Аникейчева

Номер патента: 1314669

Опубликовано: 30.05.1994

Авторы: Аникейчева, Колоша, Самко, Соколов, Фицнер, Фодор, Хорошутина

МПК: C12N 9/14

Метки: aeruginosa-18, pseudomonas, продуцент, рестриктазы, штамм, эндонуклеазы

Штамм Pseudomonas aeruginosa-18 - (коллекция Государственного научно-исследовательского института стандартизации и контроля медицинских биологических препаратов им. Л. А. Тарасевича МЗ СССР, коллекционный номер 134) - продуцент эндонуклеазы рестриктазы Рае 11.

Номер патента: 1249935

Опубликовано: 30.05.1994

Авторы: Аникейчева, Вотрин, Колоша, Соколов, Фицнер, Фодор, Хорошутина

МПК: C12N 9/22

Метки: gcatg, нуклеотидную, последовательность, расщепляющей, рестрикции, узнающей, эндонуклеазы

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЭНДОНУКЛЕАЗЫ РЕСТРИКЦИИ, УЗНАЮЩЕЙ И РАСЩЕПЛЯЮЩЕЙ НУКЛЕОТИДНУЮ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ - GCATG - C, включающий культивирование продуцирующего микроорганизма на питательной среде, содержащей источник азота, углерода, минеральные соли и воду, в условиях аэрации с последующим выделением из биомассы целевого продукта, отличающийся тем, что с целью повышения выхода биомассы продуцента и активности эндонуклеазы рестрикции Рае 1, в качестве продуцирующего микроорганизма используют штамм Pseudomonas aeruginosa BU 278.

Номер патента: 1832129

Опубликовано: 07.08.1993

Авторы: Аникейчева, Калугин, Карпычев, Либрик, Самко, Соколов, Фицнер, Хорошутина, Эльдаров

МПК: C12N 1/20, C12N 9/16

Метки: bacillus, бактерий, вrеvis-продуцент, рестриктазы, штамм

...33(3;," л"(ТОН(3 О 3 б)гГЛ 3 )г 3 Е 33 гГг 3 г 3 о3,1 , г,3.О 3 Л Е Р Н ОП О М В Г 3Г 3И З О " Г -, ;Отное.ие 3 к 3 спрол.)э,".,Ти)3 иэа 33 ИЛ УГП/),)г",)33 а г.г 33,):,;" 3 СЛота . Гаэ + 3) 3 Л;31,Индол и сероводрд;: О 3)з г,ъ 3(033 Т 3)МДЛЬ 33 ЫО УС(С) .л:,(3,:)3 ,;:Х 3)ДНЕ).33 л 3 К(13 ГУОЫ,Куль;ура В. Ьг)чг) ВКгЛ В9 хо,)(;)3 сРЭСТЕт ВУСПОВИЛХ )ЭРДЦ 313 33,3; Г (, 3-, Гг,г)3,ОНО )ОТТИНГ3, сг)ле)3(а 3 е 3 ) "г 1 Г(33(Г)Э 3,без Гл)окозь), на (,раде с 3)д)гллиэз)ок 3 пК)Л И Срвдц .В. П)3 Л ВЫГ)л.; г Ч ".: ": (П,гг;1И г С на каОй,.е 3 а )аз 3 3 и.,; )Тег(Е)33" 10: 133 пгг(3 И- Г "-); "глюкозь 3 1,(; срг:313;) 3- 1,.), (;3 к. :;.,:,(г(лд:)0333 лззто 33 2,31,(3)Е3)Е 3)ТЛГцн 3 Г, ГГ:. гдобавлен)я в фе) 3 пт,.ношении 3 10 к Обьему с)Оп) И...

