Патенты с меткой «интерферона»

Номер патента: 363746

Опубликовано: 01.01.1973

Авторы: Ивановского, Институт

МПК: A61K 38/21

Метки: интерферона

...цель достгцгает 1 оя прц цсгюльзова 1 н 1 Иц в качесТ 1 ве дндуктора,вцру 1 со 1 в раст ений.Вируссы растан 1 ий;применяют 1 в ВИде каллусо 1 в, получевнык цз зараженнык расторги 1 Й табака ц пвю 1 здцюи ремо 1 нтантсоой по методу Р. Г. БутеН 1 ко. Каждый каллус выдврждвает ю 1 т 20 до, 24 П 21 ссагжей.К выращбн 1 ному ооа 1 мат 1 рсч 1 цах клеточ 1 ному плагиату фибробластов человека, фН 1 броблацтов кур или клеток линии приоавляют,вирус мозяо 1 ки табака, штамм Казакосой поли В 1 И- рус мозаики гвоздики, штамм Гольдина ц Черновановой. Матр 1 И 1 цы помещаОт в термюстат пр 1 И 37 С, Затем куль;пуреальную иоидкость слцВаОт с клето 11 ного монослОя, ценппр 1 ифутсчруют при 2000 об/,нин. И 21 досадочвуо жп 1 дкссть под 1 ол,от 5 н....

Номер патента: 460870

Опубликовано: 25.02.1975

Авторы: Кузнецов, Менткевич, Орлова, Соловьев, Щегловитова

МПК: A61K 27/00

Метки: интерферона, человеческого

...Составитель С. ЩеневаТехред Е. Борисова Корректор А. Васильева Редактор О. Стенина Заказ 881/12 Изд, Мц 387 Тираж 559 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Типография, пр. Сапунова, 2 3на 1 мл среды 199, содержащей 5 - 10% плазмы (или сыворотки) и вышеуказанное количество антибиотиков, и инкубируют при 37 С 18 - 20 час, По окончании инкубации клетки отделяют центрифугированием при 1500 - 2000 д в течение 15 мин, осадок отбрасывают, а надосадочную жидкость повторно центрифугируют. К очищенной жидкости добавляют 10 - 20%-ный раствор соляной кислоты до рН 2,2 - 2,4 и выдерживают не менее 4 - 5 суток, при 4 С, после чего отбирают образцы для...

Номер патента: 297296

Опубликовано: 25.12.1977

Авторы: Кузнецов, Марченко, Соловьев

МПК: A61K 38/21

Метки: интерферона

...(вакцинный штамм "Индиана, взятого в дозе 100 Т 1.1 Ц 5 в культуре клеток первично-грипсинизированной кожно-мышечной ткани 10-12 недельных эмбрионов человека или в перевиваемой 30 культуре диплоидных клеток кожно-мышечной ткани эмбрионов человека. Титр прогивовирусной активности должен составлять не ме нее 32 ед/мл в культуре фибропласгов и не менее 250 ед/мл в культуре диплоидных 3 клеток. Определение токсичности проводят в монослойной культуре клеток кожно-мы-: шечной ткани эмбрионов человека, В культуру со сформированным монослоем вводят 1 мл разведения 1:16 (первично-трипсини зированная культура ) или 1:100 (диплоиднвя культура) в среде с гидролизатом лактальбумина, 14 199 или Игла, Через 2-3осуток инкубации при 37 С не должно1быть...

Номер патента: 721103

Опубликовано: 15.03.1980

Авторы: Асланов, Ауелбеков, Барам, Биктимиров, Ершов, Исмаилов, Новохатский, Садыков

МПК: A61K 38/21

Метки: индуктор, интерферона

...ИЦ в присутмкг/мл ДЭАЗ-деклученный при ток 250 мкг/ нутый воздей 10 1-10 мкг/млствии 70-100страна 4-128512 Вирус Синдбис ирус везикулярного стоматита 320 Формула изобретени П)им е"р 2. для ойределенияпротивовирусной активности ГСН накультуре клеток берут 2-3-суточныекультуры фибробластов эмбрионов кури заражают вирусом везикулярного стоматита (ВВС) с множественностьюййфекции 10 БОЕ на клетку. После330-минутной адсорбции при 37 С вируссодержащую жидкость отсасывают,клеткиотмывают раствором Хэнкса изаливают свежей пйтательной средой,содержащей препарат. Через 24 ч,когда в контроле наблюдают выражен-,ное цитопатическое действие вируса,культуральную жидкость сливают и инфекцйойность вируса определяют методом титрования по бляшкам под...

