C12N 1/21 — модифицированные введением чужеродного генетического материала

Номер патента: 1668386

Опубликовано: 07.08.1991

Авторы: Валенцев, Шевченко

МПК: C12N 1/21

Метки: jersinia, бактерий, белка, продуцент, реsтis, связываюшего, цамф, штамм

...белка в надосадочной жидкости, вносимой в пробу для определения цАМФ, составляет40 - 60 мкг.При определении цАМФ инкубацию образцов проводят на ледяной бане в течение 2 ч. Отделение белок-связанного цАМФ от несвязанного нуклеотида осуществляют адсорбцией свободного нуклеотида на угле марки "НоритА", для чего в каждую пробу добавляют 100 мкл угольной суспензии (2,60 раствор угля, 2 раствор БСА в буфе ре "А") с последующим центрифугированием при 10000 9 в течение 1 мин, Равные количества суспернатанта (200 миа)иэ аликвот помещают во флаконы и просчитывают на жидкостном сцинтилляционном счетчи ке, С помощью "слепой" пробы определяютуровень неспецифически сорбирующейся радиоактивности. Этот фон вычитают из значения радиоактивности в каждой...

Номер патента: 1703690

Опубликовано: 07.01.1992

Авторы: Долганов, Евдонина, Еремашвили, Козлов, Монастырская, Народицкая, Свердлов, Скворцова, Стеркин, Стронгин, Царев, Цыганков, Чистосердов, Юрин

МПК: A61K 37/66, C12N 1/21, C12N 15/21 ...

Метки: бактерии, днк, интерферона, кодирующая, плазмидная, продуцентинтерферона, рsеudомоnаs, рекомбинантная, синтез, человека, штамм

...вводят плазмиду 8751, которая обеспечивает устойчивость к триметаприму,Высев конъюгатов производят на минимальную агаризованную солевую среду Адамса, содержащую следующие компоненты: глюкоза 4 мг/мл; тизмингидрохло 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 рид 5 мкг/мл; треонин 50 мкг/мл; лейцин 50 мкг/мл; ампициллин 75 мкг/мл; стрептомицин 75 мкг/мл; триметаприм 75 мкг/мл, В этих условиях вырастают только коньюгаты Е.со 1 С 600 (К 751, рИЧ 22), Затем проводят коньюгацию между Е,со 1 С 600(В 751, рЧМ 22) и Рзеобоаопаз зр, 31 с дефектным геном йг А Коньюгаты вырастают на минимальной агариэованной солевой среде следующего состава: глюкоза 4 мг/мл; тиамингидрохлорид 5 мкг/мл; треонин 50 мкг/мл; ампициллин 75 мкг/мл, стрептомицин 200 мкг/мл,...

Номер патента: 1703691

Опубликовано: 07.01.1992

Авторы: Гилева, Добрынин, Коробко, Кравченко, Филиппов, Чувпило

МПК: C12N 1/21, C12N 15/21

Метки: бактерий, днк, еsснеriснiа, интерферона, кодирующая, лейкоцитарного, плазмидная, полипептид, полипептида, продуцент, рекомбинантная, свойствами, человека, штамм

...Из гибридизующихся с этой пробой клонов выделяют плазмидную ДНК, строение которой подтверждают рестриктным анализом с помощью рестриктаз Наб, Мзри Най+ЯаОК раствору 10 мкг ДНК плазмиды Р 6 А 23/Яа в 80 мкл буфера В без МаСГприбавляют 20 ед. каждой из рестрикционных нуклеаз Яаф и Крп и инкубируют 90 мин при 37 С, Анализ полноты гидролиза и выделение векторного Крп/ЯаГ-фрагмента (3,4 т,п о) проводят при помощи электрофореза в 1 -ном геле легкоплавкой агароэы, Одновременно 10 мкг ДНК плазмиды р ецГт 17 в 100 мкл буфера В обрабатывают 1,5 ч при 37 С 20 ед, каждой из рестриктаэ 89 г и ЯаГ, после чего фрагмент величиной около 500 п,о., содержащий синтетический ген а 2 интерферона, выделяют при помощи электрофореза в 5 ь-ном...

Номер патента: 1703692

Опубликовано: 07.01.1992

Авторы: Алексенко, Болотин, Борухов, Бумялис, Гервинскас, Дебабов, Евдонина, Изотова, Козлов, Костров, Лапидус, Лебедева, Лившиц, Машко, Мочульский, Носовская, Плотникова, Подковыров, Рыжавская, Скворцова, Стеркин, Стронгин, Трухан, Юрин, Янулайтис

МПК: C12N 1/21, C12N 15/23, C12P 21/00 ...

