Патенты с меткой «продуцент»

Номер патента: 1641887

Опубликовано: 15.04.1991

Авторы: Брун, Налепина, Щербаков

МПК: C12N 1/14, C12N 9/42

Метки: oryzae, анlвurg, аспергиллус, гриба, ксиланазы, продуцент, сонn, штамм

...чем на среде ЧапекаДокса, более рыхлые, с поверхностныммицелием, спороношение обильное, вмолодой культуре преобладают желтыеоттенки с возрастом желтовато-бурые.Обратная сторона колонии слабо окрашена в желтовато-коричневый тон,на картофельно-глюкозной и картофельно"морковной агаризованной средеколонии растут быстрее, чем на среде 45ФЧапека-Докса, но менее плотные,паутинистые, цочти прозрачные слабоспорулирующие, бледно окрашенные.Свет не имеет особого значения,Развитие идет одинаково как в темноте, так и на рассеяном свету, Температура для развития .на плотной питательной среде, С: оптимальная 30-35, максимальная 40, минимальная 10.Физиолого-биохимические признаки. 55ПреимущеСтвенно аэроб, мезофил. Оптимальная температура роста на...

Номер патента: 1643608

Опубликовано: 23.04.1991

Авторы: Кватадзе, Квачадзе, Квеситадзе

МПК: C12N 1/14, C12N 9/42

Метки: аllеsснеriа, гриба, продуцент, теrrеsтris, целлюлаз, штамм

...бумаги на поверхности скошенного агара, рН среды 4,5,Посевным материалом служит 10-тисуточная культура штамма Для полу 40чения целлюпаз используют жидкуюпитательную среду следующего состава,г/л:. КНРО 6,8; (БН 4)804, 1,3М 8804 ф 7 НО 0,5; микрокристаллическаяцеллюлоза ЛТ 17.; СаС 1 0,2; пептон 451,5; кукурузный экстракт 1,5 Е, рНсреды 5;51150 мл питательной среды в конических колбах емкостью 750 мп сте" рилизуют 40 мин при 1 ати, Максималь ная активность целлюпаз отмечаетсяпри выращивании штамма на термоста тированной качалке, делающей 220 об/ /мин, при 40 С в течение 96.чАк тивность биосинтезируемой штаммом целлюлазы следующая, ед/мп: по Цайщ 5,8; по фильтровальной бумаге 0,5; по целлобиозе 1,5Эндоглюканазную активность целлк...

Номер патента: 1643610

Опубликовано: 23.04.1991

Авторы: Аак, Галактионов, Демин, Кашкин, Конев, Корчагина, Лазебник

МПК: C12N 15/81

Метки: sтrертомyсеs, белка, биотинсвязывающего, продуцент, снrомоfusсus, стрептомицета, штамм

...в течение 48 ч при28+2 С11 о окончании ферментации культуральную жидкость фильтруют, нативыай раствор, освобожденный от мицелия, концентрируют примерно в 10 разна ультрафильтрациониой установке сиспользованием мембраны Рипор 4-120.Далее 0,56 л концентрата используютдля выделения биотинсвязывающего белка (БСБ).На первой стадии проводят высаливанне 70%-ным сульфатом аммония, выпавший осадок отделяют оч надосадочной жидкости центрифугированием 15000 я при 4 С и ресуспендируют в 60 мп дистиллированной воды, 1 олученный раствор днализуют против дистиллированной воды, Диализат центрифугируют при 15000 я 30 мин, Супер натант используют дпя окончательной очистки биотинсвязывающего белка методом аффинной хроматографии на имн...

Номер патента: 1645293

Опубликовано: 30.04.1991

Авторы: Дегтярев, Корсун, Пучкова, Речкунова, Серов

МПК: C12N 1/20, C12N 9/14

Метки: faecalis, sтrертососсus, бактерий, продуцент, рестриктазы, штамм

...при температуре 30 С с хорошей аэрацией допоздней логарифмической фазы роста.Выход влажных клеток составляет 2,43,0 г/л питательной среды,Выход фермента составляет 2000 ед.акт./г сырой биомассы, что более чемв 3 раза выше, чем известногоПолученная рестриктаза Бйа Б 1характеризуется следуккнми свойствами,"узнает и специфически расщепляет 45последовательность нуклеотидов ССАТС%/ 9 фоптимальное значение рН для действия рестриктазы 7,2;оптимальная температура действия37 С;оптимальная концентрация ионовИаС 1 - 150 шИ, М 8 С 1 - 5-15 шИ.Фермент стабилен в течение не менее 6 мес,. при температуре -20 С, своо55боден от примесей неспецифическихэкэо- и эидонуклеаз, фосфатаз.Изобретение иллюстрируется следующими примерами. П р и м е р 1....

