Тецузои

Способ получения полипептида со свойствами проурокиназы и штамм бактерий еsснеriсна coli продуцент полипептида со свойствами проурокиназы (варианты)

Загрузка...

Номер патента: 1695827

Опубликовано: 30.11.1991

Авторы: Еити, Казуо, Кен, Мидори, Мунеку, Наганори, Рейко, Тецузои, Тосио, Ясуо

МПК: C12N 15/58

Метки: бактерий, варианты, еsснеriсна, полипептида, продуцент, проурокиназы, свойствами, штамм

...ДНК, служащей н качествефона. 2 мкл реакционной смеси гидролизуют Я 1-нуклеазой, инкубируют прио,26 С в течение 30 мин, Реакцию завершают добавлением 10 мкл 0,25 Х трисНС 1 (рН 8, О) .4. Трансформация Е.со 1 з(Х 103.10 мкл указанной реакционной смеситрансформируют Е.со 13(Х 103,5. Классификация мутантов.С использованием зонда - олигонук-",пеотида, использовавшегося н качествезатравки, Фаговые бляшки классифицируют гибридизацией бляшек для определе.ния мутантного Фага. Бляшки переносят50с мягкой агаровой среды на нитроцеллюлозный Фильтр, нагревают н вакуумев течение 2 ч при 80 С и гибридизируютв течение ночи и растворе. Фильтр55промывают и мутантно-Фагонь(е бляшки,дающие положительные сигналы, изолируют, Мутантный Фаг дает...