Патенты с меткой «продуцент»

Номер патента: 1678832

Опубликовано: 23.09.1991

Авторы: Аникейчева, Калугин, Коваленко, Самко, Соколов, Фицнер, Фодор, Хорошутина, Эльдаров

МПК: C12N 1/20, C12N 9/14

Метки: lастовасillus, бактерий, продуцент, рlаnтаruм, рестриктазы, штамм

...и сеооводород - не образует.)Келатина уколом - разжижения нет,4 увствитель ность к антибиотикам,Культура чувствительна ко многим антибиотикам: пенициллину, стрептомицину, канамицину, тетрациклину, хлорамфениколу,эритромицину, олеандомицину, неомицину,карбенициллину, линкомицину, гентамицину, метициклину, оксациллину, нистатину,ампициллину; резистентна к полимиксину.Оптимальные условия выращивания ихранения, Культура хорошо растет на МПБ,бульоне Хоттингера, средеВ и среде ч. 7,без аэрации, при 30-37 С.Наибольший выход биомассы, содержащей рестриктазург 1, получают при выращивании на питательной среде, котораясодержит в 1 л, г; дрожжевой экстракт 5;пептон 10; глюкоза 5; йа 2 НРОп 12 Н 20 2,2;МаС з; М 980 0,5; СаС 20,25.Существенным...

Номер патента: 1678833

Опубликовано: 23.09.1991

Авторы: Аникейчева, Калугин, Самко, Соколов, Фицнер, Фодор, Хорошутина, Эльдаров

МПК: C12N 1/20, C12N 9/14

Метки: alvei, bacillus, бактерий, продуцент, рестриктазы, штамм

...в течение 4 - 5 ч додостижения конца логарифмической фазыроста, 40На среде "рыбный экстракт" культурарастет медленно, а активность рестриктазыв биомассе значительно ниже, чем при культивировании на средах Хоттингера иВ.Оптимальная температура роста 37 ОС, 45но растет и при 40-45 С,Рабочие культуры пересевают иа бульон Хоттиигера один раз в 7 - 10 дн, Храняткультуру в полужидком агаре под вазелиновым маслом или в лиофилизированном состоянии в ампулах,Культура непатогенна для мышей.Существенным фактором культивирования является аэрация, В анаэробных условиях выход рестриктазы Вачснижается, 55Инкубационная смесь для определенияактивности рестриктазы Вач 6751 обьемом25 - 50 мкм содержит 0,01 М трис-НС 1, рН7,5, 0,01 МсС 2, 0,001 М...

Номер патента: 1678834

Опубликовано: 23.09.1991

Авторы: Брузгулис, Примакова, Рагавичюс, Рузгене, Фиш

МПК: C12N 1/20, C12N 9/88

Метки: аргининдекарбоксилазы, бактерий, продуцент, рноsрноrеuм, рнотовастеriuм, штамм

...засевают суспензией клеток в количестве5 мл (по объему). Культуру выращивают 5012 ч. при 30 С при слабой аэрации(100 об./мин).Для получения биомассы Рп,рЬозрйогецш 189 штамм выращивают на традиционной полусинтетической для данноговида среде (Р 1, дополнительно добавляя Ь-аргинин НС 1 как индуктор), г/л:ИаС 1 30,0, МБОс ф 7 НО 0,2, КНРО1,0; ИаНРО 6,0; (ИН 4,)ИРОДА 0,5; глицерин 3 мл, пептон 10,0, Ь-аргинин НС 11,5, дистиллированная вода до 1 лрН 6,4 Ю,05,Питательную среду разливают по200 мл в качалочные колбы емкостью500 мл и стерилизуют 30 мин при0,5 атм. Стерильную питательную сре.ду засевают инокулятом - культуройРЬ.рЬозрЬогецш 189 в количестве .10(по объему), Выращивание продуцентав колбах проводят. на качалке(100 об,/мин) согласно...

Номер патента: 1680768

Опубликовано: 30.09.1991

Авторы: Булгакова, Кириллина, Попов, Шишкина

МПК: C12N 1/04

Метки: антигена, бактерий, еsснеriснiа, капсульного, микроба, продуцент, фракция, чумного, штамм

...с добавлением 50 мкг/мл ампициллина). выращивают при 37 С в течение 18 ч с аэрацией.При этом титр клеток в бульонной культуре штамма У. реяз ЕЧ составляет 2,5 х 10 м.к./мл,би для штамма Е, со КМ 13 рАГ9 х 10 м.к,/мл, После осаждения клеток центрифугированием при 6000 об/мин в течение 10 мин супернатанты исследуют в реакции пассивной гемагглютинации с чумным эритроцитарным моноклональным к фракциииммуноглобулиновым диагностикумом (производство Среднеазиатского ПЧИ).Для количественного определения капсульного антигена фракцияв культуральной среде и определения чувствительности метода используют препарат антигена Ф 1 из набора "Тест-система иммуноферментная моноклональная для идентификации антигена Ф 1 возбудителя чумы" (производство...

