Патенты с меткой «еsснеriснiа»

Номер патента: 1622393

Опубликовано: 23.01.1991

Авторы: Баронайте, Вайткявичене, Гаврюченкова, Громова, Марцишаускас, Песлякас, Суджювене

МПК: C12N 9/14

Метки: днк-полимеразы, еsснеriснiа

...баню и перемеаиваютстеклянной палочкой до получениягомогенной суспенэии, Суспеиэии кле"ток обрабатывают экструзиоииьи деэинтеграторои. Обломки клеток осаждают центрифугироваиием при 10000 В 2393 Ьв течение 1 ч. Выпавщий осдлок отбрасывают, центрифугят (560 мл) используют для выделения Фермента.б) фракционнрование ферментногоэкстракта полимином 11 и сульфатомаммония. К центрифугату (1560 ил),полученному нд предьдущей стадии,при постояннои перемещивянии в течение 30 мин добавляют 203-ный растворполимина 11 (48 ил) ло конечной концентрации 0,6 г После добавления всего объема полимина 11 переиещиваниепродолжают еще 30 мин, Экстракт цент Рифугируют в течение 10 иин при5000 е. Супернатант сливают, я полученный осадок суспенлируют в 780...

Номер патента: 1631081

Опубликовано: 28.02.1991

Авторы: Буткус, Кюдулене, Манелене, Пятрушите, Степонавичене, Янулайтис

МПК: C12N 1/20, C12N 9/14

Метки: бактерий, еsснеriснiа, продуцент, рестриктазы, штамм

...мМ КаС 1 5 мМ МяС 1., 10 мМ 2-меркаптоэтанол, 100 мкг/мл альбуминабычьей сыворотки, 2 мкг ДНК фага 9в 40 мкл смеси и 1 мкл фермента, Реакцию проводят при 37 С 10 мин, Электорофорез проводят в 0,1 М натрийборатном буфере (рН 8,2) 2 мМ трилон Б,в течение 1,5 ч при напряжении 100 Ви силе тока 100 мА. Окрашенные этидийбромидом (1 мкг/мл) гели просматривают в УФ-свете,За условную единицу принимаетсято количество фермента, которое воптимальных условиях за 1 ч полностьюрасщепляют 1 мкг ДНК фага Я Все операции по выделению и очистке фермента проводят при +4 С.10 г влажной биомассы суспендируют в 20 мл буфера А (10 мМ трис-НС 1-буфер, рН 7,8, содержащий 10 мМ 2-меркаптоэтанола), озвучивают на дезинтеграторе, В полученный бесклеточный...

Номер патента: 1632975

Опубликовано: 07.03.1991

Авторы: Манувахова, Несмеянова, Федотикова, Цфасман

МПК: C12N 1/20, C12N 15/55, C12N 9/14 ...

Метки: бактерий, внеклеточной, еsснеriснiа, предшественника, продуцент, фосфатазы, штамм, щелочной

...и культивирование продолжают еще 15 ч, Через ч 4 инку бации достигается максимальная активность внутриклеточной щелочной Фосфатазы 0,07 Е/мп, удельная активностьм 0,5 Е/мг белка.При последующем культивировании начинается секреция щелочной фосфата 50 зы в культуральную среду. Максимальное содержание фермента в среде достигается через 15 ч, когда он составляет 847. от всего синтезированного Фермента и является преобладающим белком культуральной жидкости. Максимальная активность щелочной Фосфатазы в среде составляет 0,16 Е/мп,внутриклеточной 0,03 Е/мп. Удельнаяактивность 4 Е/мг белка. В то же время клетки содержат значительное количество предшественника, который локализован в мембранах. Его содержаниев этом компартменте не меняется в...

Номер патента: 1085037

Опубликовано: 23.03.1991

Авторы: Климова, Ратинер

МПК: A61K 35/14

Метки: антигена, еsснеriснiа, жгутикового, идентификации, специфической, сыворотки

...специфический комплекс антигена Н 11 и не содержит парциальныхфакторов общих с антигенами Н 21 иН 40. В связи с этим адсорбция нативной сыворотки может быть ограниченатолько удалением антител к соматическим антигенам с использованием в качестве адсорбента прогретой культуры любого штамма серогруппы 055:К 59(В 5) либо живой ипи Формалинизированной. культуры любого штамма этойсерогруппы, обладающего любым, кромеН 11, жгутиковым антигеном, или неподвижного, Штамм В 99:Н 11 м депонирован: 15за В 40 в коллекции ГИСК им.Л.А,Тарасевича. П р и м е р. ОКН-сыворотки получают от кроликов, иммунизированных, штаммом В 99 Н 11 м идля сравнения диким штаммом В 551, принадлежащим к при- РодномУ серовару 055:К 59(В 5):Н 11. Бульонную...

