Шмите

Номер патента: 1179659

Опубликовано: 15.11.1994

Авторы: Виестуре, Ежов, Кадомцева, Лузина, Санцевич, Шмите

МПК: C12N 9/00

Метки: активностью, биомассы, днк-лигазной

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОМАССЫ С ДНК-ЛИГАЗНОЙ АКТИВНОСТЬЮ путем культивирования клеток штамма E.coli с гибридной плазмидой, содержащей ген ДНК-лигазы в условиях аэрации, отличающийся тем, что, с целью увеличения выхода ДНК-лигазы, питательная среда содержит однозамещенный фосфорнокислый калий в концентрации 3 - 4,5 г/л и двузамещенный фосфорнокислый натрий в концентрации 16 - 23 г/л при рН 6,9 - 7,1, а концентрацию растворенного кислорода при аэрации создают 20 - 40% от насыщения воздухом в начальный период культивирования и 40 - 60% в конечной стадии культивирования.

Номер патента: 1104156

Опубликовано: 23.07.1984

Авторы: Вина, Дегтева, Королева, Шмите

МПК: C12N 9/00

Метки: 34-продуцент, дезоксирибонуклеат, нуклеотид-гидролазы, рибонуклеат, штамм

...анаэробно - маннит, имеет активность плаэмо 156 2филококков различного происхождения, музейных и свежевьщеленных от людей и сельскохозяйственных животных. Нуклеазную активность определяли в экзопродуктах по методу Кцпгг.Экзопродукты получали по общепринятой методике, выращивая стафилококки по на целлофановых дисках, Активность ДНКазы колебалась в пределах 11,0-399,3 ед/мин/мг белка. Отобрано 16 штаммов с повышенной ДНКазной активностью. В экзопродуктах этих 16-ти культур быпа определена РНКазная активность, которая колебалась от 44,0 до 96,6 ед/мин/мг белка, а также активность загрязняющих ферментов протеазы (24,0-97,6 ед/мин/мг белка) . и щелочной Фосфатазы (1-89 ед/мин/мг белка). Иэ названных штаммов отобрано пять, имеющих...

Номер патента: 1014881

Опубликовано: 30.04.1983

Авторы: Дишлерс, Микельсоне, Ренхофа, Шмите, Шомштейн

МПК: C12N 1/00

Метки: биомассы

...ферментация производится при37+1 ОС в условиях принудительнойаэрации (2 л воздуха на 1 л питательной среды).3) Кнфицирование Е.Со 11 В фагомТ сце 82. Когда плотность культуры достигает З,ЗУ 10 клеток/мл (по калйброКвочной кривой), прекращают аэрирование, добавляют суспензия бактериофага из расчета 2 фаговые частицы на1 клетку бактерии, т.е, б,б 10 БОЕна 1 мл культуральной жидкости. Одновременно добавляют глутатион0,015 г/л,4) Постинфекционное инкубированиепроводятпри рН 7,5-7,6, регулируемое раствором НН ОН и аэрации 2 л воздуха на 1 л питательной среды в теводят культивирование в условиях принудительной аэрации до тех пор, пока плотность культуры достигнет 3,0-3,3 109 клеток/мл культуральной жидкости, и осуществляют инфицирование...

Номер патента: 861399

Опубликовано: 07.09.1981

Авторы: Ансберга, Хейслере, Шмите, Ясюкевича

МПК: C12N 1/08

Метки: биомассы, днк, еsснеriснiа

...А, Ач Корректор Е. Рашко Редактор Г, Бельская РЗаказ 6456/7 Тираж 528ВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж - 35, Раушская наб., д. 4/5 Подписное Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул, Проектная, 4 Очистку фага проводят в 33 мл градиентаСвС (д 1,4; д 1,5; О 1,3), Осадок центрифугируют.Полученную массу фага диализируют 2 раза. по часу против 2 л буфера, содержащего0,05 М йаС 1, 0,01 М трис, рН 7,9, 0,01 МЕДТА - йа. К массе фага прибавляют 3,5 мл10%.ного додецилсульфата натрия. Раствор нагревают до 48 С.Для удаления белка к раствору, содержащему 10фаговый ДНК, прибавляют. фенол. Осадокцентрифугируют, Операцию повторяют, к центрифугату прибавляют равный объем смесихлороформ-изоамиловый...

