Гервинскас

Номер патента: 1679800

Опубликовано: 09.01.1995

Авторы: Гервинскас, Дебабов, Изотова, Йомантас, Козлов, Народицкая, Стеркин, Стронгин, Уланова

МПК: C12N 15/52, C12N 15/72

Метки: amyloliquefaciens, bacillus, pbanp, бактерий, днк, кодирующая, металлопротеиназу, металлопротеиназы, плазмидная, продуцент, рекомбинантная, штамм

РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК pBANP 464, КОДИРУЮЩАЯ МЕТАЛЛОПРОТЕИНАЗУ BACILLUS AMYLOLIQUEFACIENS A-50 И ШТАММ БАКТЕРИЙ BACILLUS AMYLOLIQUEFACIENS - ПРОДУЦЕНТ МЕТАЛЛОПРОТЕИНАЗЫ .1. Рекомбинантная плазмидная ДНК pBANP463, кодирующая металлопротеиназу Bacillus amyloliquefaciens A-50 размером 6,3 т.п.н. и содержащая: плазмидную ДНК pBA4 размером 4,4 т.п.н., в которой с помощью фрагмента Кленова ДНК-полимеразы 1 удален в полилинкерной последовательности участок узнавания эндонуклеазы рестрикции EcoRI; B8l 11 - B8l 11 - фрагмент размером 1,9 т.п. н. с геном металлопротеиназы B.amyloliquefaciens А-50, гены: npr-ген, кодирующий синтез металлопротеиназы, emrC-ген, детерминирующий устойчивость клеток к эритромицину,...

Номер патента: 1703692

Опубликовано: 07.01.1992

Авторы: Алексенко, Болотин, Борухов, Бумялис, Гервинскас, Дебабов, Евдонина, Изотова, Козлов, Костров, Лапидус, Лебедева, Лившиц, Машко, Мочульский, Носовская, Плотникова, Подковыров, Рыжавская, Скворцова, Стеркин, Стронгин, Трухан, Юрин, Янулайтис

МПК: C12N 1/21, C12N 15/23, C12P 21/00 ...

Метки: 1-13, i-интерферона, бактерий, днк, еsснеriснiа, интерферона, кодирующая, конструирования, плазмидная, продуцент, рекомбинантная, синтез, фибробластного, человека, штамм

...в 20 мкл -20, 4 мкг полученного таким образом препарата ДНК обрабатывают Кленовским фрагментом ДНК-полимеразы 1 Е.со в указанных условиях для достройки возможно имеющихся одноцепочечных концов молекул до двухцепочечных. Реакцию останавливают фенольной депротеинизацией, нуклеиновые кислоты осаждают этанолом и растворяют в 20 мкл Н 20,Лигирование линейных молекул ДНК с двуцепочечными концами проводят при 16 С в пробе объемом 50 мкл, содержащей 60 мМ трис-НС, рН 7,6, 10 мМ М 9 С 2, 10 мМ дитиотреитол, 4 мМ АТФ, 8 -ный полиэтиленгликоль - 6000, 4 мкг ДНК, 100 ед, ДНК- лигазы Т 4. После завершения реакции пробу разбавляют водой в четыре раза и проводят осаждение нуклеиновых кислот этанолом, 2 мкг растворенной в Н 20 ДНК обрабатывают...