C12P 21/08 — моноклональные антитела

Номер патента: 1602393

Опубликовано: 23.10.1990

Автор: Гюнтер

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антитела, гибридомы, интерферону, моноклональные, омега, продуцирующей, типа

...среды для клеточной культуры с 10; Суспензию пипеткой подают на пластинки, каждая из которых снабжена48 углублениями (каждое углублениеимеет емкость 0,5 мл), Пластинки инкубируют при 37 С (95% воздуха, 5% двуокиси углерода, насыщение восдяньм паром), По истечении трех дней к каждой культуре прибавляют 0,5 мл среды ГАТ. Из всего 800 исходных культур по истечении 2-3 недель приблизительно 300 культур показывают рост гибридомных клеток. Последую 1 с 1 ий скрининг осуществляют следующимобразом. Надосадочные жидкости по меньшей мере 10-20% слитых гибридомных культур смешивают с одинаковым объемом раствора человеческого интерФерона типа омега(20 антивиральвых ед./мп), инкубируют в течение 90 мин при 37 С и затем исследуют по меньшей мере два...

Номер патента: 1604849

Опубликовано: 07.11.1990

Авторы: Байтубаев, Булашев, Дмитриев, Касьянов, Муканов, Несмеянов, Ромахов

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: brucella, антитела, бактериям, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональные, продуцирующий, рода, штамм

...-ние ночи. Полученные антителосодержащие материалы: супернатант и очищенную асцитную жидкость с конечнойконцентрацией иммуноглобулинов 8 мг/млиспользуют как реагенты для излученияспецифичности взаимодействия монАТ40 с тестируемыми антигенами с помощьюРМА и ТИФА,Характеристика полезного продукта,МонАТ относятся к классу 18 С подклассу 2 а. Они специфичны к эпитопу45 кор части полисахаридной цепи ЛПСбруцелл. Константа связывания 0,6 хх 10М.Методы оценки специфичности МКА:реакция микроагглютинации - (РМА) итвердофазный иммунофермвнтный анализ(ТИФА),Контаминация штамма. Контаминантовлинии, включая бактерии, грибы, дрожжи и микоплазму, не обнаружено.Криоконсервация. К осадку гибрид 55ных клеток добавляют .эмбриональнуюсыворотку теленка, а...

Номер патента: 1627557

Опубликовано: 15.02.1991

Авторы: Адомайтене, Велецкайте, Дикинене, Иванаускас, Маурицас, Микалаускене, Тамошюнас

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, белка, вируса, гибридных, животных, клеток, крупного, культивируемых, лейкоза, мusсulus, моноклональных, продуцент, против, рогатого, скота, штамм

...рассевд 1:6. Клонцро 1 ац е клеток проводят в 96-ячеечцых ;латахс иг.пользованием в качестве пи гдющего:лоя макро 1 дгсн мынеь. сеци 11 ическая эффективность 3-го клонирования составляет 9871 1 окоцгерцдц, роноят н ыворотьо мбриоцов кор,в с доба. ление 1О диметпл уь Ьс ксидд, 507 сыор л ки эмбрион.,в крупного рогатогоа .когд при коццс.цтрции 1 х 10 клет кьмл. 1 иэнеспособцость сле; окшдыма после размораживация состав дет ЯОь.Пр,нивка по 10 клеток штамма111.Ч-р 24-Ч 1 сингенцым предобрдботаццьпмышам вызывает у цих обрдзовацедсцитцой опухоли, сопровождающе ся выделением асцитной жидкости г ко лычесгне 1-5 мл. В асцитцо;1 ждкост содержатся специфические моцЛТ к белку р 24 вируса лейкоза КРС, Способность продуцировать мо 1 Л 1...

Номер патента: 1631072

Опубликовано: 28.02.1991

Авторы: Баринский, Грибенча, Клюшник, Свешников, Северин, Фуралев

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, белку, бешенства, вируса, гибридных, гликопротеидному, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, структурному, штамм

...животных.В брюшную полость мышей линииВаТЬ/с, предварительно сенсибилизированных за 1-2 недели внутрибрюшинной инъекцией 0,3-0,5 мл минерального масла 2, 4, 10, 14 тетраметилГпентадеканом, вводят гибридные клетки, Время образования опухолей 912 сут; на протяжении десяти пассажей наблюдается 100%-ная перевиваемость асцитов.Морфология клеток.Культура состоит из слабо прикреп -ляющихся к субстрату округлых клетокразличной величины с крупными ядрами, Цитоплазма имеет вид тонкогоободка.Кариология.Кариотип соответствует виду (мышиный), С помощью окраски по С-методу три маркерные хромосомы, привнесенные в эту линию от родительскоймиеломной линии.Продуктивность штамма.Итамм гибридомы Крив-С 5 продуцирует моноклональные антитела...