Номер патента: 1092776

Опубликовано: 23.03.1991

Авторы: Климова, Ратинер

МПК: A61K 35/14

Метки: антигена, еsснеriснiа, жгутикового, идентификации, специфической, сыворотки

...комбинат "Патент", г.Ужгород, ул. Гагарина, 10 антител к соматиЧеским антигенам с использованием в качестве адсорбента прогретой культуры любого штамма серогруппы 055:К 59(В 5) либо живой или 5 формалинизированной культуры любого штамма этой серогруппы обладающего любым, кроме Н 21, жгутиковым антигеном, или неподвижного, ШтаммВ 99:Н 21 м депонирован за У .41 в коллекции ГИСК им, Л.А.Тарасевича.П р и м е р. ОКН-сыворотки получают от кроликов, иммунизированных штаммом В 99:Н 2 м и для сравнения диким штаммом В 281, принадлежащим к 15 природному серовару 055:К 59(В 5):Н 21. Бульонную формапинизированную культуру пропассированного предварительно через полужидкий агар штамма вводят животным внутривенно четырехкратно в...

Номер патента: 1638156

Опубликовано: 30.03.1991

Авторы: Вахитов, Яшина

МПК: C12N 1/00, C12N 1/38

Метки: аутоактиватора, еsснеriснiа, культивирования, роста

...(фильтр Мроге; 0,22 мкм.Биологическую активность препарата определяют культивированием бактерий Е, со Мв синтетической глюкозоминеральной среде с добавкой аутоактиватора.П р и м е р 1, Культивирование бактерий Е, со Мпроводят в стандартной безбелковой минимальной синтетической среде М при 37 С во флаконах с постоянным перемешиванием среды, Засевная доза составляет 25 млн/мл. В намеченные сроки культуру фильтруют через бактериальные свечи Кс размером пор 0,9 мкм под отрицательным давлением 80 - 150 мм. Для оценки активирующего действия в фильтрат. содержащий аутоактиватор, засевают отмь 1 тую бульонную культуру Е. со Мв дозе 15 млн/мл, Для контроля производят посев аналогичной дозы клеток бактерий в свежую синтетическую среду...

Номер патента: 1638162

Опубликовано: 30.03.1991

Авторы: Воробьева, Небрат, Петрусева, Ромащенко, Стариковская, Шаманина

МПК: C12N 9/12

Метки: еsснеriснiа, обратной, транскриптазы

...72 г; удельная активность фермента 42 е.а,/мг.2. Фракционирование в двухфазной системе полиэтиленгликоль-декстран.К 3300 мл полученного грубого экстракта добавляют 1095 мл 300 -ного раствора полиэтиленгликоля (ПЭГ, мол,мас. 20000 О) и 200 мл 200 -ного раствора декстрана Т. Полученную смесь перемешивают в течение 30 мин при помощи механической мешалки. Затем центрифугируют 40 мин при 9000 об./мин. Верхнюю фазу отбрасывают, э к нижней добавляют раствор, содержащий 0,4 М КС 1, 50 мМ трис-НС 1 (рН 8,3) и 60 -ный раствор ПЭГ (мол,мас, 20000 О), из расчета 8 об. этого раствора на 1 об нижней фазы. После 30 мин энергичного перемешивания вновь разделяют фазы центрифугированием (40 мин, 9000 об./мин) и отбрасывают верхнюю фазу. К нижней...

Номер патента: 1342016

Опубликовано: 15.04.1991

Автор: Ларин

МПК: A61K 39/108, C12N 1/20

Метки: coli, антигена, бактерий, диагностики, еsснеriснiа, используемый, колибактериоза, птиц, штамм

...21-часовую агаровую культуру Взвешенную В физиологическом растворе хлориДа натрия, в конЦентраЦии 10 млрд/мл из расчета 0,01 мл взвеси на 1 см поверхности питательной средыЧерез ч 8 ч Выросшую бактериаль 1 ую :;а"су смывают В гредварительно вэвешекнь е цеитрифужные стакань 1 и дважды отмывают физиолОгическим растВором хлорида натрия В тече 11 ие 15 мин при 5000 об/мин. После втрого центрифугирсвания сливают кадасадочную жидкость, ВзвешиваЮТ цектрифужные стаканы с оставшейся в осадке бакте 1342016риальной массой, Определяют вес биомассы культуры по разности весов стаканов с биомассой и пустых. Декантируот осадок буФерным раствором с рН6;9-7,1 иэ расчета получения 3 Х взвеси сырой массы бактерий, При этомконцентрация бактерий в препарате...

