C12N 9/04 — действующие на CHOH группы как доноры, например глюкозооксидаза, лактат дегидрогеназа (1.1)

Номер патента: 142987

Опубликовано: 01.01.1961

Авторы: Покровская, Сташко

МПК: C12N 9/04

Метки: глюкозооксидазы, препарата, фермента

...целью у пленки тходы прооксидазы, о т л иата, для получения роцида Реп 1 с 1111 цгп роцида. Препарат фермента глюкозооксидазы, получаемый из культур некоторых плесневых грибов, может быть использован в ряде отраслей пищевой промышленности в качестве антиоксиданта и для удаления глюкозы, а также в медицине в качестве диагностического средства.Получение препарата фермента глюкозооксидазы известными способами связано с трудоемким и длительным процессом выращивания гриба-продуцента, что повышает стоимость продукта,Предлагаемый способ позволяет получить более дешевый препарат фермента гзпокозооксидазы за счет использования пленок продуцента микроцида Реп 1 с 1111 цгп ч 1 а 1 е, которые являются отходами при производстве микроцида....

Номер патента: 181591

Опубликовано: 01.01.1966

Авторы: Адаменко, Артю, Вина, Виткоеска, Дегтй, Журавель, Иох, Лаврищева, Ликеро, Никольска, Сина, Ттлт, Украинский

МПК: C12N 9/04

Метки: глюкозооксидазы, препарата, фермента

...в начальной стадиироцесса. Причем аэрировать следует преимущественно в течение 12 час при общей продолжительности процесса около 60 - 72 час. Количество воздуха целесообразно постепенно сокращать с 0,75 объема в минуту на 1 объем среды в первые часы до 0,25 объема в минуту в последующие часы процесса аэрации.Посевной материал выращивают в посевныхаппаратах на среде, в которую в качестве стимуляторов роста вводят биологически активные вещества, например кукурузный экстракт, в количестве от 0,5 до 0,75 сс (в пересчете на сухое вещество). В этом случае становится возможным уменьшить количество сахара в среде на 25%, Затем посевной материал передают в ферментаторы. Процесс ферментации ведут при аэрировании в течение первых 12 час,...

Номер патента: 195414

Опубликовано: 01.01.1967

Авторы: Витковска, Лебедева, Левина

МПК: C12N 9/04, C12N 9/08

Метки: каталазы, препарата, ферментного

...3 окись алюминия в два приема с15 мин при перемешивании из ра% на объем жидкости.При рН культуральной жидкости 3,5 - 4,2 каталаза сорбируется окисью алюминия, которая вместе с каталазой отделяется от культуральной жидкости фильтрацией. Фильтрат, содержащий глюкозооксидазу, используют для извлечения ее одним из известных способов.Каталазу, адсорбированную на окиси алюминия, выделяют, например, элюцией. Элюцпто каталазы осуществляют О, тт фосфатным буфером с рН, равным 6,8 - 7,0, дробно, тремя порциями элюэнта, при интенсивном перемешивании, Первая порция составляет 80 об. " от веса окиси алюминия, две последующие - 40 об. %.Окись алюминия отделяют фильтрованием и регенерируют. Из элюэнта каталазу осаждают равным объемом...

Номер патента: 204962

Опубликовано: 01.01.1967

Авторы: Билай, Гулый, Дегт, Институт, Лотоцка, Никольска, Чумаченко

МПК: C12N 9/04, C12N 9/08

Метки: глюкозооксидазы, каталазы, препаратов, ферментных

...взятого каолпна, после чего рН раствора становится равным 6,8 - 6,9. Элюциюпроводят при интенсивном перемешивании напротяжении 1 час. Элюат отделяют полутор 20 ным объемом нзопропилового спирта или ацетона, а затем высушивают.В центрпфугат, полученный после отделения адсорбента с каталазой, добавляют каолнп в количестве 2/о к ооъему жидкости н25 адсорбпруют глюкозооксидазу в стационарных условиях прп геремсшпвании в течен е15 лин.Каолин с адсорбированной глюкозооксидазой отделяют центрпфугпрованпем. Адсорбп 30 руется 95 - 100% глюкозоокспдазы прп соЗаказ 4 97/; Тираж 535 ПодписноеЦ гП Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССРМосква, Центр, пр. Серова, д, 4 Типография, пр, Сапунова, 2 держании ее в кул 1...

