Патенты с меткой «иммунодефицита»

Номер патента: 1597388

Опубликовано: 07.10.1990

Авторы: Андреева, Мамаева, Плясунова

МПК: C12N 5/00

Метки: вируса, иммунодефицита, культивирования, типа, человека, штамма-продуцента

...После замораживания сыворотку оттаивают и вновьподвергают замораживанию. Цикл замораживание - оттаивание повторяют4 раза, сыворотку отфильтровываютчерез ватно-марлевый фильтр, анализируют на фракционный состав (табл. 1)и подвергают стерилизующей фильтрациичерез мембранные фильтры с диаметромйор 0,22 мкм. Очищенную таким образом сыворотку используют для культивирования клеток - продуцентовВИЧ.П р и м е р 2. Очистку сывороткиКРС проводят аналогично примеру 1, 45но к сыворотке добавляют полиэтиленгликоль до конечной концентрации9%, а цикл замораживания - оттаивания повторяют 3 раза.П р и м е р 3. Культивированиеклеток - продуцентов ВИЧ. Во флакон со средой КРМ 1-1640 ,стерильно после добавления антибиотиков (гентамицин 160 мкг/мп и...

Номер патента: 1597728

Опубликовано: 07.10.1990

Авторы: Анджапаридзе, Венгеров, Грамоткина, Иванов, Маренникова, Мацевич, Окунев, Сазыкин, Северин, Степанова

МПК: G01N 33/535

Метки: антител, вирусу, иммунодефицита, крови, человека

...электропереноса, накладывают на акриламидный гель, в котором проведен электрофорез бел-ков экстракта вирус-продуцирующих клеток, На нитроцеллюлозный фильтр и на обратную сторону акриламидного геля накладывают прокладки из фильтровальной бумаги, смоченные буфером для электропереноса. Полученный блок акриламидный. гель - нитроцеллюлозный фильтр - прокладки помещают в прибор для электропереноса, заполненный буфером для электропереноса. 97728 6Электроперенос осуществляетсяпри напряжении 100 В 2 ч при охлаждении прибора.1.4. Идентификация белков ВИЧ нанитроцеллюлозном фильтре.Для определения места расположения маркерных белков различных молекулярных масс после электропереносабелков нитроцеллюлозный фильтр окрашивают 30 мин 17-ным...

Номер патента: 1612264

Опубликовано: 07.12.1990

Авторы: Иванов, Кожич, Суворова, Чикин

МПК: C07K 1/13, C07K 7/00

Метки: антител, биотином, вирусу, иммунодефицита, иммуноферментного, меченный, пептид, синтетический, твердофазного, человека

...в системе 0,50 ТФУ в воде -СНзОН при скорости 4 мл/мин и измененииградиента СНзОН от 20 до 50% за 3 мин и от 50до 700 за 15 мин, Собирают пик, выходящийна 17 мин при детекции на 280 нм. После лио 30 филизации получают 7,6 мг чистого пептида.Чистоту и индивидуальность пептидаподтверждают аминокислотным анализом(табл,1), масс-спектрометрически (табл. М 2) ианалитической ВЭЖХ в условиях выделения пеп 35 тида на колонке ОЬз-ЯрЬеге Осу 4,6 х 250 мм("ДиРопт", США), время выхода 17,2 мин, Приэтом, кроме предлагаемого пептида (1), используют другие синтетические пептиды из последовательности белка цр 41 вируса ВИЧформул40 608Н 2 М-Тгр 61 уСузЯег 6 у уз.ец ПеСузТпг623ТЬгАаЧа 1 Р гоТгрАз и-ОН (1)60745 Н 2 М-ЙеТгр 61 уСузЯег 61 у 1.узы еи 11...

Номер патента: 1687035

Опубликовано: 23.10.1991

Автор: Вилльям

МПК: G01N 33/48

Метки: аналогичную, вируса, дающего, другого, иммунодефицита, картину, клиническую, обнаружения, присутствия, человека

...активной РН-азы , дающей специфичные продукты расщепления несмотря на то, что 2-5 А присутствует в концентрации5 нМ.В экстрактах МКПК, инфицированных СЗЛом, РСКом и СПИДом больных, присутствуют биологически активные 2-5 А. Почему же неактивна РН-аза , Для определения того, является ли отсутствие активности РН- азыследствием нефункциональности РН- азы 1 или следствием присутствия ингибитора активности РН-азы , проведены следующие опыты со смешиванием. Экстракты клеток929, содержащие функциональную РН-азу, смешивают и совместно инкубируют с экстрактами МКПК больных СЗЛом, РСКом и СПИДом, Специфичных продуктов расщепления для РН-азы . не обнаружено,Эндогенные 2-5 А, ответственные за активацию РН-азы Е, дают по меньшей мере четырехкратное...