Номер патента: 1682389

Опубликовано: 07.10.1991

Авторы: Лактионов, Нечаева, Рошке, Рыкова

МПК: C12N 5/18, C12P 21/08

Метки: musculus, антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, миоглобину, моноклональных, продуцент, человека, штамм

...хромогена 4-хлор-нафтола. Наличие антител определяют по степени антенсивности окрашивания пятен фиолетового цвета. Для дальнейшей работы отбирают только высокопродуктивные и специфичныеклоны по наиболее интенсивно окрашенным пятнам,П р и м е р 2. Анализ неперекрываемости эпитопов связывания монАТ штамма 4 О 4 с Мч.Клетки штамма помещают в пластиковые флаконы с площадью дна 75 см в колисят в жидкий азот. Размораживают клетки втермостате при 37 С, Жизнеспособностьклеток после размораживания составляет70 У,5 П р и м е р 1. Получение штаммагибридных культивируемых клеток мышиМоз,Мцзсцвз, продуцирующего монАТк Мч,Мышам линии ВА 1 В/с вводят 100 мкл10 раствора Мч в концентрации 0,5 мг/мл в 100мкл полного адъюванта Фрейнда. С интервалом в 3...

Номер патента: 1682390

Опубликовано: 07.10.1991

Авторы: Лактионов, Нечаева, Рошке, Рыкова

МПК: C12N 5/18, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, миоглобину, моноклональных, продуцент, человека, штамм

...следующими признаками. Штамм 404 продуцирует монАТ, обладающие высокими константами связывания, которые не теряют способность к связыванию с Мч после модификации их хелатными соединениями редкоземельных металлов, Эти свойства позволяют использовать монАТ вдвухсайтн ых флуороиммунометрических тест системах на Мч.П р и м е р 1. Получение штамма гибрид ных культивируемых клеток мыши Мозтозсоцз, продуцирующего монАТ к Мч.Мышам линии ВА 1 В/с вводят 100 мклраствора Мч в концентрации 0,5 мг/мл в 100 мкл полного эдьюванта Фрейнда. С интер валом в 3 недели проводят еще 2 инъекциив неполном адьюванте Фрейндэ. Зэ 4 дня до гибридизации водят 100 кмг Мч в 200 мкл физиологического раствора внутривенно. В следующие 2 дня повторяют иньекции внут...

Номер патента: 1682391

Опубликовано: 07.10.1991

Авторы: Адамов, Казакова, Щуркина

МПК: C12N 15/01, C12P 1/04

Метки: viвriо, бактерий, вибрионов, используемый, качестве, меланина, меланинпродуцирующих, отбора, продуцент, сноlеrае, тест-объекта, холерных, штамм, штаммов

...Отношение к источникам углерода: сбраживает глюкозу, маннит, сахарозу, мальтозу, крахмал, маннозу; не сбраживает арабинозу,мактозу.Отношение к источникам азота.Для хорошего роста в питательных средах должно быть от 100 до 200 мг.о амин- ного азота, Штамм не обладает уреазной активностью.Имеет декарбоксилазу лицина и оргентина, не имеет дигидролиза аргинина, обладает протеолитической активностью.Продуцент индол, не продуцирует сероводород, разжижает желатин,Растет в 1 О-ный пептонной воде с 1 МаС, не растет - в присутствии 7 ф йаС.Чувствителен к стрептомицину, тетрациклину, эритромицину, мономицину, неомицину, левомецитину, Агглютинируется холерными выворотками О - в.разведении 1:100 и ЯО - 1.200, Лизируется цельным фагом эльтор....

Номер патента: 1505022

Опубликовано: 15.10.1991

Авторы: Ильина, Ливанова, Смирнов, Смирнова

МПК: C12N 15/00

Метки: viвriо, бактерий, в-субъединицы, днк, кодирующая, конструирования, плазмидная, продуцент, р1емз, рекомбинантная, синтез, сноlеrае, субъединицы, токсина, холерного, штамм

...инкубируот 18 ч гГи 37 С, В каче-. зеконтроля используют исходный штамм /, 1505022С 1)01 егае С 197 сегрупп д )акже )/ эгилбензтидзолин-сульфанд. Через 30с 1)оегде 569 В н качестве этдл.,с ого штал 1- мин экспозиции при комнаной тепеГ)д)ума - продуцента холерного то:синд. ре при постоянном встряхивании измеряютКолонии штаммов С 197, КМ 93 и 569 В оптическу 0 плотность раствора при 405 нмпереносят методом реплик на чашки с 1%- 5 Чувствительность метода в данной серииным отмытым синкдзным дгаром, содержа- опытов составляет 1 нг, В соответствии сощим 1/ отмытых в синкдз Ом бульоне установленной чунс)вигР. ьностью и ГооФ%эритроциее бард д;"осРГ)ы инкубируст 13 с етом числя ныро ших о процессе культи 011) 39 С )дл, еают ггое 10,5;, СинказнО-...