Номер патента: 212945

Опубликовано: 01.01.1968

Авторы: Кисл, Покровска

МПК: C12N 9/04

Метки: глюкозооксидазы, препарата, ферментного

...лтательной среде, содержащей 1% глюкозы (ил 5 л сахарозы), 0,5% кукурузного экстракта и минеральные соли. Полученную культуру высевают на такую же среду в посевной ферментер в количестве 1,5 - 2%, а спустя 18 - 20 час культуру в количестве 1,5 - 2/с передают в основной фсрментер, содержащий мелассу, разведелнуо водопровод ной водой до плотности 3 - 6 Блг с рН не нине 6,0 и свободную от минерального фосфора,Культивирование гриба ведут в течение 20 -24 час при 27 С и непрерывном продувании 3 объема воздуха на 1 объем среды в минуту.10 После этого отделяют мицелий гриба от культуральной жидкости. Последнюю доводят до рН 6,0, стерилизуют и возвращают на стадшо культивирования посевного матсриала.Мицслий гриба высушиваОт и из него экст...

Номер патента: 237080

Опубликовано: 01.01.1969

Авторы: Вптель, Ликеро

МПК: C12N 9/04, C12N 9/08, C12P 7/58 ...

Метки: каталазы, препаратов, ферментных

...кислоты, рибофлдвиц, ДИНОКИ СГ)ОЫ И ПР.В 1 й,)ьтчра,чш)О жидкос)ь виос 5)т 0,0 р " долина и сорбируют катзлазу при псрсмешивации в течение 15.)5 ин. Сорбент с адсорби;)овацным ферментом оделяют цецтрифугироваиис.К Отдаленно)у кдог)ину с ЯдсороироьаинОЙ кача )азой добаГ)5)От 0,2.11 фосфдтц ) буфер до р 11 7; осущс; гвляют элн)цию каталдзы, 1103)ччсннтю с)Нсь .снрифтгирчют д:)5 ОдсЛЕНИ 5 ОСЗДКЯ, 2 ИЗ ЭЛЮДТД ОСДЖДД)ОТ КЗТЯЛДЗУ 530 п ропилоь )ч спиртом.237080 П редмет изобретения Составитель Т, ПолянскаяТехред Л, Я. Левина Корректор Г. И. Плешакова Редактор С. Сюткина Заказ 1299,4 Тираж 480 Подписное ЦН 11 ИП; Комитета по делаги изобретений и открыгий при Совете Мш 1 истров СССР Москва, Центр, пр. Серова, д. 4Типография, пр....

Номер патента: 889705

Опубликовано: 15.12.1981

Авторы: Буглова, Захарова, Кириленко

МПК: C12N 9/04

Метки: галактозооксидазы

...Р 1060 растет хорошо,воздушный мицелий и спороносный слоИобильный.В качестве единственного источника углерода предлагаемый штамм использует галактозу, глюкозу, маннозу, фруктозу, 1. - арабиноэу, 1. - Рамнозу, лактозу, сахарозу, мальтоэу,раффиноэу. Усваивает нитратный и аммонийный азот, однако лучшим источником азота является мочевина. На известной полусинтетической среде приглубинном способе выращивания синтезирует внеклеточную галактозооксидазу. Активность культуральной жидкости на 72-ом часу выращивания 5-6 ед/йл.Для повышения активности культуральной жидкости штамм Гца г 1 цв д гав 1 пеагцв ИМВ-Г Р 1060 выращивают на 20 среде следующего состава, г/л воды:Галактоза 15 - 20Фосфат калияоднозамещенный 7 - 9Фосфат натрия2 двузамещенный б...

Номер патента: 1056909

Опубликовано: 23.11.1983

Авторы: Петер, Ханс, Хервиг

МПК: C12N 9/04

Метки: глицерин-дегидрогеназы

...осуществляют анаэробное культивирование.В процессе анаэробного культивирования вводят дополнительные количества глицерина до достижения 1 его содержания в среде.Кроме того, в питательную среду вводят биотин в концентрации 50 мкг/л.Использование микроорганизмов АегоЬасег аегоуепез штаммов РБМ 1643 или ИС 1 В 418 позволяет значительно увеличть выход глицерин-дегидрогеназы по активности (не менее, чем в 10 раз) даже при исполь зовании известных способов культивирования и выделения фермента, Предложенная в изобретении последовательность культивирования - сначала аэробные условия с подводом кислорода или кислородсодержащих смесей в течение фазы логарифмического роста, а затем анаэробные условия, позволяют получить фермент с большим...

