C12N 9/38 — действующие на бета-галактозо-гликозидные связи, например бета-галактозидаза

Номер патента: 398603

Опубликовано: 01.01.1973

Авторы: Загустина, Куликова, Тихомирова, Тронина, Фениксова

МПК: C12N 9/38

Метки: 398603

...накапливается до 2000 од:ниц з-галактозидазы. В культураль,ную жидкость переходит до 98% йсего синтезированного фермента,Активность з-гал актозидазы определяетс я колорюетрическп по появлению окрашенных молекул ортонитрофенола, оовобождающегося под дейспвнем фермента из бесцветиого ортопитро-феннл-з-Р-галактопиранозида прп рН равном 4,2. Среда 245В среду1 добавляют 2 - 10 г/л галактозыпри этом выход фермента увеличивается на 20 30 О/о, по сравнению со средой1,Выход р-галактозидазы для Л(еп 1 ага -160 единиц на 1 г кулыпуральной иидкости и40 едппгнц остается в мицелии, выросшем в 601 л среды,Среда 4Кукурузный экстрактЛактоза Выход р-галактозидазы для А 1 егпага на 1 л культуральной жидгкосли 500 единиц и 600 единиц остаетоя...

Номер патента: 891776

Опубликовано: 23.12.1981

Авторы: Бабенко, Васильева, Духович, Кондратьева, Михайлова, Момот, Парр, Рабинович, Селезнева, Столыпин, Терешин

МПК: A61K 38/46, C12N 9/38

Метки: галактозидазы, препарата, ферментного

...(-20) С на 15 ч, оттаивают при комнатной температуре, фильтруют с наполнителем на рамном Фильтр-прессе. Выход на стадии Фильтрации 80%. Натинный раствор с активностью2,7 ед/мл в количестве 20 л концентрируют в 10 раз по объему на ультраФильтрационной установке фирмы "И 1111 ро ге" на мембРане типа РТНК 00005. Получают 2 л раствора с активностью 26 ед/мл, выход на стадии 96,3 Е, Полученный раствор поцкисляют 3 н. НС 1 при перемешиваняи до рН 3,5 инактивации не наблюдается. -Галактозидазу из раствора сорбируют высокодисперсной формой смолы КМТ (ТУ-09-10-456-75) (40-60 мкм в количестве 100 г) па послойной ионообменной колонне, где смола (по 10 г) расположена 1 см - слоем на 10-и последовательно соединенныхкольцах.Смолу готовят путем...

Номер патента: 952111

Опубликовано: 15.08.1982

Авторы: Киеси, Рейсуке, Тан

МПК: C12N 9/38

Метки: галактозидазы

...в воде, 2 мл 0,2 М забуференного раствора макильвана (рН 1,5) и, 1 мл раствора 20 энзима, смесь нагревают при 37 Со 15 мин для вызывания энзиматицеской реакции. После этого реакционную Субстрат (гликозиды) Лактозао-НитрифенилО-галактониранозид и-НитрофенипО-галактониранозидМолекулярный вес(по гелевому методу)Оптимум рН Активное рН (пределы, в которыхактивен энзим) Оптимум температуры, о С Активная температура (пределы темо пературы, в которых активен энзим) С Стабильность при рН (предел рН, в котором энзим стабилен при стоянии в течение 24 ч при 4 С) Термическая стабильность (остаточная1 у.галактозидазная активность послестояния 15 мин при рН 6), Ф притемпературе, Со 1 6смесь смешивают с 1 мл водного 1 Мраствора карбоната натрия для...

Номер патента: 1082812

Опубликовано: 30.03.1984

Авторы: Виха, Жолудева, Касьянова, Кудрявцев

МПК: C12N 9/38

Метки: галактозидазы

...рехроматографии на ДЭАЭ-целлюлоза, уравновешенной 0,005 М фосфатным буфером,210 - - 110 )М дитиотреитола и2 10 - 1-10 М МАСС (буфер А)Элюцию 8-галактозидазы проводят ли нейным градиентом НаСР 0,05-1 М в бу,фере А. Фермент выходит при концентрации МаСР 0,25-0,45. Активныефракции концентрируют и диализуютпротив буфера А.50Удельная активность р -галактозй- .даэы на этой стадии 23,4 Е/мг белка,выход по белку 12,1, по общей активности 190.Рехроматографию на ДЭАЭ-целлюлозепроводят в тех же условиях и получают препарат с удельной активностью198 Е/мг белка, выходом по белку 8,6и 220 по активности.Препарат подвергают хроматографии на ДЭАЭ-сефадексе, уравновешенном 0,05 М ацетатным буфером (рН 7,0),содержащим 0,005 М МаСР, 10 +М дитиотреитола и...

Номер патента: 1089119

Опубликовано: 30.04.1984

Авторы: Кордюм, Сорочинская, Черных

МПК: C12N 9/38

Метки: лактамазы

...эту культуру из-за снижения частоты рекомбинации между гомологичными последовательностями фагаи плазмиды рВ 322, имеющими место в виде Ар-гена. Мутация в гес А-гене это условие выполняет.1Культуру Е.соб 63101 наес А 13 бн с плазмидой рВК 322 выращивают до плотности 1 МО клеток в81 мп при 37 С и доводят до постоянной скорости роста, затеи заражают фагомс Ар-геном в соотношении 10 фаговых корпускул на 1 бактериальную клетку, инкубируют 2,5-3 ч при 37 С, а затем инкубнруют 14 -О15 ч при 28 С,. Инкубирование культуры, зараженной Фагом 3 , при 28 С способствует замедлению лизиса клеток так как оптимальной для разЭовития фага является 37 С. Замедление лизиса клеток способствует накоплению /3 -лактамазы, для чего используют ааЬег -мутации в...