Номер патента: 1631073

Опубликовано: 28.02.1991

Авторы: Баринский, Василенко, Грибенча, Клюшник, Свешников, Северин

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, белку, бешенства, вируса, гибридных, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, нуклеопротеидному, структурному, штамм

...(1 МФЛ), атакде в непрямой реакции иммуноФермецтцого анализа (НИФА) как в куль -туре клеток, так и в отпечатках головного мозга заражецного бегпенствомживотного.Класс иммуноглобулинов1 тамм гибридных клеток Крив-Л 7секретирует антитела класса Тг-;-1,Криоконсервирование, Клетки КривЛ 7 замораживают ца 8 пассажа,Общее количестг,о ампул 20 по 23 млн клеток, Криозащитцая среда с25 507. эггбриоггальггой телячьей сыворотки и 107.;ггСО-дгзметггзгсульФоксида,Выживаемость при размораживании 60707,.Контаминация. Бактерии, грибыи дрожжи це об 1 гаружены,Использование штамма цллгострируется следугогпгпг примером.В культуральцые матрасы вместимостью 250-500 мл засевают гибрцд 35цые к:гетки Крив-Л 7 в концентрации100-150 тыс/мл в...

Номер патента: 1631074

Опубликовано: 28.02.1991

Авторы: Андреев, Гусев, Язова, Якименко

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: альфа, антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, против, фетопротеина, человека, штамм

...Пассирование прово 15 дят один раз в 3-4 дня той же дозойклеток (без подсчета клеток их рассеивают из одного флакона на три).Титр антител в культуральной средепри определении иммуноферментным ме 20 тодом 2110 .Для культивирования 1.п ,1 о мышам БАЕВ/с, сенсибилизированнымпристаном (0,5 мл внутрибрюшинно) за7 дней до прививки гибридом, вводят25 внутрибрюшинно О 10 - 10 клетокб 7штамма С 9-8 ч в 2 мл среды КР.11 с гентамицином, Асцитическую жидкость забирают у живых мышей по мере ее накопления, повторяя забор асцита уодной и той же мыши не менее 3 раз.Асцитный штамм перевивают на свеюк6Фмышей (510 - 10клеток на мышь),проводя не более трех пассажей. В пулах асцитов, полученных От разныхживотных и в разных взятиях титр антител при...

Номер патента: 1631075

Опубликовано: 28.02.1991

Авторы: Андреев, Гусев, Язова, Якименко

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: альфа, антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, против, фетопротеина, человека, штамм

...2 мл среды НРИ 1 с гентамицином. Асцитическую жидкость забирают у живых мьпдей по мере ее накопления, повторяя забор асцита у одной и той же мыши не менее 3 раз, Асцитный штамм перевивают на свежих мышей( 10 - 10 клеток на мышь), проводяг, 6 7не более трех пассажей. В пулах асцитов, полученныхот разных животных ц в разных взятиях, титр антител приопределении иммуноферментным методом достигает значения 10Модальное число хромосом 79.Продуктивность штамма. В 1 млкультуральной среды содержится неболее 10-20 мкг антител, а в асцитической жидкости не менее 5 кг/мл антител.Контаминация. Контаминация бактериями и грибами в штамме не обнаружена.Криоконсервирование, Клетки штамма ресуспендируют в среде для замораживания, состоящей нз...