Номер патента: 871525

Опубликовано: 23.02.1984

Авторы: Авилова, Березин, Егоров, Егорова, Платоненкова

МПК: C12N 9/04

Метки: над-зависимой, формиатдегидрогеназы

...экспоненциальной фазыроста.Повышение эффективности процессапроисходит в результате культивиронания в условиях протока, прикоторых культура поддерживается водной и той же фазе рбста при постоянной концентрации источника углерода в среде, что является необходимым условием для получения высокойформиатдегидрогеназной активности.Проточное культивирование позволяет получать большие количествабиомассы, чем периодическое, а использование в качестве источникауглерода этилового спирта вместометилового значительно упрощаеттехнологию, что также приводит кувеличению эффективности процесса.Способ осуществляют следующимобразом.Дрожжи Сапййа ше 1 Ьу 1 са ИБФМУкультивируют на синтетической питательной среде следующегосостава, г/л: (БНЛ.) НРО 4 0,5;(ИН...

Номер патента: 1110171

Опубликовано: 30.04.1985

Авторы: C12R 1:02, Виестуре, Добролинская, Жигуре, Оверченко, Хагендорф, Янсон

МПК: C12N 15/00, C12N 9/04, C12P 7/02 ...

Метки: 20-продуцент, бактерий, глицерин, глицеролдегидрогеназы, диоксиацетон, окисляющий, штамм

...тонкуюпрозрачную полисахаридную пленку,Физиолого- биохимические свойства .50Бактерии каталазоположительныеУоблигатные аэробы, Молодые клеткиграмотрицательны.Оптимальная температура дляокисления глицерина до диоксиацетата - 28-30 С, рН 5,5.55Отношение к углеводам. БактерииС,охудапз 0=20 хорошо ассимилируютглюкозу, мальтоэу, галактозу, рафФинозу.35 П р и м е р 2. Для проведения ферментации в укрупненных лаборатор б ных условиях посевной материал готовили следующим образом, Суспензию клеток односуточной культуры С.оху-. Еапз Э 20 из одной пробирки вносили в колбу Эрленмейера емкостью 750 мл, 55 снабженную четырьмя отбойниками, содержащую 100 мл питательной среды следующего состава, мас.%: Отношение к спиртам. Ассимилируют глицерин, этанол,...

Номер патента: 1310427

Опубликовано: 15.05.1987

Авторы: Авакян, Симонян, Татикян, Хачатрян

МПК: C12N 1/20, C12N 9/04

Метки: в-1458-продуцент, вкм, лизин-2-монооксигеназы, штамм

...присутствие ионов железа стимулирует образование пиовердина. Температура вышео30 С подавляет рост культуры на синтетической среде.Культура поддерживается на МПА. Оптимальная температура роста 24- 26 С. При культивировании МПБ лизин- -2-монооксигеназной активности не наблюдается, Она проявляется только при культивировании микроорганизма на синтетической лизин-содержащей среде.Внутриклеточная ЛМО проявляет максимальную активность к 45-55 ч роста культуры на жидкой синтетической среде на поступательной качалке (100 качаний в минуту)Лизин-монооксигеназную активность определяют амперометрически по убыли концентрации кислорода в ячейке с перемешиванием объемом 5 ил. Реакционная смесь содержит 0,05 М калий-фосфатный буфер рН 8,0 и 0,02 М лизин....