Метки: 1-13, i-интерферона, бактерий, днк, еsснеriснiа, интерферона, кодирующая, конструирования, плазмидная, продуцент, рекомбинантная, синтез, фибробластного, человека, штамм

...в 20 мкл -20, 4 мкг полученного таким образом препарата ДНК обрабатывают Кленовским фрагментом ДНК-полимеразы 1 Е.со в указанных условиях для достройки возможно имеющихся одноцепочечных концов молекул до двухцепочечных. Реакцию останавливают фенольной депротеинизацией, нуклеиновые кислоты осаждают этанолом и растворяют в 20 мкл Н 20,Лигирование линейных молекул ДНК с двуцепочечными концами проводят при 16 С в пробе объемом 50 мкл, содержащей 60 мМ трис-НС, рН 7,6, 10 мМ М 9 С 2, 10 мМ дитиотреитол, 4 мМ АТФ, 8 -ный полиэтиленгликоль - 6000, 4 мкг ДНК, 100 ед, ДНК- лигазы Т 4. После завершения реакции пробу разбавляют водой в четыре раза и проводят осаждение нуклеиновых кислот этанолом, 2 мкг растворенной в Н 20 ДНК обрабатывают...

Номер патента: 1703693

Опубликовано: 07.01.1992

Авторы: Авот, Грен, Дебабов, Козлов, Косиков, Костров, Мазель, Машко, Мочульский, Носовская, Романчикова, Скворцова, Стеркин, Стронгин, Трухан, Циманис, Черновская, Юрин

МПК: C12N 1/21, C12N 15/26

Метки: 2-19, бактерий, днк, еsснеriснiа, интерлейкина-2, кодирующая, конструирования, плазмидная, продуцент, рекомбинантная, синтез, человека, штамм

...ДНК длиной =750 п.нвырезает и проводят элюцию ДНК. Для достройки о,;ноцепочечных концов ДНК с помощью Кленовского фрагмента ДНК-полимеразы 1 Е со, выделенный из геля фрагмент обоа;э; .пгают в пробе объемом 20 мкл, содер,кэ.,ей 10 мМ трис-НС 1, рН 8,0, 10 мМ МдС 1:, по ЗО мкМ дезоксирибонуклеозидтрифосфатов Реакцию останавливают прогреванием, ДНК из смеси переосаждают этанолом и растворяют в 20 мкл,Полученный препарат фрагмента плазмиды рАА 1213-23 В используют на дальнейших этапах конструирования для интеграции кодирующей части интерлейкиначеловека в векторную плазмиду рВВ 124 В.3 мкг ДНК плазмиды рВВ 124 В расщепляют рестриктазой ВагпН в пробе обьемс . 12 мкл, содержащей буфер для рестрикци:- Реакцию останавливают фенольной...

Номер патента: 1705342

Опубликовано: 15.01.1992

Авторы: Атчабаров, Исин, Сатыбалдиев, Сулейменов

МПК: C12N 1/21, C12N 15/01

Метки: yersinia, бактерий, генетических, исследований, микробиологических, предназначенный, проведения, реsтis, штамм

...было показанов опытах 1 и чтго. Активным началом ПМЛ иМФ являются дериваты кислорода: супероксидный анион (ОН), перекись водорода(Н 202) и др,Мутагенное действие фагоцитов на чумной микроб в опытах 1 п ч 1 тго продемонстрировано в работе Атчабарова с соавт 4),Мутант У.резтз КМ, получен из природного штамма. У.резт 1 з С1 п ч 1 чо поддействием стимулированных и резидентных ПМЛ и МФ в брюшной полости большой песчанки ВовЬогпз ор 1 тцз)основного носителя чумного микроба в пустынных очагах чумы.В опытах используют, как и 1 п чго,предварительную стимуляцию выхода вбрюшную полость большой песчанки ПМЛс последующим введением туда чумногомикроба и смывом его после умершвленияживотного. Оценку результатов взаимодействия фагоцитов и возбудителя...

Номер патента: 1708847

Опубликовано: 30.01.1992

Авторы: Баев, Голова, Горбулев, Позмогова, Рубцов, Садиев, Свердлова, Скрябин, Чернов, Чупеева, Шульга

МПК: C12N 1/21, C12N 15/18

Метки: бактерий, гормон, гормона, днк, еsснеriснiа, кодирующая, крупного, плазмидная, продуцент, рвgнтrр, рекомбинатная, рогатого, роста, скота, штамм

...20 вМ, Реакционную смесь экстрагируют равным объемом смеси фенол:хлороформ. ДНК из водной фазы осаждают спиртом, высушивают, растворяют в водефракционируют в 1 Д агарозном геле, Нужный фрагмент ДНК (Рчц И - Есой - фрагмент размером 680 п,о.) элюируют из легкоплавкой агарозы с помощью стандартной процедуры осаждают спиртом, высушивают и растворяют в воде,0,5 мкг Рчц 1 - Есой - фрагмента инкубируют в 10 мкл срднесолевого буфера с 5 ед. рестриктазы Н 1 пб И 1 в течение 1 ч при 37 С, ДНК из реакционной смеси осаждают спиртом, высушивают и растворяют в воде.Для получения вектора из плазмиды зуп/рВй 327 4 мкг ДНК гидролизуют в 20 мкл инкубационной смеси на основе среднесолевого буфера, содеожащей 15 ед. Рчц И и 20 ед, Н 1 пб 1 И, в...

