Патенты с меткой «рекомбинантной»

Способ получения рекомбинантной днк, содержащей ген, кодирующий амилазу

Загрузка...

Номер патента: 1233805

Опубликовано: 23.05.1986

Авторы: Колетт, Коррине, Пирр, Рауль, Чарльз

МПК: C12N 15/00

Метки: амилазу, ген, днк, кодирующий, рекомбинантной, содержащей

...клокчговакие геи; а:ила.и -я,;бце уМ 781 ятьфа тт:уРргт мкг гтНК ,я:бдя 1 М 781 альфа Ату 1такое же когттчес гвс ЦНК плаз.тидырВР 322 разрезали Есс Е 1 при обычныхус.-.ов:лях, Связывание и трансформациювыполз:ллт: и метачке Описяннаи Вприм:ре 1. Каланчи Е, со 1 ттт содержа.шчт: рскамбинан "ную плязмиду, обнаружет:.ы по амилазной активности. Однатакая копания отобрана и обозначенаЕ, Гот 01, 7002 (рСР 2) и сдяка нахракэнис в 1 СВ 12 февраля 980 г.пад номерам т 1 С 1 В11573.Ауплифтлкяпля гена.Лмплфт;кяпия кодируютцего амитазугет 2 лямбдя мМ 781 ЯтльфЯ Лтт 1 Уи продуцирование амиляэы осушествлены сле-ютттм "б-;.:Бактерия - хозяин (Е, со 1 НВ 101)культлирозян в ЕВ среде с 2 мМохлоридя магния при. 3/ С до достижеь,.я оптичесьаи...

Способ получения рекомбинантной днк, кодирующей нуклеотидную последовательность инсулина

Загрузка...

Номер патента: 1308199

Опубликовано: 30.04.1987

Авторы: Аксель, Вильям, Говард, Джон, Питер, Рэймонд

МПК: C12N 15/00

Метки: днк, инсулина, кодирующей, нуклеотидную, последовательность, рекомбинантной

...9 мИ М 8 СС, 10 мИ дитиотрейтола, 50 мМ трех немеченных 10 деоксирибонуклезидтрифосфатов, 1 мМ меченого 32 в порции нуклеозидтриРфосфата с удепьной радиоактивностью1 - 10 Ки/ммоль, 50 мкг/мл к-ЛНК и 220 ед/мл обратной транскриптазы. Реакционную смесь инкубируют при 45 Со в течение 120 мин. Реакцию останавливают добавлением ЗДТА-Иа, до 25 мМ,экстрагируют фенолом и подвергают хроматографическому анализу на сефа дексе С, а затем осаждают этанолом, Порции продукта реакции с показателем от 500 до 1000 отсчетов в минуту анализируют с помощью электрофореза на геле. Полоса поглощения гетеродисперсоида сосредоточена вокруг 450 нуклеотидов по длине.Порции ДНК, полученные по примерам 1 и 2, порознь обрабатывают пищеварительными ферментами с...

Способ конструирования рекомбинантной плазмидной днк per-33, кодирующей зрелый -интерферон человека

Загрузка...

Номер патента: 1417800

Опубликовано: 15.08.1988

Авторы: Гюнтер, Марк-Брус, Норберт, Петер, Рудольф, Эва

МПК: A61K 38/21

Метки: per-33, днк, зрелый, интерферон, кодирующей, конструирования, плазмидной, рекомбинантной, человека

...тупой конец фрагмента размером 90 Ьр легируют с тупым концом КВБ и получают молекулы, в которых содержат КВБ в направлении ориентации вниз от промотора. После реакции лигазу инактивируют в течение 10 мин при 70 фС, устанавливают концентрацию ТА-буфера и дополнительно переваривают с помощью 200 единиц Ндпй 111 и 10 единиц Есо К 1. 50В образующихся в реакции мульти- мерах наряду с желательной реакцией могут.лигироваться друг с другом как Есо К 1-концы, так и также Нпй 111- концы и снова превращаться в мономеры. Затем пробу разделяют на 6 Е-ном полиакриламидном геле и вырезают из геля промотор-операторный КВБ-фраг мент. размером 100 Ьр, который имеет 0 8Есо К 1- и Нпй 111-концы электрофоретически элюируют, чтобы отделить от избытка...

