Войтенок

Номер патента: 1747484

Опубликовано: 15.07.1992

Авторы: Войтенок, Колесникова, Лях, Мисуно, Панютич, Петевка, Шидловская

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulusl, моноклональных, некроза, опухолей, рекомбинантному, фактору, человека, штамм

...После отмывания инкубируют с меченными пероксидазой к иммуноглобулинам мыши энтителами в разведении 1:2000 на ФСБ-БСА в течение 1 ч, Ферментную реакцию проводят в течение 10 мин. Раствор субстрата представляет собой 0,1 М цитратный буфер (рН 4,7) с 0,6 мг/млортофенилендиамина гидрохлорида и 0,01 % перекиси водорода. Реакцию останавливают через 10 мин 1 М серной кислотой и учитывают на спектрофотометре с вертикальным лучом при длине волны 492 нм,Результаты эксперимента по изучению специфичности связывания МКА, продуцируемого клетками штамма 10 ГИ, с антигенами, иммобилизированными на пластике, представлены в табл.1,Результаты исследований свидетельствуют о более высокой специфичности МКА, продуцируемых клетками штамма 1 ОРИ по...

Номер патента: 1733470

Опубликовано: 15.05.1992

Авторы: Войтенок, Панютич, Прасолов, Резников, Чумаков, Шидловская

МПК: C12N 5/10

Метки: антитела, белкам, гибридом, моноклональные, продуцирующих, рекомбинантным

...клетки ресуспендиравали в0,02 М фосфатном буферном растворе с0,15 М КаС, Клетки вводили внутрибрюшинно (в/б) по 10-20 млн, на мышь, чтосоответствует оптимальному количеству45 клеток для получения ЫКА к корпускулярным антигенам и/или внутриселезеночно(в/с) по 200-400 тыс, клеток на мышь, какописано Яри ес а. При комбинированномспособе иммунизации клетки вводили в/с50 через 21 сут после иммунизации в/б,Для оценки индукции иммунного ответаспленоциты культивировали в МОМ с 10;,ЭТС в концентрации 3-5 млн/мл в течение5 сут супернатанты тестировали методом55 иммуноферментного анализа (ИФА) по следующей схеме. Рекомбинантный ГР или бычий сывороточный альбумин (БСА)сорбировали в лунках микроплат (Мопсгппщпораде 1) (500 нг/лунку в 0,1 М...

Номер патента: 1684339

Опубликовано: 15.10.1991

Авторы: Агапов, Войтенок, Грэн, Коричнева, Кушниров, Панютич, Скрябин, Смирнов, Тер-Аванесян, Тоневицкий, Ураков, Циманис

МПК: C12N 15/26

Метки: cerevisiae, sасснаrомyсеs, дрожжей, интерлейкина-2, продуцент, человека, штамм

...содержащий структурную область гена интерлейкиначеловека, и в результате получают плазмиду рА 19, Есой-Яа 1 1 - фрагмент (1,8 т.п,н) плазмиды рА 19 клонируют по тем же сайтам в плаэмиду рГТР 4, сОдержащую терминатор транскрипции гена кислой фосфата з ы Р Н 05.В полученной таким образом плаэмиде рУ 116 сайт Есой 1 затем заменяют при помощи линкеров на сайт Вагп М 1, в результате получают плазмиду рУ 116 В. Ващ М 1 - Нпд 111 - фрагмент плаэмиды рУ 116 В клонируют в плазмиду рЗОВ 207 и получают плазмиду рЯ 1711 размером 8,9 т,п,нсодержащую ген ИЛчеловека под контролем препрообласти гена альфа-фактора и способная к репликации в дрожжах.Штамм бВ-Н 28/рЯ,.11711 - продуцент интерлейкиначеловека получен трансформацией клеток Я,сегеч 1 з 1...

Номер патента: 1553903

Опубликовано: 30.03.1990

Авторы: Войтенок, Иощенко

МПК: G01N 33/50, G01N 33/68

Метки: активности, дегидрогеназ, лимфоцитах

...в отличие от известного способа, по которому содержание лимфоцитов с нулевой активностью значительно (около чОЕ).П р и м е р . Определение активности сукцинатдегидрогеназы.Испытания проведены на 20 белыхбеспородных крысах массой 200-230 г.Кровь получали путем пункции хвостовой вены. Готовили по 4 мазка кровиот каждой крысы, один из которых обрабатывали предложенным способом,35второй - без субстрата окисления всреде инкубации (контроль), третий -по способу-прототипу, четвертый - попрототипу, но без субстрата окисления в среде инкубации (контроль).Приготовление препарата предложенным способом производилось в следующейпоследовательности.Свежеприготовленные мазки крови сушили при комнатной температуре 30 мин,45Далее предметные стекла...