Номер патента: 1713930

Опубликовано: 23.02.1992

Авторы: Берзин, Борисова, Грен, Лосева, Озолс, Осе, Петровский, Пумпен, Пушко, Цибиногин

МПК: C12N 1/21, C12N 15/51, C12N 15/70 ...

Метки: 1-55, аминокислот, бактерий, гепатита, днк, кодирующая, конструирования, концевых, кор-антигенвируса, лишенный, плазмидная, поверхности, рекомбинантная, штамм, экспонированным, эпитопом

...и инкубируют 30 мин при . 4 С, Лизат осветляют центрифугированием 30(10 000 д, 4 С, центрифуга). НВс Ад Ь - рге 52 (1-55) очищают следующим образом, Ли. зат подвергают фракционированию сульфатом аммония. НВс Ад Ь - рге 52 (1-55) собирают в осадке, полученном при 30% 35 насыщения. сульфатом аммония. Осадок растворяют в 0,04 М фосфате натрия, рН 8,0;0,15 М йаС, 0,1 тритоне Х 100 до конечйой концентрации белка 25-50 мг/мли 6-7 мл этого раствора наносят на колонку с Сефа-. 40 розой С 4 В (2,1 х 75 см), уравновешенную .тем же буфером, но без тритона Х 100, Фрак- ции. проявляющие НВсАд-активность, собирают и используют либо непосредственно, либо после концентриро вания переосаждением 50%-ным сульфатом аммония.Определение...

Номер патента: 1724691

Опубликовано: 07.04.1992

Авторы: Болдырева, Бурдов, Добрынин, Дрягалин, Иванющенков, Коробко, Микульскис, Некрасова, Филиппов, Чепуркин

МПК: C12N 1/21, C12N 15/42

Метки: 10fmd, 131-160, pi200-213-р, vpi200-213, бактерий, белка, белок, гибридного, гибридный, днк, еsснеriснiа, кодирующая, плазмидная, продуцент, р204-as, р204а, рекомбинантная, штамм

...Р 204, который представляет собой белок фактора1724691 некроза опухолей человека, слитый черездипептид АзрРго с последовательностьюантигенной детерминанты подтипа А 22 вируса ящура..Для получения бактериального штамма- продуцента иммуногенного полипептидаР 204 плазмидой р 10 РМО трансформируюткомпетентные клетки Е, соИ 3620050,Полученные таким образом штаммы Е.соИ 3620050/р 10 РМО (В КПМ В) характеризуются следующими признаками.Морфологические признаки.Клетки мелкие утолщенной палочковидной формы, грамьтрицательные, неспороносные.Культуральные признаки.Клетки хорошо растут.на простых питательных средах, При росте на агаре "Дифко"колонии круглые, гладкие, прижаты, мутные, блестящие, серые, край ровный, Приросте в жидких средах (на...

Номер патента: 1730150

Опубликовано: 30.04.1992

Авторы: Баев, Горбулев, Рубцов, Сагадиев, Садиев, Скрябин, Шульга

МПК: C12N 1/21, C12N 15/18

Метки: бактерий, гормон, гормона, днк, еsснеriснiа, кодирующая, кодирующий, овцы, плазмидная, продуцент, рекомбинантная, роgнтrр11, роста, синтез, фрагмент, штамм

...работы отобрали плазмиду, содержащую Есой 1-Н 1 пб И 1-фрагмент с геном ГР КРС размером 601 п.ообозначенную рВОН Ва 112;П р и.м е р 2. Получение фрагмента ДНК,кодирующего ГР овцы.А) Клонирование фрагмента ДНК, коди рующего ГР КРС, в векторе М 13(фиг, 6).10 мкг плазмидной ДНК рВОНВа 12гидролизовали рестриктазами Есой 1 и НпбИ 1 в 50 мкл инкубационной смеси следующего состава: 50 вМ йаС 1, 10 вМ 5 трисНС 1. рН 7,5,10 вМ МяС 2, 1 еМ дитиот-рейтола(ДТТ), 10 ед; рестриктазы Есойи 10 ед. рестриктазы Н 1 пбИ, в течение 2 ч при 37 С.Проводили разделениефрагментов ДНКв 1агарозном геле и выделяли из геля фрагмент раз мером 601 п,оиспользуя стандартный метод.5.мкг ДНК репликативной формы бактериофага М 13 вр 8 гидролизовалирестриктазами...