Способ получения рекомбинантной плазмидной днк, кодирующей гормон роста крысы или человека

Загрузка...

Номер патента: 1436887

Опубликовано: 07.11.1988

Авторы: Аксель, Вильям, Говард, Джон, Питер, Рэймонд

МПК: C12N 15/00

Метки: гормон, днк, кодирующей, крысы, плазмидной, рекомбинантной, роста, человека

...0,1 ммоль ЭДТКдо 25 смоль и тДНК,После экстрагирования этанолом реакционной смеси и хроматографического анализа на БерЬайех С, 32 ркДНК, элюированную в пустой объем,осаждают при помощи этанола. В результате такой обработки обеспечивается высокий выход молекул кДНК, концы которой связаны основанием, Линкер Ыпй 111 лигируют с кДНК осущестовляют при помощи инкубации при 14 Св смеси бб ммоль трис-НС 1, рН 7,6,6,6 ммоль хлорида магния, 1 ммольАТФ, 10 ммоль дитиотрейтола, 3 ммольдекамера Нпй ТТТ с показателем 105отсчетов в 1 мин/мол и лигазы ДНК Т 4,приблизительно 500 ед./мл, в течение1 ч. Чтобы дезактивировать лигазу,ореакционную смесь нагревают до 65 С;которуи поддерживают в течение 5 мин,Предварительно к ферментам, содержащим...

Способ конструирования рекомбинантной плазмидной днк, кодирующей бычий гормон роста

Загрузка...

Номер патента: 1471949

Опубликовано: 07.04.1989

Авторы: Джозеф, Джон, Уолтер

МПК: C12N 15/00

Метки: бычий, гормон, днк, кодирующей, конструирования, плазмидной, рекомбинантной, роста

...Осуществляют процедуру такимже образом, как описано в примерах5(А) - (С), в которых использовалисьЕ, со 1 х КРЛ, Е. со 11 НВ 101, Е. со 11РР 50 или Е. со 1 ПРЯ иф Р, вместоЕ. со 1, Х 1776, Все условия идентичны и получают идентичные результаты.П р и м е р б. Для осуществления данного примера получают сДНК,кодирующую предшественник.гармонароста, как описано в примере 1. Вводят линкеры Нпй 111 и кДНК обрабатывают посредством Нпи 1 111 илиНзц 1, как описано в примере 4(А).Плазмиду рС 194, изолированнуюиз Б. ацгеце, используют в качествевектора, рС 194 расщепляют в зонеНпс 1 1 .1 посредством Нпй 111 илиНяц 1 и затем подвергают обработкещелочной фосфатазой,Полученную кДНК соединяют с расщепленной рС 194. Осуществляют трансформацив В. зцЬг 11...

Способ получения рекомбинантной плазмидной днк, кодирующей синтез бычьего или человеческого гормона роста

Загрузка...

Номер патента: 1491346

Опубликовано: 30.06.1989

Авторы: Бригитте, Рональд

МПК: C12N 15/00

Метки: бычьего, гормона, днк, кодирующей, плазмидной, рекомбинантной, роста, синтез, человеческого

...Абс ТТС ТСС ВСС СТС ТТТ ЮСС ААС ССТ СТССТ Ю ААС А 66 ССС САС ААА СБС ГТС ССА С 5 Конструируют указанную линкерную последовательность в соответствии с обычной методикой.Целевые трансформанты, обозначенные Е.со 1 д К 12 КЧ 309/рСЕ 112,2, помещают на ТЧ агар, содержащий соответствующие антибтотики, а затем обычным способом культивируют до получения и выделения плазмиды рСЕ 112,2. Эти трансформанты как показано по дан ным гель-электрофореза, К 1 А и других тестов, экспрессируют шей-ЬСН с вы 6 АС, ОЛТ ТДД АТС ттт сст ССТ в 1 111 111 11 Т 11 . 111, 11 СТС СТА АТТ ТАС ддд ОСА ССЯ ДАС ССТ СТ 6 СТ 311 111 1ТГО ССА С У 5 СТДОД 666 ТАТТЛЛТА, 1.1 11 1111 3 ТСССЯТЯАТТДТ АТВ ТСС ТТС ТСС СРС 111 11 11111 11 тдс АСС ДЯС АСС СССАТС фАТ 1 САС111 1 1....