Номер патента: 1708848

Опубликовано: 30.01.1992

Авторы: Бобков, Бобкова, Гараев, Казеннова, Колот

МПК: C12N 15/48, C12N 15/70

Метки: pga9, антигенными, бактерий, белка,обладающего, вируса, днк, еsснеriснiа, иммунодефицита, кодирующая, конструирования, первого, плазмидная, продуцент, рекомбинантная, свойствами, синтез, типа, человека, штамм

...ген устойчивости к канамицину, и раг-участок СоА выделяют из плазмиды рАК 25. Для этого рАК 25 подвергают гидролизу рестриктазой Е,сой 1, ин кубируя 20 мкг ДН К рАК 25 с 20 ед, 10 фермента в присутствии 50 мМ МаС 3, 10 мММцС 32 10 мМ трис-НС 3, рН 7,5, 1 мМ ДТТ в течение 2 ч г.ри 37 С с последующим прогреванием при 75 С в течение 15 мии. Далее гидрслизовзииую ДНК разделяют в 0,8% 15 дгзрозном геле и выделяют нужный фрагмент ДНК, используя бумагу ДЕ 81.В качестве вектора используют плазмиду р 630, полученную следующим образом.Клетки бактерий Е.со 3 НВ 101, содержа щие плазмидную ДНК рОВ 290 выращиваютв 200 мл бульона до титра 1 х 10 клеток/мл. Клетки осаждают центрифугирсванием(5000 ц,5 мии,4 С) и ресуспендируют в 35 мл раствора,...

Номер патента: 1717631

Опубликовано: 07.03.1992

Авторы: Киселев, Куляндин, Мамаева, Плясунова, Покровский

МПК: A61K 39/21, C12N 7/00

Метки: антигена, вируса, иммунодефицита, типа, человека

...10 клеток в стериль 8ные роллерные бутыли, В каждую бутыль доливают ростовую питательную среду по300 + 10 мл, Питательную среду для культивирования готовят следующим образом, К 415 + 2 О мл питательной среды ЯРМ 1-1640приливают 75 й 10 мл сыворотки плода коровы, 10+ 1 мл 3%-ного раствора й-глутамина, 1,0+ 0,1 мл 30-ного раствора линкомицина (или канамицина 100 мкг/мл), 8,0 + 10 мг гентамицина. Засеянные роллерные бутыли инкубируют при 36 - 37 С и частоте вращения 1 - 2 об/мин в течение 4-5 сут,По окончании инкубации контролирую гуровень вируспродукции иммуноферментным методом. Подготовку образцов для ИЭА осуществляют, инактивируя ВИЧдо бавлением к пробе твинадо конечнойконцентрации 0,1% с последующей инкубэцией при 6 + 2 С не менее 24...

Номер патента: 1747987

Опубликовано: 15.07.1992

Автор: Браженко

МПК: G01N 1/28

Метки: активным, больных, вторичного, дыхания, иммунодефицита, органов, туберкулезом

...1 100% =55что соответствует иммунодефициту 2 стни,П р и м е р 2. Больной Бпоступил налечение 34.10,1988 г. с диагнозом: фиброэно-кавернозный туберкулез в фазе инфильтрации и обсеменения, БК+(плюс),При исследовании Т-лимфоц 9 итов4.10,88 г, количество их было 0,71 10 /л. Вклиническом анализе крви от 4.10,1988 г,лейкоцитов было 10,7 10 /л, а лимфоцитов14 О/0, (в абсолютных числах 1,49 10 /л)ЛЛИ = 7,1 (10:14), что при таком количествелимфоцитов соответствует иммунодефициту 3 степени. Иммунологическим исследованием установлено, чтоСИД-1 100% =98,3%.тствует иммунодефициту 3 степе1747987 лимфоцитов не выявляется иммунодефицит. Это жв и подтверждено приведенным иммунологияеским исследованием СИД1100% =-6,3%,формула изобретения СИД " 1 100% -...

Номер патента: 1751209

Опубликовано: 30.07.1992

Авторы: Берзин, Борисова, Грен, Дрейлиня, Лосева, Лэтч, Меринг, Озолс, Осе, Петцольд, Порстман, Пумпен, Розенталь, Ульрих, Цибиногин

МПК: C12N 15/33, C12N 15/51, C12N 15/70 ...