Номер патента: 1684334

Опубликовано: 15.10.1991

Авторы: Вьюнов, Дурасова, Жаковская, Коварская, Михайлова

МПК: C12N 1/16, C12P 33/00

Метки: 24(28)-диен-3, caudida, диметилэргоста-8, дрожжей, маlтоsа, ола, продуцент, штамм

...пастообразный, гладкий с ризоидным краем. Пигмент в среду не выделяет;б) среда сусло-агар, Беличина клеток двухсуточной культуры (3,5 - 3,8)х(4,0 - 4,5) .мкм. Диаметр колонии 15-суточной культуры 0,8 см. Штрих светло-кремовый, выпуклый, пастообразный, гладкий с резоидным краем, Пигмент в среду не выделяет;в) среда минимальная. Величина клеток двухсуточной культуры 3,5 - 3,8)х(4,5 - 4,5) мкм. Диаметр колонии 15-суточной культуры 0,8 см, Штрих розовый, выпуклый, пастообраэный, гладкий с риэоидным краем. Пигмент в среду не выделяет.В тонком слое сред УАРД и сусло-агар образует характерный псевдомицелий,На среде Городковой и среде с ацетатом натрия спор не образует.Оптимальные значения температуры выращивания 28,2 ОС, рН 4,.5.Штамм...

Номер патента: 1684338

Опубликовано: 15.10.1991

Авторы: Бердова, Ветрова, Сидоренко, Шлапацкая

МПК: C12N 5/18

Метки: антигену, антител, гибридных, дифференцировочному, животных, клеток, культивируемых, лимфоцитов, мusсulus, моноклональных, продуцент, человека, штамм

...Овод, Наглочэ, йа)Р, Вагпоз, ЕВ(лимфома Беркитта), РРМ 1-8226 (множественная миелома), Т-клеточные линии МО -4, ССРЕНз В 2, ) Ог 1 Э 1, СЕМ, МТ 4, Н 9, эритробластоидная линия К, МеЧЧО (меланома), А(аденокарцинома шейки матки). Все линии клеток культивируют на среде БРМс 10; инактивированной эмбриональной телячьей сьРворотки. Кроме того, используют лимфоциты крови, стимулированные митогенами, клетки крови и кроветворных органов 10 практически здоровых людей, 66 больных с различными вариантами лимфоидных форм лейкоэов, 3 больных острым миелобластным лейкоэом (ОМЛ), 33 больных лимфогранулематоэом (Л ГМ) и неходжкинскими злокачественными лимфомами (НЗЛ), клетки миндалин 7 детей с хроническим тонзиллитом в фазе компенацииМонАТ ИПОне...

Номер патента: 1684339

Опубликовано: 15.10.1991

Авторы: Агапов, Войтенок, Грэн, Коричнева, Кушниров, Панютич, Скрябин, Смирнов, Тер-Аванесян, Тоневицкий, Ураков, Циманис

МПК: C12N 15/26

Метки: cerevisiae, sасснаrомyсеs, дрожжей, интерлейкина-2, продуцент, человека, штамм

...содержащий структурную область гена интерлейкиначеловека, и в результате получают плазмиду рА 19, Есой-Яа 1 1 - фрагмент (1,8 т.п,н) плазмиды рА 19 клонируют по тем же сайтам в плаэмиду рГТР 4, сОдержащую терминатор транскрипции гена кислой фосфата з ы Р Н 05.В полученной таким образом плаэмиде рУ 116 сайт Есой 1 затем заменяют при помощи линкеров на сайт Вагп М 1, в результате получают плазмиду рУ 116 В. Ващ М 1 - Нпд 111 - фрагмент плаэмиды рУ 116 В клонируют в плазмиду рЗОВ 207 и получают плазмиду рЯ 1711 размером 8,9 т,п,нсодержащую ген ИЛчеловека под контролем препрообласти гена альфа-фактора и способная к репликации в дрожжах.Штамм бВ-Н 28/рЯ,.11711 - продуцент интерлейкиначеловека получен трансформацией клеток Я,сегеч 1 з 1...