Способ получения рекомбинантной плазмидной днк prh w11 или prh w12, кодирующей омега-интерферон

Загрузка...

Номер патента: 1572419

Опубликовано: 15.06.1990

Авторы: Гюнтер, Кристиан, Норберт, Петер, Рудольф, Эва

МПК: C12N 15/00

Метки: днк, кодирующей, омега-интерферон, плазмидной, рекомбинантной

...этих фрагментов. Сделан вывод, что в случае вставки клонов, Е 76 Е 9 и Р 9 А 2 речь идет о до сих пор неизвестных интерфероногенах, а именно о омега-интерферонах.Информацию об омега-интерферонах используют для того, чтобы переварить кДНК-ставку с рестрикционными эндонуклеазами. Образовавшиеся фрагменты лигируют в с 1 з ДНК-форму (репликативная форма) М 13 тпр 9 и секвенсируют с помощью дидеокси-метода Бащег. Однонитевую ДНК рекомбинантных фагов изолируют. Послесвязывания синтетического олигомера в четырех отдельных приготовлениях осуществляют двухнитевые синтезы при применении большого фрагмента ДНК-полимеразы 1 из Е.со 1 (фрагмент Кленова). В каждой из четырех частичных реакций добавляют один из четырех дидезоксинуклеозидтрифосфатов...

Способ конструирования рекомбинантной плазмидной днк, кодирующей синтез полипептидных субстанций против гепатита а

Загрузка...

Номер патента: 1469856

Опубликовано: 30.09.1990

Авторы: Ажикина, Анджапаридзе, Антонова, Арсенян, Балаян, Блинов, Вальяно, Василенко, Дроздов, Коврига, Кравченко, Кусов, Маркова, Насташенко, Овчинников, Петров, Приходько, Ростапшов, Рохлина, Свердлов, Серпинский, Снешков, Урманов, Фролов, Царев, Чернос, Чижиков

МПК: A61K 39/29, C12N 15/00

Метки: гепатита, днк, кодирующей, конструирования, плазмидной, полипептидных, против, рекомбинантной, синтез, субстанций

...эндонуклеазой рестрикции Вя 11 и затем Рз 1, как описанов примере 1, Полученный больший фрагмент лигируют с Вя 11 - (ЛРцц 11)Рзг.фрагментом длиной 1243 п.о., вьделенным из плазмиды рНА 123. Лигазной смесью трансформируют компетентные клетки штамма Е,.со 1 НВ 101 и в клонах, содержащих плазмиду со встроенным фрагментом, определяют ориентацию последнего с помощью эндонуклеаз рестрикции ЕсоВ. и Ваш 1,Клоны, содержащие плазмиды с нужной ориентацией фрагмента, наращиваютв среде Мс, тетрациклином и р -индЬ- дилакриловой кислотой, синтезируемый гибридный белок, содержащий полный 7 ф-интерферон человека и фрагменты белков ОРЗ (со 11 О по 23,а.к.) и УР5 (спо 271 а.к.) ВГА, выделяют из бактериальных клеток и используют дпя иммунизации морских...

Способ получения рекомбинантной плазмидной днк phtn 713, кодирующей фактор некроза опухоли человека

Загрузка...

Номер патента: 1614765

Опубликовано: 15.12.1990

Авторы: Масааки, Мицие, Юнити, Ясуджи

МПК: C12N 15/28

Метки: днк, кодирующей, некроза, опухоли, плазмидной, рекомбинантной, фактор, человека

...со скоростью потока, равной133 мп/ч. Элюат фракционируют по ф 1 акциям 10 мп. Фракции, обладающие цито"токсической активностью, :.бирают иобъединяют,Выделение цитотоксической активности на этой стадии составляет 533, удельная активность повышается приблизительно в 9 раэСоединенные активные фракции обессоливают и концентрируют до 1/10 объеУ ма ультрафильтрацией с помощью Оай 1 о .с использованием мембраны УМ 10,Концентрат подвергают препаративному изоэлектрофокусирующему гель-электрофорезу, Аликвоту концентрата наносят на пластинку из полиакриламидного геля (0,2 х 10 х 10 см) с градиентомрН от 5,6 до 6,1, созданном с помощью1 ишоЪ 1 чпе. Электрофореэ проводят принапряжении 2400 В в течение 16 ч при15 С, "ель нарезают на куски...