Номер патента: 1631076

Опубликовано: 28.02.1991

Авторы: Андреев, Гусев, Язова, Якименко

МПК: C12N 5/06, C12P 21/08

Метки: альфа, антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, против, фетопротеина, человека, штамм

...проводят один раз в 3-4 дня той же до - зой клеток (без подсчета клеток их рассеивают из одного Алакона на три), Титр антител в культуральной среде при определении иммунолерментным методом равен 2 х 10Для культивирования дп чьего мьппам ВАГАБ/с, сенсибилизированным пристаном (0,5 мл внутрибрюшинно) за 7 дней до прививки гибридом, вводят внутрибрюшинно 5 х 10 -10 клеток штамь 7ма 010-84 в 2 мл среды ЕР 1 П с гента - мицином. Асцитическую жидкость забирают у живых мышей, по мере ее накопления, повторяя забор асцита у одной и той же мыши не менее 3 раз.Асцитный штамм перевивают на свежих7мышей (5 х 10 -10 клеток на мышь), проводя не более трех пассажей. В пулах асцитов, полученных от разных животных и в разных взятиях, титр антител при...

Номер патента: 1631077

Опубликовано: 28.02.1991

Авторы: Андреев, Гусев, Язова, Якименко

МПК: C12N 5/06, C12P 21/08

Метки: альфа, антитела, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональные, продуцирующий, фетопротеину, человека, штамм

...антител,Коитамицация. Контаминация бактериями и грибами в щтамме не обнаружена. Криоконсервирование. Клетки штам.а ресуспендируют в среде для замораживания, состоящей из эмбриональной телячьей сыворотки, РЯЕИ или РРИ 1-1640 и диметилсульфоксида (5:4:1). 5 х 10 клеток ытяммг смешивают с 1 мп такой среды ка холоде н пластиковых пробирках, для чего последние держат на льду и сразу же помещают в хранилище с жидким азотом после программного замораживания материала.Характеристика целевого продукта.МонАТ, продуцируемые штаммом Р 2- 84, относятся к 180 классу и к1 подклассу мышиных иммуноглобулинов. Константа связывания антител штамма Р 2-84 с АФП равна 1,4 х 10 л/моль - определение проведено жидкофазным конкурентным радиоиммунологическим...

Номер патента: 1638160

Опубликовано: 30.03.1991

Авторы: Барышников, Дубинкин, Кадагидзе, Короткова, Тупицын

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: l-продуцент, антигена, антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, лейкоза, лимфобластного, мusсulus, моноклональных, общего, острого, против, штамм

...45 см в 5 мл среды заливают по 5 10 клеток штамма. Пассаж 1 раз в 2-3 дня той же дозой. Штамм выращивают при 37 С на среде МЕМ в модификации Дульбекко, содержащей 150 телячьей эмбриональной или оленьей сь 1 воротки, 2 мМ глютамина, 0,1 мг/мл гентамицина. Титр антител определяют в непрямой реакции поверхностной иммунофлюоресценции на живых лимфоцитах крови, В качестве источника антител используют культуральную жидкость, Титр антител в культуральной жидкости 1:50,5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Для выращивания штамма в виде асцитной опухоли пригодны самки мыши линии ВАВ/С. Интактным мышам за 7-14 дней до прививки опухоли вводят внутрибрюшинно раздражитель (вазелин), клетки штамма иньецируют внутрибрюшинно по 10 клеток7 на мышь в 4,0 мл...

Номер патента: 1640156

Опубликовано: 07.04.1991

Авторы: Дегтярев, Костюк, Кочетков

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, бактериофага, гибридных, днк, животных, зависимой, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, рнк-полимеразе, штамм

...из крупных округлых клеток с крупными ядрами и тонким ободком цитоплазмы.Ядрьппки крупные, по 1-2 в ядре.Культуральнйе признаки. Среда для 5культивирования - среда ДИЕМ сыворотка эмбриона коровы (10%), сыворотка новорожденных телят (10%),глютамин (2 ммоль), пируват натрия(0,05 ммоль), пенициллин/стрептоцимин (1000 ед./мл). Характер ростастационарная суспензия. Метод снятиявстряхивание. Частота пассирования -2-3 раза в неделю. Посевная доза150 тыс. клеток на 1 мл. Кратностьрассева 5-10 раз.Контаминация, Бактерии, грибы и микоплазмы не обнаружены.Культивирование т.п чиччо. Культурапрививается и растет в виде асцитыв перитональной полости мьппей ВАЯВ/С,За 7 дней до введения клеток мьппамреципиентам вводят по 0,5 мл пристана, Асцит...