Метки: 24-5, бактерий, белка, белок, вируса, гепатита, днк, еsснеriснiа, иммунодефицита, кодирующая, кор-ант, кор-антигена, оболочки, плазмидная, продуцент, рекомбинантная, слитого, слитый, человека, штамм

...клеток к реакци-онной смеси добавляют 100 мкл клеток Е.соП ЯВ 1, обработанных 0,1 М СаС 12 (конечная концентрация - 5 х 10 клеток/мл).9Отбор клоновосуществляют путем рестрикционного анализа плазмидной ДНК,выделенной экспресс-методом. Плаэмида сожидаембй рестрикционной картой получает наименование рНИ 24-5,2. Штамм-продуцент Е. соИ К 802 (рН24 - 5),Штамм-продуцейт получают трансформацией клеток Е. со 11 К 802 рекомбинантнойплазмидной рНИ 24-5, Клетки выращиваютдо оптической плотности ОП 65 о 4-5 в солевой среде М 9 с добавкой, г/л: каэаминовыекислоты 10; глюкоза 2; ампициллин. 0,02,Клетки собирают центрифугированием и лизируют в четырехкратном обьеме буфера,содержащего 0,05 М трис-НС 1, рН 8,0; 0,15М ИаС 1, 0,1% тритон Х 100,...

Номер патента: 1751210

Опубликовано: 30.07.1992

Авторы: Берзин, Борисова, Грен, Дрейлиня, Лосева, Лэтч, Меринг, Озолс, Осе, Петцольд, Порстманн, Пумпен, Пушко, Розенталь, Ульрих, Цибиногин

МПК: C12N 15/48, C12N 15/51, C12N 5/10 ...

Метки: 41-22, антиген, бакт, белка, вируса, гепатита, днк, иммунодефицита, кодирующая, конструирования, кор, плазмидная, поверхности, рекомбинантная, фрагментом, человека, штамм, экспонированным

...С 1 4 В (2,1 х 75 см), уравновешенную тем же буфером, но без тритона Х. Фракции, проявляющие РВсАд - активность, собирают и используют либо непосредственно, либо после концентрирования переосаждением 50-ным сульфатом аммония.3. Определение НВсАд - активности Методом РИД,Титр НВсАд определяют с помощью рэдиал ьной иммунодиффузии (Р ИД), Дл я этого готовят двукратные серийные разведения клеточного лизата и титруют против анти-НВс антител человека, В качестве 510 стандарта используют очищенный НВсАд, полученный из рекомбинантных бактерий (1 мг/мл). Результаты титрования методом х 0,75 мм, Злектрофорез проводят в теЗО чение 15 ч при силе тока 7 мА. После злектрофореэа белки переносят нэ нитроцеллюлозные фильтры, инкубируют с моноклональными...

Номер патента: 1761808

Опубликовано: 15.09.1992

Авторы: Абрамов, Галев, Гузаев, Завьялов, Смирнов, Чернов

МПК: C12N 15/48, C12P 19/34, C12Q 1/68 ...

Метки: белка, вируса, днк, др120, иммунодефицита, кодирующий, лимфоцитов, ответственную, поверхностного, протеином, связывание, сд4т, фрагмент, часть, человека

...65 с. В качестве мономеров используют ч-ацил-О-диметокситритип-О-цианоэтил)- й,ч-диизопропиламидофосфит)-2 -дезокси 1761808рибонуклеозиды. причем если рибонуклеозид = аденозин или цитидин, то ацил = бензоил, если рибонуклеозид = гуанозин, то ацил = изобутирил, если рибонуклеозид = тимидин, то ацил отсутствует, В качестве активатора межнуклеотидной концентрации используют тетразол, детритилирующего агента 20 -ный раствор трихлоруксусной кислоты в дихлорметане, окислителя 0,1 М раствор иода в смеси пиридин-вода-тетрагидрофуран 2:20:75, кэпирующих реагентов: равные обьемы реагента И (уксусный ангидрид,6-лутидин-тет рагидрофуран 10:10;80) и реагента В (1-метилимидазол-тетрагидрофуран 16:84), растворителя для промывки и конденсации -...

Номер патента: 1768637

Опубликовано: 15.10.1992

Авторы: Гущина, Денисова, Злобин, Кальнина, Клещинова, Клименко, Корнеева, Львов, Носик, Покровский, Юрин

МПК: C12N 7/00

Метки: 1-типа, вируса, диагностических, иммунодефицита, препаратов, приготовления, человека, штамм

...лимфоцитов больной с лимфоцитами крови здорового донора, стимулированных митогеном, а также счеловеческими перевиваемыми клеточнымилиниями.Репродукция. Штамм вируса реплицируется в лимфоцитах периферической крови, лимфобластоидных клеточных культурах МТ, СЕМ, акогкат 1 а 3, ч. Репродукция вируса сопровождалась характерныи цитопатическим действием и синцитиеобразованием. Инфекционйый титр вируса определяли по 50 тканевой цитопатической дозе вируса на модели вышеуказанных клеточных культур (табл. 1).Морфология, Методом электронной Микроскопии выявлены вирионы размером 100-120 нм с типичной для вирусов иммунодефицита человека 1 типа морфологией.Анализ антигенов,Иммунофлюоресценция. Исследование методом непрямой...