Номер патента: 1659481

Опубликовано: 30.06.1991

Авторы: Глемжа, Кюдулене, Палубинскас, Шпокаускас, Янюнайте

МПК: C12N 1/20, C12N 9/16

Метки: бактерий, еsснеriснiа, неорганической, пирофосфатазы, продуцент, штамм

...кишечная палочка течение 1 ч, а при течение 15 мин.подвижные, катааживающие глюкосбраживает, соИ6 88 хранится оем вазелинового ие 1 года. П р и м е р. Культуру Е.со сервированную в столбике М вазелинового масла, для ожив вают на стерильные чашки Пе ванным рыбным гидра1659481 П о ент Показатели П е агаемый штамм Известный штамм 4 - 6 ч (до конца логарифмической фазы) 8,0-9,0Стационарная фаза Продолжительность культивирования, ч Удельная пирофосфатазная активность, ед/мг белка Общая активность на 1000 мл культуральной жи кости,е4,0 1500-1800 Данные отсутствуют Составитель И. ЧаплйнаРедактор М, Петрова Техред М.Моргентал Корректор Т. Малец Заказ 1821 Тираж 376 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ...

Номер патента: 1661209

Опубликовано: 07.07.1991

Авторы: Барай, Бокуть, Дудчик, Зинченко, Квасюк, Михайлопуло

МПК: C12N 1/20, C12P 1/04

Метки: бактерий, еsснеriснiа, рибавирина, штамм

...в холодильнике(4 С) на полноценной агаризованной среде(МПА, среза Хоттингера) под слоем вазелинового масла, а также в лиофильно- высушенном состоянии.Штамм Е.соИ БМТ-ЗД/1 А способен синтезировать рибавирин с эффективностью1,05 ммоль/ч/г клеток (в расчете на сухуюмассу).Рибавиринсинтезирующую активностьизмеряют путем прямого определения количества рибавирина, образующегося приинкубэции сырой биомассы клеток с гуанозином и ТК. С этой целью реакционнуюсмесь (1 мл), содержащую 10 мМ К-фосфатный буфер(рН 7), 15 кг клеток, гуанозин и ТКв концентрациях 0,3 М, инкубируют при 60С в течение 8 ч. После инкубации реакционную смесь центрифугируют (80009, 10 мин)на/ч/г.35 П р и м е р 2. Клетки Е.соИ БМТ-ЗД/1 А,выросшие в двух 250 мл колбах,...

Номер патента: 1661215

Опубликовано: 07.07.1991

Авторы: Малыгин, Муравлев, Рязанкина, Чешенко, Чикаев, Щелкунов

МПК: C12N 1/20, C12N 15/38

Метки: 36к-pvh, бактерий, белка, вируса, днк, еsснеriснiа, иммуногенного, кодирующая, ливп, осповакцины, плазмидная, продуцент, рекомбинантная, синтез, штамм, штамма, этого

...от 35 вет в гибридизации с Р-зондом, выделяют32плазмидную ДНК, обозначенную 36 К-рчН,содержащую в своем составе фрагмент вирусной ДНК 1029 п.н. с геном белка 36 К,Анализ совпадения рамок трансляции40 гена ас 7 и гена белка 36 К в клонах, содержащих рекомбинатную плазмидную ДНК,осуществляют с помощью доказательствасинтеза этими клонами химерного белка смол, м. 145 - 150 КД, Для этого клетки из45 отдельных клонов, дающих положительныйответ в реакции гибридизации с Р-зондом,32высевают в 5 мл .В, содержащего 40 мкг/млампициллина, и растят в течение 16 ч. Затем0,35 мл ночной культуры вносят в 0,5 мл50 свежего ЬВ, содержащего 40 мкг/мл ампициллина, растят до плотности суспензии0,6-0,7 ОЕ/мл при 600 нм и добавляют...

Номер патента: 1662352

Опубликовано: 07.07.1991

Авторы: Вильям, Гордон, Давид, Диане

МПК: C12N 15/12

Метки: активатора, бактерий, еsснеriснiа, плазминогена, продуцент, типа, тканевого, штамм

...фильтр промывают, Полученные данные свидетельствуют о наличии одного гена активаторатканевого плазминогена в человеческом геноме.Реконструкция полной кодирующей последовательности возможна с примене нием обычного НЬа 1 участка рестрикционной эндонуклеазы, разделенного на два частичных клона рРА 17 и РА 25 Е 10. Из плазмиды рРА 17 вьделяют рестрикционный Фрагмент 55 п.о, Баи ЗА 1- НЬа 1, соответствующий аьянокислотам 5-23. Из плазмиды рРА 25 Е 10 выделяют фрагмент 263 п,о. НЬа 1-Иаг 1 (кодирующий аминокислоты 24-110) . Конструируют два синтетических деоксиолигонукле отида, которые реконструируют кодоныдля аминокислот 1-4, включают кодон инициирования трансляции АТС и создают ЕгоК 1 липкое окончание, Эти три Фрагмента затем связывают...