Номер патента: 1640157

Опубликовано: 07.04.1991

Авторы: Дегтярев, Костюк, Кочетков

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, бактериофага, гибридных, днк, животных, зависимой, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, рнк-полимеразе, штамм

...признаки. Среда длякультивирования - среда ДМЕМ: сыворочка эмбриона коровы (10 ), сыворотка новорожденных телят (10 .), глютамин (2 ммоль), пируват натрия (1 ммоль), 2-меркаптоэтанол (0,05 ммоль), пеницилин/стрептомицин (1000 ед/мл).Характер роста - стационарная суспензия. Метод снятия - встряхнвание.Частота пассирования 2-3 раза в неделю. Посевная доза 150 тыс. клеток на 1 мл. Кратность рассева 5-10 раз.Контроль контаминаций. Бактерии, грибы и микоплазмы не обнаружены,Культура прививается и растет в виде асцита в перитонеальной полости мьппей БАЕВ/С, За 7 дней до введения клеток мышам-реципиентам вводят по 0,5 мл пристана. Асцит образуется через 10-15 сут после введения 1-5 млн клеток.Продуктивность штамма. Первичная...

Номер патента: 1640158

Опубликовано: 07.04.1991

Авторы: Дегтярев, Костюк, Кочетков

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, бактериофага, гибридных, днк, животных, зависимой, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, рнк-полимеразе, штамм

...61.Консервация клеток. Клетки ИМБСзаморожены на 36-м пассаже. Общееколичествоампул 20, по 4 млн клетокв ампуле. Криозащитная среда - рос-.товая,П р и м е р 1. Культивированиегибридных клеток ИМБС, .Во Флаконы для культйвированияклеток вносят гибридные клетки в концентрации 100-200 тыс клеток в 1 млсреды ДМЕМ, содержащей 10% эмбриональной сыворотки коровы, 10% сыворотки новорожденных телят, 2 ммольглютамина, 1 ммоль пирувата натрия,0,05 ммоль 2-меркаптоэтанола,1000 ед,/мл пенициллина/стрептомицина. Клетки инкубируют 2-3 сутв стационарном состоянии при37 С в атмосфере 6% СО. Концентрацияклеток, превышающая 1 млн в 1 мл,неблаго"приятна для роста клеток ивызыв ает их,гибель. Культуральнуютометра.Моноклональные антитела, продуцируемые...

Номер патента: 1645295

Опубликовано: 30.04.1991

Авторы: Думалакене, Иванаускас, Маурицас, Микалаускене, Тамошюнас

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, в-лимфоцитов, гибридных, животных, клеток, крупного, культивируемых, мusмusсulus, моноклональных, продуцент, против, рогатого, скота, штамм

...связанные белки элюируют0,2 И НС 1-глициповым буфером, элюатнейтрализуют 1 М НаОН и диализируютпротив ФСБ.Иодирование белков клеточной поверхности проводят с помощью лактоперокси;азы, В суспензию клеток5-Ох 0 в 1 мл ФБС добавляют100 мкл лактопероксидазы (2 мг/мп),40 ИБк На 3 и 100 мкл О,ОЗХ Н 0Смесь инкубируют 4 мин, осторожноперемешивая, и опять добавляют00 мкл О,ОЗХ ИО. Через 4 мин инкубации клетки 3 раза проьываютФСБ и лизируют 0,5 Х-ным растворомдезоксихолата натрия на боратномбуфере, рН 8,3, имеюцим 1 мИ РМЯГ(уенилметилсульфонилфторида). Эффективность мечения белков устанавливают с 10 Х-ной трихлоруксусной кислотой (ТХУ). Установлено, что иммуносорбент с М 1 А специфически связывает0,79 Х белков, снятых с НЛ, и 1,36...

Номер патента: 1645296

Опубликовано: 30.04.1991

Авторы: Березкина, Волкова, Гринчук, Завадская, Игнатова, Ковалева, Милованов, Павличенко, Паншин, Паншина, Супрун

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, животных, клеток, крупного, культивируемых, мusмusсulus, моноклональных, продуцент, против, рогатого, скота, фактора, штамм, эритроцитов

...1 х 10 клеток/мп. Бизне 6способность клеток при размораживании 75-80%. Прививка клеток штамма264 сингенным иьппаи вызывает у них образование асцитной опухоли, сопровождаюце- ся выделением асцитной жидкости в 45 количестве от 1 до 8 мп. В асцитной ждкост содержатся специФические монАТ к Н- антигенному фактору крови быка. Способность в продукции монАТ клеткаи птамма Р 264 сохраняется на протяжении трех месяцев непрерывного культишрования клеток. После разораливаия клеток способность продуцировать монАТ сохраняется. Прививка мышам цтамма на разных пассажах культивирования стабильно вызывает обраэоваие асцитных опухолей у мышей с высоким титром ионАТ в асцитной жидкости. фя кариологического анализа клеток штаииа П 264 используют 100...

