Панютич

Номер патента: 1747484

Опубликовано: 15.07.1992

Авторы: Войтенок, Колесникова, Лях, Мисуно, Панютич, Петевка, Шидловская

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulusl, моноклональных, некроза, опухолей, рекомбинантному, фактору, человека, штамм

...После отмывания инкубируют с меченными пероксидазой к иммуноглобулинам мыши энтителами в разведении 1:2000 на ФСБ-БСА в течение 1 ч, Ферментную реакцию проводят в течение 10 мин. Раствор субстрата представляет собой 0,1 М цитратный буфер (рН 4,7) с 0,6 мг/млортофенилендиамина гидрохлорида и 0,01 % перекиси водорода. Реакцию останавливают через 10 мин 1 М серной кислотой и учитывают на спектрофотометре с вертикальным лучом при длине волны 492 нм,Результаты эксперимента по изучению специфичности связывания МКА, продуцируемого клетками штамма 10 ГИ, с антигенами, иммобилизированными на пластике, представлены в табл.1,Результаты исследований свидетельствуют о более высокой специфичности МКА, продуцируемых клетками штамма 1 ОРИ по...

Номер патента: 1733470

Опубликовано: 15.05.1992

Авторы: Войтенок, Панютич, Прасолов, Резников, Чумаков, Шидловская

МПК: C12N 5/10

Метки: антитела, белкам, гибридом, моноклональные, продуцирующих, рекомбинантным

...клетки ресуспендиравали в0,02 М фосфатном буферном растворе с0,15 М КаС, Клетки вводили внутрибрюшинно (в/б) по 10-20 млн, на мышь, чтосоответствует оптимальному количеству45 клеток для получения ЫКА к корпускулярным антигенам и/или внутриселезеночно(в/с) по 200-400 тыс, клеток на мышь, какописано Яри ес а. При комбинированномспособе иммунизации клетки вводили в/с50 через 21 сут после иммунизации в/б,Для оценки индукции иммунного ответаспленоциты культивировали в МОМ с 10;,ЭТС в концентрации 3-5 млн/мл в течение5 сут супернатанты тестировали методом55 иммуноферментного анализа (ИФА) по следующей схеме. Рекомбинантный ГР или бычий сывороточный альбумин (БСА)сорбировали в лунках микроплат (Мопсгппщпораде 1) (500 нг/лунку в 0,1 М...

Номер патента: 1712412

Опубликовано: 15.02.1992

Авторы: Панютич, Петевка, Фомин

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антитела, гибридных, еsснеviнiа, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклонального, пирофосфатазе, продуцент, штамм

...пирофосфат, 30 - ,50 мкМ в 0,05 М Трис-НС циллина и стрептомицина, 0,05 мМ меркап буфере, рН 9,0, 0,5 мМ МдС 2 и инкубируют тоэтанола. Клетки культивируют при 37 С в 20 мин при 37 С, Окрашивание лунок учитыатмосфере 5% С 02. Посевная доза 2 10 вают после добавления раствора, содержа- клеток в мл, щего молибдат аммония и малахитовыйДля выращивания гибридомного Штам- зеленый на спектрофотометре при длине ма в асцитной форме пригодны мыши 30 волны 620 нм.ВаЬ/с. Мышам за 7 - 30 дней до инъекции Результаты опыта по определению клеток штамма вводят внутрибрюшинно по специфичности связывания МКА, продуци,5 мл пристана. Клетки инъецируют внутри-руемого клетками штамма РГВ с пирофосбрюшинно по 2 - 5 миллионов в 0,5 мл среды . фатазой Е.со,...

Номер патента: 1684339

Опубликовано: 15.10.1991

Авторы: Агапов, Войтенок, Грэн, Коричнева, Кушниров, Панютич, Скрябин, Смирнов, Тер-Аванесян, Тоневицкий, Ураков, Циманис

МПК: C12N 15/26

Метки: cerevisiae, sасснаrомyсеs, дрожжей, интерлейкина-2, продуцент, человека, штамм

...содержащий структурную область гена интерлейкиначеловека, и в результате получают плазмиду рА 19, Есой-Яа 1 1 - фрагмент (1,8 т.п,н) плазмиды рА 19 клонируют по тем же сайтам в плаэмиду рГТР 4, сОдержащую терминатор транскрипции гена кислой фосфата з ы Р Н 05.В полученной таким образом плаэмиде рУ 116 сайт Есой 1 затем заменяют при помощи линкеров на сайт Вагп М 1, в результате получают плазмиду рУ 116 В. Ващ М 1 - Нпд 111 - фрагмент плаэмиды рУ 116 В клонируют в плазмиду рЗОВ 207 и получают плазмиду рЯ 1711 размером 8,9 т,п,нсодержащую ген ИЛчеловека под контролем препрообласти гена альфа-фактора и способная к репликации в дрожжах.Штамм бВ-Н 28/рЯ,.11711 - продуцент интерлейкиначеловека получен трансформацией клеток Я,сегеч 1 з 1...