Номер патента: 1012914

Опубликовано: 23.04.1983

Авторы: Малеева, Печеркина

МПК: A61K 39/02

Метки: активности, интерферона, препарата

...ннтерферона, растворенного 45 в дистиллированной воде, согласно указанию, имеющегося на ампуле спрепаратом. Иэ первой пробирки1 г 0 мп.жидкости переносят во вторуюпробирку, из второй " в третью ги т.д.В приготовленные разведения интерфе"рона вносят по 0,1 мл стафилококковой суспенэии. ПОале внесения баитерий жидкость в пробирках остаетсяпрозрачной,Опыт сопровождают контролями.Первым контролем йррверяют стврильность испытуемого препарата интерферона - в пробирку вносят 1,0 млисходного, растворенного в дйстиллированной воде, препарата. Вторым контролем проверяют стерильность мясопептонного бульона - в пробирку вносят 1,0 мл бульона. Третьим контролем проверяют способность культурыстафилококка размножаться в мясопептонном бульоне - в...

Номер патента: 1082422

Опубликовано: 30.03.1984

Авторы: Мартынова, Мифтахова, Мурашова

МПК: A61K 38/21

Метки: активности, интерферона, крови, плазме, сыворотке

...выделенных от больных, Высокую чувствительность к интерферону проявлял лишь один штамм, в дальнейшем используемый в предлагаемом методе. Тест-культура представляет собой белый стафилококк, обладающий гемолитической и слабовыраженной плазмокоагулирующей активностью (16 ч), слабой чувствительностью к антибиотикам широкого спектра действия, не лизи руется лизоцимом сыворотки крови слюны, яичного белка. Интерферон сыворотки оказывает прямое воздействие на тест-культуру стафилококка вышеуказанного штамма, вызывая гибель его.Для постановки реакции в стерильные пробирки наливают испытуемую сыворотку в объеме 0,09-0,11 мл (предпочтительнее (0,1 мл) и 0,1-0,21 мл физиологического раствора (предпочтительнее 0,2 мл). После чего в пробирку...

Номер патента: 1082808

Опубликовано: 30.03.1984

Автор: Печеркина

МПК: A61K 38/21

Метки: активности, интерферона, используемый, качестве, тест-культуры, штамм

...Препаратинтерферона - чувствителен, Погибаетили перестает размножаться в зависимости от активности препарата интерферона при прямом контакте в течение 18 ч (Ф 37 оС ),Н р и м е р 1. Готовят последовательные разведения препарата интерферона мясопептонным бульономв объеме 1,0 млв пробирках. Затем пбмещают в пробирки пО 100000 Клеток стафилококка, предварительно выращенного на косом агаре в течение 18 ч. Пробирки выдерживают в термостате при 37 С в течение 18 ч. Учет результата опыта пРоводится визуально. За антибактериальный титр испытуемого интерферона принимают то его наибольшее разведение, при котором культура стафилококка не растет (содержимое соответствующей пробирки остается прозрачным ) Результаты выявления уровней интерферона в...

Номер патента: 1092176

Опубликовано: 15.05.1984

Авторы: Беликов, Берлин, Болдырева, Буткус, Быстров, Добрынин, Каюшин, Колосов, Коробко, Кравченко, Полякова, Попов, Сандахчиев, Северцова, Серпинский, Сиволобова, Синяков, Чувпило, Шубина, Ямщиков

МПК: C12N 15/00

Метки: активностью, гена, интерферона, искусственного, микробиологическим, полипептида, синтезом, человека

...вставки.Другой способ заключается в выделе нии соответствующим образом подготовленных половин структурного гена и одновремевяой вставке их в векторную ДНК.,В этом случае в качестве вектора используют большой Ве 11 Яа 1 1-Фрагмент плазмиды рРК 14, который выделяют электрофорезом в 57-ном полиакриламидном геле (ПАГ). Чтобы получить И-концевой фрагмент, ДНК плазмиды рЬе 1 Р (7-250), 2 сначала расщепляют рестриктазой Нпд 111, а послеобработки Я -нуклеазой гидролизуют рестриктазой ВД 11, и малый фрагмент выделяют электрофорезом в 57-ном ПАГ.Аналогичным образом для получения С-концевого фрагмента ДНК плазмиды рЬе 1 Р (251-501) гидролизуют рестриктазой ЕсоК 1, липкие концы достраивают ДНК-полимеразой 1 Е, сой после чего гидролизуют...