Номер патента: 1645295

Опубликовано: 30.04.1991

Авторы: Думалакене, Иванаускас, Маурицас, Микалаускене, Тамошюнас

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, в-лимфоцитов, гибридных, животных, клеток, крупного, культивируемых, мusмusсulus, моноклональных, продуцент, против, рогатого, скота, штамм

...связанные белки элюируют0,2 И НС 1-глициповым буфером, элюатнейтрализуют 1 М НаОН и диализируютпротив ФСБ.Иодирование белков клеточной поверхности проводят с помощью лактоперокси;азы, В суспензию клеток5-Ох 0 в 1 мл ФБС добавляют100 мкл лактопероксидазы (2 мг/мп),40 ИБк На 3 и 100 мкл О,ОЗХ Н 0Смесь инкубируют 4 мин, осторожноперемешивая, и опять добавляют00 мкл О,ОЗХ ИО. Через 4 мин инкубации клетки 3 раза проьываютФСБ и лизируют 0,5 Х-ным растворомдезоксихолата натрия на боратномбуфере, рН 8,3, имеюцим 1 мИ РМЯГ(уенилметилсульфонилфторида). Эффективность мечения белков устанавливают с 10 Х-ной трихлоруксусной кислотой (ТХУ). Установлено, что иммуносорбент с М 1 А специфически связывает0,79 Х белков, снятых с НЛ, и 1,36...

Номер патента: 1645296

Опубликовано: 30.04.1991

Авторы: Березкина, Волкова, Гринчук, Завадская, Игнатова, Ковалева, Милованов, Павличенко, Паншин, Паншина, Супрун

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, животных, клеток, крупного, культивируемых, мusмusсulus, моноклональных, продуцент, против, рогатого, скота, фактора, штамм, эритроцитов

...1 х 10 клеток/мп. Бизне 6способность клеток при размораживании 75-80%. Прививка клеток штамма264 сингенным иьппаи вызывает у них образование асцитной опухоли, сопровождаюце- ся выделением асцитной жидкости в 45 количестве от 1 до 8 мп. В асцитной ждкост содержатся специФические монАТ к Н- антигенному фактору крови быка. Способность в продукции монАТ клеткаи птамма Р 264 сохраняется на протяжении трех месяцев непрерывного культишрования клеток. После разораливаия клеток способность продуцировать монАТ сохраняется. Прививка мышам цтамма на разных пассажах культивирования стабильно вызывает обраэоваие асцитных опухолей у мышей с высоким титром ионАТ в асцитной жидкости. фя кариологического анализа клеток штаииа П 264 используют 100...

Номер патента: 1645299

Опубликовано: 30.04.1991

Авторы: Крамаров, Матвиенко, Резник, Смирнов, Смольянинов, Сорокулова

МПК: C12N 1/20, C12N 9/22

Метки: bacillus, cereus, бактерий, продуцент, штамм, эндонуклеазы

...краем, Образование спор начинается через 48-72 ч при вырацивании на1645299 Формула изобретенияПтамм бактерий Вас 111 цз сегеозВКПИ В- продуцент эндонуклеазыВсе 751 1,1Составитель И. ПриваловаТехред М.Дндык Корректор М. Шарошн Редактор С. Лисина Заказ 1.322 Тираж 377 ПодписноеВНИИЛИ Государственного комитета по нзоьретениям н открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул, Гагарина, 101 мясопептонном агаре при 37 С. После роста на глюкозном агаре в протоплазме обнаруживаются глобулы. Рост на жидкой питательной среде характеризуется равномерньв помутнением.физиолого-биохимические признаки. Грамположительные аэробные спорообразуюцие палочки. Продуцируют...