Номер патента: 1761804

Опубликовано: 15.09.1992

Авторы: Аникейчева, Калугин, Карпычев, Либрик, Самко, Соколов, Фицнер, Хорошутина, Эльдаров

МПК: C12N 1/20, C12N 9/16

Метки: bacillus, coagulans, бактерий, всо, продуцент, рестриктазы, штамм

...в 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 ферментере при 37 С в аэробных условияхна питательной среде Хоттингера, котораясодержит в 1 л, 250 мл основного перевараХоттингера; 5 г КаС; 1 г К 2 НР 04 и до 1 лводы. Выращивание прекращают в концелогарифмической фазы роста, когда ростдостигает Аббе=1,5 - 1,7, Выход биомассы 7 - 8г/л,На рыбной среде культура растет плохо(при 18-часовой ферментации на качалкеА 650=0,3).Ферментацию культуры проводят последобавления в ферментер инокулята в соотношении 1:10 к объему среды.Рабочие культуры пересевают на мясопептонный бульон или среду Хоттингераодин раз в 8-10 дней,Хранят культуру в полужидком мясопептонном агаре под вазелиновым масломили в лиофилизированном виде в ампулах,Выделение...

Номер патента: 1761803

Опубликовано: 15.09.1992

Авторы: Аникейчева, Калугин, Либрик, Самко, Соколов, Фицнер, Хорошутина

МПК: C12N 1/20, C12N 9/16

Метки: alvei, bacillus, бактерий, продуцент, рестриктазы, штамм

...споры. Грамположительны (признак непостоянный, варьирует Гр - Гр).+ 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Утилизация углеводов - на глюкозе, лактозе, сахарозе образуют кислоту; на арабинозе, ксилозе и манните кислоту необразуют,Крахмал - гидрол изуют.Лакмусовое молоко - свертывание, пептонизация,Индол и диоксиацетон - образуют,Казеин - расщепляют,Тирозин - не расщепляют,Фенилаланин - не дезаминируют.Оптимальные условия выращивания ихранения культуры,Культура В.а 1 че ВКМ Вхорошо растет на жидких и твердых полноценных питательных средах - бульоне Хоттингера, среде1 В,мясопептонном бульоне,Максимальная и минимальная температура роста культуры соответственно 35 - 45С и 15 - 20 С, а оптимальная температура -37 С. Оптимум роста рН 7,0 - 7 - 2,...

Номер патента: 1712415

Опубликовано: 15.02.1992

Авторы: Аникейчева, Калугин, Либрик, Самко, Соколов, Фицнер, Хорошутина

МПК: C12N 1/20, C12N 9/14

Метки: рестриктазы

...аэрации при 370 С на бульоне Хоттингера с добавлением 2 глюкозы, а также на среде, содержащей в 1 л, г: дрожжевой экстракт 5; пептон 10; глюкоза 5; МагНРО 12 НгО 2,2; МаС 3; Мд 804 0,5; СаО 2 0,25, рН 7,2-7,5. Ферментацию культуры проводят после добавления в ферментер инокулята в соотношении 1:10 к объему среды. Рабочие культуры пересевают на бульон Хоттингера один раз в 7-10 дней. Храняткультуру в полужидком агаре под вазелиновым маслом или в лиофилизированном виде5 в ампулах,Культура непатогенна для мышей.Инкубационная смесь для определенияактивности рестриктазы ВЬчА 1 объемом 40 -50 мкл содержит 0,05 М трис-НО, рН 7,5,10 0,01МдСг, 0,001 М, дитиотреитола, 0,1 ММаС 1,2 мкгДНКфагаЛи 0,5-10 мкл фермента, Инкубацию проводят при 37 С в...

Номер патента: 1707077

Опубликовано: 23.01.1992

Авторы: Аникейчева, Калугин, Либрик, Самко, Соколов, Фицнер, Хорошутина

МПК: C12N 9/14

Метки: рестриктазы

...после добавления в ферментер инокулята в соотношении 1:10 к объему среды,Рабочие культуры пересев: от на среду Хоттингерэ один раз в 8 - 10 дней, Хранят культуру в полужидком агаре под вазелиновым маслом или в лиофилизиронэнном виде в ампулах.Выделение рестриктазы Взр 01 производят фракционированием полиэтиленимином и хроматографией на колонках с аффинным сорбентом и ионообменниками. 5 10 1 Г, 20 25 30 35 40 45 50 55 Инкубационная смесь дпя определения активности рестриктэзы ВзрОобьемом 50 мкп содержит 0,01 М трис-НС 1 буфер(рН 7,4) 0,01 М гх 9 С 12, 0,001 М дитиотреитолэ (или .,007 М 2-меркэптоэтанолэ) и 2 мкг ДНК фага Л . Инкубацию проводят при 37 С в течение 60 мин, Продукты расщепления Д 11 К фага Л рестриктэзой ВзрО 1...