Номер патента: 1652339

Опубликовано: 30.05.1991

Авторы: Дьяконов, Куликова, Федоров, Феоктистова

МПК: C12N 5/18, C12P 21/08

Метки: arginini, антигену, антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, мyсорlаsма, мембранному, моноклональных, продуцент, штамм

...в 96, 24, 12-луночных плашках, а затем в чашках Петри.Культуральную жидкость исследуют на содержание специфических антител. Титр1652339 Составитель А,МаныкинРедактор М.Петрова Техред М.Моргентал Корректор М.Пожо Заказ 1747 Тираж 380 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 специфических антител в иммуноферментном тесте составляет 1:128-1;256.Препараты моноклональных антителполучают 3-кратным осаждением раствором сульфата аммония 50;-ного насыщения с последующим диализом. Определяютклассовую принадлежность и специфичность моноклональных антител.Штамм клеток обладает следующими,...

Номер патента: 1652340

Опубликовано: 30.05.1991

Авторы: Криворутченко, Кривошеин, Попов, Червонский

МПК: A61K 39/395, C12N 5/18, C12P 21/08 ...

Метки: антител, белку, вируса, гибридных, гриппа, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, типа, штамм

...и посевах на питательной среде. Заражениямикоплазмой не выявлено по окрашиваниюкрасителями на ДНК и тимидиновой метке вкультуральной среде,Криоконсервирование.Клетки штамма ресуспендируют в культуральной бычьей сйворотке, содержащей10 длиметилсульфоксида (концентрацияклеток 5 х 10 - 10 в 1 мл), разливают в пла 5 6стиковые ампулы при 4 С, помещают в толстостенную коробку иэ полипеноуретана ипереносят на 24 ч в холодильник (70 С), Затем клетки хранят в жидком азоте. Возможно программное замораживание соснижением температуры на 1 С в 1 миндо - 40 С с последующим переносом в жидкий азот. Размораживание осуществляют втечение 3 мин при 37 С, Клетки разводят в10 мл среды для культивирования, осаждают центрифугированием, ресуспендируют в5...

Номер патента: 1654338

Опубликовано: 07.06.1991

Авторы: Ветласенин, Ершов, Карпухина, Милованов

МПК: C12N 5/02, C12P 21/08

Метки: антител, восстановления, гибридных, животных, клеток, криоконсервации, мusсulus, моноклональных, питательная, после, продуцентов, противогриппозных, среда

...криопротектора, 15 размороженную суспензию центрифугируют 10 мин при 1000 об/мин, осадок ресуспендируют в 1,0 мп охлажденной среды КРМ 1-1640 и проводят подсчет жизнеспособных клеток путем окраши вания 1 Х-ным трипановым синим в камере Горяева (доля живых клеток 18 Х). Затем клетки разбавляют в известной среде КРМ 1-1640 и в разработанной среде в равных количествах до конечной 25 концентрации 0,8 х 10 кл/мл и разливают в 24-луночные пластины с двухдневной культурой макрофагов из брюшной полости мыши. Культивирование проводят при 37 С в атмосфере с 5 Х СО. На 30 третий день после размораживания подсчитывают число клеток в лунках и определяют коэффициент прироста, Культивирование осуществляют до формирования монослоя, после чего...

Номер патента: 1657527

Опубликовано: 23.06.1991

Авторы: Балаян, Беркова, Иванов, Кожич, Кусов, Насташенко, Шамборант

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, вирусу, гепатита, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, человека, штамм

...1,6 х 10 М тимидина, 20 еМ .-глутамина, суспендируют 55клетки пинетированием и распределяют в96-луночные плейты по 50 х 10 клеток в 100мкл среды в лунки, в которые эа день догибридизации высаживают мышиные перитонеальные макрофаги (5 х 10 клеток в лунку). Клоны гибридных клеток становятся заметными через 10-12 дней. Тестирование клонов проводят, когда клоны заполняют лунку на 207 ь. Положительные культуры клонируют методом предельного разведения в 96-луночных панелях на фидерном слое перитониальных макрофагов, внося по 30. 300 и 30000 клеток на панель.Для получения асцитов самкам мышей ВаЬ/с за 10 - 14 дней до инъекции гибридных клеток внутрибрюшинно вводят по 0,5 мл пристана.При введении (2 - 4)х 10 гибридных клебток у мышей...