Номер патента: 1530638

Опубликовано: 23.12.1989

Авторы: Войтенок, Панютич, Турецкая

МПК: A61K 39/395, C12N 15/00

Метки: альфа, антитела, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклонального, некроза, опухолей, продуцент, фактору, человека, штамм

...н жидкий азот, Размораживание на водяой бане при 37 С, Жизнео,способность клеток после размораживания 65-707. по окрашиванию трипаноным синим.П р и м е р 1. Гибридомные клеткипомещают н стеклянньп Флакон объемом50 мл по 1 х 10 клеток в 5 мл средыбс 107. ЭТС, 2 мМ со -глютамина,100 мкг/мл пенициллина и стрептомицина. 0,05 и меркаптоэтанола, Клетоки культивруют 2-3 дня при 37 С ватмосфере 5",. СО, Полученньй супернатант используют н качеств реагентан иммунохмических реякцях (как препарат монАТ). Тест н определение специфичностинзгимодействия монАТ с ацтигенами,иммобилизонанными на пласгик,Используемый метод: гм;уноферментный анализ.Р ФНО- К, Р ФНГ)-1." и бычий сывороточный альбумин (БСА) в количестве0,5 мкг н 50 мкл 0,1 М...

Номер патента: 1521776

Опубликовано: 15.11.1989

Авторы: Войтенок, Добрынин, Коробко, Недоспасов, Панютич, Турецкая, Чувпило, Шахов, Шингарова

МПК: A61K 39/395, C12N 15/00

Метки: активность, антитела, биологическую, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклонального, нейтрализующего, некроза, опухолей-альфа, продуцент, фактора, человеческого, штамм

...кроличьими антимьшгиными антителами. Все отмывкипроводят бидистиллированной водой.Контролем служит бычий сывороточныйальбумкц в качестве антигена.Стабильность продукции. ПродукцияьанАТ сохраняется как минимум до 15пассажей 1 п ч 7.сто, Б асцитной формештамм не пассировался более одногораза,Криоконсервирование. Для длительного хранения клетки штамма замораживают в эмбриональной телячьей сыворотке с добавлением 10% диметилсульфоксида. Режим замораживания: 1 С/миндо минус -70 С. После замораживанияклетки переносят в жидкий азот, Разморая(иванне на водяной бане при 37 С,Жизнеспособность клеток после размораживания 60-70% по Окрашиванию три"пановым синим,П р и м е р 1, Гибридамцые клеткипомеШаот в стеклянный Флакон объемомГ50 мл по...

Номер патента: 1507791

Опубликовано: 15.09.1989

Авторы: Войтенок, Добрынин, Коробко, Недоспасов, Панютич, Турецкая, Чувпило, Шахов, Шингарова

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антитела, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклонального, некроза, опухолей-альфа, продуцент, фактору, человека, штамм

...Для длительного хранения клетки штамма замораживаат в эмбриональной телячьей сыворотке с добавлением 10% диметилсульфоксида. Режим замораживания: 1 С/мин до -70 С. После замораживания клетки переносят в жидкий азот. Размораживание на водяоной бане при 37 С. Жизнеспособность клеток после размораживания 55-60% по окрашиванию трипановым синим.Контаминация, Бактерии и грибы в культуре. не обнаружены при длительном наблюдении и посевах на питательные среды. Заражение микоплазмой не выявлено при окрашивании красителями на ДНК и по характеру включения тимидиновой метки.П р и м е р 1, Тест на определение специфичности взаимодействия мои АТ с антигенами, иммобилизованными на пластине Р ФНО-с, Р ФНО- и БСА. в количестве...

