Способ предотвращения фаголизиса бактериальных культур

СОЮЗ СОВЕТСНИХСОЦИАЛ ИСТИЧЕСНРЕСПУБЛИК 19) И)ецкий,СССР 1978 ОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР ПО-ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТ(71) Институт микробиологлогии им. Д.К. Заболотногтут молекулярной биологииАН УССР(54) СПОСОБ ПРЕДОТВРАЩЕНИЯ ФАГОЛИЗИСА БАКТЕРИАЛЬНЫХ КУЛЬТУР(57) Изобретение относится к микробиологической промышленности, аименно к способам защиты бактериальных культур - продуцентов биологически активных соединений от фаголиэиса. Целью изобретения является снижение токсичности. Для предотвращения фаголизиса при выращивании культуры Егчхпа саго 1 оога в культуральную жидкость вводят б-азацитидинв концентрации 1-50 мкг/мл.1439121 предотвращение фаголиэиса с помощью гексаметилендииэоцианата (внесенного 0,17. по объему) наблюдают почти полное подавление роста бактерий продуцентов Б-аспарагиназы. Фо рмула изобретения Составитель И, Тарееза Техред М.Дидык Корректор О. Кравцова Редактор Н. Гунько Подписное Заказ 604 /25 Тираж 520ВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий13035, Москва, Ж, Раушская наб д, 4/5 Производственно полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул, Проектная, 4 Изобретение относится к микробиологической промьппленности, а именно к способам защиты бактериальных культур - продуцентов биологически активных соединений от фаголизиса.Целью изобретения является снижение токсичности при выращивании культуры Его.п 1 а саго 1 очога,П р и м е р 1. В колбы объемом 300 мп вносят питательную среду - аминопептид с Физиологическим раствором в соотношении 1:1 и посевную дозу опытной культуры Егю.п 1 а саго 1 оуога, которую предварительно синхро 15 ниэируют, вЫцерживая в течение 1 чопри 4 С, В опытные колбы вносят также 6-азацитидин в концентрациях 1,5, 10, 50 мкг/мл, Колбы с материалом помещают на качалки и культивируют прио30 С, Через различные промежутки времени после начала культивирования для определения динамики роста бактерий и присутствия спонтанно продуцнруемого культурой бактериофага отбирают пробы культуры. Динамику ро; ста бактерий определяют по оптической плотности бактериальной суспензии и , по количеству жизнеспособных микроорганизмов (серийные разведения мик, роорганизмов высевают на твердую пи -тательную среду). Количество свободных Фаговых частиц в этих пробахопределяют методом двухслойных агаровых слоев с помощью индикаторной 35 культуры для Фага. Спонтанный вьход Фаговых частиц почти полностью подавляется в присутствии 6-азацитиди" на по сравнению с контролем при незначительном снижении плотности кле 4 О точной популяции. В то же время при использовании известного способа П р и м е р 2. В аппараты непрерывного культивирования микроорганизмов с рабочим объемом 1,5 л, стерильной подачей воздуха 0,5 л/мин, скоростью вращения 200 об/мин вносят посевную дозу синхронизированной культуры Егч 1 пха саго 1 оуога (1/15 часть рабочего объема аппарата). и препарат - 6-азацитидин концентрации 50 мкг/мл. В качестве питательной среды используют смесь аминопептид и 0,15 М ИаС 1. Через различные промежутки времени отбирают пробы культуральной среды для определения динамики роста бактерий и спонтанно продуцируемого культурой бактериофага. Полученные результаты свидетельствуют, что, как и в случае выращивания бактерий на качалках, данный препарат полностью подавляет спонтанный фаголиэис бактерий. В случае использования известного вещества отмечают почти полную инактивацию жизнеспособных бактерий. Способ предотвращения фаголизиса бактериальных культур, включающий введение в культуральную жидкость протективного вещества, о т л и - ч а ю щ и й с я тем, что, с целью снижения токсичности при выращивании культуры Егчпж саго 1 очога, в качестве протективного вещества используют 6-азацитидин в концентрации; 1- 50 мкг/мл.