазы люциферином и АТФ. В 25 за 35 н 40 результате помимо иммобилизациипроисходит также очистка люциферазыот сопуствующих низко- и высокьмолекулярных примесей. П р и м е р 1. 60 мг предварительно высушенных над Са С 1 в вакуумелампочек светляков растирают в тонкий порошок и экстрагируют 3 млтрис-ацетатного 0,02 М буфера, 2 мМЭДТА, (этилендиаминтетрауксуснаякислота) 0,1 М Иа С , рН 7,9 при5 С в течение 30 мин. Полученную суспензию центрифугируют (15000 об/ми 5 С) в течение 10 мин, Раствор отделяют, а осадок промывают 2 мй тогоже буфера и вновь центрифугируют. Ксоединенным водным фракциям (5 мл)добавляют набухший порошок (283 мг)ВкСН актифированной сефарозы. Суспензию встряхивают при 4 фС в течение 25 ч....

Номер патента: 1339128

Опубликовано: 23.09.1987

Авторы: Букатина, Духович, Угарова, Филиппова

МПК: C12N 9/02

Метки: люциферазы, светляков

...при 3000 д 10 мин, отделяютраствор, к осадку добавляют 20 млсвежего буферного раствора того жесостава, инкубируют 30 мин, вновьцентрифугируют, Последнюю операциюинкубирования и центрифугиронанияповторяют, Три порции полученногонадосадочного раствора объединяют ицентрифугируют 30 мин при 25000 я,осадок отбрасывают, а надосадочнуюжидкость центрифугируют при 1400001,5 ч, Получают надосадочный раствор,который содержит люциферазу с активностью 1,0 10 мВ/мл и удельной ак 9тивностью 131 О мВ/мг белка, Степеньочистки исходного экстракта последифференциального ультрацентрифугирования состанляет 16 раз. При хранеонии при 4 С в растворе 30 сут, препарат сохраняет 50% актинности, По известному способу получают препаратлюцифераэы с...

Номер патента: 1341189

Опубликовано: 30.09.1987

Авторы: Березин, Духович, Угарова, Филиппова, Швец

МПК: C12N 11/12, C12N 11/14

Метки: иммобилизованной, люциферазы, светляков

...хранят в 0,1 М трис-ацетатном буферном растворе, содержащем 0,3 моль КС 1 и 0,8 мг/мл дитиотреитола, рН 7,8 при 4 С в течение 10 дней, измеряя каждый день активность люциферазы. Через 10 дней хранения мембрана сохраняет 70% от исходной активности.П р и м е р 2. Нитроцеллюлозную мембрану площадью 1,5 см погружают в 10%-ный раствор лецитина в спирте, инкубируют смесь в течение 0,5 ч, затем мембрану извлекают из раствора, высушивают в токе воздуха в течение 15 мин и погружают в раствор люциферазы с активностью 10 10 мВ/мл. Раствор люциферазы готовят в 0,1 М трис-ацетатном буферном растворе, рН 7,8, содержащем О,б моль КС 1, 20% глицерина, 1 мг/мл дитиотреитола.ОСмесь инкубируют 20 ч при 4 С. Затем мембрану извлекают из раствора и...

Номер патента: 1546484

Опубликовано: 28.02.1990

Авторы: Букатина, Дементьева, Кутузова, Угарова

МПК: C12N 9/02

Метки: luciola, люциферазы, мingrеliса, светляков

...1:30 1:30 5" 1 О 0,01 В, ,Гомогенный препарат,0 2 10 2 1 О 0 тем же буфером для удаления с носителя,несвяэавшихся веществ. Люцифераэу элюируют тем же буфером, но содержащим 60 мМ МАЗО,. Во Фракциях, содер-жащих люциферазу спектрофотометрическим методом определяют концентрациюбелка, и полученные фракции наносятна колонку с голубой агарозой в соотношении белок:носитель 1:30. Несвязав шиеся белки смывают 0,05 М трис-ацетатным буфером, рН 7,8,. содержащим2 мМ ЭДТА 60 мМ ИМБО. Злюцию люциферазы проводят тем же буфером, содержащим 15 мК АТФ. Получают раствор люцифераэы с концентрацией белка0,05 мг/мл и удельной активностью2 10 мВ/мг, Выход по активности сос 9тавляет 1004 от исходной.Раствор люциферазы после аффиннойхроматографии на...