Номер патента: 1685997

Опубликовано: 23.10.1991

Авторы: Вайль, Василов, Втюрина

МПК: C12N 5/20, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, гормону, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, тиреотропному, человека, штамм

...по ,явления окраски в лунках реакцию останав ливаЮт раствором 2 н, серной кислоты,Спектрофотометрическое определение реакции проводят при 492 нм, Из результатов следует, что монАТ Тспецифичны только к тиеотропному гоомону, Культуры гибридом, в супернатантах которых обнаружены антитела против ТТГ, не реагирующие с ФСГ, ХГЧб, СТГ и ЛГ человека, клонируют методом предельных разведений из расчета 0,3 клетки на лунку в среде ВРМ 3 1640 с 100 эмбриональной телячьей сыворотки, 2 мМ глутамина,5 х 105 М 2-меркаптоэтанола в присутствии гипоксантина (10 " М) и тимидина , (1,6 х 10 М).Штамм характеризуется следующими свойствами.Купьтуральные свойства, Клетки культивируют в монослое в концентрации 5 х 105 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 10 кл/мл,...

Номер патента: 1686000

Опубликовано: 23.10.1991

Авторы: Дегтярев, Пучкова, Речкунова, Серов, Терещенко

МПК: C12N 1/20, C12N 9/14

Метки: bacillus, sтеаrотнеrморнilus, бактерий, продуцент, рестриктазы, штамм

...Выход фермента Взз Т не менее 10000 ед, акт,/г влажной биомассы.Полученная рестриктаза Взз Т характеризуется следующими свойствами; узнает и специфически расщепляет последовательность нуклеотидов СС(А/Т)(А/Т)86, оптимальное значение рН для действия рестриктазы 7,5 - 8,0, оптимальная температура действия 50-55 С, оптимальная концентрация МаС 50 мМ.Определяющие отличия предлагаемого штамма В. зееагойегаорЫцз (360) В: высокое содержание рестриктазы Взз Т 1, составляющей 10000 ед.акт./г влажной биомассы (в 5 раз выше), отсутствие патогенности штамма, использование для культивирования микроорганизмов простой дешевой среды.П р и м е р 1. Получение биомассы.Клетки В. з 1 еагойепворЫЬз (360), хранящиеся под слоем вазелинового масла при 40 С,...

Номер патента: 1687616

Опубликовано: 30.10.1991

Авторы: Егоров, Стоянова

МПК: C12N 1/20, C12P 21/00

Метки: lастis, sтrертососсus, антибиотика, низина, продуцент, штамм

...количества диацетила и ацетоина (по креатиновой пробе), за 8-9,5 ч инкубирования - полипептидный антибиотик низин с активностью его в культуральной жидкости до 4000-4200 МЕ/мл, Штамм устойчив к низину, фузидину, рифампицину, неомицину, пенициллину, фагоустойчив, не патогенен, Высокая активность штамма стабильна в течение 22 генераций и при длительном хранении в лиофильном состоянии в ампулах с защитной средой, содержащей, О ; желатоза 11; сахароза 22, глютамат натрия 4,4; цитрат натрия трехзамещенного 50,0, при 4 - 6 С; в течение месяца штамм можно хранить в условиях холодильника в виде молочного сгустка. Перевивку производят посредством внесения сгустка с одной микробиологической петли в стерильное обезжиренное молоко (8 - 10 мл)....

Номер патента: 1689400

Опубликовано: 07.11.1991

Авторы: Дегтярев, Пучкова, Речкунова, Серов, Терещенко

МПК: C12N 9/14

Метки: flаvовастеriuм, бактерий, ваlusтinuм, продуцент, рестриктазы, штамм

...неутилизирует. Лизин, аргинин, орнитин и фенилаланин не ферментирует,Отношение к антибиотикам.Культура устойчива к пенициллину, ампициллину,мономицину, неомицину, канамицину, оксациллину, чувствительна ктетрацикливу, стрептомицину, олеандомицину, левомицетину, эритромицину, карбенициллину, линкомицину, гентамицину,.рифампицину.Штамм хранят в лиофильно-высушенном состоянии и на питательном агаре подваэелиновым маслом,Для культивирования Е.Ьацзтпцпч 324применяют питательную среду следующегосостава, дистиллированная вода 1000,0; сухой дрожжевой экстракт 20,0; уксуснокислый натрий 2,0, сернокислый магний 0,2,фосфор н окисл ый калий 2,0. Готовая средаимеет рН 7 Культивирование проводят при 30 С со скоростью вращения качалки 200 об/мин до...