Номер патента: 1802329

Опубликовано: 15.03.1993

Авторы: Гользанд, Попов, Попова

МПК: G01N 33/53

Метки: вторичного, детей, диагностики, иммунодефицита, инфекции, нв-вирусной, хронической

...составляет 40 ч,Одновременно в реакции могут быть исследованы 32 пробы сывороток крови. Ниже подробно излагается методика определения уровня а 1 -тимозина с помощью тест- Системы методом конкурентного ИФА.Порядок работы.Подготовка необходимых реактивов и г риборов;фосфатный буфер или раствор Хенкса, Ма-фосфоцитратный буфер, ортофенилендиамин,30%-ный раствор перекиси водородэ, твин, кроличьи антитела в разв. 1:1, (ф -тимозин, коньюгат антикроличьих антител с пероксидазой хрена, пробы сывороток для исследования;рН-метр, термостэт, холодильник, автол 1 атическая пипетка-дозатор с наконечникаМи, высокосорбционные 96-луночные пластины фирмы "МипК", "тЮечтеМ", планеты для иммунологических исследованийедполимер",мультискан,Постановка...

Номер патента: 1804848

Опубликовано: 30.03.1993

Авторы: Балтина, Муринов, Плясунова, Покровский, Толстиков

МПК: A61K 31/705

Метки: вируса, иммунодефицита, ингибитор, размножения, человека

...лунку 96-луночного культурального планшета. Затем вконтрольные лунки вносят по 20 мкл ростовой питательной среды, а е остальные лункивносят по. 20 мкл раствора азидотими- .дина в питательной среде с концентрацией100 мкг/мл до конечной концентрации азидотимидина в культуральной среде 10 мкг/мл.Далее поступают так же, как описано впримере 1. Результаты приведены в таблице 1,П р и м е р 4. Изучение влияния азидотимидина на репродукцию ВИЧв культуреклеток ЭВК-ИРА/3.Суспензию хронически инфицированных ВИЧклеток ЭВК-ИРА/3 с концентрацией 0,6. х 10 клеток/мл в питательнойсреде ВРМ 1-1640, содержащей 15 ф сыворотки коровы, 0,060 глутэминэ, антибио- .тики, вносят автоматической пипеткой по180 мкл в каждую лунку 96-луночного культурального...

Номер патента: 1816797

Опубликовано: 23.05.1993

Авторы: Бобков, Гараев, Шуленин

МПК: C12N 1/21, C12N 15/48

Метки: антигенными, бактерий, белка,обладающего, вируса, гибридного, днк, еsснеriснiа, иммунодефицита, конструирования, определяющая, плазмидная, продуцент, рекомбинантная, рр1, свойствами, синтез, человека, штамм

...ДНК проводят методом равновесного центрифугирования в градиенте плотности СзС 1 с бромистым этидием (1 мкг/мл),Для получения плазмиды рР 1 фрагмент Н 1 пб 111 - Е.сой 1 плазмиды рйТЗ переклонируют в вектор рцй 290 по сайту Нпб 111, С этой целью 10 мкг ДНК плазмиды инкубируют с 30 ед. эндонуклеазы Е.соЯ в буфере, содержащем 100 мМ йаС 1, 10 тМ МдМ 12, 10 аМ трис-НС 1 рН 7,5, 1 щМ ДТТ, в течение 1 ч при 37 С. Затем добавляют 1/10 объема ЗМ ацетата йэ и осаждают ДНК 2,5 объемами этилового спирта на ценрифуге (10000 д, 10 мин, 4 С). Осадок высушивают и растворяют в буфере 10 мМ трис-НС 1 рН 8,0 и 5 мМ ЭДТА. Полученный препарат лигируют с 50 мМ адаптора Е.сой-Нпд 11 с помощью ДНК-лигазы фага Т 4 (30000 единиц/мл),из расчета 1 мкл...