Номер патента: 1730151

Опубликовано: 30.04.1992

Авторы: Болдырева, Бурдов, Добрынин, Дрягалин, Иванющенков, Коробко, Микульскис, Некрасова, Филиппов, Чепуркин

МПК: C12N 1/21, C12N 15/42

Метки: бактерий, гибридного, гибридный, днк, еsснеriснiа, кодирующая, м.д, плазмидная, полипептид, полипептида, продуцент, р199, рекомбинантная, штамм

...кодирует иммуногенный пептид Р 199, который представляет собой белок фактора некроза опухолей человека, слитый через дипептид АзрРго с последовательностями антигенных детерминант подтипа Аг 2 вируса ящура,Для получения бактериального штамма - продуцентов иммуногенного полипептида5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Р 199 плазмидой р 9 ЕМО трансформируюткомпетентные клетки Е. соИ 3620050.Полученный таким образом штамм Е.соИ ВКПМ Вхарактеризуется следующими признаками,Морфологические признаки, Клеткимелкие утолщенной палочковидной формы,грамотрицательные, неспороносные,Культуравьные признаки. Клетки хорошо растут на простых питательных средах.При росте на агаре "Дифко" колонии круглые, гладкие, прижаты, мутные, блестящиесерые, край ровный. При...

Номер патента: 1742331

Опубликовано: 23.06.1992

Авторы: Берзин, Борисова, Грен, Дрейлиня, Лосева, Озолс, Осе, Платцер, Пумпен, Пушко, Розенталь, Сиаккоу, Ульрих, Цибиногин

МПК: C12N 1/21, C12N 15/48, C12N 15/51 ...

Метки: 51-3, 56-103, антиген, вируса, гепатита, днк, кодирующая, конструирования, кор, крупного, лейкоза, плазмидная, поверхности, рекомбинантная, рогатого, скота, экспонированным, эпитопом

...разбавляют в 4 раза дистиллированной водой и подвергаютф ра кциони рован и ю сульфатом аммония. 20Н ВсАд Ь - ВО/др 51(56 - 103) собирают восадке, полученном при 30 насыщениясульфатом аммония. Осадок растворяют в0,05 М трис-НС 1, рН 8,0, 0.15 М йаО, 0,1тритоне Хдо конечной концентрации .25белка 25 - 50 мг/мл, и 2 - 4 мл этого раствора наносят на колонку с сефарозой (1,6 х 100см), уравновешенную тем же буфером, нобез тритона Х. Фракции, проявляющиеНВсАд-активность, собирают и используют 30либо непосредственно, либо после концентрирования переосаждением 50-нымсульфатом аммония,П р и м е р 3. Определение НВсАд-активности методом РИД. 35Титр НВсАд определяют с помощью радиальной иммунодиффузии по Ухтерлони,Для этого готовят двухкратные...

Номер патента: 1744110

Опубликовано: 30.06.1992

Авторы: Грен, Дрейлиня, Козловская, Озолс, Платцер, Пумпен, Пушко, Розенталь, Сиаккоу, Соминская, Ульрих

МПК: C12N 1/21, C12N 15/33, C12N 15/70 ...

Метки: frblv, бактерий, бактериофага, белок, вируса, днк, еsснеriснiа, кодирующая, конструирования, крупного, лейкоза, оболочки, плазмидная, прод, рекомбинантная, рогатого, скота, слитый, штамм

...50 мМ трис-НС, рН 7,5; 10 мММдС 2, 10 мМ дитиотрейтол, 50 Ы АТР и 10ед, Т 4 ДНК-лигазы, в течение 12 ч при 4 С,Фрагмент инактивируют нагреванием при650 С в течение 15 мин, К реакционной смесидобавляют 100 мкл клеток Е,соИ ВВ 1, обработанных 100 мМ СаС 2 (конечная концентрация - 5 х 10 клеток/мл), длятрансформации клеток,Отбор клонов осуществляют путем экспресс - выделения ДНК и ее рестрикционного анализа, а также секвенирования.Плазмида с ожидаемой последовательностью получает наименование рГРВ Ч-Р 6,Конструирование рекомбинантнойплазмидной ДНК рЕРВ ЧзР 6,2 мкг плазмиды рРРВ Ч-Г 6, выделенной стандартным методом, расщепляют 3.ед, растриктазы Есо 781 и 3 ед, рестриктазыЗзр 1 в 25 мкл раствора А, содержащего100 мМ трис-НС, рН 7,5; 50 мМ...