Номер патента: 1693045

Опубликовано: 23.11.1991

Авторы: Северин, Фуралев

МПК: C12N 5/20, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, трансферрину, человека, штамм

...клеток мышей сенсибилизируют внутрибрюшинной инъекцией 0,5 млминерального масла пристан (2,4,10,14-тетраметилпентадекан), Время образованияасцитных опухолей 10-16 сут. Перевариваемость асцитов 100-ная,Маркерный признак: продукция специфических монАТ к трансферрину человека,Класс 1 у 19 61.Подвижность изоферментов глюкозофосфатдегидрогеназы и лактатдегидрогеназы характерна для мышиных клеток.Контаминантов штамма 1 С 10 р 2/О,включая бактерии, грибы, дрожжи и микоплазмы, не обнаружено.Характеристика монАТ,Штамм 1 С 10 Бр 2/О гибридом продуцирует мышиные моноклональные иммуноглобулины класса О, подкласса 61.Принадлежность иммуноглобулинов к данному классу и подклассу определена методом иммуноферментного анализа сиспользованием...

Номер патента: 1693046

Опубликовано: 23.11.1991

Авторы: Горностаев, Данилов, Нягулов, Окулов, Олимпиева, Папаян, Торопова, Хролова, Чистякова

МПК: C12N 5/20, C12P 21/08

Метки: антитела, виллебранда, гибридных, животных, клеток, крови, культивируемых, мusсulus, моноклонального, продуцент, свертывания, системы, фактору, человека, штамм

...штамма на присутствие контаминирующих микроорганизмов, проведенная на культурах, постоянно выращиваемых без антибиотиков, показывает отсутствие бактерий, грибов, дрожжей и микоплазм,Клетки штамма 380 Ф 2 продуцируют в среду иммуноглобулины 96 класса, Это показано в твердофаэном иммуноферментном анализе с помощью серии моноспецифических кроличьих антисывороток к мышиным антителам классов 961, 962 а, 962 в, 96 З и 9 М. Специфичность антител оценивают в конкурентном иммуноферментном анализе с коммерческой сывороткой к фактору УШ й:А 9 и методом иммуногистохимического окрашивания эндотелиальных клеток пуповинной вены человека,Криоконсервирование штамма проводят в среде следующего состава, : среда МЕМ или ДМЕМ 50; сыворотка крупного...

Номер патента: 1693056

Опубликовано: 23.11.1991

Авторы: Бачина, Васильева, Великжанина, Жданова, Соколов, Ямпольская

МПК: C12N 15/01, C12P 13/22

Метки: bacillus, suвтilis, бактерий, продуцент, фенилаланина, штамм

...В качестве источника углерода используют сахарозу или содержащие ее субстраты,например технологический сахар, в качестве источника азота - мочевину или соли аммония, в качестве ростовых веществкукурузный экстракт. Ферментацию осуществляют в течение 46-72 ч в условиях аэрации при 28-37 С, рН 6-8, в колбах на качалкеили в ферментере. В конце ферментации вкультуральной жидкости накапливается до17 г/л фенилаланина.Препарат (.-фенилаланина из ферментационного раствора готовят в виде кормового препарата или выделяют вкристаллической форме известными способами,П р и м е р 1. Штамм Вас, зоЬМПз ВКПМВвыращивают в течение 18 ч при 37 Сна агаризованной среде Хоттингера. Затемпетлей засевают колбы объемом 250 мл, содержащие 30 мл посевной среды....

Номер патента: 1694643

Опубликовано: 30.11.1991

Авторы: Арсатянц, Бачина, Беларева, Гусятинер, Дебабов, Жданова, Козлов, Лившиц, Плотникова, Позднякова, Соколов, Хургес, Цыганков, Чистосердов, Шакалис, Шолин, Янковский

МПК: C12N 15/00, C12P 13/08

Метки: l-треонина, бактерий, еsснеriснiа, продуцент, штамм

...(плазмида рИС 40) и известного (плазмида рай 7) штаммов. Клетки обоих штаммов выращивали в присутствии соответствующего антибиотика до ранней стационарной фазы и засевали среду Луриа, лишенную антибиотиков, с исходным титром 5. После 48 ч культивирования полученными клетками вновь засевали такую же среду до исходного титра 50 и вновь инкубировали 48 ч. Каждый пассаж соответствовал 20 генерациям. После указанных пассажей клетки высевали на агаре Луриа и выросшие колонии проверяли на устойчивость к стрептомицину и пенициллину (табл,1).Иэ данных табл.1 видно, что плазмида рИС 40 стабильно сохраняется в клетках нового продуцента в неселективных условиях. В этих же условиях клетки известного штамма быстро утрачивают плазмиду. 10 15 20...