Номер патента: 1322984

Опубликовано: 07.07.1987

Авторы: Альберт, Барбара, Карл-Хайнц, Фридрих, Ханс, Эрих

МПК: C12N 9/04, C12Q 1/26

Метки: биологических, объектах, пирувата

...пирувата - мононатриеваясоль),40П р и м е р 1. Кинетическое определение пирувата (СРТ).К 2,5 мл раствора, содержащего,ммоль/л: КН РО (рН 6,7) 80; алании/800; М-(3 -сульфонил-окси-хлорфенил)-4-аминоантипирин 0,2; х -кетоглутаровая кислота 18, а такжепируватоксидаза 0,2 ед/мл; пероксидаза 2 ед/мл, добавляют 0,1 мл пробы.Спустя 3 мин определяют изменениеэкстинкции в 1 мин. Температура измеОрения составляет 25 С, длина волны546 нм, с составляет 19,6, общий объем 2,6 мл и объем пробы 0,1 мл. Иэприроста экстинкции в 1 мин рассчитывают активность на СРТ.П р и м е р 2. Кинетическое определение СОТ. В исходную смесь, аналогичную примеру 1, которая вместо ала 3лекулярное сито Сефадекс АСА (фирмы .КВ)Данные обогащения представлены в табл.3....

Номер патента: 1337403

Опубликовано: 15.09.1987

Авторы: Буглова, Жигуре, Захарова, Маланчук, Элланская

МПК: C12N 1/14, C12N 9/04

Метки: drамinеаruм, fuzаriuм, галактозооксидазы, имв-f, культивирования, питательная, продуцента, среда

...к снижениюгалактозооксидаэной активности в 2,экультуральной жидкости (см,таблицу),а более 4,0 Е - к удорожанию питательной среды беэ достаточного повышения активности, Содержание БВК всреде менее 0,27 и более 0,47 обус- ЗОловливает снижение биосинтеза галактоэооксидаэы, Содержание в среде мочевины и солей КН РО , ИаэНРО,12 НО,МАМБО 7 Н О, СцБО 5 НО, Мп 80 менее0,8 0,4; О,б; 0,02; 0,001 и 0,0013соответственно приводит к снижениюгалактоэооксидаэной активности вкультуральной жидкости, а увеличениесодержания перечисленных компонентов,соответственно, более 1,3; 0,8; 0,9;0,04; 0,005 0,0047. - к удорожаниюпитательной среды, практически невлияя на величину галактозооксидазной активности в культуральной жидкости, 45Составы предлагаемой и...

Номер патента: 1418338

Опубликовано: 23.08.1988

Авторы: Груно, Таухерт, Шепп

МПК: C12N 9/04

Метки: изоцитратдегидрогеназы

...или экстракцией сульфатом аммония 5 141833810 раз. Для этого к грубому белковому экстракту добавляется твердый сульфат аммония до конечной концентрации в 70% насьпцения, причем вся активность переходит в осадок. Для дальнешпего обогашения изоцитратдегидрогеназы остаток перемешивается каждые 5 мин с раствором сульфата аммония, содержащего 0,05 моль/л МЯНРО,Е при 0 Со, и снижающихся концентрациях сульфата аммония. Фермент растворяется при этом в возрястаюшей степени. Основное количество растворяется при этом в промежутке концентраций сульфата аммония между 40 и 50 насыщения, Фермент снова осаждают добавлением сульфата аммония до конечной ко.цент- рации в 70 .Предлагаемый Фермент хорошо сохраняется. При специфической активности 5-10...

Номер патента: 1449581

Опубликовано: 07.01.1989

Авторы: Безбородов, Матевосян

МПК: C12N 1/20, C12N 9/04

Метки: 2-оксигеназы, alcaligenes, paradoxus, бактерий, катехол-1, продуцент, штамм

...высокочувствителен к мономицину. Непатогенен,П р и м е р 1. Штамм А 1.рагайохцвВкультивируют в срвде, содержащей, г/л: КН. РО 3,4, К НР 04 4,3,(ИН ) 804, 2, МВС 1 0,343, СаС 1 0,026,МпС 10,0015, РеБО 0,008, Ха МоО0,002, бензойная кислота 1,2, рНсреды 6,5, Стерилизация - 0,05 атм40 мин.Посевной материал вносят в объеме 10 мл с содержанием 0,6 мг/мл сухой биомассы в колбы объемом 750 млсо 150 мл ростовой среды. Ферментацию проводят при 29 С на круговойкачалке с 220 об/мин.На фиг.1 и 2 представлены динамика накопления биомассы, скорость по-,требления субстрата, а также изменение активности катехол,2-оксигеназы в процессе роста культуры А 1 са 18 епев рагайохцв В,Установлено, что наибольшая активность катехол,2-оксигеназы врасчете на мг...