Способ получения рекомбинантной плазмидной днк pit337, экспрессирующей изопенициллин-n-синтетазу

Загрузка...

Номер патента: 1623567

Опубликовано: 23.01.1991

Авторы: Поль, Стефен, Сьюллен, Томас

МПК: C12N 15/52

Метки: pit337, днк, изопенициллин-n-синтетазу, плазмидной, рекомбинантной, экспрессирующей

...с 5 мкл1,5 МЬ Л 3 сог-ВагпН 1 рестрикционного фрагмента ппазмиды р 11335 до получения плазмиды 1. 7337, Реакционный объем составляет О мкл и включает указанные фрагментыДНК, 1,1 мкл ( 100 ед,) Т 4 ДНК лигазы, 3мкл 10-кратного лигирующего буфера (0,5 Мтрис-НС 1, рН 7,8; 100 мМ М 9 С 1 г; 200 мМ дитиотреитола ЭДТТ); 100 мМ АТР; и 1 мг/млВЯА/ и 13,4 мкл НгО. Реакционную смесьинкубируют при 15 С в течение 2 ч, послечего реакция практически завершается. Лигированная ДНК составляет целевую плаэмидную ДНК рТ 337.С, Конструирование Е,со 1 К 12ЯЧ 308/рТ 337.А, Конструирование Е.со К 12ЯЧ 308/ р 1 Т 337,50 мл культуры Е,со 1 К 12 ЯЧ 308 (ИЯЯВ - 15624) в-бульоне выращивают доО.Д 59 о 0,5 единиц поглощения, Культуруохлаждают на льду в...

Рекомбинантная плазмидная днк prd 100 источник зонда для идентификации возбудителя чумы, способ ее конструирования и штамм бактерий еsснеriснiа coli продуцент рекомбинантной плазмиды prd 100

Загрузка...

Номер патента: 1677059

Опубликовано: 15.09.1991

Авторы: Мишанкин, Подладчикова

МПК: C12N 15/31

Метки: бактерий, возбудителя, днк, еsснеriснiа, зонда, идентификации, источник, конструирования, плазмидная, плазмиды, продуцент, рекомбинантная, рекомбинантной, чумы, штамм

...геле,Лигазной смесью (1/10 ч) трансформируют штамм Е.со. После трансформации культуру высеивают на агаризованную средуВ, содержащую 50 мкг/мл ампицилли 1677059на, 40 мкг/мл индикатора Р -галактозидазной активности Хца 1 и 240 мкг/мл индуктора 3-галактозидазы ИПТГ (изопропил- /3-Д-тиогалактопиранозид). Через 14 - 20 ч на чашках вырастают колонии трансформантов. Рекомбинантные клоны отбирают по отсутствию Р -галактозицазной аос, поскольку у них нарушается способность синтезировать Р-галактозидазу из-за сдвига рамки считывания фермента при встраивании в векторную плазмиду фрагмента ДНК длиной 280 п.,о.Из клеток рекомбинантных клонов была выделена плазмидная ДНК, Анализ плаэмидных ДНК осуществляют с помощью рестриктаз Мзр 1 и Есой 1....

Способ конструирования рекомбинантной плазмидной днк, кодирующей зимоген с человека

Загрузка...