Номер патента: 1694647

Опубликовано: 30.11.1991

Авторы: Африкян, Дегтярев, Репин, Речкунова, Хачатурян, Читчян

МПК: C12N 1/20, C12N 9/14

Метки: bacillus, бактерий, вrеvis, продуцент, рестриктазы, штамм

...качалках при 30 С.Недостатками данного штамма (по литературным данным) являются низкий выход фермента, составляющий 3000 ед/г сырой биомассы, а также требовательность к богатым и дорогостоящим питательным средам (выход биомассы не указан). Цель изобретения - выявление штамма ВасИоз Ьгечз - продуцента, синтезирующего рестриктаэу ВЬч 121, способную узнавать и расщеплять последовательность нуклеотидов 56(А/Т)6 С(А/Т)Сс более высоким выходом фермента.Штамм выделен из бурой окультуренной почвы в результате систематического поиска штаммов - продуцентов эндонуклеаз рестрикции в роде ВэсИоз и хранится в ВКПМ под регистрационным номером В,Рестриктаза иэ ВасИоз Ьгечз Вследующими признаками.Кул ьтурал ьно-морфологические и ризнаки. На МПА...

Номер патента: 1695827

Опубликовано: 30.11.1991

Авторы: Еити, Казуо, Кен, Мидори, Мунеку, Наганори, Рейко, Тецузои, Тосио, Ясуо

МПК: C12N 15/58

Метки: бактерий, варианты, еsснеriсна, полипептида, продуцент, проурокиназы, свойствами, штамм

...ДНК, служащей н качествефона. 2 мкл реакционной смеси гидролизуют Я 1-нуклеазой, инкубируют прио,26 С в течение 30 мин, Реакцию завершают добавлением 10 мкл 0,25 Х трисНС 1 (рН 8, О) .4. Трансформация Е.со 1 з(Х 103.10 мкл указанной реакционной смеситрансформируют Е.со 13(Х 103,5. Классификация мутантов.С использованием зонда - олигонук-",пеотида, использовавшегося н качествезатравки, Фаговые бляшки классифицируют гибридизацией бляшек для определе.ния мутантного Фага. Бляшки переносят50с мягкой агаровой среды на нитроцеллюлозный Фильтр, нагревают н вакуумев течение 2 ч при 80 С и гибридизируютв течение ночи и растворе. Фильтр55промывают и мутантно-Фагонь(е бляшки,дающие положительные сигналы, изолируют, Мутантный Фаг дает...

Номер патента: 1412288

Опубликовано: 07.12.1991

Авторы: Алафаева, Буриков, Демина, Жданова, Козырева, Румянцева, Соколов, Шолин, Ясиновский

МПК: C12N 1/20, C12P 13/06

Метки: flаvuм, бактерий, вrеviвастеriuм, продуцент, серина, штамм

...следующего состава, г/л: сахароза - 120; (БН) ВО+Р 4 - 041 11804 711 О - Оф 41мел - 35,0; кукурузный экстракт "4 О; биотин или дестиобиотин -150 мкг/л; тиамин - 100 мкг/л; водопроводная вода - остальное, Все компоненты среды стерилизуют вместе при0,5 атм в течение 30 мин. Ферментацию проводят на указанной выше качалке при 28 С, После 96 ч культивирова"ния в культуральной жидкости образуется 14,5 г/л 1.-серина, а также аланин, глицин и глутаминовая кислота.Выделение кристаллического Ь-се"рина проводят следующим образом:380 мл культуральной жидкости с концентрацией серина 14,5 г/л, содержащей также 6,3 г/л глутаминовой кисло"ты, 2,6 г/л аланина и 1 г/л глнцина,после отделения биомассы пропускаютчерез колонку с сульфокатионнтомКУ-8 в...

Номер патента: 1698287

Опубликовано: 15.12.1991

Авторы: Авдеев, Барышников, Жордания, Кадагидзе, Казачкина, Кармакова, Короткова, Якубовская

МПК: C12N 5/20, C12P 21/08

Метки: антигену, антитела, гибридных, глобул, женского, животных, жировых, клеток, культивируемых, мusсulus, мембран, молока, моноклонального, продуцент, штамм

...специфичности, клонируют методом предельных разведений на фидере из клеток селезенки и тимуса мышей ВА 1 В/С:Для приготовления фидера кусочки тимуса и селезенки разрушают в стеклянном гомогенизаторе Поттера, Взвесь клеток фильтруют через 2 слоя марли, Суспензию клеток разливают по 0,1 мл в лунки 96-лу 40 45 50 роля используют сыворотку крови мыши,35 а также поликлональные антитела кроликаТитр антител в культуральной жидкостиопрсделяют в иммунофлюоресцентном тесте. Титр антител в культуральной жидкости равен 500,5 Для выращивания асцитной опухоли изштамма гибридных клеток пригодны мыши самки ВА 1 ВС. Интактным мышам за 1 - 7 дн дс прививки опухоли вводят внугрибрю. шинно по 0,5 мл 3%-ного пептона на вазели новом масле, Клетки гибо 7...