Номер патента: 1113410

Опубликовано: 15.09.1984

Авторы: Дмитренко, Дмитриев, Нестерова, Одиноков, Сизов

МПК: C12Q 3/00

Метки: гидролизных, индуктора, интерферона, производства, процессом, субстратах

...является и и и -обладаюшим поставщиком кислородс субстратом, поэтому можно поло,1 ить(1. С -С т,Г Л -гг).1 С с; (СО,-СО,Ььо,(С-С,У 1 п(-с-М 2",ьСсл, зсмк,воль и раствора сг)с 1 . С учетом изложенного из выражений (7) и (12) получают отношение Из уравнения (14) следует,что для управления по результатамсравнения текущих и теоретическихзначений отношений количеств углерода к кислороду (помимо измерениятекущих значений дыхательного коэффициента) необходимо и достаточноНизмерять: СрВ ) Срз, )л,В ) -Со,г Величины СР, (1-, С , и,:,являются справочньчи,На чертеже изображена трустур)ясхема реализации данного способа.Схема содержит ферментер 1, ккоторому подведены линии подачиуглеродсодержащего субстрата) водьг,питательных солей и воздуха...

Номер патента: 1135477

Опубликовано: 23.01.1985

Авторы: Григорьян, Джумаев, Ершов, Жданов, Поверенный, Подгородниченко, Попов

МПК: A61K 38/21

Метки: индукции, интерферона

...и перорально"." 35цепараты нолиИ.полиЦ и полиГ,полиЦв липосомальном виде в дозе 1,10,50 и100 мкг/мышь (в расчете на чистый индуктор). Через 4 ч у мышей беруткровь, отделяют сыворотку и определя-Оют содержание в ней интерферона. Результаты анализа показали, что оптимальный предел дозы препарата 1050 мкг/мьппь или 1-5 мкг/г веса животного. 45Выбор способа введения препарата.Иышам внутрибрюшинно и пероральновводят по 5 мкг/г веса полиИполиЦ иполиГ.полиЦ з чистом и липосомальномвиде. Через 4,24,48 ч в сывороткекрови определяют содержание интерферона,2В табл. 1 представлено сравнительное изучение интерферониндуцирующей активности липосомапьных полиИ.полиЦ и полиГ.полиЦ при внутрибрюшинном и пероральном способах введения. Из...

Номер патента: 1144376

Опубликовано: 07.02.1986

Авторы: Аспетов, Ефимов, Жданов, Зайцева, Кавсан, Кузнецов, Монастырская, Новохатский, Овчинников, Саломатина, Свердлов, Соловьев, Царев, Чахмахчева

МПК: A61K 38/21

Метки: интерферона, кодирующие, лейкоцитарного, плазмиды, продуценты, рекомбинатные, синтез, типа, человека, штаммы

...научно-исследовательского института генетики и селекции промышленных микроорганизмов "ВНИИ 1Изобретение относится к микро биологической промышленности, молекулярной биологии и генетической инженерии и представляет собой серию сконструированных Ы чего рекомби ф нантных плаэмид,обуславливающих син тез одного из интерферонов челове" ка - лейкоцитарного интерферона типа Ф Р в клетках кишечной, палочки Е.со 1., и штаммы Е,со 1 - проду центы данного интерферона,Известна рекомбинантная плаз,мида, кодирующая синтез лейкоцитар ного интерферона типао -А человека и штаммы Е.со 15., содержащие эту плазмиду - продуценты интерферона типао 1 -А человека. ФУказанная рекомбинантная плазмида состоит из гена интерферонай-А и триптофанового промотора,...

Номер патента: 1219647

Опубликовано: 23.03.1986

Авторы: Зорин, Ильичев, Мизенко, Петренко, Семенова, Татьков, Тимофеев

МПК: C12N 15/00

Метки: интерферона, лейкоцитарного

...белка влизае трансформированных бактерий.Лизаты бактерий Е.со 11 1 М 103,трансформированных ДНК М 13 36 Ь 112,получают разрушениемклеток ультразвуком после обработки лизоцимом,как описано. Аликвоту бактериального лиэата разбавляют в 2 разабуферным раствором 2 , добавляют0,2 объема 0,4 Е-ного водного раствора ОНФГ и инкубируют смесь прио28 С в течение 10 мин - 7 ч в зависимости от концентрации белка. Вконтрольном опыте используют лизатнетрансформированных бактерийЕ,со 1. У М 103. Чувствительность об.наружения химерного белка - менее10 усл.ед. антивирусной активностив 1 мл Концентрирование препарата гибридного белка и обнаружение последнего в солевых растворах после хроматографии,К 2 ч, осветленного центрифугированием клеточного лизата...