Номер патента: 1659477

Опубликовано: 30.06.1991

Авторы: Демчева, Мантрова, Папковский, Пономарев, Савицкий, Чередникова

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, животных, клеток, копропорфирину, культивируемых, мusмusсulus, моноклональных, продуцент, штамм

...пассажи 1 раэ в 4-5 дней с подсчетом клеток. Для получения асцита мышам ВаЬ/с эа 7 дней до введения гибридомных клеток вводят 0,5 мл 2,6 10,14-тетраметилпентадекана в/б. На 7 день штамм клеток иньецируют в/б в количестве 500000 клеток в мышь. Асцитную жидкость отбирают на 10-й день, Объем асцита 5-6 мл. Клетки иэ асцита иеревивают новым мышам в течение 9 пассажей беэ заметного изменения титра моноклонэльных антител в асцитной жидкости.Контаминация, Бактерии и грибы в культуре не обнаружены. Тест на микоплаэму отрицателен.Кариологическая характеристика штамма: модальное число хромосом 90. Маркерных хромосом не выявлено.Продуктивность. штамма, Концентрация моноклональных антител в культуральной жидкости на 7-й день культивирования...

Номер патента: 1666531

Опубликовано: 30.07.1991

Авторы: Атанадзе, Красильников, Николаева, Новиков, Рубин, Сидорович

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, вируса, гибридных, гликопротеину, животных, клеток, клещевого, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, штамм, энцефалита

...ГАТ на обычнуюсреду следующего состава: средаКРМ 1-1640 с 15 фетальной телячьейсьворотки и 2 мМ 1-глютамина. Дляисключения возможности бактериально-.го пророста в среду добавляют гентамицин в дозе 50 мкг/мп.Гибридома по типу роста являетсясуспензионной культурой и растет ввиде гроздей из 10-30 клеток и в виде единичных клеток, Характер ростаменяется в зависимости от качестваиспользуемого пластика или стекла.Пересев культуры осуществляют путемзнергичного встряхивания культурального сосуда или смьвом клеток скультуральной поверхности средой поддавлением из шприца в случае ростакультуры в виде монослоя. Морфологияклеток предлагаемого штамма .-клеткинеоднородны по форме и размерам,но преимущественно имеют округлуюФорму и неровные...

Номер патента: 1666532

Опубликовано: 30.07.1991

Авторы: Байтубаев, Булашев, Гоголев, Муканов, Надточей, Несмеянов, Соколова

МПК: C12N 5/18, C12P 21/08

Метки: антитела, белку, гибридных, животных, клеток, коронавируса, крупного, культивируемых, мusсulus, моноклональные, нуклеокапсидному, продуцирующий, рогатого, скота, штамм

...в культуральной среде. В очищенной ас-. цитной жидкости концентрация иммуно глобулинов составляет 4 мг/мп.Характеристика полезного продукта. ИонАТ относятся к иммуноглобулинам подкласса С 2 Ь, ИонАТ специфически взаимодействуют с нуклеокапсидным белком молекулярной массы 53 КДа. Специфичность определяют методом чммуноблотинга. Контаминация. Контаминантов в клетках, включая бактерии, грибы, дрожжи и микоплазму, не обнаружено.Криоконсервапия, К осадку гибридных клеток добавляют эмбриональную сыворотку теленка, а затем диметил-. сульфоксид до конечной концентрации 10%. Суспензию клеток разливают в стерильные пластиковые ампулы с за винчивакщимися крьппками по 2 10 клес 6 ток в объеме 1 мп. Ампулы помещают в коробку из пенопласта и...

