Мекшенков

Номер патента: 1437392

Опубликовано: 15.11.1988

Авторы: Катковская, Мекшенков, Серегина

МПК: C12N 5/00

Метки: в-лимфоцитов, гибридных, используемый, клеток, культивируемых, человека, штамм

...50 мкг/мллипополисахарида из Е.со 1 и Роедееа Мгояеп (РММ) в разведении 1:100и инкубируют 48 ч при 37 С, в атмосфере 57 СО. Обработку РйМ и липополисахаридом проводят для активацииЛПК и увеличения частоты слияния,2 10 клеток НСИ.ТК .6410 с, находящихся в середине логаримической фазыроста смешивают с 2 10 .ЛПК. Смесь7клеток трижды отмывают от РСБ, центрифугируя их при 160 ц. После центрифугирования супернатант удаляютполностью и к осадку добавляют 1 мл457-ного (ПЧ) ПЭГ (м.м. = 4000).ПЭГ добавляют постепенно, осторожновзвешивая в нем клеточный осадок.Процедура добавления ПЭГ занимает1 мин, Еще 1 мин клетки инкубируют сПЭГ при комнатной температуреЗатемк инкубационной смеси медленно постенке центрифужной пробирки добавляют 1 мл КРМ...