Номер патента: 1645300

Опубликовано: 30.04.1991

Авторы: Андреева, Дегтярев, Кривопалова, Пучкова, Речкунова, Селина, Серов

МПК: C12N 1/14, C12N 9/14

Метки: fradiae, sтrертомyсеs, продуцент, рестриктазы, штамм

...нуклеотидов ССССО;оптимальное значение рН для действиярестриктазы 7,5-8,0; оптимальная температура действия 37 С, активностьо сохраняется также при 50 С; оптимальоная концентрацияионов Ия ф 5-15 мИ.БаС 1 50 мИ.Электрофореграмма продуктов гидролиза ДНК фага Ф С 1 857 рестриктазамиБЕг 1 и Бас 11 и Бас 11 показывает,что картина гидролиэа полностью совпадает как при параллельном, так исовместном гидролизе. Следовательно,рестриктаэа Бйг 1 является изошиэоме,ром рестриктаэы Бас 11, узнает и расцепляет последовательность нуклеотидов СССССС,П р и м е р 1. Получение биомассыБ. йгаЫае 303, Клетки Б. йгайае 303,храняциеся в ЗОХ-ном растворе глицерина в, питательной среде при -20 С,овысевают на чашку с плотной питательной...

Номер патента: 1648976

Опубликовано: 15.05.1991

Авторы: Аникейчева, Калугин, Самко, Соколов, Фицнер, Фодор, Хорошутина, Эльдаров

МПК: C12N 1/20, C12N 9/14

Метки: agile, аснrомовастеr, бактерий, продуцент, рестриктазы, штамм

...с мясопептонным агаром мелкие, блестящие, края ровные. На мясопептонном бульоне на дне пробирки осадок, среда прозрачная.Отношение к кислороду: строгий аэроб.Желатина уколом - очень медленное разжижение.Чувствительность к антибиотикам: культура чувствительности ко многим антибиотикам, резистентна к пенициллину, стрептомицину, полимиксину,Условия выращивания и хранения Культура хорошо растет на твердых и жидких полноценных питательных средах: бульоне Хоттингера, среде 1 В. При культивировании на среде 1 В наблюдается продолжительная лаг-фазаОптимум роста при,37 С. Зона рН роста культуры лежит впределах 4,6-9;5. Оптимум роста культурыи образования фермента при рН среды7,2 - 7,4, При рН 10,0 культура не растет,адИе.Наибольший выход...

Номер патента: 1650696

Опубликовано: 23.05.1991

Авторы: Бурд, Гарибян, Нудлер

МПК: C12N 1/20, C12P 17/12

Метки: аммоniаgеnеs, бактерий, продуцент, соrynевастеriuм, тимина, штамм

...по аргинину, В качестве источника аденина может использоваться также аденозин, в меньшей степени,адениловые нуклеотиды, Желатину не разжижает, на крахмальном агаре и на обеэжиренном молоке роста нет, Клетчатку неразрушает и не усваивает, нитраты не восстанавливает. Усваивает глюкозу, фруктоэу,рибоэу, цитрат, пуриновые и пиримидиновые рибонуклеоэиды, плохо усваивает сахарозу, сорбит, маннит, не потребляетлактозу, галактоэу, фумарат, сукцинат, дезоксирибозу, ксилоэу, арэбинозу. Устойчивк бактериостатическому действию 5-фторурацила, 5-фторуридина, аэаурацила, азауридина и 5-фтордезоксиридина, Содержитмутацию по нуклеотиддифосфатредуктазе,приводящую к сверхпродукции тимина. Антагонистических свойств нет, не патогенен, За 120 ч ферментации...

Номер патента: 1650697

Опубликовано: 23.05.1991

Авторы: Дегтярев, Дедков, Речкунова

МПК: C12N 1/20, C12N 9/14

Метки: bacillus, fоrмis, liснеni, бактерий, продуцент, рестриктазы, штамм

...е ./г биомассы1000 5000 Составитель И,ПриваловаТехред М.Моргентал Корректор М,Демчик Редактор Н,Гунько Заказ 1583 Тираж 374 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж. Раушская наб 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул. Гагарина, 101 глюкозы образуют кислоту, Гидролиэует крахмал, казеин, желатин, твин, Дезаминирует аргинин. Сероводород и индол не образует. Восстанавливает нитрат в нитрит, Чувствителен к ампилициллину, хрорамфениколу, канамицину, стрептомицину, тетрациклину (100 мкг/мл среды 1), Используют глюкозу в качестве единственного источника углерода и энергии для роста, Растет при 10 - 55 С, оптимум 37 С, рН среды 6 - 8, оптимум рН...