Номер патента: 1479513

Опубликовано: 15.05.1989

Авторы: Авилова, Березин, Вайткявичюс, Глемжа, Егоров, Карзанов, Петкявичене, Тишков

МПК: C12N 9/04

Метки: формиатдегидрогеназы

...на примере ферментеров различной конструкции, При проведениикультивирования в 100-лцтровых фермен-.терах отечественного производства,фирм "Электролюкс (Ывеция), Нордон",(Франция) и в 15-литровом ферментерефирмы "Нью Браунсвик" (США) величинаудельной активности Формиатдегидрогеназы составила 1000, 80, 92и 410 нмоль/мцн на 1 мг белка соответственно, При проведении культифвирования в присутствии 10 М вольфрамата величина удельной активностинезависимо от типа ферментера составила 1640-1700 нмоль/мин на 1 мгбелка. Выход фермента увеличился нана 70, а в случае других Ферментерон выход возрос в 4-21 раз,Изобретение имеет важное значение,поскольку позволяет проводить крупномасштабное культивирование бактерий Рзецс 1 ошопаз зр. (10,1) ВКМВЛдля...

Номер патента: 1551741

Опубликовано: 23.03.1990

Авторы: Вайткявичюс, Галкин, Глемжа, Егоров, Кадушевичюс, Петкявичене, Тишков

МПК: C12N 9/04

Метки: выделения, формиатдегидрогеназы

...активность 1,67 мкмоль/мин/мг белка,Супернатант наносят на колонку с 40 г (90 мл) фенилсилохрома Ссконцентрацией фенильных групп1.17 мкмоль/г носителя. Носитель отмывают от части примесных белков 15%от насыщения раствором сульфата аммония. Формиатдегидрогеназу элюируют линейным нисходящим градиентом: 5-07.от насыщения раство.-чм сульфата аммония, общий объем градиента 400 мл.Удельная активность формиатдегидрогеназы 11,5 мкмоль/мин/мг белка,Выход по активности 83%.П р и м е р 2. Способ осуществляют согласно примеру 1, но для элюции фермента с колонки используютлинейный нисходящий градиент: 15-57.от насыщения раствором сульфата аммония. Удельная активности фермента11,9 мкмоль/мин/мг белка. Вьжод поактивности 84%.П р и м е р...

Номер патента: 1578125

Опубликовано: 15.07.1990

Авторы: Беляцкий, Гуреева

МПК: C07C 251/02, C12N 9/04

Метки: ингибитор, моноаминооксидазы, фермента

...минирование бензиламина: на 58,4 Х. П р и м е р 5. Исследование влияния диализа на торможение дезаминирования серотонина в гомогенатах печени быка в присутствии ингибиторов(1), (11) и (111),Берут гомогенат, приготовленный,как описано в примере 4, серия 1,наливают 1 мп его в пеницилиновуюсклянку, куда также добавляют поО, мл ингибитора (концентрация 1,3 х х 10 ). Отверстие в склянке завязывают целлофаном. Склянку укреппяютвверх дном в сосуде, заполненном0,2 М раствором фосфатного буфера, ипомещают этот сосуд в холодипьник,Буферный раствор в склянке время от времени меняют свежими порциями охлажденного фосфатного буфера. Через 2 сут вынимают склянки и их содержимое центрифугируют на холоду (не выше 4 С). К осадку гомогената добаволяют...

Номер патента: 1663023

Опубликовано: 15.07.1991

Авторы: Баянова, Родичева, Трубачев

МПК: C12N 1/20, C12N 9/04

Метки: lеiоgnатнi, бактерий, культивирования, люцифреразы, питательная, продуцента, рнотовастеriuм, светящихся, среда

...Как видно из результатов, представленных на фиг, 1 и 2 (кривые 1), концентрация биомассы, выращенной на среде с гидролизатом, измеренная по оптической плотности, а также интенсивность люминесценции через 3 ч от начала культивирования ниже контрольной (среда с пептоном) на 6 и 4% соответственно.П р и м е р 2. В стерильную колбу обьемом 500 мл заливают 135 мл стерильной питательной среды, содержащей, г/л; йаС 28,0; йа 2 НР 04 12 Н 20; КНгРО 4 0,9; (ИН 4)2 НРО 40,45; М 9304 7 Н 20 0,09; глицерин 2,8 и 15 мл 5% гидролизата иэ светящихся бактерий. Таким образом получают питательную среду с содержанием гидролизата по сухому весу,0,5%. Затем вводят 1 мл стерильного инокулята светящихся бакте 50 рий РЬосоЬастегца еодпай 213 и наблюдают рост и...