Номер патента: 1747490

Опубликовано: 15.07.1992

Авторы: Белохвостов, Владимиров, Воскресенский, Семухина, Шерлина

МПК: C12N 1/21, C12N 15/12

Метки: воздействия, оценки, радиационного

...добавляя 3 объема охлажденного до -20 С этанола, Осадок собирают центрифугированием, Полученный препарат ДНК вновь растворяют в малом объеме (0,1-0,2 мл) ТЕ-буфера (10 мМ трис-Н С (рН 8,0), 1 м М ЭДТА-Ма) и переосаждают еще один раз тремя объемами этанола. Очищенную низкомолекулярную ДНК растворяют в 20-30 мкл ТЕ-буфера, проверяют, нанося 2-3 мкл пробы на ПАГ для электрофореза и, убедившись в наличии ДНК, используют ее в качестве малого )Л-Фрагмента для конс-руирования рекомбинантной молекулы В 58. В качестве ВГ-формы ДНК бактериофага М 13 вр 8 берет препарат фирмы АгпегзЬаа (Великобритания) в концентрации 1 мг/мл. 2 мкг ЯГ-формы ДНК бактериофага М 13 гпр 8 смешивают с рестриктазой Япа (15 ед) в буфере 1(20 мМ КС,10 мМ трис-НС(рН 8,0),...

Номер патента: 1761805

Опубликовано: 15.09.1992

Авторы: Данилюк, Кравченко, Кьамынина, Сандахчиев, Синяков

МПК: C12N 1/21, C12N 15/26

Метки: pil-221, бактерий, днк, еsснеriснiа, интерлейкин-2, интерлейкина-2, кодирующая, конструирования, плазмидная, продуцент, рекомбинантная, человеческий, человеческого, штамм

...ДНК-полимеразы (фрагмент Кленова) и выдерживают еще 10 мин при 10 С. 10мкл смеси используют для трансформациикомпетентных клеток Е.со 3 М 10 . Из колоний, имеющих фенотип Ар, Тс, выделяютплазмидную ДНК, обозначенную рВ, ипроводят Маги (Есор -ЯаО )-рестрикционный анализ, Правильность структуры нуклеотидов в области сайтов Есори ЯаОподтверждают методом Максама-Гилберта.П р и м е р 2, Конструирование рекомбинантной плазмиды рВ 1:2,20 мкг репликативной формы ДНК фагаМ 1 з гра гидролизуют в 100 мкл буфера 2 50ед, рестриктазы Есор1 ч при 37 С. Есор-Есор-фрагмент (198 п,о,) выделяют в 6%ПААГ,1 мкг ДНК плазмиды рВ -2 гидролизуют в 20 мкл буфера 2 рестриктазой Есогвописанных выше условиях, Смесь 0,25пкмоль линейной формы рВ:2,пкмоль(Есор -Есор...

Номер патента: 1788966

Опубликовано: 15.01.1993

Авторы: Баев, Болотин, Вольфович, Дебабов, Йомантас, Козлов, Народицкая, Орлова, Попов, Рябченко, Сорокин, Стеркин

МПК: C12N 1/21

Метки: bacillus, liснеnifоrмis, амylоliquеfасiеns-продуцент, амилазы, бактерий, штамм

...маркеров плазми1. Устойчивость к эритромицину клеток В.агпу 1 оИцце 1 асепз (В), содержащих плаэмиду рВАТАМ 2, анализируют на среде с содержанием эритромицина 5 - 20 мкг/мл. Данные клетки растут на средах с такой концентрацией эритромицина.2. Наличие секретируемой термостэбильной а -амилазы в клетках В,агпу 1 оИцце 1 асепз (В), содержащих плазмиду рВАТАМ 2, устанавливают следующим образом: клетки из отдельных клонов наносят микробиологической петлей на чашку Петри с твердым 1 В-агаром, содержащим 0,15% амилопектиназура, в виде точек или полос и инкубируют при 37 С 18 - 24 час. Вокруг выросшей массы клеток образуется прозрачная зона гидролизованного амилопектиназура. Клетки исходного штамма - реципиента В.ату 1 оИс 1 цеГасепз (В),...

Номер патента: 1816797

Опубликовано: 23.05.1993

Авторы: Бобков, Гараев, Шуленин

МПК: C12N 1/21, C12N 15/48

Метки: антигенными, бактерий, белка,обладающего, вируса, гибридного, днк, еsснеriснiа, иммунодефицита, конструирования, определяющая, плазмидная, продуцент, рекомбинантная, рр1, свойствами, синтез, человека, штамм

...ДНК проводят методом равновесного центрифугирования в градиенте плотности СзС 1 с бромистым этидием (1 мкг/мл),Для получения плазмиды рР 1 фрагмент Н 1 пб 111 - Е.сой 1 плазмиды рйТЗ переклонируют в вектор рцй 290 по сайту Нпб 111, С этой целью 10 мкг ДНК плазмиды инкубируют с 30 ед. эндонуклеазы Е.соЯ в буфере, содержащем 100 мМ йаС 1, 10 тМ МдМ 12, 10 аМ трис-НС 1 рН 7,5, 1 щМ ДТТ, в течение 1 ч при 37 С. Затем добавляют 1/10 объема ЗМ ацетата йэ и осаждают ДНК 2,5 объемами этилового спирта на ценрифуге (10000 д, 10 мин, 4 С). Осадок высушивают и растворяют в буфере 10 мМ трис-НС 1 рН 8,0 и 5 мМ ЭДТА. Полученный препарат лигируют с 50 мМ адаптора Е.сой-Нпд 11 с помощью ДНК-лигазы фага Т 4 (30000 единиц/мл),из расчета 1 мкл...