Номер патента: 1652339

Опубликовано: 30.05.1991

Авторы: Дьяконов, Куликова, Федоров, Феоктистова

МПК: C12N 5/18, C12P 21/08

Метки: arginini, антигену, антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, мyсорlаsма, мембранному, моноклональных, продуцент, штамм

...в 96, 24, 12-луночных плашках, а затем в чашках Петри.Культуральную жидкость исследуют на содержание специфических антител. Титр1652339 Составитель А,МаныкинРедактор М.Петрова Техред М.Моргентал Корректор М.Пожо Заказ 1747 Тираж 380 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 специфических антител в иммуноферментном тесте составляет 1:128-1;256.Препараты моноклональных антителполучают 3-кратным осаждением раствором сульфата аммония 50;-ного насыщения с последующим диализом. Определяютклассовую принадлежность и специфичность моноклональных антител.Штамм клеток обладает следующими,...

Номер патента: 1652340

Опубликовано: 30.05.1991

Авторы: Криворутченко, Кривошеин, Попов, Червонский

МПК: A61K 39/395, C12N 5/18, C12P 21/08 ...

Метки: антител, белку, вируса, гибридных, гриппа, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, типа, штамм

...и посевах на питательной среде. Заражениямикоплазмой не выявлено по окрашиваниюкрасителями на ДНК и тимидиновой метке вкультуральной среде,Криоконсервирование.Клетки штамма ресуспендируют в культуральной бычьей сйворотке, содержащей10 длиметилсульфоксида (концентрацияклеток 5 х 10 - 10 в 1 мл), разливают в пла 5 6стиковые ампулы при 4 С, помещают в толстостенную коробку иэ полипеноуретана ипереносят на 24 ч в холодильник (70 С), Затем клетки хранят в жидком азоте. Возможно программное замораживание соснижением температуры на 1 С в 1 миндо - 40 С с последующим переносом в жидкий азот. Размораживание осуществляют втечение 3 мин при 37 С, Клетки разводят в10 мл среды для культивирования, осаждают центрифугированием, ресуспендируют в5...

Номер патента: 1652341

Опубликовано: 30.05.1991

Авторы: Бойков, Виестуре, Дегтярев, Репин

МПК: C12N 9/14

Метки: sтuтzеri, бактерий, продуцент, рsеudомоnаs, рестриктазы, штамм

...растет на жидкой питательной среде, содержащей 50 г/л рыбного гидролиэата и до 1,0 л воды, рН 7,2-7,4. Нв такой питательной среде штамм растет при температуре 25-27 ОС, аэрации 2 обьемв воздуха на 1 обьем питательной среды в течение 5 - 6 ч. При выращивании штамма на питательной среде данного состава происходит помутнение среды, что свидетельствует о сильном росте культуры. Рост глубинный и пленки на поверхности не образуется, Осадок, состоящий из клеток Рзецбоеопаз з 1 ц 1 аег 131, тягучий, при воздействии нв него лиэоцимом быстро происходит лиэис клеток, Количество осадка обильное, цвет осадка светло-серый.Штамм фагоустойчив, Не лиэируется в присутствии фагов СЬ 4 А,А, МЗ 2, 0 Р.Штамм чувствителен к ампициллину в концентрации...

Номер патента: 1657527

Опубликовано: 23.06.1991

Авторы: Балаян, Беркова, Иванов, Кожич, Кусов, Насташенко, Шамборант

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, вирусу, гепатита, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, человека, штамм

...1,6 х 10 М тимидина, 20 еМ .-глутамина, суспендируют 55клетки пинетированием и распределяют в96-луночные плейты по 50 х 10 клеток в 100мкл среды в лунки, в которые эа день догибридизации высаживают мышиные перитонеальные макрофаги (5 х 10 клеток в лунку). Клоны гибридных клеток становятся заметными через 10-12 дней. Тестирование клонов проводят, когда клоны заполняют лунку на 207 ь. Положительные культуры клонируют методом предельного разведения в 96-луночных панелях на фидерном слое перитониальных макрофагов, внося по 30. 300 и 30000 клеток на панель.Для получения асцитов самкам мышей ВаЬ/с за 10 - 14 дней до инъекции гибридных клеток внутрибрюшинно вводят по 0,5 мл пристана.При введении (2 - 4)х 10 гибридных клебток у мышей...