Номер патента: 1836101

Опубликовано: 23.08.1993

Автор: Вилльям

МПК: A61K 39/12

Метки: вируса, выявления, животного, иммунодефицита, человека, человеческого

...РНазы 1, Для достижения этого мною использован новый чувствительный метод, 25 30 35 4045 50 55 5101520 описанный ниже, позволяющий определять активированную РНазув экстрактах МКПК, выделенных всего лишь из одного миллилитра периферийной крови, и этот метод основан на специфичности расщепления 2 - 5 А-активированной РНазы на рРНК.Вследствиетого, что рРНК присутствует в МКПК ниже уровня детектирования, экстракты клеток Н 929 (субклон штамма клеток929 с дефицитом РНазы 1) используют в качестве источника рРНК, Клетки Н 929 депозитированы в Американской Коллекции типовых культур (Роквиль, шт, Мэриленд, США) под регистрационным номером согласно Будапештскому Соглашению. Использованием этого испытания мне удалось показать, что...

Номер патента: 2004249

Опубликовано: 15.12.1993

Авторы: Бондаренко, Кожемякин

МПК: A61K 39/00

Метки: активности, вируса, иммунодефицита, ингибирования, человека

...веней ВИЧ. Без воздействия на эти фер- крови человека, Элюцию антител с ДНК-сементные системы (внутриядерные фарозы осуществляют 0,1 М ацегатным бу 2004249фером, рН 5,0, Из полученного элюата гото- параметра. отражающего жизнеспособностьвят рабочий раствор антител в концентра- клеток,выбираютотношениеОП 540 висследуции 10 мкг/мл. емой пробе к ОП 540 в пробе клеток. не инфиВ лунку 24-луночного планшета вносятцированных ВИЧ, выраженное в процентах,1 мл суспензии активированных лймфоци Результаты исследования приведены етов крови человека (5 10 клеток/мл) и су- табл. 1, 2, 3.4пернатант культузоальной жидкости, Приведенные данные свидетельствуютсодержащий ВИЧ (10 частиц/мл). После 1 ч о повышении жизнеспособности клеток иинкубации(37...

Номер патента: 1554370

Опубликовано: 30.01.1994

Авторы: Горчакова, Карамов, Мамаева, Плясунова, Покровский, Руднева, Черных

МПК: C12N 5/08

Метки: вируса, иммунодефицита, клеток, моноцитов, перевиваемых, продуцент, типа, человека, штамм

Штамм перевиваемых клеток моноцитов человека ГКВ N4005 - продуцент вируса иммунодефицита человека 1 типа.

Номер патента: 1766070

Опубликовано: 30.01.1994

Авторы: Дедкова, Киприянов, Офицеров, Серпинский

МПК: C12N 1/21, C12N 15/48

Метки: escherichia, бактерий, белков, вируса, днк, иммунодефицита, кодирующая, оболочки, плазмидная, продуцент, рекомбинантная, типа, фрагментов, фрагменты, человека, штамм

1. Рекомбинантная плазмидная ДНК pUE 41, кодирующая фрагменты белков оболочки gp120 и gp41 вируса иммунодефицита человека типа 1 размером 5700 н. п. и мол. м. 3,7, содержащая- Bam HI - Hind III - фрагмент плазмидной ДНК pUR292 размером 5180 н. п. ;- Bgl II - Hind III - фрагмент плазмидной ДНК pBH 10 размером 520 н. п. ;- уникальный сайт рестрикции Hind III;- гены и генетические маркеры;- ген bla - обеспечивающий синтез -лактамазы;- ген lacz - обеспечивающий синтез -галактозидазы;- фрагмент гена env ВИЧ - 1, обеспечивающий синтез полипептида, обладающего антигенным...

Номер патента: 1797350

Опубликовано: 10.03.1996

Авторы: Еремин, Квачева, Полещук, Попов, Рытик

МПК: G01N 33/53

Метки: вируса, иммунодефицита, обнаружения, человека

...800-50 тыс, клеток на флакон.Суспензионную культуру Т-лимфобластов,продуцирующую ВИЧи культуру, не про-дуцирующую вирус, в объеме 3 мл помеща 45 ют в отдельные пробирки и центрифугируютпри 1,5 тыс оборотах в течение 10 мин, Надосадок удаляют. Используя камеру Горячева, подсчитывают количество клеток восадке и разводят их ростовой средой до50 концентрации 1 млн. 200 тыс. кл/мл, Из флаконов с культурами астроцитов удаляют ростовую среду и в каждый из первых 6флаконов вносят по 2 мл приготовленнойсуспензии Т-лимфобластов, продуцирую 55 щих ВИЧ (по 2 млн. 400 тыс, клеток на флакон). Помещают флаконы на 15 мин втермостат при 37"С с 5 С 02, затем добавляют в каждый флаконы по 3 мл ростовойсреды и вновь помещают в термостат. Через24 ч из...