Номер патента: 1766070

Опубликовано: 30.01.1994

Авторы: Дедкова, Киприянов, Офицеров, Серпинский

МПК: C12N 1/21, C12N 15/48

Метки: escherichia, бактерий, белков, вируса, днк, иммунодефицита, кодирующая, оболочки, плазмидная, продуцент, рекомбинантная, типа, фрагментов, фрагменты, человека, штамм

1. Рекомбинантная плазмидная ДНК pUE 41, кодирующая фрагменты белков оболочки gp120 и gp41 вируса иммунодефицита человека типа 1 размером 5700 н. п. и мол. м. 3,7, содержащая- Bam HI - Hind III - фрагмент плазмидной ДНК pUR292 размером 5180 н. п. ;- Bgl II - Hind III - фрагмент плазмидной ДНК pBH 10 размером 520 н. п. ;- уникальный сайт рестрикции Hind III;- гены и генетические маркеры;- ген bla - обеспечивающий синтез -лактамазы;- ген lacz - обеспечивающий синтез -галактозидазы;- фрагмент гена env ВИЧ - 1, обеспечивающий синтез полипептида, обладающего антигенным...

Номер патента: 1427833

Опубликовано: 15.03.1994

Авторы: Андрианов, Калиев, Пирузян

МПК: C12N 1/21, C12N 15/84

Метки: agrobacterium, tumefaciens, бактерий, векторная, генов, днк, переноса, плазмидная, рак, растения, рекомбинантная, штамм

1. Способ переноса генов в растения с помощью плазмид Agrobacterium, включающий инфицирование растений бактериями, несущими две плазмиды, одна из которых - мутантная неонкогенная Ti-плазмида A. tumefaciens, индуцирующая перенос в растительные клетки мутантной неонкогенной Ti - T - ДНК, не вызывающая опухолевой пролиферации клеток растений, а другая -Ri-плазмида дикого типа A. rhizogenes, вызывающая у чувствительных растений фотогормоннезависимую пролиферацию корней, состоящих только из генетически однородных трансформированных растительных клеток, включивших в геном Ri - T - ДНК, получение трансформированных генетически однородных клеток растений, включивших в геном одновременно Ri - T - ДНК и мутантную Ti - T - ДНК, регенерацию из...

Номер патента: 1547312

Опубликовано: 15.03.1994

Авторы: Великодворская, Метт, Могутов, Пирузян, Царейкина, Юрьев

МПК: C12N 1/21, C12N 15/52

Метки: escherichia, глюкозидазу, плазмида, продуцирующий, рекомбинантная, термостабильную, штамм

1. Рекомбинантная плазмида pCU 201, содержащая ген термостабильной -глюкозидазы, состоящая из плазмиды pBR 322, в Bam HI сайт которой клонирован фрагмент ДНК размером 4,1 тпн, полученный при частичном гидролизе рестриктазой Sau-3А ДНK Clostridium thermocellum и содержащий в своем составе ген термостабильной при 60oС -глюкозидазы.2. Штамм Escherichia coli К 12 С 600, содержащий плазмиду pCU 201, коллекция Центрального музея промышленных микроорганизмов института ВНИИ генетика, продуцирующий термостабильную -глюкозидазу.

Номер патента: 1547316

Опубликовано: 15.03.1994

Авторы: Андрианов, Метт, Пирузян, Юсибов

МПК: C12N 1/21, C12N 15/84

Метки: agrobacterium, ptivy4, tumefaciens, бактерий, днк, используемый, плазмидная, предназначенная, растений, рекомбинантная, трансгенных, трансформации, штамм

1. Способ получения трансгенных растений, заключающийся в том, что листовой материал растения инфицируют штаммом Agrobacterium tumefaciens, селекционируют по признаку устойчивости к канамицину, отбирают и укореняют трансгенные растения, отличающийся тем, что, с целью ускоренного укоренения трансгенных растений при черенковании, для инфицирования используют штамм Agrobacterium tumefacens ВКПМ В - 4428, несущий ген глюкозоизомеразы Escherichia coli, а отбор трансгенных растений проводят с помощью блоттинг-гибридизации геномной ДНК растений с радиоактивным зондом гена глюкозоизомеразы и определения ферментативной активности глюкозоизомеразы e. coli с помощью цистеин-карбозольного метода.2. Рекомбинантная плазмидная ДНК pTi VY 4,...