Номер патента: 1678831

Опубликовано: 23.09.1991

Авторы: Имшенецкий, Мунтян, Назарова, Никитин, Селезнева, Черкасова, Ширшова, Яковлева

МПК: C12N 1/20, C12N 9/04

Метки: холестериноксидазы

...состава, г/л: крахмал нерастворимый 10,0; КгНР 04 1,0; (Р 4 Н 4)гЯ 04 1,0; СаСОз З,О; белково-витаминный концентрат З,О; рН 7,0, Посевной материал готовят в колбах Эрленмейера на 250 мл с объемом среды 70 мл, выращивание ведут на качалке с 180 об;/мин в течение 24 ч при 28 С. Количество посевного материала 10; об./об.), Культуру выращивают в колбах Эрленмейера на 250 мл с объемом среды 70 мл на качалке с 180 об./мин. Через 14 ч культивирования в колбы вносят холестерин из расчета 0,002 О/., Культивирование продолжают до 22-часового возраста, затем мицелий отделяют, промывают 0,005 М фосфаткым буфером с рН 7,0. Фермект экстрагируют из мицелия раствором ТритонХ 100 и определяют его содержание в экстракте, Холестериноксидазная...

Номер патента: 1701227

Опубликовано: 30.12.1991

Авторы: Бабоша, Ладыгина, Трофимец

МПК: A01N 63/00, C12N 7/04, C12N 9/04 ...

Метки: антивирусных, веществ, препарата, синтеза, ферментного

...тканях величина двуспиральнсго участка, необходимая для активирования олигоаденилатсинтетаыл, составляет не менее 10 нуклеотидных пар.Точная структуоа растительных олигоаденилатов не установлена.Время сорбции фермента на дсРНК носителе составляет 2-4 ч, Емкость носителя (количество белка, элюируемого с дсРНК- целлюлозы 1 М этаноламинацетатным буфером рН 7,6) составила 1,5-2 мгй сырого сорбента,П о и м е р 2, Динамика изменения активности олигоа,:.: илатсинтетазы карта. феля после инокуляц 1 и Х- и У-вирусами и дсРНК,Способ получения препарата описан в при",ере 1, Результаты опыта приведены в табл,2, Высокие значения активности фермента получены уже через 24 ч после инокуляции индуктора, В случае применения вирусов активност...

Номер патента: 1705338

Опубликовано: 15.01.1992

Авторы: Будрис, Замбржицкий, Коваленко

МПК: C12N 1/16, C12N 9/04

Метки: candida, requinii, алкогольдегидрогеназы, дрожжей, продуцент, штамм

...гранулированы, опушенныепсевдомицелием,Минеральная агаризованная среда сэтанолом (2,0 об, оь), трое суток, 30 С, (посевштрихом); рост обильный, сплошной, переходящий в цепочку отдельных колоний, крайровный, серо-белого цвета, колонии круглые, 3,5 мм, матовые, край ровный, профильслабо выпуклый, пастообразной консистенции, серо-белого цветаЧерез месяц (17 С) колонии серого цвета, не гранулированы, край не опушен псевдомицелием. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Рост на глюкоэо-картофельном агаре:на стекле отдельные клетки и псевдомицелий.Кукурузный агар: на стекле (анаэробныеусловия) псевдомицелий и почкующиесяклетки.Истинный мицелий и артоспоры отсутствуют, Растет без витаминов на среде Ридер+глюкоза.Физиолого-биологические...

Номер патента: 1731813

Опубликовано: 07.05.1992

Авторы: Клебер, Шепп

МПК: C12N 9/04

Метки: 3-гидроксибутиратдегидрогеназы

...(МН 4)2 Я 04 и в каждом случае путем пятиминутного перемешивания. При этом фермент все больше растворяется, Основная масса фермента растворяется в районе концентраций между 35 и 20 фнасыщения раствора сульфата аммония, Фермент переосаждается путем добавления сульфата аммония до конечной концентрации в 50.На гидрофобном носителе, таком как, например, 10-карбоксидецилсефароза, возможно дальнейшее обогащение фермента. При этом на колонку, заполненную 10-карбоксисефарозой, сажается фермент в 20 насыщения раствора сульфата аммония. После промывки раствором сульфата аммония этой же концентрации производят фракционное элюирование с 17 насыщения раствора сульфата аммония. В первой фракции наблюдается 4-кратное и во второй - 7- кратное...

