Пятрушите

Номер патента: 1698289

Опубликовано: 15.12.1991

Авторы: Битинайте, Буткус, Вайткявичюс, Кюдулене, Пятрушите, Янулайтис

МПК: C12N 9/22

Метки: выделения, класса, рестриктаз

...100 В. Окрашенные этидийбромидом (1 мкг/мл) гели просматривают вУФ-свете, 10 20 зуют в течение 16 ч против 2 л буфера А,30 содержащего 0,1 М йаС 1, ростью 20 мл/ч наносят на колонку (1,5 х 35 40 50 55 За условную единицу активности принимается то количество фермента, которое в оптимальных условиях за 1 ч полностью расщепляет 1 мкг ДРК фаза А,Все операции по выделению и очистке ферментов проводят при +4 С,Для выделения рестриктаз ХЬа 1,йо 11, Есо 147используют биомассы клеток Хапйопопаз Ьабг 1, йосагса оОтЫ 1 зсач 1 агшп и ЕзсЬег 1 сЫа со 11 ВР 147 соответственно,Разрушение клеток: 20 г биомассы клеток суспендируют в 40 мл буфера А, содержащего 0,1 М йаО, обрабатывают ультразвуком на дезинтеграторе мощностью 100 Ю в течение 7 мин...

Номер патента: 1631081

Опубликовано: 28.02.1991

Авторы: Буткус, Кюдулене, Манелене, Пятрушите, Степонавичене, Янулайтис

МПК: C12N 1/20, C12N 9/14

Метки: бактерий, еsснеriснiа, продуцент, рестриктазы, штамм

...мМ КаС 1 5 мМ МяС 1., 10 мМ 2-меркаптоэтанол, 100 мкг/мл альбуминабычьей сыворотки, 2 мкг ДНК фага 9в 40 мкл смеси и 1 мкл фермента, Реакцию проводят при 37 С 10 мин, Электорофорез проводят в 0,1 М натрийборатном буфере (рН 8,2) 2 мМ трилон Б,в течение 1,5 ч при напряжении 100 Ви силе тока 100 мА. Окрашенные этидийбромидом (1 мкг/мл) гели просматривают в УФ-свете,За условную единицу принимаетсято количество фермента, которое воптимальных условиях за 1 ч полностьюрасщепляют 1 мкг ДНК фага Я Все операции по выделению и очистке фермента проводят при +4 С.10 г влажной биомассы суспендируют в 20 мл буфера А (10 мМ трис-НС 1-буфер, рН 7,8, содержащий 10 мМ 2-меркаптоэтанола), озвучивают на дезинтеграторе, В полученный бесклеточный...