Способ внутригрупповой дифференциации вирусов коксаки в

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 2 И 7/О МИТЕТ СССРИЙ И ОТКРЫТИ ОСУДАРСТВЕННЫЙПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТ ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТ следовате пидемиоло(54) СПОСОБ ВНУТРИГРУППОВОЙ ДИФФЕРЕН-. ЦИАЦИИ ВИРУСОВ КОКСАКИ В(57) Изобретение относится к вирусологии и касается способа внутригруппой дифференциации вирусов Коксаки В. Для осуществления способа исследуемой вирусной суспенэией заражают культуру клеток ФЭЧ, которые инкубируют, и определяют цитопатический эффект, при наличии последнего дифференцируют вирусы Коксаки В 1, ВЗ, В 5, Вб. В случае отсутствия этого эффекта повторно заражают исследуемой суспензией клетку того же типа, инкубирование ведут в присутствии трипсина и при наличии цитопатическо- ас го эффекта на этом этапе ди 4 ференцируют вирусы Коксаки В 2, В 4. 1 табл,1425204 Изобретение относится к медицинской вирусологии и может быть использовано для дифференциации внутри подгруппы вирусов Коксаки В и их ди 5 агностики.П р и м е р. Исследованию подвергают стандартные штаммы подгруппы ирусов Коксаки В (Коксаки В 1 - Соп)песдси, Коксаки В 2 - ОЫо, Кокса ки ВЗ - Иапсу, Коксаки В 4 - дчВ, Коксаки В 5 - Гац 1 Кпег, Коксаки ВЬ - Бсйппй), а также .13 штаммов энтеровирусов подгруппы Коксаки В, выделенных от больных серозным менингитом, герпангиной, а также из водных обьектов окружающей среды, Индикацию вирусов химическим соединением проводят в культуре клеток (ФЭЧ). Клетки ФЭЧ выращивают в растворе Хенкса, содержащем 0,5% гидролизата лактапьбумина и 10% сыворотки крупного рогатого скота, За 3 ч до внесения вируса проводят смену на среду того же состава без сыворотки, но с добавле нием аморфного трипсина в конечной концентрации 50 мкг/мл, Вируссодержащий материал вносят на монослой после удаления среды из расчета 0,1 мп10 ЦПД /мл на 250 тыс, клеток и после часового контакта культуру заливают средой, содержащей трипсин в такой же концентрации (50 мкг/мл) иоинкубируют при 37 С. Аналогичным образом инфицируют культуру ФЭЧ в питательной среде, в которую не добавлен трипсин. Инфицированные пробирки инкубируют при 37 С в течение 48-72 ч. Результат оценивают по ЦПД вируса,Штамм пределение типов кишечных вирусов Размножение в ФЭЧ в при сутствии трипсина (50 мкг/мл) Типирование иммунными сыворотками Размножениев ФЭЧ Коксаки В 1 Коксаки В 2 Коксаки ВЗ Коксаки В 4(чВ) Коксаки ВЗ Коксаки В 4+в Коксаки В 5 Коксаки ВЬКоксаки ВЬ (БсЬпЫс) Коксаки В 1 (СоппесдсцС)Коксаки В 2 (ОЬо) Коксаки В 5 (Рац 1 Кпег) в случае его развития в ФЭЧ без добавления к питательной среде трипсина, исследуемые штаммы относят к Коксаки В 1, ВЗ, В 5, ВЬ, а в случае развития в ФЭЧ на трипсинсодержащейсреде (при отсутствии такого эффектав ФЭЧ без трипсина) его относят кКоксаки В 2 и В 4,Принадлежность вирусов к КоксакиВ 1, ВЗ, В 5 Вб и Коксаки В 2, В 4 контролируют и подтверждают типированиемвирусных агентов иммунными сыворотками в реакции нейтрализации.Сравнительные данные по дифференциации стандартных штаммов вирусовКоксаки Б внутри своей подгруппы вкультуре клеток (ФЭЧ) приведены втаблице,Использование способа позволяетпроводить дифференциацию вирусов Коксаки В внутри группы, что повыситточность диагностики. Формула изобретения Способ внутригрупповой дифференциации вирусов Коксаки В, заключающийся в том, что исходной вирусной суспензией заражают культуру клеток ФЭЧ,инкубируют и при наличии цитопатического эффекта дифференцируют вирусыКоксаки В 1, ВЗ, В 5, ВЬ, а при отсутствии его дополнительно заражают исследуемой суспензией культуру клетокФЭЧ, инкубируют в присутствии 50,0+фЬ,Ь мкг/мл трипсина и при появлениицитопатического эд;фекта дифференцируют вирусы Коксаки В 2, В 4,