Кюдулене

Номер патента: 1698289

Опубликовано: 15.12.1991

Авторы: Битинайте, Буткус, Вайткявичюс, Кюдулене, Пятрушите, Янулайтис

МПК: C12N 9/22

Метки: выделения, класса, рестриктаз

...100 В. Окрашенные этидийбромидом (1 мкг/мл) гели просматривают вУФ-свете, 10 20 зуют в течение 16 ч против 2 л буфера А,30 содержащего 0,1 М йаС 1, ростью 20 мл/ч наносят на колонку (1,5 х 35 40 50 55 За условную единицу активности принимается то количество фермента, которое в оптимальных условиях за 1 ч полностью расщепляет 1 мкг ДРК фаза А,Все операции по выделению и очистке ферментов проводят при +4 С,Для выделения рестриктаз ХЬа 1,йо 11, Есо 147используют биомассы клеток Хапйопопаз Ьабг 1, йосагса оОтЫ 1 зсач 1 агшп и ЕзсЬег 1 сЫа со 11 ВР 147 соответственно,Разрушение клеток: 20 г биомассы клеток суспендируют в 40 мл буфера А, содержащего 0,1 М йаО, обрабатывают ультразвуком на дезинтеграторе мощностью 100 Ю в течение 7 мин...

Номер патента: 1659481

Опубликовано: 30.06.1991

Авторы: Глемжа, Кюдулене, Палубинскас, Шпокаускас, Янюнайте

МПК: C12N 1/20, C12N 9/16

Метки: бактерий, еsснеriснiа, неорганической, пирофосфатазы, продуцент, штамм

...кишечная палочка течение 1 ч, а при течение 15 мин.подвижные, катааживающие глюкосбраживает, соИ6 88 хранится оем вазелинового ие 1 года. П р и м е р. Культуру Е.со сервированную в столбике М вазелинового масла, для ожив вают на стерильные чашки Пе ванным рыбным гидра1659481 П о ент Показатели П е агаемый штамм Известный штамм 4 - 6 ч (до конца логарифмической фазы) 8,0-9,0Стационарная фаза Продолжительность культивирования, ч Удельная пирофосфатазная активность, ед/мг белка Общая активность на 1000 мл культуральной жи кости,е4,0 1500-1800 Данные отсутствуют Составитель И. ЧаплйнаРедактор М, Петрова Техред М.Моргентал Корректор Т. Малец Заказ 1821 Тираж 376 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ...

Номер патента: 1631081

Опубликовано: 28.02.1991

Авторы: Буткус, Кюдулене, Манелене, Пятрушите, Степонавичене, Янулайтис

МПК: C12N 1/20, C12N 9/14

Метки: бактерий, еsснеriснiа, продуцент, рестриктазы, штамм

...мМ КаС 1 5 мМ МяС 1., 10 мМ 2-меркаптоэтанол, 100 мкг/мл альбуминабычьей сыворотки, 2 мкг ДНК фага 9в 40 мкл смеси и 1 мкл фермента, Реакцию проводят при 37 С 10 мин, Электорофорез проводят в 0,1 М натрийборатном буфере (рН 8,2) 2 мМ трилон Б,в течение 1,5 ч при напряжении 100 Ви силе тока 100 мА. Окрашенные этидийбромидом (1 мкг/мл) гели просматривают в УФ-свете,За условную единицу принимаетсято количество фермента, которое воптимальных условиях за 1 ч полностьюрасщепляют 1 мкг ДНК фага Я Все операции по выделению и очистке фермента проводят при +4 С.10 г влажной биомассы суспендируют в 20 мл буфера А (10 мМ трис-НС 1-буфер, рН 7,8, содержащий 10 мМ 2-меркаптоэтанола), озвучивают на дезинтеграторе, В полученный бесклеточный...

Номер патента: 1618760

Опубликовано: 07.01.1991

Авторы: Буткус, Вайткявичюс, Кундротене, Кюдулене, Науряцкене, Падягимене, Янулайтис

МПК: C12N 1/20, C12N 9/14

Метки: coli-продуцент, бактерий, еsснеriснiа, рестриктазы, со130, штамм

...волны540 нм составляет 6,0 о,е. Полученныйинокулят засевают в лабораторныйферментер "Биолайит", содержащий 10 лсреды Р 2,Культуру ЕзсЬег 1 сЬ 1 а со 11 КР 1, 130выращивают при 37 С, рН 7,0, со ско-ростью перемешивания в первый часкультивирования 200 об/мин и далеедо 400 об/мин, а также подачей стериального воздуха 4 л/мин в первыйчас роста с постепенным увеличениемдо 7 л/мин на третьем часу роста .Заданный рН во время Аерментацииподдерживают добавлением в среду 1 МортоАосАорной кислоты, Во.время культивирования периодически отбираютпробы и измеряют оптическую плотностьсуспензии клеток, Культивирование штамма проводят до поздней логариАмической Фазы роста - оптическая плотность суспензии клеток составляет3,7 о.е. (длина волны 540 нм,...