Номер патента: 1669981

Опубликовано: 15.08.1991

Авторы: Мишанкин, Павлович, Романова

МПК: C12N 15/31, C12Q 1/68

Метки: coli, francisella, бактерий, днк, еsснеriснiа, зонда, источник, плазмидная, плазмидную, представителей, рrд, рекомбинантная, рекомбинантную, рода, содержащий, тестирован, тестирования, штамм

...смеси трансформируют штамм Е,со 1 М 103,Выбор штамма обусловлен тем, что вприсутствии рО С 19 он способен синтезировать фермент /3-галактоэидаэу эа счет комплементации дефектного хромосомальногогена Й-концевым фрагментом гена, находящегося на плазмиде, Эта способность штаммане проявляется в присутствии рекомбинант 5 ной плаэмиды со встроенным по ЕсоВ 1 сайтуфрагментом ДНК, длина которого не кратнатрем, вследствие сдвига рамки считывания,В-галактозидаэы. Клоны с такими рекомбинантными плазмидами, не обладающие /310 галактозидаэной активностью, могут бытьотобраны на индикаторной среде с хромогенным субстратом Х-ца по отсутствию голубой окраски,Клетки культуры Е,со 11 М 103, транс 15 формированные лигазной смесью, высеивают на чашки с...

Номер патента: 1677059

Опубликовано: 15.09.1991

Авторы: Мишанкин, Подладчикова

МПК: C12N 15/31

Метки: бактерий, возбудителя, днк, еsснеriснiа, зонда, идентификации, источник, конструирования, плазмидная, плазмиды, продуцент, рекомбинантная, рекомбинантной, чумы, штамм

...геле,Лигазной смесью (1/10 ч) трансформируют штамм Е.со. После трансформации культуру высеивают на агаризованную средуВ, содержащую 50 мкг/мл ампицилли 1677059на, 40 мкг/мл индикатора Р -галактозидазной активности Хца 1 и 240 мкг/мл индуктора 3-галактозидазы ИПТГ (изопропил- /3-Д-тиогалактопиранозид). Через 14 - 20 ч на чашках вырастают колонии трансформантов. Рекомбинантные клоны отбирают по отсутствию Р -галактозицазной аос, поскольку у них нарушается способность синтезировать Р-галактозидазу из-за сдвига рамки считывания фермента при встраивании в векторную плазмиду фрагмента ДНК длиной 280 п.,о.Из клеток рекомбинантных клонов была выделена плазмидная ДНК, Анализ плаэмидных ДНК осуществляют с помощью рестриктаз Мзр 1 и Есой 1....

Номер патента: 1338153

Опубликовано: 23.09.1991

Автор: Ратинер

МПК: A61K 39/02

Метки: антигена, диагностических, еsснеriснiа, жгутикового, идентификации, поливалентных, сывороток

...поливалентной вакцины, Сыворотки, в которых обнаружены гетерологичные Н-антитела, адсорбируют штаммами 055;К 59 (В 5) с Н-антигенами, соответствующими этим Н-антителам. Результаты контроля специфичности сывороток и штаммы, использованные для их вдсорбции, прдеставлены в табл,2.Преимушество предлагаемого способа состоит в повышении специфичности получаемых поливалентных сывороток, позволяющем упростить процесс идентификации Н-антигенов беэ уменьшения его диагностической эффективности, в частности относительного количества штаммов, у которых оказывается возможным идентифицировать Н-антиген, и правильности идентификации.Повышение специфичности заключается в том, что сыворотки освобождают адсорбцией от антител к соматическим (О и К)...

Номер патента: 1680768

Опубликовано: 30.09.1991

Авторы: Булгакова, Кириллина, Попов, Шишкина

МПК: C12N 1/04

Метки: антигена, бактерий, еsснеriснiа, капсульного, микроба, продуцент, фракция, чумного, штамм

...с добавлением 50 мкг/мл ампициллина). выращивают при 37 С в течение 18 ч с аэрацией.При этом титр клеток в бульонной культуре штамма У. реяз ЕЧ составляет 2,5 х 10 м.к./мл,би для штамма Е, со КМ 13 рАГ9 х 10 м.к,/мл, После осаждения клеток центрифугированием при 6000 об/мин в течение 10 мин супернатанты исследуют в реакции пассивной гемагглютинации с чумным эритроцитарным моноклональным к фракциииммуноглобулиновым диагностикумом (производство Среднеазиатского ПЧИ).Для количественного определения капсульного антигена фракцияв культуральной среде и определения чувствительности метода используют препарат антигена Ф 1 из набора "Тест-система иммуноферментная моноклональная для идентификации антигена Ф 1 возбудителя чумы" (производство...