Номер патента: 1364343

Опубликовано: 07.01.1988

Авторы: Арсенян, Беляев, Дебабов, Долганов, Изотова, Козлов, Костров, Кузнецов, Монастырская, Овчинников, Огарков, Саломатина, Свердлов, Стеркин, Стронгин, Царев, Цыганков, Чистосердов

МПК: A61K 38/21

Метки: альфа-2, интерферона, лейкоцитарного, человеческого

...роста образует колонии диаметром 2-3 мм серого цвета, колониикруглые, шероховатые.Физиологические и биохимические 45 признаки. Растет при 25-35 С, оптимумЗО С, рН 7,0, Источники углерода:утилизирует глюкозу, арабинозу, Источники азота; хорошо усваивает аммоний, мочевину.П р и м е р. Штамм Рвецйощопаяяр. ЧСвыращивают при 28 С в течение 12 ч на скошенной агаризованнойсреде следующего состава; триптон10 г/л, дрожжевой экстракт 5 г/л,аденин 80 мл/л, глюкоза 10 г/л, стрептомицин 150 мг/л, тетрациклин 50 мг/л,вода дистиллированная - до 1 л,агар - агар 15 г/л (среда А). Выросшую на косяках биомассу используют13643 Составитель А. МаныкинТехред Л,Олийньп Корректор С. Черни Редактор Е, Папп Заказ 6505/5 Тираж 655 Подписное ВНИИПИ Государственного...

Номер патента: 1389667

Опубликовано: 15.04.1988

Авторы: Казуо, Хитоси

МПК: A61K 38/21, C07K 14/555

Метки: интерферона, фибробластного, человеческого

...раствора интерферона используютинтерферон, подобный по примеру 1.Подкисленный раствор интерферона(концентрация в 20 раз и очистка в 110 раэ). Часть элюента из колонки сБР-сефадексом (200 мл с активностью2 х 10 , содержанием общего белка10 мг) пропускают со скоростьюг8 мл/ч через колонку с 2 мл Соффхелатного носителя. После промывания20 мп воды и 20 мл Физиологическогораствора интерферон элюируют 0,2 Ираствора гистидина, содержащим0,2 И хлористого натрия рН 7,5. Элюент (6,0 мл) содержал 2,3 х О ИЕ/мл6интерферона (общая активность,13,8 х 10 ИЕ/693) и 15 мкг/мп белка 25(общее количество белка 0,09 мг,выход 0,9 Х, Удельная активность этойфракции составила 1,5 х 10 ИЕ/мгбелка, концентрация составила 460раз, очистка - 750 раз по сравнениюс...

Номер патента: 1523046

Опубликовано: 15.11.1989

Авторы: Кацуо, Хитоси

МПК: A61K 38/53

Метки: интерферона, человеческого

...сырого интерферона, и элюировали с фракционированием в каждую фракцию 2 мп, Использовали следующие промывочные растворы и элюентфпервый промывочный раствор (10 мп):25%-ный раствор этиленгликоля,содержащий 1 М хлористого нат 9 1523046 1 Ория и 1 О мМ Фосфорнокислого натриявторой промывочный раствор (10 мп)40 .-ный раствор этиленгликоля,содержащий 1 М хлористого натрия и 10 мМ фосфорнокислогонатрияэлюент:60%-ный раствор этиленгликоля,содержащий 1 М хлористого натрия и 10 мМ фосфорнокислогонатрия,Элюат (12 мл) из колонны синей агарозы имел интерферонную активность1,6 1 О им.ед. (выход 80%) и 4,6 мгбалка. Средняя удельная активность вкаждой фракции была 2,510 им,ед,/мгбелка (макс. : 5 10 им.ед,/мг белка),Элюат подвергли анализу так же,...

Номер патента: 1433019

Опубликовано: 15.09.1990

Авторы: Арсенян, Аспетов, Виноградова, Ершов, Крыкбаев, Кузнецов, Мелков, Монастырская, Новохатский, Овчинников, Ростапшов, Свердлов, Царев, Чернов, Честухин

МПК: A61K 38/21

Метки: днк, иммунного, интерферона, кодирующая, плазмидная, рекомбинантная, синтез, т"рр, человеческого

...буфере.Х 1 мкг полученного фрагмента до 50бавляют 0,1 мкг синтетических олигодезоксирибонуклеотидов, полученныхпутем химического синтеза, 2 мкг выделенного электроэлюцией большого, ЕсоВ 1-Рв 1 фрагмента рВВ 322 с триптофановым промотором и лигируют вприсутствии .10 ед ДНЕ"лигазы Фага Т 4в растворе, содержащем 0,5 мМ АТР и,буФер, состав которого был приведен вьппе .Лнгазной смесью трансформируют компетентные клетки Е,со 11 К 12, которые высевают на чашки, содержащие ЬВ-агар с тетрациклипом. Из полученных клонов выделяют плаэмиды и структура встроенных генов подтверждается рестриктным анализом н спквенсом.Полученную генно-инженерную конструкцию анализируют по эффективности синтеза иммунного интерферона после трансФормации...