Номер патента: 1659477

Опубликовано: 30.06.1991

Авторы: Демчева, Мантрова, Папковский, Пономарев, Савицкий, Чередникова

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, животных, клеток, копропорфирину, культивируемых, мusмusсulus, моноклональных, продуцент, штамм

...пассажи 1 раэ в 4-5 дней с подсчетом клеток. Для получения асцита мышам ВаЬ/с эа 7 дней до введения гибридомных клеток вводят 0,5 мл 2,6 10,14-тетраметилпентадекана в/б. На 7 день штамм клеток иньецируют в/б в количестве 500000 клеток в мышь. Асцитную жидкость отбирают на 10-й день, Объем асцита 5-6 мл. Клетки иэ асцита иеревивают новым мышам в течение 9 пассажей беэ заметного изменения титра моноклонэльных антител в асцитной жидкости.Контаминация, Бактерии и грибы в культуре не обнаружены. Тест на микоплаэму отрицателен.Кариологическая характеристика штамма: модальное число хромосом 90. Маркерных хромосом не выявлено.Продуктивность. штамма, Концентрация моноклональных антител в культуральной жидкости на 7-й день культивирования...

Номер патента: 1659481

Опубликовано: 30.06.1991

Авторы: Глемжа, Кюдулене, Палубинскас, Шпокаускас, Янюнайте

МПК: C12N 1/20, C12N 9/16

Метки: бактерий, еsснеriснiа, неорганической, пирофосфатазы, продуцент, штамм

...кишечная палочка течение 1 ч, а при течение 15 мин.подвижные, катааживающие глюкосбраживает, соИ6 88 хранится оем вазелинового ие 1 года. П р и м е р. Культуру Е.со сервированную в столбике М вазелинового масла, для ожив вают на стерильные чашки Пе ванным рыбным гидра1659481 П о ент Показатели П е агаемый штамм Известный штамм 4 - 6 ч (до конца логарифмической фазы) 8,0-9,0Стационарная фаза Продолжительность культивирования, ч Удельная пирофосфатазная активность, ед/мг белка Общая активность на 1000 мл культуральной жи кости,е4,0 1500-1800 Данные отсутствуют Составитель И. ЧаплйнаРедактор М, Петрова Техред М.Моргентал Корректор Т. Малец Заказ 1821 Тираж 376 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ...

Номер патента: 1661212

Опубликовано: 07.07.1991

Авторы: Верхозина, Виноградова, Дегтярев, Дедков, Репин, Речкунова

МПК: C12N 1/20, C12N 9/14

Метки: асinетовастеr, аса, бактерий, продуцент, рестриктазы, саlсоасетiсus, штамм

...6 С вДН К% (по плавучей плотности).Культуральные признаки. 10Дает рост на МПА, при температурномдиапазоне от 5 до 30 С. Оптимальнаятемпература 25 С. Оптимальный рН 7. Растет при 0,5 - 30 йаС. Оптимальная для роста О,б 1 чаС 1. Требователен к аэрации. 15Хранение осуществляют под вазелиновыммаслом в 30%-ном глицерине при 70 С.П р и м е р 1. Получение биомассы ивыделение рестриктазы,Ночную культуру штамма 20А.са 1 соасебсоз засевают в свежую питательную среду, состоящую из 10 г/л триптона ("ОИсо"); 5 г/л дрожжевого экстракта1,"Зегча"); 6 г/л йаС 1; остальное вода. Культивируют при 25 С в термостатированной 25качалке в двухлитровых колбах с 200 млпитательной среды при 200 об/мин до достижения логарифмической фазы роста,Клетки осаждают...

Номер патента: 1661213

Опубликовано: 07.07.1991

Авторы: Верхозина, Виноградова, Дегтярев, Дедков, Репин, Речкунова

МПК: C12N 1/20, C12N 9/14

Метки: flаvовастеriuм, аquатilе, бактерий, продуцент, рестриктазы, штамм

...нить. ОбнаруживаЬтся рост при 15 - 30 С, Оптимальной дляЬоста является 25-30 С. Наблюдается ростпри концентрациях КаС 0 - 1,5 О/ оптимальные значения 0-0,7 О. Оптимальными являются нейтральные значения рН. При рН 5 и9 роста не обнаруживается.Дает активный рост на бульоне Хоттинегра. Требователен к аэрации.Хранение штамма осуществляют подваэелиновым маслом в ЗОО-ном глицеринепри -70 С,Штамм Е,ароайе Всодержит уникальную рестриктазу с ранее неизвестнойспецифичностьо5 -ССС 6 С 3 -666 С 6-5Изобретение иллюстрируется следующими примерами,П р и м е р, Получение биомассы и выделение фермента,Ночную культура Е,/азиате засевают всвежую питательную среду МПБ. Культивируют при 25 С с аэрацией два объема вминуту при 2000 об/мин мешалки до...