Номер патента: 1472497

Опубликовано: 15.04.1989

Авторы: Бундулис, Войтенок, Панютич, Скривелис, Циманис

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, еsснеriснiа, животных, используемый, клеток, культивируемых, липополисахариду, мusсulus, моноклональных, штамм

...клетки пассировали один раз в 2-3 дня, кратностьрассева - 1:б - 1:8. Культура суспенэионная,Культивирование в организме животных. Для выращивания асцита пригоднымыши Ва 1 в/с. Мышам эа 7-30 дней доинъекции клетокштамма вводят внутрибрюшинно по 0,5 мл пристана, Клетки инъецируют внутрибрюшинно по 2-5 х 10 клеток в 1 мл среды 1 МДМ. Асцит формируется через 12-14 дней.Продуктивность штамма.Секреция моноклонального антитела(МкАТ) на 2-3 день культивированиясоставляет 40-45 мкг в 1 мл культуральной среды и 15-20 мг в 1 мл асцитной жидкости при определении иммуноферментным методом.Характеристика полученного продукта. Штамм продуцирует моноклональноеантитело с изотипом 1 Ы. Специфичность - антиген Е.со 1 небелковойприроды,.содержащийся в...

Номер патента: 1446157

Опубликовано: 23.12.1988

Авторы: Бундулис, Войтенок, Панютич, Скривелис, Циманис

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, белку, гибридных, еsснеriснiа, животных, интерлейкина-2, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, мембранному, моноклональных, препарате, рекомбинантного, человека, штамм

...в препарате РИЛчеловека, Методы оценки сохранения специфичности: тест на связыва" ние МКА с иммобилизованным частично очищенным РИЛ(иммуноферментный анализ), Продукция МКА сохраняется как минимум до 10 пассажей 1 п чдС- то. В асцитной форме штамм не пассируется более одного раза,Контаминация. Бактерии и грибы в культуре не обнаружены при длительном наблюдении и посевах на питательные среды. Заражение микоплаэмой не выявлено по характеру включения тимидиновой метки.. Криоконсервирование. Для длительного хранения клетки штамма замораживают в эмбриональной телячьей сыворотке с добавлением 10 диметилсульфоксида, Режим замораживания;1 С в 1 мин до -70 С, После замораживания клетки переносят в жидкий . азот, Размораживание - на водяной...

Номер патента: 1446154

Опубликовано: 23.12.1988

Авторы: Войтенок, Осипович, Панютич, Циманис

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, белку, гибридных, еsснеriснiа, животных, интерлейкина-2, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, мембранному, моноклональных, препарате, рекомбинантного, человека, штамм

...частично очищенным РИЛ(иммуноферментный анализ).Продукция МКА сохраняется как ми) нимум до 10 пассажей п ч 11 о, В асцитной форме штамм не пассируется более одного раза.Контаминация, Бактерии и грибы в культуре .:не обнаружены при длительном наблюдении и посевах на пита" тельные среды. Заражение микоплазмой не выявлено по характеру включения тимидиновой меткиКриоконсервирование, Для длительного хранения клетки штамма замораживают в эмбриональной телячьей сыво" ротке с добавлением 10 диметилсульфо оксида. Режим замораживания: 1 С в 1 мин до -70 С. После замораживания клетки переносят в жидкий азот, Раэморажйвание - на водяной бале при +3 С. Жизнеспособность клеток послеоразмораживания 70-80 , по окрашиванию трипановым синим,П р...

Номер патента: 1437393

Опубликовано: 15.11.1988

Авторы: Бундулис, Войтенок, Панютич, Скривелис, Циманис

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, интерлейкину-2, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, рекомбинантному, человека, штамм

...не пассируетсяболее одного раза.Контаминация, Бактерии и грибы вкультуре не обнаружены при длительном наблюдении и посевах на питатель.ные среды. Заражение микоплаэмой невыявлено при окрашивании красителямина ДК Н и по характеру включения тимидиновой метки,Криоконсервирование, Для длительного хранения клетки штамма замораживают в эмбриональной телячьейсыворотке с добавлением 107 диметилсульфоксида. Режим заморажния: 1 С/минОдо -70 С. После замораживания клеткипереносят в жидкий азот. Размораживание - на водяной бане при 37 С.Жизнеспособность клеток после размораживания 70-807. по окрашиванию трипановым синим.Использование штамма иллюстрируется следующими примерами.П р и м е р 1. Гибридомные клеткипомещают в стеклянный флакон объемом50...

Номер патента: 1125549

Опубликовано: 23.11.1984

Авторы: Войтенок, Журавков

МПК: G01N 33/50

Метки: иммуносорбента

...ганизмы три раза отмывают физиологическим раствором, содержащим 0,02 М фосфатный буфер с РН 7,6, центрифугированием при 3000 об/мин в течение 5 мин. 30Эффективность полученных иммуносорбентов иллюстрируется следующимипримерами.П р и м е р 2. Получение иммуносорбентов проводят по пРимеРу 1, но 35 используют 1, 4, 5 и 6 Ж-ные концентрации взвеси клеток, Иммуносорбенты с концентрацией взвеси 4, 5 и 63 сор. бируют иммуноглобулины С и М с драк". тически одинаковой эффективностью(специфичность иммуносорбента зависит от типа используемых для его получения антител). Эффективность сорбции для иммуносорбента, полученного на основе 17-ной взвеси клеток, снижается в отношении иммуноглобулинов С и М соответственно в 5-6 и 8-8,5 раз, Таким образом,...