Номер патента: 1585330

Опубликовано: 15.08.1990

Авторы: Карканица, Панютич

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: гемопоэтического, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, продуцент, ростового, фактора, штамм

...продукции,Продукция гемопоэтического ростового фактора мыши сохраняется как минимум до 60-ти пассажей 1 п ч 1 гго,Криоконсервирование,Для длительного хранения клеткиштамма эамораживают в эмбриональнойтелячьей сыворотке с добавлением 10%диметилсульфоксида. Режим замораживания; 1 С/мин до -70 С. После замораживания клетки переносят в жидкийазот, Размораживание на водяной банепри 37 С. Жизнеспособность клетокпосле размораживания 60-70% по ок"рашиванию трипановьм синим.Контаминация,Бактерии и грибы в культуре необнаружены при длительном наблюдениии посевах на питательные среды. Заражение микоплазмой не выявлено при.окрашивании красителями на ДНК и похарактеру включения тимидиновойметки.Использование штамма иллюстрируется...

Номер патента: 1530638

Опубликовано: 23.12.1989

Авторы: Войтенок, Панютич, Турецкая

МПК: A61K 39/395, C12N 15/00

Метки: альфа, антитела, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклонального, некроза, опухолей, продуцент, фактору, человека, штамм

...н жидкий азот, Размораживание на водяой бане при 37 С, Жизнео,способность клеток после размораживания 65-707. по окрашиванию трипаноным синим.П р и м е р 1. Гибридомные клеткипомещают н стеклянньп Флакон объемом50 мл по 1 х 10 клеток в 5 мл средыбс 107. ЭТС, 2 мМ со -глютамина,100 мкг/мл пенициллина и стрептомицина. 0,05 и меркаптоэтанола, Клетоки культивруют 2-3 дня при 37 С ватмосфере 5",. СО, Полученньй супернатант используют н качеств реагентан иммунохмических реякцях (как препарат монАТ). Тест н определение специфичностинзгимодействия монАТ с ацтигенами,иммобилизонанными на пласгик,Используемый метод: гм;уноферментный анализ.Р ФНО- К, Р ФНГ)-1." и бычий сывороточный альбумин (БСА) в количестве0,5 мкг н 50 мкл 0,1 М...

Номер патента: 1521776

Опубликовано: 15.11.1989

Авторы: Войтенок, Добрынин, Коробко, Недоспасов, Панютич, Турецкая, Чувпило, Шахов, Шингарова

МПК: A61K 39/395, C12N 15/00

Метки: активность, антитела, биологическую, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклонального, нейтрализующего, некроза, опухолей-альфа, продуцент, фактора, человеческого, штамм

...кроличьими антимьшгиными антителами. Все отмывкипроводят бидистиллированной водой.Контролем служит бычий сывороточныйальбумкц в качестве антигена.Стабильность продукции. ПродукцияьанАТ сохраняется как минимум до 15пассажей 1 п ч 7.сто, Б асцитной формештамм не пассировался более одногораза,Криоконсервирование. Для длительного хранения клетки штамма замораживают в эмбриональной телячьей сыворотке с добавлением 10% диметилсульфоксида. Режим замораживания: 1 С/миндо минус -70 С. После замораживанияклетки переносят в жидкий азот, Разморая(иванне на водяной бане при 37 С,Жизнеспособность клеток после размораживания 60-70% по Окрашиванию три"пановым синим,П р и м е р 1, Гибридамцые клеткипомеШаот в стеклянный Флакон объемомГ50 мл по...

Номер патента: 1507791

Опубликовано: 15.09.1989

Авторы: Войтенок, Добрынин, Коробко, Недоспасов, Панютич, Турецкая, Чувпило, Шахов, Шингарова

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антитела, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклонального, некроза, опухолей-альфа, продуцент, фактору, человека, штамм

...Для длительного хранения клетки штамма замораживаат в эмбриональной телячьей сыворотке с добавлением 10% диметилсульфоксида. Режим замораживания: 1 С/мин до -70 С. После замораживания клетки переносят в жидкий азот. Размораживание на водяоной бане при 37 С. Жизнеспособность клеток после размораживания 55-60% по окрашиванию трипановым синим.Контаминация, Бактерии и грибы в культуре. не обнаружены при длительном наблюдении и посевах на питательные среды. Заражение микоплазмой не выявлено при окрашивании красителями на ДНК и по характеру включения тимидиновой метки.П р и м е р 1, Тест на определение специфичности взаимодействия мои АТ с антигенами, иммобилизованными на пластине Р ФНО-с, Р ФНО- и БСА. в количестве...