Номер патента: 1694643

Опубликовано: 30.11.1991

Авторы: Арсатянц, Бачина, Беларева, Гусятинер, Дебабов, Жданова, Козлов, Лившиц, Плотникова, Позднякова, Соколов, Хургес, Цыганков, Чистосердов, Шакалис, Шолин, Янковский

МПК: C12N 15/00, C12P 13/08

Метки: l-треонина, бактерий, еsснеriснiа, продуцент, штамм

...(плазмида рИС 40) и известного (плазмида рай 7) штаммов. Клетки обоих штаммов выращивали в присутствии соответствующего антибиотика до ранней стационарной фазы и засевали среду Луриа, лишенную антибиотиков, с исходным титром 5. После 48 ч культивирования полученными клетками вновь засевали такую же среду до исходного титра 50 и вновь инкубировали 48 ч. Каждый пассаж соответствовал 20 генерациям. После указанных пассажей клетки высевали на агаре Луриа и выросшие колонии проверяли на устойчивость к стрептомицину и пенициллину (табл,1).Иэ данных табл.1 видно, что плазмида рИС 40 стабильно сохраняется в клетках нового продуцента в неселективных условиях. В этих же условиях клетки известного штамма быстро утрачивают плазмиду. 10 15 20...

Номер патента: 1703691

Опубликовано: 07.01.1992

Авторы: Гилева, Добрынин, Коробко, Кравченко, Филиппов, Чувпило

МПК: C12N 1/21, C12N 15/21

Метки: бактерий, днк, еsснеriснiа, интерферона, кодирующая, лейкоцитарного, плазмидная, полипептид, полипептида, продуцент, рекомбинантная, свойствами, человека, штамм

...Из гибридизующихся с этой пробой клонов выделяют плазмидную ДНК, строение которой подтверждают рестриктным анализом с помощью рестриктаз Наб, Мзри Най+ЯаОК раствору 10 мкг ДНК плазмиды Р 6 А 23/Яа в 80 мкл буфера В без МаСГприбавляют 20 ед. каждой из рестрикционных нуклеаз Яаф и Крп и инкубируют 90 мин при 37 С, Анализ полноты гидролиза и выделение векторного Крп/ЯаГ-фрагмента (3,4 т,п о) проводят при помощи электрофореза в 1 -ном геле легкоплавкой агароэы, Одновременно 10 мкг ДНК плазмиды р ецГт 17 в 100 мкл буфера В обрабатывают 1,5 ч при 37 С 20 ед, каждой из рестриктаэ 89 г и ЯаГ, после чего фрагмент величиной около 500 п,о., содержащий синтетический ген а 2 интерферона, выделяют при помощи электрофореза в 5 ь-ном...

Номер патента: 1703692

Опубликовано: 07.01.1992

Авторы: Алексенко, Болотин, Борухов, Бумялис, Гервинскас, Дебабов, Евдонина, Изотова, Козлов, Костров, Лапидус, Лебедева, Лившиц, Машко, Мочульский, Носовская, Плотникова, Подковыров, Рыжавская, Скворцова, Стеркин, Стронгин, Трухан, Юрин, Янулайтис

МПК: C12N 1/21, C12N 15/23, C12P 21/00 ...

Метки: 1-13, i-интерферона, бактерий, днк, еsснеriснiа, интерферона, кодирующая, конструирования, плазмидная, продуцент, рекомбинантная, синтез, фибробластного, человека, штамм

...в 20 мкл -20, 4 мкг полученного таким образом препарата ДНК обрабатывают Кленовским фрагментом ДНК-полимеразы 1 Е.со в указанных условиях для достройки возможно имеющихся одноцепочечных концов молекул до двухцепочечных. Реакцию останавливают фенольной депротеинизацией, нуклеиновые кислоты осаждают этанолом и растворяют в 20 мкл Н 20,Лигирование линейных молекул ДНК с двуцепочечными концами проводят при 16 С в пробе объемом 50 мкл, содержащей 60 мМ трис-НС, рН 7,6, 10 мМ М 9 С 2, 10 мМ дитиотреитол, 4 мМ АТФ, 8 -ный полиэтиленгликоль - 6000, 4 мкг ДНК, 100 ед, ДНК- лигазы Т 4. После завершения реакции пробу разбавляют водой в четыре раза и проводят осаждение нуклеиновых кислот этанолом, 2 мкг растворенной в Н 20 ДНК обрабатывают...

Номер патента: 1703693

Опубликовано: 07.01.1992

Авторы: Авот, Грен, Дебабов, Козлов, Косиков, Костров, Мазель, Машко, Мочульский, Носовская, Романчикова, Скворцова, Стеркин, Стронгин, Трухан, Циманис, Черновская, Юрин

МПК: C12N 1/21, C12N 15/26

Метки: 2-19, бактерий, днк, еsснеriснiа, интерлейкина-2, кодирующая, конструирования, плазмидная, продуцент, рекомбинантная, синтез, человека, штамм