Номер патента: 1661214

Опубликовано: 07.07.1991

Авторы: Гимадутдинов, Ожерельев, Перфирьева, Синявина, Тюлина, Шарапов, Юсупова

МПК: C12N 9/14, C12N 9/22

Метки: serratia, бактерий, маrсеsсеns, продуцент, штамм, эндонуклеазы

...(реакционная смесь без Фермента), наодну оптическую единицу за час инкубациив пересчете на 1 мл культуральной жидкости(А 26 о ед/мл/ч).В качестве субстрата используют препараты высокополимерной ДНК из тимуса 5теленка, выделенной по методу Кэя в модификации Бенинга, или коммерческие препараты высокополимерной ДНК,Сравнительная характеристика активности внеклеточной эндонуклеазы штаммов Я,щагсезсепз известных и предлагаемого в качестве продуцента эндонуклеазы на питательной среде следующего состава:Глицерин 5Цитрэт аммония 5Двузамещенный фосфаткалия 10Сернокислый магний 0,5Хлористый натрий 0,5Сернокислое железо 0,025Гидролизат казеина 1Дрожжевой экстракт 3рН среды 7,6для получения эндонуклеазы представленав таблице.П р и м е р 1, Получение...

Номер патента: 1661215

Опубликовано: 07.07.1991

Авторы: Малыгин, Муравлев, Рязанкина, Чешенко, Чикаев, Щелкунов

МПК: C12N 1/20, C12N 15/38

Метки: 36к-pvh, бактерий, белка, вируса, днк, еsснеriснiа, иммуногенного, кодирующая, ливп, осповакцины, плазмидная, продуцент, рекомбинантная, синтез, штамм, штамма, этого

...от 35 вет в гибридизации с Р-зондом, выделяют32плазмидную ДНК, обозначенную 36 К-рчН,содержащую в своем составе фрагмент вирусной ДНК 1029 п.н. с геном белка 36 К,Анализ совпадения рамок трансляции40 гена ас 7 и гена белка 36 К в клонах, содержащих рекомбинатную плазмидную ДНК,осуществляют с помощью доказательствасинтеза этими клонами химерного белка смол, м. 145 - 150 КД, Для этого клетки из45 отдельных клонов, дающих положительныйответ в реакции гибридизации с Р-зондом,32высевают в 5 мл .В, содержащего 40 мкг/млампициллина, и растят в течение 16 ч. Затем0,35 мл ночной культуры вносят в 0,5 мл50 свежего ЬВ, содержащего 40 мкг/мл ампициллина, растят до плотности суспензии0,6-0,7 ОЕ/мл при 600 нм и добавляют...

Номер патента: 1662352

Опубликовано: 07.07.1991

Авторы: Вильям, Гордон, Давид, Диане

МПК: C12N 15/12

Метки: активатора, бактерий, еsснеriснiа, плазминогена, продуцент, типа, тканевого, штамм

...фильтр промывают, Полученные данные свидетельствуют о наличии одного гена активаторатканевого плазминогена в человеческом геноме.Реконструкция полной кодирующей последовательности возможна с примене нием обычного НЬа 1 участка рестрикционной эндонуклеазы, разделенного на два частичных клона рРА 17 и РА 25 Е 10. Из плазмиды рРА 17 вьделяют рестрикционный Фрагмент 55 п.о, Баи ЗА 1- НЬа 1, соответствующий аьянокислотам 5-23. Из плазмиды рРА 25 Е 10 выделяют фрагмент 263 п,о. НЬа 1-Иаг 1 (кодирующий аминокислоты 24-110) . Конструируют два синтетических деоксиолигонукле отида, которые реконструируют кодоныдля аминокислот 1-4, включают кодон инициирования трансляции АТС и создают ЕгоК 1 липкое окончание, Эти три Фрагмента затем связывают...

Номер патента: 1666531

Опубликовано: 30.07.1991

Авторы: Атанадзе, Красильников, Николаева, Новиков, Рубин, Сидорович

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, вируса, гибридных, гликопротеину, животных, клеток, клещевого, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, штамм, энцефалита

...ГАТ на обычнуюсреду следующего состава: средаКРМ 1-1640 с 15 фетальной телячьейсьворотки и 2 мМ 1-глютамина. Дляисключения возможности бактериально-.го пророста в среду добавляют гентамицин в дозе 50 мкг/мп.Гибридома по типу роста являетсясуспензионной культурой и растет ввиде гроздей из 10-30 клеток и в виде единичных клеток, Характер ростаменяется в зависимости от качестваиспользуемого пластика или стекла.Пересев культуры осуществляют путемзнергичного встряхивания культурального сосуда или смьвом клеток скультуральной поверхности средой поддавлением из шприца в случае ростакультуры в виде монослоя. Морфологияклеток предлагаемого штамма .-клеткинеоднородны по форме и размерам,но преимущественно имеют округлуюФорму и неровные...