Номер патента: 1472497

Опубликовано: 15.04.1989

Авторы: Бундулис, Войтенок, Панютич, Скривелис, Циманис

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, еsснеriснiа, животных, используемый, клеток, культивируемых, липополисахариду, мusсulus, моноклональных, штамм

...клетки пассировали один раз в 2-3 дня, кратностьрассева - 1:б - 1:8. Культура суспенэионная,Культивирование в организме животных. Для выращивания асцита пригоднымыши Ва 1 в/с. Мышам эа 7-30 дней доинъекции клетокштамма вводят внутрибрюшинно по 0,5 мл пристана, Клетки инъецируют внутрибрюшинно по 2-5 х 10 клеток в 1 мл среды 1 МДМ. Асцит формируется через 12-14 дней.Продуктивность штамма.Секреция моноклонального антитела(МкАТ) на 2-3 день культивированиясоставляет 40-45 мкг в 1 мл культуральной среды и 15-20 мг в 1 мл асцитной жидкости при определении иммуноферментным методом.Характеристика полученного продукта. Штамм продуцирует моноклональноеантитело с изотипом 1 Ы. Специфичность - антиген Е.со 1 небелковойприроды,.содержащийся в...

Номер патента: 1446157

Опубликовано: 23.12.1988

Авторы: Бундулис, Войтенок, Панютич, Скривелис, Циманис

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, белку, гибридных, еsснеriснiа, животных, интерлейкина-2, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, мембранному, моноклональных, препарате, рекомбинантного, человека, штамм

...в препарате РИЛчеловека, Методы оценки сохранения специфичности: тест на связыва" ние МКА с иммобилизованным частично очищенным РИЛ(иммуноферментный анализ), Продукция МКА сохраняется как минимум до 10 пассажей 1 п чдС- то. В асцитной форме штамм не пассируется более одного раза,Контаминация. Бактерии и грибы в культуре не обнаружены при длительном наблюдении и посевах на питательные среды. Заражение микоплаэмой не выявлено по характеру включения тимидиновой метки.. Криоконсервирование. Для длительного хранения клетки штамма замораживают в эмбриональной телячьей сыворотке с добавлением 10 диметилсульфоксида, Режим замораживания;1 С в 1 мин до -70 С, После замораживания клетки переносят в жидкий . азот, Размораживание - на водяной...

Номер патента: 1446154

Опубликовано: 23.12.1988

Авторы: Войтенок, Осипович, Панютич, Циманис

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, белку, гибридных, еsснеriснiа, животных, интерлейкина-2, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, мембранному, моноклональных, препарате, рекомбинантного, человека, штамм

...частично очищенным РИЛ(иммуноферментный анализ).Продукция МКА сохраняется как ми) нимум до 10 пассажей п ч 11 о, В асцитной форме штамм не пассируется более одного раза.Контаминация, Бактерии и грибы в культуре .:не обнаружены при длительном наблюдении и посевах на пита" тельные среды. Заражение микоплазмой не выявлено по характеру включения тимидиновой меткиКриоконсервирование, Для длительного хранения клетки штамма замораживают в эмбриональной телячьей сыво" ротке с добавлением 10 диметилсульфо оксида. Режим замораживания: 1 С в 1 мин до -70 С. После замораживания клетки переносят в жидкий азот, Раэморажйвание - на водяной бале при +3 С. Жизнеспособность клеток послеоразмораживания 70-80 , по окрашиванию трипановым синим,П р...

Номер патента: 1437393

Опубликовано: 15.11.1988

Авторы: Бундулис, Войтенок, Панютич, Скривелис, Циманис

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, интерлейкину-2, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, рекомбинантному, человека, штамм

...не пассируетсяболее одного раза.Контаминация, Бактерии и грибы вкультуре не обнаружены при длительном наблюдении и посевах на питатель.ные среды. Заражение микоплаэмой невыявлено при окрашивании красителямина ДК Н и по характеру включения тимидиновой метки,Криоконсервирование, Для длительного хранения клетки штамма замораживают в эмбриональной телячьейсыворотке с добавлением 107 диметилсульфоксида. Режим заморажния: 1 С/минОдо -70 С. После замораживания клеткипереносят в жидкий азот. Размораживание - на водяной бане при 37 С.Жизнеспособность клеток после размораживания 70-807. по окрашиванию трипановым синим.Использование штамма иллюстрируется следующими примерами.П р и м е р 1. Гибридомные клеткипомещают в стеклянный флакон объемом50...