Номер патента: 1671687

Опубликовано: 23.08.1991

Авторы: Власик, Калантаров, Миткевич, Самохин, Стрельцова, Трахт

МПК: C12N 5/18, C12P 21/08

Метки: антитела, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклонального, продуцент, с-концевому, участку, фибриногена, цепи, человека, штамм

...инкубируют при комнатной температуре. Через 1,2, 10,30 и 60 мин расщеплениеостанавливают добавлением апротининадо 100 калликреиновых единиц на 1 мп.Полученные препараты фибриногена различных степеней расщепление разделяют 40гель-электрофорезом, переносят на нит-.роцеллюлозу и окрашивают методом иммуноблоттинга с использованием антител 5 А 2. При этом наблюдают окрашивание полос с мол .массами 340,45,22, 4520,17 и 15 кД. Первая из них соответствует интактному, нерасщепленномуфибриногену, остальные - продуктамего деградации. При этом через 30 миностается лишь полоса с мол.массой 5015 кД, а через 60 мин и она практически исчезает. В соответствии с известными данными, что наиболее чувствительным к действию плазмина являетсяС-концевой...

Номер патента: 1673597

Опубликовано: 30.08.1991

Авторы: Василов, Данилова

МПК: C12N 5/18, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, теофиллину, штамм

...отношению к метаболитам и аналогам теофиллина. Штамм депонирован под номером ВСКК(П) М 367 ДКлон продуцирует антитела, относящиеся к подклассу 1962 а.Для получения больших количествантител гибридные клетки вводят внутрибрюшинно мышам, предварительно сенсибилизированным пристаном.Антитела из асцитных жидкостей ионообменной хроматографией на ДЕАЕ - целлюлозе.Полученные моноклональные антитела используют в иммуноферментном методе определения теофиллина.Штамм характеризуется следующими признаками,Культуральные свойства клона 2634 типичны для гибридом. Клетки культивируют в монослое в концентрации 5-10 клеток/мл, время субкультивирования составляет около 48 ч,Продуктивность штамма. Штамм продуцирует специфичные к теофиллину монАТ с...

Номер патента: 1678830

Опубликовано: 23.09.1991

Авторы: Гуртовой, Дерюгина, Оловникова, Удалов, Чертков

МПК: C12N 5/18, C12P 21/08

Метки: антител, д-антигену, клеток, культивируемых, многоклональных, продуцент, резус, системы, человека, штамм

...С, 5"-;ь СОр в воздухе. Частота пассирования 3-4 сут, кратность рассева 1:2-1:3. Титрантител в культуральной жидкости, определяемой в прямой реакции агглютинации О+эритроцитов, обработанных бромелином,составляет 1;4096.Характеристика моноклональных антител, Моноклональные антитела, секретируемые штаммом 0-89/Н 6, выявляют, О-антиген эритроцитарной мембраны и егослабые формы (Ои); относятся к классу 6-иммуноглобулинов.Способ криоконсервирования. Криозащитная среда: 50, ростовой среды, 40;сыворотки, 10 Д диметилсульфоксида, Клетки в криозащитной среде помещают на сутки при - 70 С, после чего переносят вжидкий азот, Жизнеспособность после размораживания 85 - 90); культивирование после размораживания в плотности0,4 - 0,5 х 10...

Номер патента: 1682389

Опубликовано: 07.10.1991

Авторы: Лактионов, Нечаева, Рошке, Рыкова

МПК: C12N 5/18, C12P 21/08

Метки: musculus, антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, миоглобину, моноклональных, продуцент, человека, штамм

...хромогена 4-хлор-нафтола. Наличие антител определяют по степени антенсивности окрашивания пятен фиолетового цвета. Для дальнейшей работы отбирают только высокопродуктивные и специфичныеклоны по наиболее интенсивно окрашенным пятнам,П р и м е р 2. Анализ неперекрываемости эпитопов связывания монАТ штамма 4 О 4 с Мч.Клетки штамма помещают в пластиковые флаконы с площадью дна 75 см в колисят в жидкий азот. Размораживают клетки втермостате при 37 С, Жизнеспособностьклеток после размораживания составляет70 У,5 П р и м е р 1. Получение штаммагибридных культивируемых клеток мышиМоз,Мцзсцвз, продуцирующего монАТк Мч,Мышам линии ВА 1 В/с вводят 100 мкл10 раствора Мч в концентрации 0,5 мг/мл в 100мкл полного адъюванта Фрейнда. С интервалом в 3...