Номер патента: 1703689

Опубликовано: 07.01.1992

Авторы: Билай, Гомартели, Джобава, Квеситадзе, Ломкаци, Церетели, Школьный

МПК: C12N 9/14, C12N 9/26

Метки: canescens, гриба, продуцент, реniсilliuм, фруктофуранозидазы, штамм

...короткой,Культуральные признаки. На агариэованных искусственных средах (сусло-агар, картофельно-глюкоэный агар, картофельный агар) и синтетических агаризованных средах(средах Чапека, Сабура, Ролена-Тома. агариэованной среде с сахарозой) штамм растет хорошо,Линейный рост колоний штамма на агаризованных средах по дням: сусло-агаровой среде 5-й день 35-48 мм; 10-й день - до 85 мм; среда Чапека - 5-й день 30 мм; 10-й день 40 мм; агаризованная среда с лактозой - 5-й день 28-40 мм; 10-й день до 70 мм.На отрубях в условиях твердо-фазной ферментации штамм растет хорошо.Отношение к углеродному питанию, Хороо усваивает моносахариды; глюкозу, арабинозу, сахароспирты: сорбит, манит, дульцит, иэ дисахаридов: лактозу, сахарозу, мальтозу, а также...

Номер патента: 1703691

Опубликовано: 07.01.1992

Авторы: Гилева, Добрынин, Коробко, Кравченко, Филиппов, Чувпило

МПК: C12N 1/21, C12N 15/21

Метки: бактерий, днк, еsснеriснiа, интерферона, кодирующая, лейкоцитарного, плазмидная, полипептид, полипептида, продуцент, рекомбинантная, свойствами, человека, штамм

...Из гибридизующихся с этой пробой клонов выделяют плазмидную ДНК, строение которой подтверждают рестриктным анализом с помощью рестриктаз Наб, Мзри Най+ЯаОК раствору 10 мкг ДНК плазмиды Р 6 А 23/Яа в 80 мкл буфера В без МаСГприбавляют 20 ед. каждой из рестрикционных нуклеаз Яаф и Крп и инкубируют 90 мин при 37 С, Анализ полноты гидролиза и выделение векторного Крп/ЯаГ-фрагмента (3,4 т,п о) проводят при помощи электрофореза в 1 -ном геле легкоплавкой агароэы, Одновременно 10 мкг ДНК плазмиды р ецГт 17 в 100 мкл буфера В обрабатывают 1,5 ч при 37 С 20 ед, каждой из рестриктаэ 89 г и ЯаГ, после чего фрагмент величиной около 500 п,о., содержащий синтетический ген а 2 интерферона, выделяют при помощи электрофореза в 5 ь-ном...

Номер патента: 1703692

Опубликовано: 07.01.1992

Авторы: Алексенко, Болотин, Борухов, Бумялис, Гервинскас, Дебабов, Евдонина, Изотова, Козлов, Костров, Лапидус, Лебедева, Лившиц, Машко, Мочульский, Носовская, Плотникова, Подковыров, Рыжавская, Скворцова, Стеркин, Стронгин, Трухан, Юрин, Янулайтис

МПК: C12N 1/21, C12N 15/23, C12P 21/00 ...

Метки: 1-13, i-интерферона, бактерий, днк, еsснеriснiа, интерферона, кодирующая, конструирования, плазмидная, продуцент, рекомбинантная, синтез, фибробластного, человека, штамм

...в 20 мкл -20, 4 мкг полученного таким образом препарата ДНК обрабатывают Кленовским фрагментом ДНК-полимеразы 1 Е.со в указанных условиях для достройки возможно имеющихся одноцепочечных концов молекул до двухцепочечных. Реакцию останавливают фенольной депротеинизацией, нуклеиновые кислоты осаждают этанолом и растворяют в 20 мкл Н 20,Лигирование линейных молекул ДНК с двуцепочечными концами проводят при 16 С в пробе объемом 50 мкл, содержащей 60 мМ трис-НС, рН 7,6, 10 мМ М 9 С 2, 10 мМ дитиотреитол, 4 мМ АТФ, 8 -ный полиэтиленгликоль - 6000, 4 мкг ДНК, 100 ед, ДНК- лигазы Т 4. После завершения реакции пробу разбавляют водой в четыре раза и проводят осаждение нуклеиновых кислот этанолом, 2 мкг растворенной в Н 20 ДНК обрабатывают...

