Марцишаускас

Номер патента: 1622393

Опубликовано: 23.01.1991

Авторы: Баронайте, Вайткявичене, Гаврюченкова, Громова, Марцишаускас, Песлякас, Суджювене

МПК: C12N 9/14

Метки: днк-полимеразы, еsснеriснiа

...баню и перемеаиваютстеклянной палочкой до получениягомогенной суспенэии, Суспеиэии кле"ток обрабатывают экструзиоииьи деэинтеграторои. Обломки клеток осаждают центрифугироваиием при 10000 В 2393 Ьв течение 1 ч. Выпавщий осдлок отбрасывают, центрифугят (560 мл) используют для выделения Фермента.б) фракционнрование ферментногоэкстракта полимином 11 и сульфатомаммония. К центрифугату (1560 ил),полученному нд предьдущей стадии,при постояннои перемещивянии в течение 30 мин добавляют 203-ный растворполимина 11 (48 ил) ло конечной концентрации 0,6 г После добавления всего объема полимина 11 переиещиваниепродолжают еще 30 мин, Экстракт цент Рифугируют в течение 10 иин при5000 е. Супернатант сливают, я полученный осадок суспенлируют в 780...

Номер патента: 1576563

Опубликовано: 07.07.1990

Авторы: Дайлиденайте, Лакачаускене, Марцишаускас, Песлякас, Суджювене

МПК: C12N 9/14

Метки: фосфатазы, щелочной

...буфером.При этом фосфатаза не сорбируется и выходит острым пиком, а нуклеазные примеси сорбируются и могут быть элюированы при повышении ионной силы до 1 М КС 1. Фракции щелочной фосАатазы объединяют и концентрируют. Концентрирование конечного препа-. рата.Объединенные Фракции диализуют против 1 л 0,01 М трис-НС 1 буфера рН 7,5, содержащего 0,001 М МРС 1 , 005 М ИаС 1 и 50% глицерина (по обьему). Диализ продолжают в течение 12 ч, Препарат помещают в предварительно охо лажденную емкость и хранят при -20 С, Выход щелочной АосАатазы Е, со 11 составляет ЗЗЕ с удельной активностью 30 ед/мг белка. Ферментный препарат не содержит нуклеазных примесей и пригоден для использования в генноинженерных экспериментах и молекулярной биологии....

Номер патента: 1541256

Опубликовано: 07.02.1990

Авторы: Баронайте, Вайткявичене, Марцишаускас, Пасечник, Песлякас, Суджювене, Федорова

МПК: C12N 15/00, C12N 9/00

Метки: большого, днк-полимеразы, еsснеriснiа, кленова, фрагмента

...ферментного экстракта полимином Р и сульфатом аммония. К центрифугату (215 мл), полу5 15412 ченному на предыдущей стадии, при постоянном перемешивании в течение 30 мин добавляют 107.-ный (13,7 мл) раствор полимина Р до конечной концентрации 0,67, После добавления 5 всего объема полимина перемешивание продолжают еще 30 мин. Экстракт центрифугируют в течение 15 минпри 4000 Полученный осадок используют для получения фрагмента Кленова. Фермент экстрагируют из осадка 100 мл 0,1 М калий-фосфатным буфером рН 7,0, содержащим 0,001 М /ь-меркаптоэтанол, 0,002 М ЭДТА, 0,1 М ЯаС 1. Процедуру повторяют еще раз. Супернатанты объединяют, Экстракт центрифугируют в течение 15 мин при 4000 я. К супернатанту (230 мп), медленно перемеши вая,...