Номер патента: 834123

Опубликовано: 30.05.1981

Авторы: Ансберга, Витенберга, Хейслере, Шмите

МПК: C12N 1/00

Метки: биомассы, днк, обогащеннойфаговой

...аналогичныпримеру 1, После нагревания культу.оральной жидкости до 44-45 С глюкозудобавляют в количестве 1,0%, а лецитин 0,05%, Далее по примеру 1,Выход биомассымг/мл 5,220 Количество внутриклеточного вегетативного Фага,БОЕ/мг биомассы 2,8 ОфПредлагаемый способ обеспечивает25 получение Фаговой ДНК для нужд молекулярной биологии и исследований вгенной инженерии с высоким выходомбиомассы и целенаправленным накоплением в ней интактной ДНК фага лямбда. 3Глюкозу вводят в питательную средув виде стерильного раствора.Проводят термообработку биомассыпри 44-45 С в течение 2-3 мин с последующим выращиванием на среде, содержащей дополнительно 0,05-0,1% лецитина и 0,5-1,0% глюкозы.Выход биомассымг/мл 4,0-5,2Количество внутриклеточного вегетационного...

Номер патента: 810717

Опубликовано: 07.03.1981

Авторы: Ансберга, Гравите, Хейслере, Шмите

МПК: A61K 38/45

Метки: иммобилизован-ной, полирибонуклеотидфосфорилазы

...13 ы 1 Остцгястся за счет сохранения естественнойцс 1301 яч 11 л ьпой я ктпвпостп фс)мсцта.11 оситсль - гидроокись ал омиция3-Л 1(0 Н ) ., ха ра ктеризуется вь 1 сокой адсорбппоцпой способностью за счет возникцовсцп 51 водородных связей, я тякжс 00:и,ИОй п;Ощад 110 коптяктиру 10 щ 1 й ИОвсрхцостц, что способствует повышении) скорости и эффсктивностп адсорбции,Стаоильпость и устойчиВость с 13 язи ИОсптль-фермент повышается в процессепрс;1 варительпой обработки носителя вВодном растворе. Предварительная активация увеличивает адсорбционную способность гпдроокиси ялк)мипия за счег обраЗОВЯНИ 5 допОлцис,ьцых ВОдОродцых с 1351.зц.Короткий срок иммобилизации (10 мин)прсдотврашаст ицактивацик фермента.ТлИратурз 1 процесса 18- - 20 С также...

Номер патента: 744004

Опубликовано: 30.06.1980

Авторы: Ансберга, Баумане, Расса, Шмите

МПК: A61K 31/787, C07H 21/00

Метки: высокомолекулярных, полинуклеотидов

...30 мин при 6000 об/мини +4 С. Полиадениловую кислоту (поли-А) высаживают из водного слоядвухкратным объемом этилового спиртас кристалликами хлористого натрия.Полученный осадок растворяют в дистиллированной воде. Для освобожденияраствора от низкомолекулярных примесей раствор пропускают через ультрафильтрат (размеры пор 5000-10000 Х),Получают две фракции: низкомолекулярную и высокомолекулярную,Высокомолекулярную фракцию пропускают через колонку с гелем ЕД(размеры колонки 602). Получаютполи-А с мол.весом 70000"100000. Выход 49 мг.Ниэкомолекулярные нуклеотиды (5)используют вновь для синтеза полинуклеотидов. Низкомолекулярную фрак"цйю проЩсвйот через колонку с гелем ЕД(размеры колонки 60 ю 2). Получают непрореагировавший...