Номер патента: 1739854

Опубликовано: 07.06.1992

Авторы: Брайан, Нилс, Сау-Чи, Хармут

МПК: C12N 15/12

Метки: днк, зимоген, кодирующей, конструирования, плазмидной, рекомбинантной, человека

...хранятся под Р АТСС. СКЬ 9595. Клетки 293 выращивают в минимальной среде Игла с 103-.ной термоинактивированной лощадиной сывороткой прио37 С Гсреду меняют дважды в неделю).Среда состоит из Э МЕМ с 107 теля-.чьей сыворотки, 50 мкг/мл ентамицина 10 и 10 мкг/мл Агнца МЕРНУТОИ фитандиона витамина К 1, Клетки субкультивируют удалением среды, промывают раствором Хенка, прибавляют 0,257.-ныйтрипсин Гсодержащий 0,2 г/л ЭДТА) 15 на 1-2 мин, промывают свежей средой,отсасывают и распределяют в новыесосуды с отношением субкультивирования 1:5 или 1:10.За 1 день перед трансформированиемклетки высевают в количестве 0,х 10 бклеток на 100 мм чашку Петри, Стерильную, осажденную этанолом плазмиду ,ДНК растворяют в ТЕ-буфере и используютдля получения...

Способ конструирования рекомбинантной плазмидной днк, кодирующей фермент деацетоксицефалоспорин с синтетазудеацетилцефалоспорин с синтетазу

Загрузка...

Номер патента: 1739856

Опубликовано: 07.06.1992

Авторы: Поль, Стефен, Сьюллен, Томас

МПК: C12N 15/52

Метки: деацетоксицефалоспорин, днк, кодирующей, конструирования, плазмидной, рекомбинантной, синтетазу, синтетазудеацетилцефалоспорин, фермент

...связуйщей 5 молекулы обрабатывают Т 4 ДНК"кинаэойи затем аннелируют с.образованиемнеповрежденной связуюцей молекулы.1 мкл гидролизованной Ваш Н 1 ДНКплазмиды рМЬС 12 лигируют с 4 мкл 1 О Бсо 1 - Нсо 1 фрагмента плазмидырЬС 1 и 10 мкл аннелированной связующей молекулы.Лигазной смесью трансформируютЕ.со 1 Аликвоты трансформированной 15 клеточной смеси вжевают на чашкахс Ь-агаром, содержащим 25 мкг/млхлорамфеникола, 40 мкг/мл Х-да 1.и40 хмкг/мл 1 РТС. Чашки инкубируютнри 37 С в течение ночи. Колонии,окоторые содержат плазмиду беэ вставки, такие как Е.со 1 К 12 М 109//рМЬС 12, проявляют синий цвет наэтих чашках. Колонии, которые содержат плазмиду с вставкой, такие какЕ.со 11 К 12 1 М 109/рРБ 53, проявляютбелый цвет на этих чашках,...

Способ конструирования рекомбинантной плазмидной днк pps 20, кодирующей изопенициллин-n-синтетазу, способ получения штамма сернаlоsроriuм асrемоniuм, обладающего активностью изопенициллин-n-синтетазы

Загрузка...

Номер патента: 1780542

Опубликовано: 07.12.1992

Авторы: Поль, Стефен, Сьюллен, Томас

МПК: C12N 15/52, C12N 15/80

Метки: активностью, асrемоniuм, днк, изопенициллин-n-синтетазу, изопенициллин-n-синтетазы, кодирующей, конструирования, обладающего, плазмидной, рекомбинантной, сернаlоsроriuм, штамма

...3,7 ХааРестрикцибуфера и 85 мкл Н 20. Около 5 мкл (50 еди онного фрагмента получают и суспендир ютниц) рестрикционного фермента Н 1 пб - И 1 в 10 мкл Н 20.добавляют к раствору ДНК и полученный В, Окончательное конструированиераствор инкубируют при 37 С в течение 2 ч. плэзмид РРЯ 30 и РРЯ 30,1.Н 1 пб- расщепленную плазмиднуюРРЯ 21 А ДНК помещают на 1 агарозный 40 . Около 1 мкг плэз ДНКг плэзмиднои Д растворягель и проводят электрофорез до тех пор, ют в 2 мкл 10 Х Хмкл аа рестрикционного буфеН 1 пб - И 1пока. 3,45 кв, 3,16 кв, 1,2 кви 69 кв ра и 6 мкл Н О. 0 2и - рестрикционные фрагменты не ста- рестрикционного фермента Хаа 1 добавляновятся четко выделенными на геле. Выде- ют к раствор " ДЙКляют Н 1 пб - И 1ляют и - рестрикционный...