Номер патента: 1703693

Опубликовано: 07.01.1992

Авторы: Авот, Грен, Дебабов, Козлов, Косиков, Костров, Мазель, Машко, Мочульский, Носовская, Романчикова, Скворцова, Стеркин, Стронгин, Трухан, Циманис, Черновская, Юрин

МПК: C12N 1/21, C12N 15/26

Метки: 2-19, бактерий, днк, еsснеriснiа, интерлейкина-2, кодирующая, конструирования, плазмидная, продуцент, рекомбинантная, синтез, человека, штамм

...ДНК длиной =750 п.нвырезает и проводят элюцию ДНК. Для достройки о,;ноцепочечных концов ДНК с помощью Кленовского фрагмента ДНК-полимеразы 1 Е со, выделенный из геля фрагмент обоа;э; .пгают в пробе объемом 20 мкл, содер,кэ.,ей 10 мМ трис-НС 1, рН 8,0, 10 мМ МдС 1:, по ЗО мкМ дезоксирибонуклеозидтрифосфатов Реакцию останавливают прогреванием, ДНК из смеси переосаждают этанолом и растворяют в 20 мкл,Полученный препарат фрагмента плазмиды рАА 1213-23 В используют на дальнейших этапах конструирования для интеграции кодирующей части интерлейкиначеловека в векторную плазмиду рВВ 124 В.3 мкг ДНК плазмиды рВВ 124 В расщепляют рестриктазой ВагпН в пробе обьемс . 12 мкл, содержащей буфер для рестрикци:- Реакцию останавливают фенольной...

Номер патента: 1705338

Опубликовано: 15.01.1992

Авторы: Будрис, Замбржицкий, Коваленко

МПК: C12N 1/16, C12N 9/04

Метки: candida, requinii, алкогольдегидрогеназы, дрожжей, продуцент, штамм

...гранулированы, опушенныепсевдомицелием,Минеральная агаризованная среда сэтанолом (2,0 об, оь), трое суток, 30 С, (посевштрихом); рост обильный, сплошной, переходящий в цепочку отдельных колоний, крайровный, серо-белого цвета, колонии круглые, 3,5 мм, матовые, край ровный, профильслабо выпуклый, пастообразной консистенции, серо-белого цветаЧерез месяц (17 С) колонии серого цвета, не гранулированы, край не опушен псевдомицелием. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Рост на глюкоэо-картофельном агаре:на стекле отдельные клетки и псевдомицелий.Кукурузный агар: на стекле (анаэробныеусловия) псевдомицелий и почкующиесяклетки.Истинный мицелий и артоспоры отсутствуют, Растет без витаминов на среде Ридер+глюкоза.Физиолого-биологические...

Номер патента: 1705343

Опубликовано: 15.01.1992

Авторы: Бердова, Ветрова, Сидоренко, Шлапацкая

МПК: C12N 5/18

Метки: антигену, антител, гибридных, дифференцировочному, животных, клеток, культивируемых, лимфоцитов, мusсulus, моноклональных, продуцент, человека, штамм

...в среде РРМ 1-1640 ("ОЬсо", Великобритания)с 10 6 инактивированной прогреванием при раэтилпентадеквна или вазелинового масла, Клетки инъецируют внутрибрюшинно по 10 клеток в 5 мл среды Игла, Асцит формибруется через 12-14 дней в количестве 4 5 млБиосинтез полезного продукта, Секреция Мон-АТ, обозначаемого ИПО, на 3-4 день культивирования составляет 10-15 мкг в 1 мл культуральной среды и 5-10 мг в 1 мл асцитической жидкости. Продукция Мон-АТ сохраняется как минимум до 45 пассажей и ч 1 го и до 4-х пассажей в асцитной форме,Криоконсервирование, Для длительного хранения клеток штамма клетки замораживают в эмбриональной телячьей сыворотке с добавлением 10 ДМСО, Режим замораживания: 4/мин до+4 С, затем 1/мин до - 70 С, После замораживания...

Номер патента: 1707072

Опубликовано: 23.01.1992

Авторы: Галкина, Глазунова, Илларионова, Маркова

МПК: C12J 1/04, C12N 1/20

Метки: nensis, orlea, suвsр, асетi, асетовастеr, бактерий, продуцент, производства, уксуса, штамм

...выпуклый, края ровные, консистенция слизистая. кремоватого цвета, не флуоресцируют, пигмент не выделяют, Размеры колоний в пределах 0,3 - 0,5 мм,Физиолого-биохимические признаки.Отношение к источникам углерода; использует этиловый, пропиловый спирты, уксусную, пропионовую и молочную кислоты, глицерин. При кислом рН (4,5) способен окислчть глюкозу, фруктозу и сахарозу. При окислении глицерина образует дигидрооксиацетон. Отношечие к источникам азота; испсгь ует иммснийнь:й азот; на нитратами не растет. Молоко не ксагулирует. Желатину не разжижает, В витаминах не нуждается. Строгий аэроб. Растет в диапазоне от 5 до 40 С. оптимум 30 С. Диапазон рН для роста 2 - 6,3, оптимум 4,0,Способ осуществляют следующим образом.На первой стадии...