Номер патента: 1604164

Опубликовано: 30.10.1990

Авторы: Герхард, Гюнтер, Ингрид, Петер, Рудольф, Эдгар

МПК: C12N 15/20

Метки: гибридного, интерферона, типа

...Гершейиспользуют 2,0 мл 207-ной глюкозы,0,5 мл 27.-ного треонина, 1,0 мл 17-ного лейцина, 1,0 мл 27-ного пролина, 27-ного аргинина, О, 1 мл О, 17-ного тиамина в виде гидрохлорида,.20 мкг/мл ИАК-индоакрнловой кислоты.Добавлением 5 мг/мл 8-метионинаи дальнейшей инкубацией при 37 С втечение 1 ч новосинтезируемые протеины радиоактивно маркируют. Бактерииотделяют цечтрифугированием и в 04164 О200 мкл буфера (ДСН) - додецилсульфата натрия (6,6 мл Фосфата натрияс рН 68 р 2 мМ ЭДТУК, 27 ЛСН, 37 глицерина, 0,027 бромфенолового сине;го, 0,667 2-меркаптоэтанола) в течеоние 5 мин лигируют при 100 С. Пробызатем разделяют в 157-ном полиакриламидном геле (разделительный гель;157. акриламида, 0,47, бисакриламида,375 мМ трис, рН 8,8, 2 мМ ЭДТУК,...

Номер патента: 1642956

Опубликовано: 15.04.1991

Авторы: Адольф, Гюнтер, Норберт, Петер, Рудольф

МПК: C12N 15/20

Метки: интерферона, лошадиного

...Д, Характеристика рекомбинантных фагов,Из 7 гибридизирующихся с человеческим 06-интерфероном рекомбинантныхДНК готовят фаговую ДНК, ДНК переваривают рестриктазами Есой 1, ВавН 1,Н 1 пй 111, Рвй 1, ВК 111, ЯаП, Ява 1 ипутем электрофореза разделяют в0,8 Х-ном агаровом геле, Величинагибридиризувцих фрагментов определяется по способу Саусерна, Положениерестрикционных мест внутри лямбда вставки определяют после частичногорестрикционного переваривания ляибдаЦНК, маркировки правых или левых тупых концов лямбда-ветвей синтетичес 5кими, маркированными Р 32 олигонуклеотидами и электрофореза в 0,457 ном агаровом геле,Стадия Е, Субклонирование геналошадиногою-интерферона,Рестрикционный фрагмент клонаЕ 8-01, который гибридизуется с маркером...

Номер патента: 1665300

Опубликовано: 23.07.1991

Авторы: Лазаревич, Мисенжников

МПК: C12N 9/00, G01N 33/00

Метки: активности, интерферона, лейкоцитарного, человеческого

...хлорида натрия и окрашивают 1-ным раствором анилинового красителя с 1-ным раствором ледяной уксусной кислоты. 2 табл,Постановку основного опыта сопровождают контролями клеток(клетки беэ вируса) и развернутым контролем рабочей дозы вируса (без интерферона). После внесения рабочей дозы вируса плашки выдерживают в СО 2-инкубаторе 18 - 24 ч, затем жидкость из плашек сливают, все лунки дважды промывают слабой струей физиологического раствора (рН 7,0) и окрашивают сохранившиеся клетки путем внесения в каждую лунку по 0,1 мл 1 ф,-ного раствора анилинового красителя (например, метиленовой сини, фуксина) с 17 ь ледяной уксусной кислоты, Через 2 - 5 мин краситель сливают, лунки дважды промывают физиологическим раствором и проводят визуальный...