Рекомбинантная плазмидная днк pes78vcs-источник зонда для идентификации холерных вибрионов и штамм бактерий еsснеriснiа coli продуцент рекомбинантной плазмидной днк pes78vcs

Загрузка...

Номер патента: 1807081

Опубликовано: 07.04.1993

Авторы: Власов, Вуцан, Монахова, Седых

МПК: C12N 15/31, C12Q 1/68

Метки: pes78vcs, pes78vcs-источник, бактерий, вибрионов, днк, еsснеriснiа, зонда, идентификации, плазмидная, плазмидной, продуцент, рекомбинантная, рекомбинантной, холерных, штамм

...отбирали по признакуАр Тес,Из 12 различных по размерам встроенных фрагментов ДНК вибриона рекомби 40 нантных плазмид (случайная выборка) спомощью эндонуклеазы Нпб В были получены соответствующие фрагменты и испытаны на видоспецифичность в качествемолекулярных зондов, Радиоактивную мет 45 ку (32 Р-АТР или 32 Р-СТРг. Ташкент, межреспубликанское объединение В/О"Изотоп") вводили с помощью ник-трансляции,Гибридизацию проводили на нитроцел 50 люлозных фильтрах после получения на нихотпечатков колоний Ч.стоегае 01 ине 01(150 штаммов), и 12 других видов рода Ч 1 Ьг 1 о(всего 37 штаммов), а также шигелл, сальмонелл, аэромонад, алломонад, псевдомонэд55 и Е,соИ (всего 25 штаммов) и их соответствующей обработки с использованием модифицированного...

Способ получения рекомбинантной плазмидной днк рсдус 2. 27, кодирующей гликопротеин межклеточной адгезии

Загрузка...

Номер патента: 1809837

Опубликовано: 15.04.1993

Авторы: Дональд, Майкл, Тимоти

МПК: C12N 15/06

Метки: адгезии, гликопротеин, днк, кодирующей, межклеточной, плазмидной, рекомбинантной, рсдус

...СОМ 8, она демонстрируетналичие как зависимых от ЗСАМ, так инезависимых от 1 САМкомпонентов адгезии, зависящей от ЛФА. Трансфецированные клетки СОЯ инкубируют в покрытыхЛФАчашках Петри при наличии моноклональных антител 3 САМдля предотвращения выделения кодирующей ДНК ЗСАМ, 15Адгезированные клетки элюируют ЭДТА, аплазмиды выделяют и амплифицируют, После трех циклов трансфекции, адгезии, выделения плаэмиды и фракционирования поразмерам, 30 плазмид анализируют с использованием рестрикционной эндонуклеазы, Из трех плазмид со вставкой более 1,0тыс. пар оснований (т.п,о,) одна, введеннаяв клетки СОЯ посредством трансфекции,обуславливает адгезию по отношению к,25Л ФА.П р и м е р 2. Характеристика последовательности, кодирующей ДНК 3...

Способ получения днк,кодирующей гормон роста лосося, способ конст-ния промежуточной рекомбинантной плазмидной днк, содержащей днк-фрагмент, кодирующий гормон роста лосося, для получения плазмид ps gh1, ps gh3,

Загрузка...

Номер патента: 1825376

Опубликовано: 30.06.1993

Авторы: Акико, Мориюки, Сейга, Сусуму, Тамио

МПК: C12N 15/18, C12N 15/70

Метки: гормон, днк, днк,кодирующей, днк-фрагмент, кодирующий, конст-ния, лосося, плазмид, плазмидной, промежуточной, рекомбинантной, роста, содержащей

...экстрагируют смесью фенола с хлороформом и осаждают этанолом с получением 0,5 пмоля кДНК-вектора-затравки ДНК, связанной с (дЦ) цепями. Затем 0,08 пмоля ДНК и 0,16 пмоля упомянутой связующей ДНК добавляют к 40 мл раствора, содержащего 10 мМ трис-НС (рН 7,5), 0,1 М йаС и 1 мМ ЭДТА, и инкубируют при 65 С, 42 С и 0 С в течение соответственно 10, 25 и 30 мин. Реакционный раствор доводят до 400 мл (полный объем) раствора. содержащего 20 мМ трис-НС 1 (рН 7,5) 4 мМ МцС 12, 10 мМ (НН 4)2504, 0,1 М КС 1 и 0,1 мМ Р.НАД, К реакционному раствору добавляют 10 единиц ДНК-лигазы Езсег 1 сЬ 1 а со 11 и инкубируют в течение 1 сут при 11 С. Реакционный раствор доводят до раствора, содержащего 40 мкМ дНТФ и 0,15 мкМ /3-НАД. Затем добавляют пять единиц...