Номер патента: 1742328

Опубликовано: 23.06.1992

Авторы: Буглова, Кондакова, Тертых, Янишпольский

МПК: C12N 1/38, C12N 13/00, C12N 9/04 ...

Метки: активации, галактозооксидазы

...буфер (рН 7,0);Фермент галактозооксидаза получен по известному методу.Активность лиофильно высушенного порошка фермента составляет 0,1 ед/мг. Активность раствора фермента регистрируют по проявляемой активности. Активность галактоэооксидазы определяют в растворе галактозы с концентрацией 0,1 моль/л в 0,05 М фосфатном буферном растворе (рН 7,0). Для этого в термостатированную при 25 С ячейку с кислородным электродом Кларка помещают 5,5 мл соответствующего раствора галактоэы. После термостатирования прибавляют 0,5 мл раствора фермента и регистрируют на ленте самописца кинетику потребления кислорода (1 ед. активности соответствует количеству фермента, катализирующего окисление 1 мкмоль субстрата за 1 мин),Активность фермента в...

Номер патента: 1752767

Опубликовано: 07.08.1992

Авторы: Безбородов, Куликова

МПК: C12N 1/20, C12N 9/04

Метки: rноdососсus, бактерий, еryтнrороlis, монооксигеназы, продуцент, штамм, эпоксидирующей

...такое же количество биомассы, как и на легкоутилизируемых сахарах, При глубинном культивировании предпочтительным источником азота являются соли аммония.Штамм непатогенен. При росте на пропане культура обладает активной монооксигеназной Ферментной системой, катализирующей превращение газообразных алкенов (этилена, пропилена) в окиси алкенов (1,2-эпоксиды),Культуру штамма хранят в эксикаторе в атмосфере пропан-воздух в объемном соотношении 1:1, в качестве источника пропана используют бытовой пропан, температура хранения 4 С, на среде Гозсег, Оачз (1966), следующего состава, г/л: МаМОз 2,0; Ма 2 НРО 4 0,21; МаН 2 РО 4 0,09; МЯЗО 47 Н 20 0,2, КС 1 0,04; СаС 12 0,05; Ге 504 1 мг; Со 504 0,01 мг; НЗВОз 0,02 мг; Мп 5040,02 мг,ЕпЯО 4 14 мг;...

Номер патента: 1770357

Опубликовано: 23.10.1992

Авторы: Сапоженкова, Сибирный, Титоренко

МПК: C12N 1/16, C12N 9/04

Метки: pinus, алкогольоксидазы, дрожжей, продуцент, рiснiа, штамм

...мкг/мл. Активность алкогольоксидазы в диализированной культуральной жидкости равна 2,01 .мкмоль мин мгбелка, Культуральную жидкость колнцентрируют следующим образом; 4 мл этой жидкости в диализном мешке помещают в стакан. содержащий 20 г полиэтиленгликоля с молекулярной массой 20000 (ПЭ Г) и инкубируют 6 часов при температуре 4 С. При этом достигается уменьшение обьема культуральной жидкости до 0,1 мл, т,е. концентрирование этой жидкости в 40 раз, Концентрированную культуральную жидкость подвергают электрофорезу в 7,5%-ом полиакриламидном геле в нативных условиях при напрякении 200 В и силе тока 24 мА. При окрашивании электрофореграммы с целью детекциибелка и активности алкогольоксидазы выявляется одна белковая зона, РГ которой равен Я,5...