Номер патента: 1137762

Опубликовано: 07.08.1991

Авторы: Денисова, Киянов, Петрищев, Псурцева, Фалина

МПК: C12N 15/00, C12N 9/50

Метки: coprinus, dомеsтiсus, fr)gray, базидиального, вкм, гриба, продуцент, тромболитических, ферментов, фибринолитических, штамм

...солодоворостковым и кукурузным экстрактами.Соргхпця Йошевгсцв - культурадереворазрушающего гриба, относитсяк возбудителям бурой гнили древесины,дает отрицательный тест на реакциюБавендамма на среде с таннином,Штамм-продуцент выращивают глубинно в колбах на 0,5 л, содержащих100 мл питательной среды, при 25 лСна качалке при 130-160 об/мин. Посевной материал вносят в виде суспензии(иэмельченная пленка мицелия) в количестве 107. от объема среды. Для посевного материала и для культивирования гриба, используют питательную среду следующего состава, г/л: глюкоза, 11310, пелтон 2,5; КНРО 0,6; КНРО0,4; МдБО 4 НдО 0,05; ИаС 1 О,5; СаС 120,05; РеБО 4 0,005; ЕпБ 04 0,001;МпБ 04 0,003; солодово-ростковый экстракт 0,17 (по сух. весу), вода...

Номер патента: 1668386

Опубликовано: 07.08.1991

Авторы: Валенцев, Шевченко

МПК: C12N 1/21

Метки: jersinia, бактерий, белка, продуцент, реsтis, связываюшего, цамф, штамм

...белка в надосадочной жидкости, вносимой в пробу для определения цАМФ, составляет40 - 60 мкг.При определении цАМФ инкубацию образцов проводят на ледяной бане в течение 2 ч. Отделение белок-связанного цАМФ от несвязанного нуклеотида осуществляют адсорбцией свободного нуклеотида на угле марки "НоритА", для чего в каждую пробу добавляют 100 мкл угольной суспензии (2,60 раствор угля, 2 раствор БСА в буфе ре "А") с последующим центрифугированием при 10000 9 в течение 1 мин, Равные количества суспернатанта (200 миа)иэ аликвот помещают во флаконы и просчитывают на жидкостном сцинтилляционном счетчи ке, С помощью "слепой" пробы определяютуровень неспецифически сорбирующейся радиоактивности. Этот фон вычитают из значения радиоактивности в каждой...

Номер патента: 1669980

Опубликовано: 15.08.1991

Авторы: Помухина, Уралева

МПК: A61K 39/106, C12N 1/20

Метки: viвriо, бактерий, дермонекротического, продуцент, сноlеrае, фактора, штамм

...наложены прокипяченныев течение 30 мин кружки целлофана. Культуруна мембране распределяют равномернымраскатыванием и, не переворачивая чашки,помещают их в термастат, выращивают при37 С 24 ч. Затем на поверхность целлофананаливают пипеткой 2 мл физиологическогораствора, осторожно смывают культурушпателем и пипеткой отсасывают в пробирку, После этого определяют концентрациювибрионов, которая должна быть не ниже 20млрд. в 1 мл, К вэвесям культур добавляюттиомерсал натрия до конечной концентрации 1:5000, хорошо перемешивают и оставляют в холодильнике до следующего дня,, После этого проверяют на специфическуюстерильность, Обеззэраженный материалцентрифугируют при 6000 об/мин в течение20 мин.Для постоянства кожной пробы берутбесклеточный...