Номер патента: 1669402

Опубликовано: 07.08.1991

Авторы: Адольф, Гюнтер, Норберт, Петер, Рудольф

МПК: C12N 15/20

Метки: интерферона, собачьего

...н,е маленькие части в ледяной банг с помощью 20-секундных ультразвуковых иллпульсов (всего 1 ПО.). ДНК-концы восстанавливают в те еение 2 ч при 14 С л 25 С мкл рЕ; кционной Срвды (50 мМ триСНС 1, О". 75, О мМ М 9 С 12, 1 м",4 д.:тиотреи.е=."а 0 5 мг/мл а":,бул(ина сыворотки кр,геного рогатое О ечеота, по 0,1 мМ ОАТР,5 10 15 20 25 3,. г Е 3 40 45 55 ОСТР, ОСТР, ОТТР с помощью 15 ед большого фрагмента Е,со 1-полимеразы(фрагмента Кленова), После концентрированияпутем осаждения этанолом предварительнообработанную таким образом ДН К разделяют в 1 О/.-ном агароэном геле и ДНК-фрагменты длиной 0,351,0 т.п.о, выделяют иочищают. Примерно в 10-кратном молярномизбытке фрагменты лигируют с разрезанной Яетеа и дефосфорилированной репликативной...

Номер патента: 1698285

Опубликовано: 15.12.1991

Авторы: Башкис, Бумялис, Вилутис, Григишкис, Пунтежис, Римкявичене, Янулайтис

МПК: C12N 1/04

Метки: species, интерферона, консервирования, продуцента, рsеudомоnаs, рекомбинантного, штамма

...Ч(-1)О культуру готовят к консервированию,Для этого в стерильных условиях центрифугируют 400 мл культуральной среды.,осадок клеток ресуспендируют в 200 мл свежей среде указанного состава, добавляютантибиотики и 200 мл стерильного раствора 15;4-ного глицерина, Полученную суспензию клеток разливают по 1 мл вгластмассовые пробирки типа Эппендорфемкостью 1,5 мл. Емкость с пробиркамипомещают в холодильник глубокого ох.лаждения при -20 С на 22-24 ч, а потомперемещают в кельвинэтор и хранят притемпературе (-7075) - (-19 б)С в течение1,5 года.Динамику биосинтеза рекомбинэнтного аинтерферона определяют иммуннымметодом.Результаты экспериментальных исследований приведены в табл,1 и.отображенына чертеже, где нэ графике 5 исходного варианта отмечены...

Номер патента: 1701114

Опубликовано: 23.12.1991

Авторы: Адольф, Петер, Рудольф

МПК: C12N 15/23

Метки: интерферона, лошади

...гена в плазмиду рйН,10 мкг плазмиды рВНрасщепляют рестриктазой Зас 1 в 100 мкл реакционного буфера и этим инактивируют путем 10-минутного нагрева до 70 С. ДНК обрабатывают фрагментом Кленова при 25 С в течение 30 мин в присутствии всех четырех дезоксинуклеотидтрифосфатов, каждый из которых берут в количестве 10 мкМ, Реакцию прекращают зкстракцией смесью фенола с хлороформом, ДНК концентрируют осаждением этанолом, В результате этой обработки за триптофановым промотором образуется ту50 55 пой конец ДНК, который заканчивается трансляционным стартовым кодоном АТО, Линеаризированную плазмидную ДНК расщепляют рестриктазой ВащН 1 и векторную часть выделяют электрофорезом в агарозном геле.50 нг подготовленного таким образом плазмидного вектора...

Номер патента: 1701322

Опубликовано: 30.12.1991

Авторы: Гюллинг, Кишко, Ковтун, Кривохатская, Пап, Романов, Спивак

МПК: A61K 38/21

Метки: индуктор, интерферона

...пик интерферо- разование в организме мышей после интрана в сыворотке крови (320 кд/мл) через 6 ч назального введения,10 При изучении интерферонообразующейОднако использование данного индук- активности препарата БТФКТ в организме тора интерферона также имеет существен- поросят (масса до 10 кг) сыворотки кровиотбирают в пуле животных (по 5-6 живо - сложность синтеза используемого тных) через различные интервалы времени поепарата, поскольку для его получения не после интраназального введения 0,01-0,05 обходимо разделение рацемического тетра- мг/кг. Уровни интерферона в сыворотках мизола на оптически активные изомеры; определяют на культуре перезиваемых кле - необходимость исгользования его в ток линии СПЭВ против 100 ТЦДво...

Номер патента: 1703690

Опубликовано: 07.01.1992

Авторы: Долганов, Евдонина, Еремашвили, Козлов, Монастырская, Народицкая, Свердлов, Скворцова, Стеркин, Стронгин, Царев, Цыганков, Чистосердов, Юрин

МПК: A61K 37/66, C12N 1/21, C12N 15/21 ...