Номер патента: 1524484

Опубликовано: 15.03.1994

Авторы: Арман, Грановский, Легчилина

МПК: C12N 1/21, C12N 15/51

Метки: cerevisial, hbsag, saccharomyces, антигена, белка, вируса, гена, гепатита, дрожжей, поверхностного, продуцент, штамм

1. Штамм дрожжей Saccharomyces cerevisiae ВКПМ У-754 - продуцент белка гена поверхностного антигена (HBsAg) вируса гепатита B.2. Способ получения штамма дрожжей Saccharomyces cerevisiae - продуцента белка гена поверхностного антигена (HBsAg) вируса гепатита B путем скрещивания, отбора по признаку гетерозиса, трансформации и селекции гибридов по продуктивности белка HBsAg, отличающийся тем, что, с целью увеличения выхода белка HBsAg за счет стабилизации системы клетка - плазмида, плазмидой pNMVG 39 - 54 трансформируют линии клеток, полученные скрещиванием штаммов S cerevisiae ДВУ 746 и 1R 22В, селекцию проводят по признакам гетерозиса, митотической "сверхстабильности" плазмиды и повышенной продуктивности белка HBsAg и отбирают...

Номер патента: 1561510

Опубликовано: 30.07.1994

Авторы: Болдырева, Добрынин, Коробко, Недоспасов, Панина, Турецкая, Филиппов, Чумаков, Шахов

МПК: C12N 1/21, C12N 15/19, C12P 21/02 ...

Метки: escherichia, бактерий, днк, используемая, кодирующая, конструирования, лимфотоксина, плазмидная, полипептид, рекомбинантная, свойствами, человека, штамм

1. Рекомбинантная плазмидная ДНК pLT 9, кодирующая полипептид со свойствами лимфотоксина человека, с мол.м. 2,64 мДа и размером 4,06 т.п.о., содержащаяHind III - Kpn I - фрагмент ДНК плазмиды p 6А23 с тандемом промоторов A2 и A3 ранней области бактериофага T7, геном -лактамазы и терминатором транскрипции фага лямбда размером 3, 4 т.п.о.;Kpn I - Hind III - фрагмент с синтетическим сайтом инициации трансляции и полусинтетическим геном лимфотоксина человека размером 0,64 т.п.о.;генетический маркер - ген -лактамазы, детерминирующий устойчивость клеток E.coli к пенициллиновым антибиотикам;

Номер патента: 1602055

Опубликовано: 30.10.1994

Авторы: Дегтярев, Загребельный, Кравченко, Петренко, Ривкин, Хомов

МПК: C12N 1/21

Метки: coli-продуцент, escherichia, бактерий, кленова, фрагмента, штамм

Штамм бактерий Escherichia coli ВКПМ В-3825 - продуцент фрагмента Кленова.

Номер патента: 1679798

Опубликовано: 27.08.1995

Авторы: Горн, Плетнев, Пугачев, Ямщиков

МПК: C12N 1/21, C12N 15/33, C12N 15/52 ...

Метки: 1-белок, вируса, галактозидаза-ns, гибридный, днк, клещевого, кодирующая, конструирования, плазмидная, полипептид, рекомбинантная, энцефалита

1. Рекомбинантная плазмидная ДНК pUR 290 S E, кодирующая гибридный полипептид галактозидаза NSI-белок вируса клещевого энцефалита, размером 6447 п.о. и мол.м. 4,25 МД, содержащая: Hin d III Sal I-фрагмент ДНК плазмиды pUR 290 размером 5200 п.о. Hind III-конец которого достроен фрагментом Кленова ДНК-полимеразы 1 E.coli; Alu I Msp I-фрагмент ДНК-плазмиды pTBE 2 размером 109 п.о. Alu I-конец которого заменен на Sal I-конец; Msp I Cfr 10 I-фрагмент ДНК-вируса клещевого энцефалита размером 572 п.о. Cfr 10 I Hind III фрагмент ДНК-плазмиды p621-11 размером 540 п.о. Hind III EcoRI синтетический фрагмент ДНК,...

Номер патента: 1515698

Опубликовано: 10.09.1995

Авторы: Гибадулин, Гродницкая, Денисова, Дзюбенко, Долгушина, Лидеман

МПК: C12N 1/21, C12N 15/51

Метки: вируса, гепатита, днк, кодирующая, осповакцины, плазмидная, продуцент, рекомбинантная, синтез, штамм

1. Рекомбинантная плазмидная ДНК rLD 206, кодирующая синтез HBs Ag вируса гепатита В, мол.м. 7,3 МД, размером 11,1 т.п.о. содержащая плазмидную ДНК вектора RUI размером 7,7 т.п.о. две копии EcoRI-фрагмента плазмиды pLD 1 с фрагментом генома вируса гепатитов B подтипаAdW размером 1,35 т.п.о. под контролем промотора белка 7,5 кД ВОВ размером 350 п.о. и общим размером 3,4 т. п. о. уникальные сайты для эндонуклеаз рестрикции: 4BamHI, 3 EcoRI, xba1 и hind 111; генетические маркеры: ampr устойчивость к ампициллину.2. Штамм вируса осповакцины ГКВ N 2126 продуцент HBs Ag вируса гепатита B.