Номер патента: 889001

Опубликовано: 15.12.1981

Авторы: Войтенок, Потапнев

МПК: A61K 35/26

Метки: митогенного, фактора

...миллипоровые Фильтры (размер пор 0,3 мкм), Иитогенная активность культуральных сред исследуется в тест-культурах свежевыделенных лимфоцитов здоровых доноров, Для этого смешивают 1 объем исследуемой на активность культуральной среды в 3синтез ДНК (имп/мин) в тест-культусинтез ДНК имп мин в контрольныхфактораСравнительные результаты, полученные предложенным способом и известным способом, представлены в таблице Ф е Количество Температура культивирования Активность митогенногоФГА-стимулированных лимфа- фактора (выраженная вцитов индексах стимуляции) живых клетокв культуре,млн/мл 37 (известный способ)40 (предложенный способ)о 2,67 3,180,33 п=419,9+2,52п=4 250 0,82 3,271,22 Как видно из таблицы культивирование стимулированных ФГА...

Номер патента: 843991

Опубликовано: 07.07.1981

Авторы: Варивоцкая, Войтенок

МПК: A61K 35/36

Метки: митогенного, фактора

...мкг/мл, и культивируют 72 ч при 37 С, Газовая среда над культурой состоит из 5% С 02 в воздухе. В конце культивирования клетки удаля843991 кроличьей аптисыворотки против фитогемагглютинина.Синтез ДНК в тсст-культурах исследуютпо включению Н-тимидина, а радиоактив ность клеток измеряют на спектрометре.Активность митогенного фактора выражают индексом стимуляции, который представляет собой отношение синтеза ДНК в тест-культурах с митогенным фактором к 1 О синтезу ДНК в тест-культурах без митогенного фактора, но содержащих 5% анти- сыворотки против фитогемагглютинина и фитогемагглютинин в концентрации 10 мкг/мл (контроль на нейтрализациюфи тогемагглютинина) .Таким образом, индекс стимуляции (ИС)равняется синтез ДНК зН имп/мин в...

Номер патента: 538045

Опубликовано: 05.12.1976

Авторы: Владимиров, Войтенок, Горынин, Золоторевский, Серебрийский

МПК: C22C 21/00

Метки: лигатура

...ннтерметаппидов, равномерно ржпредепенные по ппощвди излома,н с Извест никель К,гатура, со Нике пь Алю миннЛигатуру иэготдугсвьемиереппаводов ь Охпющаемо Остальное 1 13.ечивает достах свойств в сппа 2 О Бельизобретен свойств обрабатыв лигатуру дополнит дующем содержан тва извес ны сплавы апвмйиия, содержащие числу таких сплавов относится нидержащая, вес, ЪфХО 20й Остальное 13.Однако такая лигатура непригодна для . тО одновременного легирования легких сплавов никелем, кобапьтом н азотом,Известна также лигатура следующего ссстава, вес, А;Железо 5-1 5 О,Никель 8-20 Азот 0,5-3АлюминийТакая лигатура не обеспточно высоких механическивах. я-повышение механическихемых сплавов. Для этого вьно вводят кобальт при слекомпонентов, вес. %: 2 абпице...

Номер патента: 497349

Опубликовано: 30.12.1975

Авторы: Антонова, Владимиров, Войтенок, Гончарова, Горынин, Золоторевский, Рудометов, Серебрийский

МПК: C22C 21/00

Метки: лигатура

...сГплавов, содержащая иттрий и алюминий.Сгиавы, обработанные известной лигатурой,обладают недостаточной прочностью. 10Целью изобретения является разработкалигатуры для легких сплавов, с применениемкоторой прочностные свойства обрабатываемых сплавов повышаются.Для этого в нее введен металл, выбранный 15пз группы, содержащей титан и цирконий, приследующем соотношении компонентов, вес, %:Металл, выбранный пз группы,со;Гержащей титан и цирконий 1,5 - 5,0Иттрпй 815 20Алюминий ОстальноеЛигатуру изготовляют путем сплавленнякомпонентов в индукционной высокочастотнойпечи или печи сопротивления под слоем флюса и разливают в плоский кокиль. 25Лигатура имеет температуру плавления845 - 870 С, хорошо дробится на куски.Механические свойства...