Рекомбинантная плазмидная днк р28сме, кодирующая синтез полипептидов для получения живой рекомбинантной вакцины против клещевого энцефалита, и способ ее конструирования

Загрузка...

Номер патента: 1490963

Опубликовано: 07.07.1993

Авторы: Беляев, Вторушина, Данилюк, Добрикова, Куличков, Малыгин, Мамаев, Матвеев, Плетнев, Прессман, Приходько, Путинцева, Синяков, Хромых, Шевлягина, Ямщиков

МПК: C12N 15/00

Метки: вакцины, днк, живой, клещевого, кодирующая, конструирования, плазмидная, полипептидов, против, р28сме, рекомбинантная, рекомбинантной, синтез, энцефалита

...Ввш Н 1 зндонуклеаз рестрикции, Из полученной таким образомплазмиды р 2823, содержащей правильно состыкованные 28 к промотор иструктурные гены ВКЭ, выделяют ВвпН 1 ЕсоК 1 фрагмент ДНК длиной 2304 п.о,Фрагмент состоит из ВапН 1-НдпйШфрагмента ДНК плвзмиды рВК 322 длиной 346 п.о., НпйП 1-ЕсоК 1 синтетического Фрагмента ДНК длиной74 п.о, и ЕсоК 1-ЕсоК 1 фрагментаДНК длиной 1784 и.о содержащегогены ВКЭ, Для окружения промотораи генов ВКЭ участками ТК-геня ВОВвыделенный ВвшН 1-ЕсоКЕ Фрвгмент лигируют с большии ВвпН 1-ЕсоК 1 фрагментом ДНК вектора р ЧАК 15 и лигазной смесью трансФормируют компвтентные клетки Е. со 11. НВ 101. Искомые клоны идентифицирует методомДНК - ДНК гибридизации на Р-мечез 2ный Рьс 1-РвС 1 фрагмент к ДНК ВКЭ,Наличие в...

Способ получения рекомбинантной плазмидной днк и способ получения зимогенной формы белка с человека

Загрузка...

Номер патента: 1838411

Опубликовано: 30.08.1993

Авторы: Бриан, Брус

МПК: C12N 15/09, C12N 15/15, C12P 21/02 ...

Метки: белка, днк, зимогенной, плазмидной, рекомбинантной, формы, человека

...типичных эукариотических клеток, включая клетки линии АУ 12, и к векторам экспрессиинастоящего изобретения,30 Клетки 293 были получены из АТСС (подномером СР 1573) в 25-мм -колбе, содер 2жащей сплошной монослой около 5,5 х 10клеток в минимальной поддерживающейсреде Игла (ОЬсо) с 10; термо-инактивиро 35 ванной лошадиной сывороткой, Колбу инкубировали при 37 С, а среду меняли два разав неделю. Среда состояла из ОМЕМ (ОЬсо),дополненной 10 оь околоплодной сывороткой,.теленка, 50 мкг/мл гентамициа, и 1040 мкг/мл витамина К 1, фитонадиона АкваМефитон В Мегс: ЯЬагр В ОоЬпе, Мегс В СоЗлс., ЧЧезт Ропс, РА, 19486). Клетки суб культивировали путем удаления среды, промывания сбалансированным голевым45 раствором Хэнкса (ОЬсо), добавления в течение...

Способ получения рекомбинантной плазмидной днк, кодирующей бычий гормон роста, способ биосинтеза производного бычьего гормона роста

Загрузка...