Номер патента: 1576565

Опубликовано: 07.07.1990

Авторы: Битинайте, Буткус, Горбачев, Грубер, Кюдулене, Лазарявичюте, Лаучис, Падегимене, Поляченко, Янулайтис

МПК: C12N 9/22

Метки: cgc=3, нуклеотидов, последовательность, расщепляющей, эндонуклеазы-рестриктазы

...150 об/мин и далее до 250 об/мин, а также подачей стерильного воздуха 3 л/мин в первый, час роста культуры, с постепенным увеличением до 5 л/мин на 6-м часу1576565 25 роста. Заданный рН во время выращивания культуры поддерживают добавлением насыщенного раствора бикарбонатанатрия,Во время культивирования периоди 5чески отбирают пробы и измеряют оптическую плотность суспензии клеток,Культивирование штамма проводят допоздней логарифмической фазы ростаоптическая плотность суспензии клетоксоставляет 2,2-2,5 о.е. (длина волны540 нм).Культуральную жидкость охлаждаютдо 4"С и центрифугируют на проточнойцентрифуге типа ЦЕПА при 2,5 10 об/минПолученную биомассу хранят при -20 С,Выход сырой биомассы 2,5-3,0 г/л культуральной жидкости.При...

Номер патента: 1479507

Опубликовано: 15.05.1989

Авторы: Грубер, Кюдулене, Мельникова, Поляченко, Раскин, Смирнова

МПК: C12N 1/20

Метки: бактерий, наеморнilus, питательная, рестриктирующих, рода, среда, эндонуклеаз

...чем в10 раз.Изменение содержания компонентовиспользуемой среды по сравнению соптимальным вариантом как в сторонууменьшения, так и увеличения, приводит к снижению выхода биомассы.Данные представлены в табл. 3.В табл. 4 приведены данные, характеризующие ростовые свойства предлагаемой питательной среды в зависимости от величины навесок используемых ингредиентов и содержание ферментов рестрикции в полученных на этихсредах культурах штамма-продуцентаН, пГ 1 цепкае Кс Б. Среда, приготовленная по примеру 1, являетсяоптимальным вариантом и обеспечиваетне только максимальную продуктивностьпо выходу биомассы, но также и максимальную Ферментную активность культуры продуцента,1479507 15 Таблица 1 Питательная среда Показатели качества сред...

Номер патента: 1458388

Опубликовано: 15.02.1989

Авторы: Битинайте, Буткус, Горбачев, Грубер, Кюдулене, Лазарявичюте, Лаучис, Манялене, Поляченко, Янулайтис

МПК: C12N 9/22

Метки: catg-3, gpucgpyc-3, нуклеотидов, обладающих, последовательности, расщеплять, способностью, узнавать, эндонуклеаз-рестриктаз

...буфером В, содержащим 0,1 М ИаС 1. Колонку промывают 150 мл того же буфераи элюируют линейным градиентом ИаС 1 от 0,1 до 1,0 М в 500 мл буфера В. Отдельно собирают фракции, элюируемые при 0,25-0,36 М НаС 1, содержащиеосновную часть активности рестриктазы Нхп 1 1, и фракции, элюируемыепри 0,58-0,7 М, содержащие активностьрестриктазы Н 1.п 1 11. Далее очисткурестриктаз Нп 1 1 и Нп 1 11 провоАктивность рестриктаз тестируют методом гидролиза ДНК фага лямбда с последующим . разделением полученных фрагментов электрофорезом в агарозном геле. Реакционная смесь для гидролиза ДНК фага лямбда рестриктазой Ндп 1 1 содержит 10 мМ трис-НС 1 рН 8,5, 25 мМ НаС 1, 5 мМ МяС 1 100 мкг/мл альбумина бычьей сыворотки, 2 мкг ДНК фага лямбда в 40 мкл...