Номер патента: 1602056

Опубликовано: 27.10.1995

Авторы: Добрица, Дубовая, Михайлов, Носков, Такаева

МПК: C12N 1/21, C12N 15/00

Метки: aureus, bacillus, staphylococcus, subtilis, бактерий, белка, продуцент, штамм

Штамм бактерий Bacillus subtilis ВКМ N CR-303 Д продуцент белка А Staphylococcus aureus.

Номер патента: 1524485

Опубликовано: 20.11.1995

Авторы: Добрица, Дубовая, Михайлов, Носков, Такаева

МПК: C12N 1/21, C12N 15/31

Метки: aureus, bacillus, staphylococcus, subtilis, бактерий, белка, днк, кодирующая, конструирования, плазмидная, продуцент, рекомбинантная, рмм, синтез, штамм

1. Рекомбинантная плазмидная ДНК pMM 9, кодирующая синтез белка A Staphylococcus aureus, размером 6,7 т. п. н. содержащая: Pst I-EcoR I-фрагмент векторной плазмиды pPL 608 размером 4,7 т. п. н. EcoR I-Pst I-фрагмент хромосомы Staphylococcus aureus Cowani размером 2,0 т. п. н. несущий ген белка A с собственным промотором; cat-ген хлорамфениколацетилтрансферазы без промотора; Kmг-ген устойчивости к канамицину; уникальные сайты рестрикции EcoR I; Pst I; круг хозяев - грамположительные бактерии.2. Способ конструирования плазмиды pMM 9, кодирующей белок A, заключающийся в том, что смесь ДНК Staphylococcus aureus Swant I и плазмиды pBR 327 гидролизуют рестрикционной эндонуклеазой Pst I, фрагменты соединяют ДНК-лигазой, смесью...

Номер патента: 1438240

Опубликовано: 20.03.1996

Авторы: Болдырева, Добрынин, Коробко, Кравченко, Недоспасов, Турецкая, Филиппов, Чувпило, Шахов, Шингарова

МПК: C12N 1/21, C12N 15/28

Метки: ген, днк, кодирующая, конструирования, некроза, опухоли, плазмида, плазмидная, плазмидной, полипептид, полусинтетический, промежуточная, рекомбинантная, рекомбинантной, ртnf, содержащая, фактора, человека

1. Рекомбинантная плазмидная ДНК pTNF 22, содержащая полусинтетический ген фактора некроза опухоли человека, - промежуточная плазмида для конструирования рекомбинантной плазмидной ДНК pTNF 31, с мол.м. 3,6 MD (5,95 т.п.о. ), содержащая:Bam I - Hind III-фрагмент ДНК плазмидного вектора PVR 291 с промотором, оператором и измененным геном -галактозидазы, кодирующим 1027 аминокислотных остатков размером 5,35 т.п.о.;Bam I - Msp I-фрагмент синтетической ДНК с участком, инициации трансляции Escherichia coli, инициирующим кодоном ATG и 31 N-концевым кодоном фактора некроза опухоли размером 120 тыс. п.о.;Msp I - Hind III-фрагмент ДНК рекомбинантного фага l 422 с...

Номер патента: 1438241

Опубликовано: 20.03.1996

Авторы: Болдырева, Добрынин, Коробко, Кравченко, Недоспасов, Турецкая, Филиппов, Чувпило, Шахов, Шингарова

МПК: C12N 1/21, C12N 15/28

Метки: escherichia, бактерий, днк, кодирующая, некроза, опухоли, плазмидная, полипептид, полипептида, продуцент, рекомбинантная, ртnf, свойствами, фактора, человека, штамм

1. Рекомбинантная плазмидная ДНК pTNF 33, кодирующая полипептид со свойствами фактора некроза опухоли человека, с мол.м. 2,93 MD и размером 4,85 т. п.о., содержащаяPst I / Pvu II-фрагмент ДНК плазмиды pGA 23 с тандемом промоторов A2 и A3 ранней области бактериофага T7, с геном дигидрофолатредуктазы и частью гена -лактамазы размером 1,83 т.п.о.,Pst I /Xho I-фрагмент ДНК плазмиды pTNF 3 с геном хлорамфениколацетилтрансферазы, терминатором транскрипции фага l, частью гена -лактамазы и частью гена фактора некроза опухоли человека, кодирующего аминокислотную последовательность 4 (Ser)-157 (Leu) размером...