Номер патента: 1671687

Опубликовано: 23.08.1991

Авторы: Власик, Калантаров, Миткевич, Самохин, Стрельцова, Трахт

МПК: C12N 5/18, C12P 21/08

Метки: антитела, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклонального, продуцент, с-концевому, участку, фибриногена, цепи, человека, штамм

...инкубируют при комнатной температуре. Через 1,2, 10,30 и 60 мин расщеплениеостанавливают добавлением апротининадо 100 калликреиновых единиц на 1 мп.Полученные препараты фибриногена различных степеней расщепление разделяют 40гель-электрофорезом, переносят на нит-.роцеллюлозу и окрашивают методом иммуноблоттинга с использованием антител 5 А 2. При этом наблюдают окрашивание полос с мол .массами 340,45,22, 4520,17 и 15 кД. Первая из них соответствует интактному, нерасщепленномуфибриногену, остальные - продуктамего деградации. При этом через 30 миностается лишь полоса с мол.массой 5015 кД, а через 60 мин и она практически исчезает. В соответствии с известными данными, что наиболее чувствительным к действию плазмина являетсяС-концевой...

Номер патента: 1671688

Опубликовано: 23.08.1991

Авторы: Агапов, Локтев, Перебоев, Разумов

МПК: C12N 5/18

Метки: антител, вируса, восточного, гибридных, гликопротеиду, животных, клеток, культивируемых, лошадей, мusсulus, моноклональных, продуцент, штамм, энцефаломиелита

...иммуноблотингаустановлено, что МонАТ 7 В 6 специфически реагируют с гликопротеидом Е 1вируса АсЭЛ. Титры МонАТ в асцитических жидкостях составляют 1:1000001;200000. МонАТ, синтезируемые гибридомой 7 В 6, являются специфичнымиисключительно к вир 1 су ВСЭЛ, что показано в ТРИА.П р и м е р 1. Получение МонАТ к вирусу ВсЭЛ путем культивирования клеток линии 7 В 6 п Ыо.1В культуральный сосуд емкостью 250 мл вносят 30 мл среды ДМЕМ с 157сыворотки плода коровы содержащей6Фбх 10 клеток гибридомы 7 В 6 и инкубиоУ руют при 37 С в течение 3 сут. Выращенные клетки снимают энергичным встряхиванием, Клеточную суспензию центрифугируют 5 мин при 600 Р, Клеточный осадок суспендируют в 3 - 5 млсреды ДМЕМ и определяют концентрациюклеток с помощью камеры...

Номер патента: 1677059

Опубликовано: 15.09.1991

Авторы: Мишанкин, Подладчикова

МПК: C12N 15/31

Метки: бактерий, возбудителя, днк, еsснеriснiа, зонда, идентификации, источник, конструирования, плазмидная, плазмиды, продуцент, рекомбинантная, рекомбинантной, чумы, штамм

...геле,Лигазной смесью (1/10 ч) трансформируют штамм Е.со. После трансформации культуру высеивают на агаризованную средуВ, содержащую 50 мкг/мл ампицилли 1677059на, 40 мкг/мл индикатора Р -галактозидазной активности Хца 1 и 240 мкг/мл индуктора 3-галактозидазы ИПТГ (изопропил- /3-Д-тиогалактопиранозид). Через 14 - 20 ч на чашках вырастают колонии трансформантов. Рекомбинантные клоны отбирают по отсутствию Р -галактозицазной аос, поскольку у них нарушается способность синтезировать Р-галактозидазу из-за сдвига рамки считывания фермента при встраивании в векторную плазмиду фрагмента ДНК длиной 280 п.,о.Из клеток рекомбинантных клонов была выделена плазмидная ДНК, Анализ плаэмидных ДНК осуществляют с помощью рестриктаз Мзр 1 и Есой 1....

Номер патента: 1678830

Опубликовано: 23.09.1991

Авторы: Гуртовой, Дерюгина, Оловникова, Удалов, Чертков

МПК: C12N 5/18, C12P 21/08

Метки: антител, д-антигену, клеток, культивируемых, многоклональных, продуцент, резус, системы, человека, штамм

...С, 5"-;ь СОр в воздухе. Частота пассирования 3-4 сут, кратность рассева 1:2-1:3. Титрантител в культуральной жидкости, определяемой в прямой реакции агглютинации О+эритроцитов, обработанных бромелином,составляет 1;4096.Характеристика моноклональных антител, Моноклональные антитела, секретируемые штаммом 0-89/Н 6, выявляют, О-антиген эритроцитарной мембраны и егослабые формы (Ои); относятся к классу 6-иммуноглобулинов.Способ криоконсервирования. Криозащитная среда: 50, ростовой среды, 40;сыворотки, 10 Д диметилсульфоксида, Клетки в криозащитной среде помещают на сутки при - 70 С, после чего переносят вжидкий азот, Жизнеспособность после размораживания 85 - 90); культивирование после размораживания в плотности0,4 - 0,5 х 10...