Марк-Брус

Номер патента: 1417800

Опубликовано: 15.08.1988

Авторы: Гюнтер, Марк-Брус, Норберт, Петер, Рудольф, Эва

МПК: A61K 38/21

Метки: per-33, днк, зрелый, интерферон, кодирующей, конструирования, плазмидной, рекомбинантной, человека

...тупой конец фрагмента размером 90 Ьр легируют с тупым концом КВБ и получают молекулы, в которых содержат КВБ в направлении ориентации вниз от промотора. После реакции лигазу инактивируют в течение 10 мин при 70 фС, устанавливают концентрацию ТА-буфера и дополнительно переваривают с помощью 200 единиц Ндпй 111 и 10 единиц Есо К 1. 50В образующихся в реакции мульти- мерах наряду с желательной реакцией могут.лигироваться друг с другом как Есо К 1-концы, так и также Нпй 111- концы и снова превращаться в мономеры. Затем пробу разделяют на 6 Е-ном полиакриламидном геле и вырезают из геля промотор-операторный КВБ-фраг мент. размером 100 Ьр, который имеет 0 8Есо К 1- и Нпй 111-концы электрофоретически элюируют, чтобы отделить от избытка...

Номер патента: 1346048

Опубликовано: 15.10.1987

Авторы: Герхард, Гюнтер, Марк-Брус, Петер, Эва

МПК: C12N 15/00

Метки: coli, pbr322, бактерий, вставку, еsснеriснiа, интерферон, клона, кодирующую, плазмидой, рсть, содержащей, трансформированного

...позиции 1 С 12,1 Р 12, Е 52 Е 1. Кпоны Р 1 А 6 и Р 2310 анализируют таким же методом,П р и м е р 6. Поли(А) РНК отделяют от индуцированных и неиндуцированных клеток намальва, денатурируют в результате инкубации в течение 1 ч при 50 С в 1 моль глиоксаля, 50 .-ном диметилсульфоксиде, 10 ммоль буфера фосфата натрия, рН , разделяют на 1,4 -ном плавающем агаре, переносят на нитроцеллюлозный фильтр и гибридизируют с плазмидной ДНК, Р-меченной с помощьв никтрансляции. Плазмидную ДНК, которая произошла от индуцированного гена, гибридизируют вэтой серии опытов только РНК из индуцированных клеток, но не РНК иэ неиндуцированных клеток. Применяемые для гибридизации плазмиды-ДНК являются Р 1 Н 1 (А), Р 1 У 12 (В,1), Р 2 Н 10(С), Р 1 А 6 (Е), Р 2 В 10...