...ДНК длиной =750 п.нвырезает и проводят элюцию ДНК. Для достройки о,;ноцепочечных концов ДНК с помощью Кленовского фрагмента ДНК-полимеразы 1 Е со, выделенный из геля фрагмент обоа;э; .пгают в пробе объемом 20 мкл, содер,кэ.,ей 10 мМ трис-НС 1, рН 8,0, 10 мМ МдС 1:, по ЗО мкМ дезоксирибонуклеозидтрифосфатов Реакцию останавливают прогреванием, ДНК из смеси переосаждают этанолом и растворяют в 20 мкл,Полученный препарат фрагмента плазмиды рАА 1213-23 В используют на дальнейших этапах конструирования для интеграции кодирующей части интерлейкиначеловека в векторную плазмиду рВВ 124 В.3 мкг ДНК плазмиды рВВ 124 В расщепляют рестриктазой ВагпН в пробе обьемс . 12 мкл, содержащей буфер для рестрикци:- Реакцию останавливают фенольной...

Номер патента: 1705347

Опубликовано: 15.01.1992

Авторы: Барай, Бокуть, Дудчик, Зинченко, Михайлопуло

МПК: C12P 19/40

Метки: 2ъ-дезоксиаденозина, coli, бактерий, еsснеriснiа, предназначенный, штамм

...20 25 30 35 40 45 50 Физиолого-биохимические признаки.Факультативный анаэроб, В процессероста сбраживает до кислоты с незначительным выделением газа глюкозу, арабинозу,трегалозу, мапьтозу, маннит, глицерин. Неусваивает сахароэу, лактозу, рафинозу. сорбит, дупьцит,В качестве единственного источника углерода может использовать ацетат, но нецитрвт и инозит.Желатину не разжижает.Крахмал не гидролизует.Молоко не свертывает.Гидролизует РНКГемолитическими свойствами не обладает. Не токсичен и не патогенен для теплокровных животных.Усваивает аммонийный и нитратныйазот. Наиболее активный рост биомассыобеспечивают органические источники азота (пептон, дрожжевой и кукурузный экстракты, ферментапизат БВК).Продуцирует индол и катвпаэу,Не образует...

Номер патента: 1707078

Опубликовано: 23.01.1992

Авторы: Амосова, Болдырева, Добрынин, Коробко, Филиппов

МПК: C12N 15/12, C12N 15/21

Метки: бактерий, днк, еsснеriснiа, кодирующая, конструирования, плазмидная, полипептид, продукт, промежуточный, рекомбинантная, ртну12, ртнуз14, свойствами, тимозина, человека, штамм

...ауо Гача т М; - .и. Э УГ эез :. 1 ан,леатдсд дып а якт . даг д- а знык ", ос 4 дамидитн ьнл методомпПОН. С 1 Чд 1 а УУИн; - , д эп;.;-ь 1 ечат 3- . - -,д 5 гч .".щью защ;щ чы,, , тПЬ, дхтр 1 та з пил 2 азси ул с: д, п 1:асед 1 ЗОПРОП,ГатУлича)-фаСФ 1 ТОВ Эт. В 1 Раданы тетрээплал С 1 уев предадет е масшта бе 0 5.0 7 мл 1 агь 1.п;,;ь уя в каче;тве час егя посистпа стеа (газмрр пар 500 А, размер частиц 40-8; лл) отаоол 1 у через13 .суцичатчу и связь гри-оед няют перваа нулеаз 1 д аа звечп 111 эгрузка 20 -.лсль, 11 с па "ьз уат "итрасотар м паг,е рад 1ач тенг э ииВедает ПраЫЬу .а ЛЬ СмрСЬ" ТЕТРИС ИД гафуран - пиридич - дода 5 3 2) После -о чания синтеза защитные гр)псы удаляют последовательной обработкой тиофено- ЛЯтаМ то 11 зт 1 Лаь...

Номер патента: 1708847

Опубликовано: 30.01.1992

Авторы: Баев, Голова, Горбулев, Позмогова, Рубцов, Садиев, Свердлова, Скрябин, Чернов, Чупеева, Шульга

МПК: C12N 1/21, C12N 15/18

Метки: бактерий, гормон, гормона, днк, еsснеriснiа, кодирующая, крупного, плазмидная, продуцент, рвgнтrр, рекомбинатная, рогатого, роста, скота, штамм

...20 вМ, Реакционную смесь экстрагируют равным объемом смеси фенол:хлороформ. ДНК из водной фазы осаждают спиртом, высушивают, растворяют в водефракционируют в 1 Д агарозном геле, Нужный фрагмент ДНК (Рчц И - Есой - фрагмент размером 680 п,о.) элюируют из легкоплавкой агарозы с помощью стандартной процедуры осаждают спиртом, высушивают и растворяют в воде,0,5 мкг Рчц 1 - Есой - фрагмента инкубируют в 10 мкл срднесолевого буфера с 5 ед. рестриктазы Н 1 пб И 1 в течение 1 ч при 37 С, ДНК из реакционной смеси осаждают спиртом, высушивают и растворяют в воде.Для получения вектора из плазмиды зуп/рВй 327 4 мкг ДНК гидролизуют в 20 мкл инкубационной смеси на основе среднесолевого буфера, содеожащей 15 ед. Рчц И и 20 ед, Н 1 пб 1 И, в...