Номер патента: 1802814

Опубликовано: 15.03.1993

Авторы: Бэрри, Джеймз

МПК: C12N 9/04

Метки: амидированного, амидирующей, монооксигеназы, пептида, пептидилглициновой

...Я-ЗОО. Вытеснительная хроматография (по размеру), Сефэкрил Я(Рйаппас 1 а) уравновешивают в 50 мМ трис НС 1, рН 7,0 и выливают в колонку К 50/100 (РЬагщас 1 а) согласно инструкциям изготовителя. Объем слоя колонки составляет примерно 1,3 литра, Пробу загружают в колонку в объеме, представляющем примерно 3 объема слоя колонки. Белки злюируют из колонки в 50 мМ Трис НС 1, рН 7,0, при протоке примерно 2 мл в минуту. Фракции по 10 мл собирают и испытывают в отношении альфа-амидирующей монооксигеназной активности с использованием субстрата Оапзу 1-0-Туг-Чг-С 1 у. Фермент, элюированный из колонки вединичном пике активности, характеризуется молекулярной массой от 60,000 до 65.000 дальтон. Активность составляет по крайнеймере 50 гпч/мг...

Номер патента: 1832128

Опубликовано: 07.08.1993

Авторы: Гладаревская, Гончар, Кшеминская, Сибирный

МПК: C12N 1/16, C12N 9/04

Метки: hansenula, алкогольоксидазы, глюкозой, дрожжей, метилотрофных, роlyмоrрна-продуцент, среде, штамм

...В среде с10 ЫаС рост слабый,Чувствителен к циклогексимиду, антимицину Л, нистатину. Резистентен к ампицилли ну, тет ра ци кл и ну.Отношение к источникам углерода: хорошо утилизирует глюкозу, мальтозу, рибозу, эритрол, рибитол, глицерин, этанол,метанол,маннит, плохо утилизирует ксилозу, сахарозу, рамнозу, лимояну,о кислоту,янтарную кислоту, не утилизирует галактозу, лактозу, оаффиноэу, арабинозу, крахмал.Как источники азота хорошо усваиваетсоли аммония и нитраты,Рост штамма в синтетических средахабсолютно зависит от наличия биотина, тиамин частично стимулирует рост,Клетки штамма не содержат плазмид. %ГЦ пар составляет 48/О.Штамм не токсичен в опытах нэ белыхмышах.Штамм хранится на скошенном суслоагаре при 4 С, пересевы следует...

Номер патента: 1839186

Опубликовано: 30.12.1993

Авторы: Жилина, Заварзин, Савельева

МПК: C12N 1/20, C12N 9/04

Метки: alcaligenes, eutrophus, бактерий, гидрогеназы, зависимой, продуцент, штамм

...НАД-зависимой гидрогеназы выращивают на минеральной среде Шлегеля следующего состава. гл: Ма 2 НР 0412 Н 2 О 4,5; К Н 2 РО 0,75, 1839186чНаС 2,0; МрЯ 04 0,20; СаС 2 0,02, Ге(чНа)С 6 Н 507 0,012; МаНСОз 0,5. Вода дистиллированная 1000 мл, рН среды 6,9-7,1.В срезу добавляются микроэлементы в количестве 2 мл/л, Смесь микроэлементов Хо агланда на 200 мл Н 20 содержит, мг: НзВОз 22,8; СоС 2 6 Н 20 8,0; СцЯО 5 Н 20 0,8; МпС 2 7 Н 20 0,8: Ег Я 04 7 Н 20 1,76; Ма 2 Мо 04 2 Н 20 5,0; йС 2 0,8. Газовая фаза состоит из 75-80 6 Н 2, 10-156 02 и 10 10 С 02. В факторах роста культура не нуждается. Оптимальная для роста температура 28- )30 С.Периодический способ культивирования является наиболее приемлемым для 15 получения автотрофной биомассы А. ео 1...

Номер патента: 1520844

Опубликовано: 27.01.1997

Автор: Смирнова

МПК: C12N 9/00, C12N 9/04

Метки: l-лизинальфа, оксидазы

Способ получения L-лизин-альфа-оксидазы, предусматривающий приготовление посевной культуры продуцента Trichoderma harzianum Rifai F-180, получение инокулята, внесение его в ферментационную среду, содержащую в качестве источника углерода пшеничные отруби, источник неорганического азота и воду, последующее культивирование в условиях аэрации до максимального накопления целевого продукта, отличающийся тем, что, с целью сокращения сроков культивирования продуцента и повышения удельной активности фермента, культивирование проводят глубинным способом, а компоненты ферментационной среды берут в следующем соотношении, мас.Пшеничные отруби 4 6Источник неорганического азота 0,7 0,9Вода Остальноепри этом pH среды устанавливают...