Номер патента: 1353807

Опубликовано: 23.11.1987

Авторы: Орещенко, Рафаловская, Шишкова

МПК: C12N 9/38

Метки: глюканазы

...в 1,9 раза, а 30 степень очистки фермента увеличена на 6,3 ,.П р и м е р 3. Способ получения высокоочищенного препарата-глюканазы из протосубтилина Г 10 х аналогичен способу, описанному в примере 1, до стадии гель-Фильтрации на сефадексе С. Колонку с сефадексом уравновешивают 2 10 М ацетатным буфером рН 6,2, содержащим 0,005 М СаС 1 На колонку наносят 500 мл Ферментного раствора активностью 3 -глюканазы 23,3 ед/мл и содержанием белка 10,2 мг/мл, скорость гель-Фильтрации 0,5 мл/мин см . После гель-Фильтрации 45 получают 1800 мл обессоленного раствора активностью-глюканазы 5 ед/мл и содержанием белка 2 мг/мл. В этот раствор добавляют цистеин в количестве 0,05 мг на единицу активности50 Р -глюканазы и наносят на колонку с-г...

Номер патента: 1431681

Опубликовано: 15.10.1988

Авторы: Клаус, Ральф

МПК: C12N 15/00, C12N 9/38

Метки: coli-продуцент, бактерий, галактозидазы, еsснеriснiа, штамм

...колонии. Все колонии собирают, 1 О очищают и отделяют.Каждая из полученных указанным способом колоний обладает способностью использовать рафинозу в качестве единственного источника углерода и одно временно была устойчива к действию ампициллина. Таким образом, они обладают иными свойствами по сравнению со штаммом, который был применен в качестве организма-хозяина. 20Из полученных колоний в каждом случае выделяют плазмидную РБА.Отбирают плазмиду из колоний, которые после обработки ферментом Есо В 1 или Нпй 111 дают меньший второй фрагмент, чем плазмиды других колоний. Бактерии, которые несут эту плазмиду, могут использовать рафинозу в качестве единственного источника углерода и про изводить все ферменты-оперона. По 10 мкг РБА рВТ 100 иэ...

Номер патента: 1509402

Опубликовано: 23.09.1989

Авторы: Билай, Гомартели, Квеситадзе, Церетели, Школьный

МПК: C12N 1/14, C12N 9/38

Метки: галактозидазы, гриба, продуцент, штамм

...мм, картофельно-глюкоэная среда: 5-й день 40 мм, 10-йдень 55 мм, среда Сабуро; 5-й день 2530 мм, 10-й день 50 мм, агаризованная среда с лактозои: 5-й день 38 мм,10-й день 60 мм.На отрубях растет хорошо. Отношение к углеродному питанию: усваивает 30лактозу, сахароэу, глюкозу, галактору мальтозу, фруктозу, арабиноэу,крахмал, инулин, сорбит, маннит и др.Отношение к азотному питанию. Хорошо усваивает нитратный азот, лучшеаммонийный, из органических источников азота ассимилирует пептон, мочевину, кукурузный экстракт и др.Отношение к кислороду. Облигатныйаэроб. 40Отношение к температуре. Иезофил,оптимальная температура роста 28 -30 С.Отношение к кислотности среды.астет в шир редел рН 2 О 9 хО 45При выращивании Репхсх 11 цш саттпезсепз ТКна...

Номер патента: 1738854

Опубликовано: 07.06.1992

Авторы: Беккер, Иванова, Морозова, Флях

МПК: C12N 1/14, C12N 9/38

Метки: canescens, галактозидазы, гриба, продуцент, реniсilliuм, штамм

...среде с соевой 50мукой иминеральными солями в течение.72 ч активность внеклеточной Р-галактозидазы штамма ТКсоставляет 60 ед,/млкультуральной жидкости (гидролиз ОНФГпри 30 С), 5Недостатком штамма Р. сапезсепз ТК -85 является низкий уровень синтеза Р -галакт,.озидазы,Наиболее близким к предлагаемому посовокупности признаков (вид продуцента,,5далее стелющийся. Конидиеобразование умеренное, Конидии светло-серые с голубо-. ватым оттенком, по краю колоний голубые. 5 Образуются равномерно по всей поверхности колоний, Обратная сторона колоний складчатая, темно коричневая.Агаризованная среда Чапека с глюкозой и добавлением кукурузного экстракта 10 (10 сут роста, 29 С), Диаметр колоний равен 5,0-6,0 см. Воздушный мицелий пушистый; местами...

Номер патента: 1768638

Опубликовано: 15.10.1992

Авторы: Данилевич, Калугина, Линд, Молотов, Суходолец

МПК: C12N 1/20, C12N 9/38

Метки: sтrертососсus, бактерий, галактозидазы, продуцент, тнеrморнilus, штамм

...Времяферментации 12 ч, Фермент выделяется в культуральную жидкость, Преимуществом данного штамма по сравнейию с известным штаммом является короткое вр,емя ферментации, а таже способность данного штамма продуцировать внеклеточную Р-галактоэидазу. Следует отметить, что новый продуцент ф-галактозидаэы получен на основе уже применяемого в молочной промышленности штаммаБтгерюсоссцз йеппорЫцз 6 кб, таким образом использование соэаданного намиштамма позволит беэ именения существующей технологии получать сыворотку с гидролиэованной лэктоэой.Штамм Зсгер 1 ососсцз 11 егглорЫцз СМ 1351 депонирован во Всесоюзной коллекции промышленных микроорганизмов института ВНИИгенетика под номером В - 5392.Штамм Ятгертасоссцз тЬеппорЫцз СМ 1351 имеет...