Номер патента: 1708848

Опубликовано: 30.01.1992

Авторы: Бобков, Бобкова, Гараев, Казеннова, Колот

МПК: C12N 15/48, C12N 15/70

Метки: pga9, антигенными, бактерий, белка,обладающего, вируса, днк, еsснеriснiа, иммунодефицита, кодирующая, конструирования, первого, плазмидная, продуцент, рекомбинантная, свойствами, синтез, типа, человека, штамм

...ген устойчивости к канамицину, и раг-участок СоА выделяют из плазмиды рАК 25. Для этого рАК 25 подвергают гидролизу рестриктазой Е,сой 1, ин кубируя 20 мкг ДН К рАК 25 с 20 ед, 10 фермента в присутствии 50 мМ МаС 3, 10 мММцС 32 10 мМ трис-НС 3, рН 7,5, 1 мМ ДТТ в течение 2 ч г.ри 37 С с последующим прогреванием при 75 С в течение 15 мии. Далее гидрслизовзииую ДНК разделяют в 0,8% 15 дгзрозном геле и выделяют нужный фрагмент ДНК, используя бумагу ДЕ 81.В качестве вектора используют плазмиду р 630, полученную следующим образом.Клетки бактерий Е.со 3 НВ 101, содержа щие плазмидную ДНК рОВ 290 выращиваютв 200 мл бульона до титра 1 х 10 клеток/мл. Клетки осаждают центрифугирсванием(5000 ц,5 мии,4 С) и ресуспендируют в 35 мл раствора,...

Номер патента: 1586193

Опубликовано: 23.02.1992

Авторы: Попов, Шишкина

МПК: C12N 15/00

Метки: pfra, бактерий, днк, еsснеriснiа, зонд, зонда, идентификации, конструирования, микроба,несущих, плазмидная, плазмиду, продуцент, рекомбинантная, чумного, штамм, штаммов

...Т 1 ЦК Д и Цц ИТа 1 М 1 Ц с Ус 1"ного микроба, депонирован п музее жи 5вьх культур ВНИПГ 1 И "Микроб под номером КМ,Способы получения рекоибццацтцыхплазмидцых ЛНК серии рВБ иллюстри, -руется примером,П р и м е р . Конструировациерекомб 13 нднтнай плаэмиды рВБ 2 и получение штамма Е,со 1 Г К- пропуцецтдзонда для идентификации штаммав чумного микроба, садерждцих плаэмиду,Л, Выделение ДНК рРка из штамма1,ревс 1 з А 1122 (рЕка+) и Д(К векторных плаэмид рВК 327 и рВК 322 иэ 1 тама Е,со 11 С 600. 20Клетки бактерий выр 3 гигдют в бульоне 1.В (рН 7,2) с аэрацией в течениеночи при 28 С (клетки бактерий 1.резьс 1 в или 37 С Е,со 11). Для амплифцкации ДНК векторных плаэмид клетки . 25бактерий Е.са 13. обрабатывают хлорамфениколом 20 лкг/мл с...

Номер патента: 1724691

Опубликовано: 07.04.1992

Авторы: Болдырева, Бурдов, Добрынин, Дрягалин, Иванющенков, Коробко, Микульскис, Некрасова, Филиппов, Чепуркин

МПК: C12N 1/21, C12N 15/42

Метки: 10fmd, 131-160, pi200-213-р, vpi200-213, бактерий, белка, белок, гибридного, гибридный, днк, еsснеriснiа, кодирующая, плазмидная, продуцент, р204-as, р204а, рекомбинантная, штамм

...Р 204, который представляет собой белок фактора1724691 некроза опухолей человека, слитый черездипептид АзрРго с последовательностьюантигенной детерминанты подтипа А 22 вируса ящура..Для получения бактериального штамма- продуцента иммуногенного полипептидаР 204 плазмидой р 10 РМО трансформируюткомпетентные клетки Е, соИ 3620050,Полученные таким образом штаммы Е.соИ 3620050/р 10 РМО (В КПМ В) характеризуются следующими признаками.Морфологические признаки.Клетки мелкие утолщенной палочковидной формы, грамьтрицательные, неспороносные.Культуральные признаки.Клетки хорошо растут.на простых питательных средах, При росте на агаре "Дифко"колонии круглые, гладкие, прижаты, мутные, блестящие, серые, край ровный, Приросте в жидких средах (на...

