Патенты с меткой «клонирования»

Номер патента: 1275043

Опубликовано: 07.12.1986

Авторы: Баев, Семенова, Солонин, Таняшин

МПК: C12N 15/00

Метки: вектор, генов, клонирования, конструирования, обеспечивающий, регулируемую, транскрипцию, чужеродных

...в течение 10 мин во льду добавляют 50 мкл пан - креатической РНКазы (1 мг/мл), предварительно прогретой при 100 С в течение 5 мин, и 0,5 мл "лизирующей" смеси (0,3 мл 1 ОЕ тритон-Х, 7,5 мл М ЭДТА рН 8,0, 1,5 мл 1 М трис - НСЕ рН 8,0, 0,7 мл Н О). После инкубации2при постоянном помешивании стеклянной палочкой во льду в течение 10 мин получают осветленный лизат центрифугированием пробы в течение 1 ч при 17000 об/мин (КапегзЫ 2.). Полученный лизат разбавляют водой вдвое, обрабатывают равным объемом фенола, насыщенного 50 мМ тРис -НС 1, рН 8,0, при комнатной температуре в течение 10 мин, водную фазу собирают центриФугированием при 6000 об/мин. Остав - шийся в пробе Фенол удаляют эфирной экстракцией, а ДНК переосаждают 707. - ным спиртом.5...

Номер патента: 1476896

Опубликовано: 23.09.1990

Авторы: Добрица, Шевченко

МПК: C12N 15/00

Метки: bacillus, polya15, spp, векторная, генов, днк, еsснеriснiа, клетках, клонирования, конструирования, плазмидная, предназначенная, чужеродных

...0 С. На следую- тов, Зля трансформации берут в рабощнй день О, мл Са ф -клеток смешиваютту 0,5 мл суспензин полученных прото"с 0,05 мп ДНК (10 мкг/мп), инкубируют пластов, смешивают с ДНК, растворен-.1 ч при температуре ОС и 5 мин ной в ЯММР буфере,н добавляют 1,5 мппри температуре 42 С и затем перено- полиэтиленгликоля (ПЭГ). После разсят в пробирку с 1,5 мп среды ЬВ. 1 О бавления в 5 мп БММР буфера клеткиПосле 2 ч инкубации в этой среде при центрифугируют и ресуспендируют в37 С со встряхиванием клетки высева мл ЯММР буфера. Через 1,5 ч суспенют на чашки с индикаторными (Ьас) зию высевают на чашки Петри со средойсредами, содержащими тетрациклин ДМЗ. Чашки инкубируют при температурео(15 мкг/мл). В качестве индикаторных 5 37 С в течение 2...

Номер патента: 1615180

Опубликовано: 23.12.1990

Авторы: Йомантас, Козлов, Народицкая, Стойнова, Уланова

МПК: C12N 15/75

Метки: бациллах, вектор, днк, клонирования, предназначенный, рва, фрагментов

...В, яиЬТ 111 я 83112 позволяют выявить плазмиду рВА 4,5 мкг ДНК рВА 4 обрабатывают рестриктазой ЕсоКв следующих ус"ловиях: 100 мМ тряс-НС 1, рН 7,5,10 мМ ИяС 1 р, 6 мМ 2-8-меркаптаэтанола, 50 мМ ИаС 1 р 0,5 ед, активности ЕсоК 1. Объем инкубационной5 16 смеси 40 мкл, Инкубацию проводят при 3 С в течение 20 мин, Реакцию останавливают добавлением 100 мкл 96%- ного этанола. Затем ДНК перерастворяют в 20 мкл буфера ТЕ (10 мМ трис-НС 1, рН 8,0, 0,1 мМ ЭДТА), вносят смесь дезокситрифосфатов до конечной концентрации 0,25 мМ каждого. Объем доводят до 30 мкл буфером ТЕ и вносят 2 ед, активности кленовского фрагмента ДНК-полимеразы Е.со 1 д, Реакцию достройки липких концов проводят при комнатной температуре 30 мин и останавливают добавлением...

Номер патента: 1650694

Опубликовано: 23.05.1991

Автор: Катковский

МПК: C12M 3/00

Метки: животных, клеток, клонирования

...производят следующим образом: за 24 ч до введения в ампулу 3 клонируемой клети в сосуд Карреля высевают клетки для получения фидерного слоя. Клетку для клонирования с помощью микроманипулятора помещают в ампулу 3, заполненную ростовой средой, Далее устройство собирают, как описано выше, Когда трубку 4 с ампулой 3 вставляют в сосуд Карреля, в котором к этому времени фидерные клетки находятся в логарифмической фазе роста, клонируемая клетка эа счет сообщения ростовой среды через фильтр 5 в каждый момент времени получает ростовые факторы фидерных клеток, рН среды в случае необходимости можно регулировать путем прокачивания через 20 25 30 35 40 45 50 55 фильтры 6, 9 и 10 в патрубках 4, 1, 8 СОэ или02. При достижении фидерными...

Номер патента: 1727817

Опубликовано: 23.04.1992

Авторы: Васин, Кононенко, Романов

МПК: A61D 19/02

Метки: доимплантационных, животных, клонирования, эмбрионов

...эти углубления соответствуют размерам 150,160 и 170 мк, а для эмбрионов свиней и мелкого рогатого скота - 130,140 и 150 мк. Полусферические углубления расположены в ряд по прямой линии, по которой проходит направляющая бороздка 5, разделяющая полусферические углубления соосно по диаметру каждое на две равные половинки. По бороздке 5 свободно перемещается микроскальпель б, второй конец которого на оси закреплен в микроманипулвторе (не показан ), Полусферические углубления 2-4 могут быть расположены поочередно, но могут быть размещены рядами по нескольку равновеликих полусферических углублений, Капример, ряд мелких полусферических углублений 2, затем ряд средних полусферических углублений 3 и ряд крупных полусферических углублений 4, В...

Номер патента: 1727821

Опубликовано: 23.04.1992

Авторы: Абраскова, Кононенко, Леткевич, Никитин

МПК: A61D 19/04

Метки: доимплантационных, животных, клонирования, микроигла, эмбрионов

...фиг.1 показана микроигла в процессе разделения эмбрионов, вид сбоку; нафиг,2 - то же. вид сверху. 10Микроигла для, клонирования доимплантациофыЯ эмбрионов животных выполнена из стекла и содержит конусовидноеутолщение: 1,.:переходящее в рукоятку-держатель для закрепления в микроманипуляторе, рабочую цилиндрическую часть 2,расположенную между опорным острием 3и конусообразным утолщением 1, причемрабочая цилиндрическая часть 2 составляет1/4 длины микроиглы без держателя, 20Процесс разделения доимплантационных эмбрионов животных осуществляетсяследующим образом,Микроманипулятором подводят рабочую цилиндрическую часть 2 микроиглы к 25середине эмбриона 4, опираясь на острие 3,опускают ее на эмбрион 4 точно по его диаметру, Конусовидное...