Номер патента: 1838412

Опубликовано: 30.08.1993

Авторы: Бригитте, Рональд, Хансен

МПК: C12N 15/18, C12N 15/70

Метки: биосинтеза, бычий, бычьего, гормон, гормона, днк, кодирующей, плазмидной, производного, рекомбинантной, роста

...трансформантыэкспрессируют вышеупомянутое производное МЕТ бГР с высокими уровнями, Поскольку плазмида рАТ содержит15 термоиндуцируемый репликон неконтролируемого роста, максимальная экспрессияжелаемого продукта производного бГР происходит при культивировании при температурах около 37 С,20 П р и м е р 9. Конструирование плазми 25 ДНК; ССС ЛАС ССТ СТССТ 3ССС ТТС ССЛ С 515 30 35 40 ки, и затем культивируют для последующего продуцирования и выделения плазмиды45 рАЯР 1. Как показано ЯОЯ-гель-электрофо 50 55 В, Лигирование и трансформация,Примерно 20 пикомолей линкернойДНК примера 7,Б, 1 мкг перевара рММ 608примера 7,А, 0,5 мкг ВаоН 1-ЕсоВ 1 фрагмента примерно 10,2 3 сЬ плазмиды рСЕ 101(полученного в соответствии с методикойпримера 2;Б, с...

Рекомбинантная плазмидная днк ртnf 22, содержащая полусинтетический ген фактора некроза опухоли человека промежуточная плазмида для конструирования рекомбинантной плазмидной днк ptnf 31, кодирующая полипептид с

Номер патента: 1438240

Опубликовано: 20.03.1996

Авторы: Болдырева, Добрынин, Коробко, Кравченко, Недоспасов, Турецкая, Филиппов, Чувпило, Шахов, Шингарова

МПК: C12N 1/21, C12N 15/28

Метки: ген, днк, кодирующая, конструирования, некроза, опухоли, плазмида, плазмидная, плазмидной, полипептид, полусинтетический, промежуточная, рекомбинантная, рекомбинантной, ртnf, содержащая, фактора, человека

1. Рекомбинантная плазмидная ДНК pTNF 22, содержащая полусинтетический ген фактора некроза опухоли человека, - промежуточная плазмида для конструирования рекомбинантной плазмидной ДНК pTNF 31, с мол.м. 3,6 MD (5,95 т.п.о. ), содержащая:Bam I - Hind III-фрагмент ДНК плазмидного вектора PVR 291 с промотором, оператором и измененным геном -галактозидазы, кодирующим 1027 аминокислотных остатков размером 5,35 т.п.о.;Bam I - Msp I-фрагмент синтетической ДНК с участком, инициации трансляции Escherichia coli, инициирующим кодоном ATG и 31 N-концевым кодоном фактора некроза опухоли размером 120 тыс. п.о.;Msp I - Hind III-фрагмент ДНК рекомбинантного фага l 422 с...

Рекомбинантная плазмидная днк pga 23 промежуточный продукт для конструирования рекомбинантной плазмидной днк ptnf 311, -, рекомбинантная плазмидная днк ptnf 311, -, кодирующая полипептид со свойствами фактора н

Номер патента: 1445193

Опубликовано: 20.03.1996

Авторы: Болдырева, Добрынин, Коробко, Кравченко, Максимова, Недоспасов, Турецкая, Филиппов, Чувпило, Шахов, Шингарова

МПК: C12N 1/21, C12N 15/28

Метки: днк, кодирующая, конструирования, плазмидная, плазмидной, полипептид, продукт, промежуточный, рекомбинантная, рекомбинантной, свойствами, фактора

1. Рекомбинантная плазмидная ДНК pGA 23 - промежуточный продукт для конструирования рекомбинантной плазмидной ДНК pT pTNF311 с мол.м. 2,5 МД, содержащая:Rst I -Bam I-фрагмент ДНК плазмиды p 4256 с тандемом промоторов A2 и A3 ранней области фага T7 и с частью гена b лактамазы размером 1,01 т.п.о.;Bam I - Pst-фрагмент ДНК плазмиды pDSI T0 2+ с геном дигидрофолатредуктазы, хлорамфениколацетилтрансферазы с терминатором транскрипции фага l и частью гена b -лактамазы;генетические маркеры:ген b -лактамазы и хлорамфениколацетилтрансферазы, детерминирующие устойчивость трансформированных плазмидой pGA 23 клеток Escherichia coli к...