Фаг ро29, лизирующий бактерии рrотеus мirавilis и рrотеus vulgaris

(5)5 С2 М 7/,1) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР(56) Ргогея 1 су О.И. ег. а 1, Т 11 е п 1 отрЬо 1 оу оЕ Ргосеия ЬасгеггорЬаВе, Л Сеп М 1 сгоЬ 1011965 41ТацЬепес 1. ц. Редпяггц 1 гцг чоп Ргогеия ВасгегорЬа 8 еп. - ,1. Арр 1, М 1 сгоЬ 1 о 1, 1968, 8. Изобретение относится , вирусологии,а именно к лечебным Ааг;Целью изобретения является д 1 агР 029, имеющий широкий спектр лцтического действия в отношении бактерийРгоСеия ш 1 гаЬ 111 я и Ргогеця чи 18 аг 1 я,Культурально-морфологические признаки. При посеве двуслоцньп; методомна агаре Мартена велцчица негативныхпятен равна 0,5-1 мм в диаметре, колонии прозрачные, край ровный. В бульоне Мартена при посевной дозе и хф 10 микробных клеток ца 1 мл средыи множественности 0,1, при инкубациипри температуре (37+1) С в течение4 ч накапливается в количестве дои 1) БОБ/мл,801654334 А 1(57) Изобретение относится к вирусологии, а именно к лечебным бактериофагам. Целью изобретения является АагР 029, имеющий плрокий спектр литического действия в отношении бактерийРгогеця щ(гаЬ 111.я ц Рго:еця чц 18 аг 1 я.Указаццьпй аг выделен цз сточных вод.Времд а,"сорбциц данного Аага ца бактерии-хозяине равно 25 лсцц, латентныйпериод длится 55 мцн, прц максимальном выходе Лага иэ одной клетки в количес"пве 115 частиц. Фаг лцэирует 48%све.евыделеццых от больных штаммовРгогеця г 1 гаЬ 1 я ц Ргогеця чи 1 даггя.2 табл,Физиологические прцэцакц. Титр Лага, то есть максимальное разведение, прц котором определяется лцтцческое действие Аага, равен и 1" БОЕ/жп. Время адсорбции 25 мин, латентный период 55 мин. Урожайность 115 частиц ца одну иАццированную клетку.Спектр литического действия. Фаг лиэцрует 48% свежевыделенцых от больных штаммов Ргогеця пь.гаЬ 111 я и Ргосеця чц 18 аг 1 я.Серологическце признаки.Путем иммунизации трех кроликов получают специфическую антиАаговую сыворотку, При этом первую инъекцию делают внутримышечно (2 мл с содержанием 1 10 БОЕ/лш вместе с полным1654334 Т а б л и ц а 1 Штамм Разведения фаэовой суспензии на питательном бульонеФаг Титр фаговыхчастиц,БОЕ/мп Р 029 Р.ш 18 агдз 6605 41:) 4 10 39 адъювантом Фрейнда), а затем через1 мес вводят внутривенно 2 мл фага110 ц БОЕ/мп, а на 10-й день послепоследней инъекции кроликов обескров 5лнвают и иэ крови получают сыворотку.Кинетику скорости нейтрализации определяют по методу М.Адамса, равна К=1400 1/мин.Морфологические признаки. Посредством электронного микроскопа устанавливают морфологию и размеры фаговых частиц. Вактериофаг Р 029 имеет гексогональную головку и сократимый отросток.На конце отростка отмечается наличиенекоторого утолщения. Размеры фаговойголовки 78 нм х 78 нм. Отростка340 нм х 22 нм, отростка в сокращенном виде 140 нм х 26 нм, свободногостержня 178 нм х 13 нм, шейки 17 нм.Фаг Р 029 обладает широким спектромлитического действия на бактерииРгоеоз ш 1 гаЬ 111 в и Ргосецз чи 18 агз,дополняет известную коллекцию и используется для изготовления лечебного 25препарата бактериодага протеус,П р и м е р. Фаговую суспенэию разводят десятикратным разведением доуровня 10 , Из каждой пробирки берутпробу по 1 мп фаговой суспенэин и добавляют смыв 18-часовой агаровой культуры в объеме О, 1 мл. К этой смесиодобавляют расплавленный до 46 СО,П-ный агар-агар на питательномбульоне, содержимое пробирки выпиваютна предварительно приготовленные чашки Петри с твердым слоем 1,5 Х-ногоагар-агара на питательном бульоне. Чашки оставляют до застывания верхнего слоя, Затем их переворачивают дном вверх и в таком положении инкубируют в термостате при 37 С 18 ч. На следующий день становится возможным подсчет стерильных пятен в виде прозрачных эон на непрозрачном фоне бактериального роста.Определение диапазона литического действия,1,5 Х-ный твердый слой агар-агара на питательном бульоне обрабатывают этиловым спиртом для сдерживания роения исследуемой культуры и чашкио высушивают в термостате при 37 С в те. чение 30 мин, После высушивания на поверхность агар-агара наносят полоски 4-часовой бульонной культуры. Полоски подсушивают и на них наносят суспенэию фага в виде капли.О Содержимое чашек инкубируют при 37 С в течение 4-13 ч. Лизирующне участки наблюдаются на полоске бактериального роста в области нанесения капли фагаРезультаты опытов представлены в табл. 1 и 2.Как следует из табл. 1 и 2, фаг обладает по отношению к штаммам Ргосеоз шдгаЬ 11 м и Ргоеов чи 18 агдв высокой активностью литического действия.Формула и э о бр ете ния Фаг РО 29 У Ф, лизирующий бактерии Ргосецв адгаЬ 111 в и Ргосеов чп 1 ааг 1 з.65433 м Таблица 2 Доля лизированных штаммов, Х Количестволизированных штамФаг оличествопроверенямов, ш р ште 48,4 748 36) 29 ПроизводственнаяполивалентнаярасаПроизводственнаяполивалентнаяраса с добавлением Фага Р 029 21,9 16 52,0 89 Составитель С.Светлышеведактор Н.Гунько Техред Л,Олийнык Корректор А.Обручар акаэ 1930 Тирам 369 ПодписноеНИКЛИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 НТ ССС роиэводственно-издательский комбинат "Патент", г.уагород, ул. Гагарина,10