Номер патента: 1682390

Опубликовано: 07.10.1991

Авторы: Лактионов, Нечаева, Рошке, Рыкова

МПК: C12N 5/18, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, миоглобину, моноклональных, продуцент, человека, штамм

...следующими признаками. Штамм 404 продуцирует монАТ, обладающие высокими константами связывания, которые не теряют способность к связыванию с Мч после модификации их хелатными соединениями редкоземельных металлов, Эти свойства позволяют использовать монАТ вдвухсайтн ых флуороиммунометрических тест системах на Мч.П р и м е р 1. Получение штамма гибрид ных культивируемых клеток мыши Мозтозсоцз, продуцирующего монАТ к Мч.Мышам линии ВА 1 В/с вводят 100 мклраствора Мч в концентрации 0,5 мг/мл в 100 мкл полного эдьюванта Фрейнда. С интер валом в 3 недели проводят еще 2 инъекциив неполном адьюванте Фрейндэ. Зэ 4 дня до гибридизации водят 100 кмг Мч в 200 мкл физиологического раствора внутривенно. В следующие 2 дня повторяют иньекции внут...

Номер патента: 1685997

Опубликовано: 23.10.1991

Авторы: Вайль, Василов, Втюрина

МПК: C12N 5/20, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, гормону, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, тиреотропному, человека, штамм

...по ,явления окраски в лунках реакцию останав ливаЮт раствором 2 н, серной кислоты,Спектрофотометрическое определение реакции проводят при 492 нм, Из результатов следует, что монАТ Тспецифичны только к тиеотропному гоомону, Культуры гибридом, в супернатантах которых обнаружены антитела против ТТГ, не реагирующие с ФСГ, ХГЧб, СТГ и ЛГ человека, клонируют методом предельных разведений из расчета 0,3 клетки на лунку в среде ВРМ 3 1640 с 100 эмбриональной телячьей сыворотки, 2 мМ глутамина,5 х 105 М 2-меркаптоэтанола в присутствии гипоксантина (10 " М) и тимидина , (1,6 х 10 М).Штамм характеризуется следующими свойствами.Купьтуральные свойства, Клетки культивируют в монослое в концентрации 5 х 105 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 10 кл/мл,...

Номер патента: 1693045

Опубликовано: 23.11.1991

Авторы: Северин, Фуралев

МПК: C12N 5/20, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, трансферрину, человека, штамм

...клеток мышей сенсибилизируют внутрибрюшинной инъекцией 0,5 млминерального масла пристан (2,4,10,14-тетраметилпентадекан), Время образованияасцитных опухолей 10-16 сут. Перевариваемость асцитов 100-ная,Маркерный признак: продукция специфических монАТ к трансферрину человека,Класс 1 у 19 61.Подвижность изоферментов глюкозофосфатдегидрогеназы и лактатдегидрогеназы характерна для мышиных клеток.Контаминантов штамма 1 С 10 р 2/О,включая бактерии, грибы, дрожжи и микоплазмы, не обнаружено.Характеристика монАТ,Штамм 1 С 10 Бр 2/О гибридом продуцирует мышиные моноклональные иммуноглобулины класса О, подкласса 61.Принадлежность иммуноглобулинов к данному классу и подклассу определена методом иммуноферментного анализа сиспользованием...

Номер патента: 1693046

Опубликовано: 23.11.1991

Авторы: Горностаев, Данилов, Нягулов, Окулов, Олимпиева, Папаян, Торопова, Хролова, Чистякова

МПК: C12N 5/20, C12P 21/08

Метки: антитела, виллебранда, гибридных, животных, клеток, крови, культивируемых, мusсulus, моноклонального, продуцент, свертывания, системы, фактору, человека, штамм

...штамма на присутствие контаминирующих микроорганизмов, проведенная на культурах, постоянно выращиваемых без антибиотиков, показывает отсутствие бактерий, грибов, дрожжей и микоплазм,Клетки штамма 380 Ф 2 продуцируют в среду иммуноглобулины 96 класса, Это показано в твердофаэном иммуноферментном анализе с помощью серии моноспецифических кроличьих антисывороток к мышиным антителам классов 961, 962 а, 962 в, 96 З и 9 М. Специфичность антител оценивают в конкурентном иммуноферментном анализе с коммерческой сывороткой к фактору УШ й:А 9 и методом иммуногистохимического окрашивания эндотелиальных клеток пуповинной вены человека,Криоконсервирование штамма проводят в среде следующего состава, : среда МЕМ или ДМЕМ 50; сыворотка крупного...