Метки: бактерии, днк, интерферона, кодирующая, плазмидная, продуцентинтерферона, рsеudомоnаs, рекомбинантная, синтез, человека, штамм

...вводят плазмиду 8751, которая обеспечивает устойчивость к триметаприму,Высев конъюгатов производят на минимальную агаризованную солевую среду Адамса, содержащую следующие компоненты: глюкоза 4 мг/мл; тизмингидрохло 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 рид 5 мкг/мл; треонин 50 мкг/мл; лейцин 50 мкг/мл; ампициллин 75 мкг/мл; стрептомицин 75 мкг/мл; триметаприм 75 мкг/мл, В этих условиях вырастают только коньюгаты Е.со 1 С 600 (К 751, рИЧ 22), Затем проводят коньюгацию между Е,со 1 С 600(В 751, рЧМ 22) и Рзеобоаопаз зр, 31 с дефектным геном йг А Коньюгаты вырастают на минимальной агариэованной солевой среде следующего состава: глюкоза 4 мг/мл; тиамингидрохлорид 5 мкг/мл; треонин 50 мкг/мл; ампициллин 75 мкг/мл, стрептомицин 200 мкг/мл,...

Номер патента: 1703691

Опубликовано: 07.01.1992

Авторы: Гилева, Добрынин, Коробко, Кравченко, Филиппов, Чувпило

МПК: C12N 1/21, C12N 15/21

Метки: бактерий, днк, еsснеriснiа, интерферона, кодирующая, лейкоцитарного, плазмидная, полипептид, полипептида, продуцент, рекомбинантная, свойствами, человека, штамм

...Из гибридизующихся с этой пробой клонов выделяют плазмидную ДНК, строение которой подтверждают рестриктным анализом с помощью рестриктаз Наб, Мзри Най+ЯаОК раствору 10 мкг ДНК плазмиды Р 6 А 23/Яа в 80 мкл буфера В без МаСГприбавляют 20 ед. каждой из рестрикционных нуклеаз Яаф и Крп и инкубируют 90 мин при 37 С, Анализ полноты гидролиза и выделение векторного Крп/ЯаГ-фрагмента (3,4 т,п о) проводят при помощи электрофореза в 1 -ном геле легкоплавкой агароэы, Одновременно 10 мкг ДНК плазмиды р ецГт 17 в 100 мкл буфера В обрабатывают 1,5 ч при 37 С 20 ед, каждой из рестриктаэ 89 г и ЯаГ, после чего фрагмент величиной около 500 п,о., содержащий синтетический ген а 2 интерферона, выделяют при помощи электрофореза в 5 ь-ном...

Номер патента: 1703692

Опубликовано: 07.01.1992

Авторы: Алексенко, Болотин, Борухов, Бумялис, Гервинскас, Дебабов, Евдонина, Изотова, Козлов, Костров, Лапидус, Лебедева, Лившиц, Машко, Мочульский, Носовская, Плотникова, Подковыров, Рыжавская, Скворцова, Стеркин, Стронгин, Трухан, Юрин, Янулайтис

МПК: C12N 1/21, C12N 15/23, C12P 21/00 ...

Метки: 1-13, i-интерферона, бактерий, днк, еsснеriснiа, интерферона, кодирующая, конструирования, плазмидная, продуцент, рекомбинантная, синтез, фибробластного, человека, штамм

...в 20 мкл -20, 4 мкг полученного таким образом препарата ДНК обрабатывают Кленовским фрагментом ДНК-полимеразы 1 Е.со в указанных условиях для достройки возможно имеющихся одноцепочечных концов молекул до двухцепочечных. Реакцию останавливают фенольной депротеинизацией, нуклеиновые кислоты осаждают этанолом и растворяют в 20 мкл Н 20,Лигирование линейных молекул ДНК с двуцепочечными концами проводят при 16 С в пробе объемом 50 мкл, содержащей 60 мМ трис-НС, рН 7,6, 10 мМ М 9 С 2, 10 мМ дитиотреитол, 4 мМ АТФ, 8 -ный полиэтиленгликоль - 6000, 4 мкг ДНК, 100 ед, ДНК- лигазы Т 4. После завершения реакции пробу разбавляют водой в четыре раза и проводят осаждение нуклеиновых кислот этанолом, 2 мкг растворенной в Н 20 ДНК обрабатывают...

