Ветласенин
Питательная среда для восстановления после криоконсервации гибридных клеток животных mus мusсulus l. продуцентов противогриппозных моноклональных антител
Номер патента: 1654338
Опубликовано: 07.06.1991
Авторы: Ветласенин, Ершов, Карпухина, Милованов
МПК: C12N 5/02, C12P 21/08
Метки: антител, восстановления, гибридных, животных, клеток, криоконсервации, мusсulus, моноклональных, питательная, после, продуцентов, противогриппозных, среда
...криопротектора, 15 размороженную суспензию центрифугируют 10 мин при 1000 об/мин, осадок ресуспендируют в 1,0 мп охлажденной среды КРМ 1-1640 и проводят подсчет жизнеспособных клеток путем окраши вания 1 Х-ным трипановым синим в камере Горяева (доля живых клеток 18 Х). Затем клетки разбавляют в известной среде КРМ 1-1640 и в разработанной среде в равных количествах до конечной 25 концентрации 0,8 х 10 кл/мл и разливают в 24-луночные пластины с двухдневной культурой макрофагов из брюшной полости мыши. Культивирование проводят при 37 С в атмосфере с 5 Х СО. На 30 третий день после размораживания подсчитывают число клеток в лунках и определяют коэффициент прироста, Культивирование осуществляют до формирования монослоя, после чего...