Номер патента: 1678833

Опубликовано: 23.09.1991

Авторы: Аникейчева, Калугин, Самко, Соколов, Фицнер, Фодор, Хорошутина, Эльдаров

МПК: C12N 1/20, C12N 9/14

Метки: alvei, bacillus, бактерий, продуцент, рестриктазы, штамм

...в течение 4 - 5 ч додостижения конца логарифмической фазыроста, 40На среде "рыбный экстракт" культурарастет медленно, а активность рестриктазыв биомассе значительно ниже, чем при культивировании на средах Хоттингера иВ.Оптимальная температура роста 37 ОС, 45но растет и при 40-45 С,Рабочие культуры пересевают иа бульон Хоттиигера один раз в 7 - 10 дн, Храняткультуру в полужидком агаре под вазелиновым маслом или в лиофилизированном состоянии в ампулах,Культура непатогенна для мышей.Существенным фактором культивирования является аэрация, В анаэробных условиях выход рестриктазы Вачснижается, 55Инкубационная смесь для определенияактивности рестриктазы Вач 6751 обьемом25 - 50 мкм содержит 0,01 М трис-НС 1, рН7,5, 0,01 МсС 2, 0,001 М...

Номер патента: 1678832

Опубликовано: 23.09.1991

Авторы: Аникейчева, Калугин, Коваленко, Самко, Соколов, Фицнер, Фодор, Хорошутина, Эльдаров

МПК: C12N 1/20, C12N 9/14

Метки: lастовасillus, бактерий, продуцент, рlаnтаruм, рестриктазы, штамм

...и сеооводород - не образует.)Келатина уколом - разжижения нет,4 увствитель ность к антибиотикам,Культура чувствительна ко многим антибиотикам: пенициллину, стрептомицину, канамицину, тетрациклину, хлорамфениколу,эритромицину, олеандомицину, неомицину,карбенициллину, линкомицину, гентамицину, метициклину, оксациллину, нистатину,ампициллину; резистентна к полимиксину.Оптимальные условия выращивания ихранения, Культура хорошо растет на МПБ,бульоне Хоттингера, средеВ и среде ч. 7,без аэрации, при 30-37 С.Наибольший выход биомассы, содержащей рестриктазург 1, получают при выращивании на питательной среде, котораясодержит в 1 л, г; дрожжевой экстракт 5;пептон 10; глюкоза 5; йа 2 НРОп 12 Н 20 2,2;МаС з; М 980 0,5; СаС 20,25.Существенным...

Номер патента: 1648976

Опубликовано: 15.05.1991

Авторы: Аникейчева, Калугин, Самко, Соколов, Фицнер, Фодор, Хорошутина, Эльдаров

МПК: C12N 1/20, C12N 9/14

Метки: agile, аснrомовастеr, бактерий, продуцент, рестриктазы, штамм

...с мясопептонным агаром мелкие, блестящие, края ровные. На мясопептонном бульоне на дне пробирки осадок, среда прозрачная.Отношение к кислороду: строгий аэроб.Желатина уколом - очень медленное разжижение.Чувствительность к антибиотикам: культура чувствительности ко многим антибиотикам, резистентна к пенициллину, стрептомицину, полимиксину,Условия выращивания и хранения Культура хорошо растет на твердых и жидких полноценных питательных средах: бульоне Хоттингера, среде 1 В. При культивировании на среде 1 В наблюдается продолжительная лаг-фазаОптимум роста при,37 С. Зона рН роста культуры лежит впределах 4,6-9;5. Оптимум роста культурыи образования фермента при рН среды7,2 - 7,4, При рН 10,0 культура не растет,адИе.Наибольший выход...