Номер патента: 497095

Опубликовано: 30.12.1975

Авторы: Беляков, Владимиров, Войтенок, Горынин, Золоторевский, Серебрийский

МПК: B22D 23/08

Метки: гранул, металлических

...3 - разрез,по А - А на фиг. 2.Обечайка 1 установки, имеющая форму усеченного конуса и установленная малым основанием на плиту 2, выполнена с образующей, наклоненной под углом 45 - 60 к горизонтали, отношение диаметра кольца 3, имеющего о-образное сечение, к наружному диаметру разливочного стакана выбрано в пределах 4,5 - 5,5, а отношение суммарной площади поперечного сечения патрубков-вводов 4 охлаждающей среды к суммарной площади поперечного сечения отверстий 5 и 6 для стока среды - в пределах 0,3 - 0,4.При угле сс наклона образующей обечайки к ,горизонтали, меньшем 45, для образования водяной воронки требуется напор воды в патрубках-вводах, превышающий 2 ат, что требует применения дополнительных насосов, в противном случае вода не...

Номер патента: 495380

Опубликовано: 15.12.1975

Авторы: Владимиров, Войтенок, Горынин, Золоторевский, Рудометов, Серебрийский

МПК: C22C 21/00

Метки: лигатура

...легких сплавов предлаоисходит упрочнение матвведения большого колиных частиц нитридов цирчем загрязнение сплавов ы является незначительАзотАлюмиПри легигаемой лигаРицы сплавчества мелккония и тиокислами иным,ниировании турой пра за счет одисперстана, приз лигату уппы,0,5 - 10,0 0,5 - 5,0 стальное обретение оллургии и мталлургическоймышленности.Известна лигатурасплавов, включающагруппы, содержащейалюминии й.Однако сплавы, обрабгатурой, обладают невизносостойкостью.Цель изобретения -недостатков - достигаеру вводят азот при слмежду компонентами (вМеталл, выбраннысодержащей цири титан рисоединением заявки1995815/22-1 Э. И. Серебрийский, Ю. Н, Владимиров, И. В. Горынин Ю. С. Золоторевский, В. С, Рудометов и Б, М, Войтено Твердость НЧ...

Номер патента: 485823

Опубликовано: 30.09.1975

Авторы: Владимиров, Войтенок, Горынин, Золоторевский, Серебрийский

МПК: B22D 23/08

Метки: гранул, металлических

...воды.2. Способ по п, 1 отличающийся тем, что в качестве охлаждающей среды используют 5 - 10%-ные водные растворы хлоридо" щелочных металлов.3. Способ по п. 1 отличающийся тем, что в качестве охлаждающей среды исполь. зуют 5 - 10%-ные водные растворы гидратоь окислов щелочных металлов. О Изобретение относится к области производства гранул из сплавов черных и цветных металлов и может быть использовано в металлургии и машиностроении.Известны способы получения металлических гранул, в частности гранул алюминиевых сплавов, прп которых осуществляется диспергирование жидкого металла и охлаждение получающихся капель или брызг металла воздухом, газом или водой. Однако достигаемые скорости охлаждения гранул при этом недостаточны, что не всегда...

Номер патента: 419308

Опубликовано: 15.03.1974

Авторы: Бел, Владимиров, Войтенок, Горынин, Золоторевский, Серебрийский

МПК: B22F 9/10

Метки: металлическихгранулт

...закреплена кольцевая трубка 3 сцгмаобразного сечения с двумя патрубкамц-вводамц 4 охлаждающей среды, расположенными по касательной к трубке и направленными в сторону движения охлаждающей среды. Через плиту 2 пропущен вал 5, который вращается при помощи электропривола 6 и ца котором укреплен чугунный перфорированный стакан 7. Для удаления гранул и стока жилкой охлаждающей среды служит приемное лццще 8, выполненное по винтовой лцццц с уклоном в сторону движения охлаждающей среды, и сливной патрубок 9, цлущцй в сборник граУстановка работает следующим образом.В патрубкц 4 подается охлаждающая среда, например вола, под давлением водопроводной сети. Выходя цз щели спгмаобразцой трубки по касательной к,поверхцости конической обечайкц, вола...