Номер патента: 1730150

Опубликовано: 30.04.1992

Авторы: Баев, Горбулев, Рубцов, Сагадиев, Садиев, Скрябин, Шульга

МПК: C12N 1/21, C12N 15/18

Метки: бактерий, гормон, гормона, днк, еsснеriснiа, кодирующая, кодирующий, овцы, плазмидная, продуцент, рекомбинантная, роgнтrр11, роста, синтез, фрагмент, штамм

...работы отобрали плазмиду, содержащую Есой 1-Н 1 пб И 1-фрагмент с геном ГР КРС размером 601 п.ообозначенную рВОН Ва 112;П р и.м е р 2. Получение фрагмента ДНК,кодирующего ГР овцы.А) Клонирование фрагмента ДНК, коди рующего ГР КРС, в векторе М 13(фиг, 6).10 мкг плазмидной ДНК рВОНВа 12гидролизовали рестриктазами Есой 1 и НпбИ 1 в 50 мкл инкубационной смеси следующего состава: 50 вМ йаС 1, 10 вМ 5 трисНС 1. рН 7,5,10 вМ МяС 2, 1 еМ дитиот-рейтола(ДТТ), 10 ед; рестриктазы Есойи 10 ед. рестриктазы Н 1 пбИ, в течение 2 ч при 37 С.Проводили разделениефрагментов ДНКв 1агарозном геле и выделяли из геля фрагмент раз мером 601 п,оиспользуя стандартный метод.5.мкг ДНК репликативной формы бактериофага М 13 вр 8 гидролизовалирестриктазами...

Номер патента: 1730151

Опубликовано: 30.04.1992

Авторы: Болдырева, Бурдов, Добрынин, Дрягалин, Иванющенков, Коробко, Микульскис, Некрасова, Филиппов, Чепуркин

МПК: C12N 1/21, C12N 15/42

Метки: бактерий, гибридного, гибридный, днк, еsснеriснiа, кодирующая, м.д, плазмидная, полипептид, полипептида, продуцент, р199, рекомбинантная, штамм

...кодирует иммуногенный пептид Р 199, который представляет собой белок фактора некроза опухолей человека, слитый через дипептид АзрРго с последовательностями антигенных детерминант подтипа Аг 2 вируса ящура,Для получения бактериального штамма - продуцентов иммуногенного полипептида5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Р 199 плазмидой р 9 ЕМО трансформируюткомпетентные клетки Е. соИ 3620050.Полученный таким образом штамм Е.соИ ВКПМ Вхарактеризуется следующими признаками,Морфологические признаки, Клеткимелкие утолщенной палочковидной формы,грамотрицательные, неспороносные,Культуравьные признаки. Клетки хорошо растут на простых питательных средах.При росте на агаре "Дифко" колонии круглые, гладкие, прижаты, мутные, блестящиесерые, край ровный. При...

Номер патента: 1147030

Опубликовано: 07.05.1992

Авторы: Крутяков, Махно, Шевелев

МПК: C12N 9/00

Метки: бактериофага, днк-полимеразы, еsснеriснiа, клетках

...за 30 мин при перемешивании а магнитной мешалке 100 мл 123 растора стрептомицинсульфата, который готовят непосредственно перед употеблением. Через 45 мин отделяют осаок центрифугированием. В супернатане остается около 952 ДНК-полимеразы актериофага Т 4.Благодаря такому осаждению ДНК трептомицинсульфатом отпала необхо 511470Вследствие вышеуказанных причинотпадает необходимость в проведенииавтолиза (упрощается процесс), а так"же значительно увеличивается выходцелевого продукта с более высокой5удельной активностью.Кроме того, предложение изменитьпоследовательность хроматографической очистки; сйачала очищать от нукФлеиновых кислот, затем от белкаобеспечивает повышение выхода целевого продукта. Это объясняется.тем,что удается...

Номер патента: 1742322

Опубликовано: 23.06.1992

Авторы: Алешукина, Воронов, Езепчук, Мартыненко

МПК: A61K 39/108, C12N 1/20

Метки: бактерий, еsснеriснiа, продуцент, термолабильного, штамм, энтеротоксина

...40 45 Изобретение иллюстрируется следующими примерами,П р и м е р 1, Для продукции термолабильного энтеротоксина применяют питательную среду следующего состава, мл: Мясо-пептонныйбульон 1000 мл Глюкоза 40%-ныйводный раствор 6,25 мл Линкомицин 30 оь-ныйводный раствор 0,33 - 0,26 мл Комплекс микроэлементов 1,0 м - 0,5 мл Способ приготовления среды: к стерильному мясо-пептонному бульону асептично добавляют раствор глюкозы,простерилизованный на водяной бане в течение 30 мин, линкомицин (для усиления токсинопродукции) и смесь микроэлеменводы растворяют навеску следующих реактивое: 0,5 г МпО 2, 0,5 г РеС 1 э, 5,0 г М 9304 и после полного растворения реактивов обьем доводят до 100 мл дистиллированной водой).Биомассу культивируют 18 - 24 ч в...