Номер патента: 1712416

Опубликовано: 15.02.1992

Авторы: Башкис, Бумялис, Вилутис, Григишкис, Козлов, Пунтежис, Римкявичене, Стронгин, Цыганков, Янулайтис

МПК: C12N 15/00

Метки: species, альфа-2, бактериями, интерферона, лейкоцитарного, рsеudомоnаs, рекомбинатными, человеческого

...деградация продукта.Следовательно, температуру культивирования следует понижать от 30+0,5 до 20 ч 0,50 С до начала деградации продукта, т.е, через 15-30 мин после достижения максимальной скорости роста (табл 1).Процесс культивирования следует завершить через 2-3 ч после снижения температуры потому, что после 2,5 й 0,5 ч, но не раньше (табл.2), наступает деградация продукта, Завершение процесса определяется по времени, так как оптическая плотность повышается незначительно.П р.и м е р. Приготавливают 10 л питательной среды для ферментера "В 1 озта 1 Е" емкостью 13,7 л с рабочим объемам 10 л следующего состава, г/л: гидрализат казеина 120 мл/л; гидролизат пекарских дрожжей 5; О-глюкоза 10; сернокислый аммоний 3; фосфорнокислый...

Номер патента: 1713591

Опубликовано: 23.02.1992

Авторы: Валериа, Илона, Миклош, Шандор

МПК: A61K 38/21

Метки: интерферона, лейкоцитарного, человеческого

...равным 10 клеток/мл. Питательный7раствор содержит 2 мг/мл свободной от глобулина сыворотки человеческой крови (около 6 ф), Клетки обрабатывают при 37 С при постоянном помешивании 200 МЕ/мл свободного от индуктора концентрированного человеческого а-интерферона. Через 2 ч клетки индуцируют 400 гемаглютинированных единиц вируса Сендая, Инкубацию заканчивают через 18 ч после индуцирования, Антивирусный титр суспернативной жидкости, т.е, сырого а- интерферона, составляет 54, 200 Е/мл, Клетки, использованные для получения а-интерферона один раз, промывают названным питательным раствором, после, чего образуется суспензия лейкоцитов в питательном растворе при концентрации 2,5 10 клеток/мл. Питательный раствор содержит 1 мг/мл свободной от...

Номер патента: 1756349

Опубликовано: 23.08.1992

Авторы: Варбанец, Гавриш, Гвоздяк, Дьяченко, Дядюн, Захарова, Мурас, Рыбалко, Спивак, Фролов

МПК: C12N 1/20, C12P 19/04

Метки: sереdоniсuм, бактерий, индуцирующего, интерферона, образование, полисахарида, продуцент, соrynевастеriuм, штамм

...человека и животных,Безвредность, Штамм С. зеребопсапИМВ 7694 не вирулентен, не токсичен для 40 теплокровных животных, Введение 24-часовой культуры С, зеребоп 1 сое ИМВ 7694 внутрибрюшинно, подкожно и перорально в дозах 5 и 1 О млрд микробных клеток на 1 мышь, а также фильтратов среды роста 45 (после культивирования культуры на жидкой синтетической среде) не вызывало у животных патологического процесса, регистрируемого клинически или при макроскопическом изучении внутренних органов 50 животных.Штамм 7694 С. зеребоп 1 сцв не патогенен для теплокровных животных.В ыращиавние бактериальной массы С.зеребоп 1 сцгп ИМВ 7694 и получение пол исахарида осуществляли следующим образом, Для получения.инокулята используют 24-часовую культуру,...

Номер патента: 1764515

Опубликовано: 23.09.1992

Автор: Чарльз

МПК: C12N 15/21

Метки: интерферона, лейкоцитарного

...гибридизующие (к НИ) Нпб-Нпс 3 или ЕсоВ- ЕсоВ фрагменты субклонируют в Рзт сайт рВВ 322 и экспрессируют активности ИФН- а в Е.со,Формула изобретения Способ получения лейкоцитарного интерферона, предусматривающий культивирование биологических культур, выделение и очистку целевого продукта, о т л и ч а ющ и й с я тем, что, с целью повышения чистоты целевого продукта, в качестве биологических культур используют штамм мик роорганизма ЕзсйегсЫа со АТСС 31633или 31634, трансформированный рекомбинантными плазмидными ДНК со вставкой 2-рВВ 322(Рзт) Нс Р-206. или Е- рВВ 322(Рзт)/НсИ ЗК 35-АН 1 6 с нуклеотид ной последовательностью55 ных в 1 л воды ("РВЯ"), и добавляют при интенсивном перемешивании к 17 л 20 мМ Трис-НС (рН 7,5), 1 мМ...