Номер патента: 661006

Опубликовано: 05.05.1979

Авторы: Виестуре, Витенберга, Гравите, Шмите

МПК: C12D 13/10

Метки: биомассы, обогащенной, полинуклеотидфосфорилазой

...двухвалецтных металлов и темсамым стабилизирует фосфатно-буфернуюсистему питательной среды, препятствуя образованию нерастворимых фосфатов и выпадению их в осадок. Таким образом, ионымагния и фосфатов становятся более доступными для питания клеток, что способствуетприросту биомассы.55Стабилизированная буферная система предотвращает преждевременное подкисление питательной среды во время роста культуры и обеспечивает повышеный выход биомассы.Введение в иитагельцую среду глюкозы,пептона и фосфатов в соотношении 1:0,02::1,66 оказывает значительное воздействиена дыхательную функцию, вызывая дисбаланс в синтезе макроэргических соединенийфосфора и си итеза Р Н К.Выращивание клеток ири низшей точкеоптимальных температурных пределов роста, т....

Номер патента: 644797

Опубликовано: 30.01.1979

Авторы: Ансберга, Гравите, Каула, Шмите

МПК: C07H 21/00

Метки: кислоты, полиинозиновой

...из Е,со 11 и содержащего 60 мг поли-А, 10 - М ацетата магния и 0,1 М трис-НС 1, после отделения, ферментативного белка прибавляют 0,12 мл ледяной уксусной кислоты, 0,1 М раствора этилендиамин-И,Х,Х,К - тетрауксусной кислоты (ЭДТА) до конечной концентрации 10 -(рН 2,5 - 2,55), При непрерывном перемешивании небольшими порциями в течение 3 ч прибавляют 0,12 г сухого нитрата натрия, Перемешивание продолжают до тех пор, когда отношение оптических плотностей Дзо,/Дм, достигает 1,6 - 1,7.Поли-И осаждают 20 об, 96% -ного этилового спирта и проводят очистку известным способом.Степень дезаминирования 98%, Яо,г 18, выход 56 мг поли-И.П р и м е р 2. 60 мг поли-А, полученных в процессе биосинтеза полинуклеотидфосфорилазой из Е.со 11, растворяют...

Номер патента: 619508

Опубликовано: 15.08.1978

Авторы: Ансберга, Гравите, Каула, Шмите

МПК: C12D 13/06

Метки: активностью, обладающих, полинуклеотидов, полирибонуклеотидфосфорилазной

...в соотношении 1:1 О, пэчогретой дэ 37 С, добавляют 20 г аденэзиндифосфат (АДф), инкубируют с перемешиванием в течение 18 ч.Поли- А выделяют известным способом, Выход поли-А 58%,П р и м е р 2. 50 г интактных клеток суспендируют в 1 л реакционной среды, (рН)сэдержашей 1,2 г трисэснэвания, 0,5 гМСбо; 2 г гипрэлизата казеина, 2 г лизина, глютатион и глюкозу, взятых в соотношении 1;10, попо619508 Составитель С, Малютинаедактор д, Емельянова Техред А, Алатырев Корректор Н. Тупица Заказ 4378/21 Тираж 568 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-З 5, Раушская набд. 4/5,взятых в соотношении 1:1. Выход поли-Ц65%.П р и м е р 5, 50 г интактных кле.ток суспендируют в 1 л...

Номер патента: 601287

Опубликовано: 05.04.1978

Авторы: Ансберга, Гравите, Хейслере, Шмите

МПК: C07H 21/02

Метки: полирибонуклеотидов

...накопиения фосфатов до50-60% обеспечивает стабииизацию равновесия реакции, устраняет обратный процесс 20деконденсацни с одновременной адсорбциейна поверхности геля ферментных белков,Предваритеиьная обработка геия 0,01 Мтрис-НС-буфером повышает специфическуюадсорбцнонную сйособность геля и ускоряет Ипроцесс адсорбции до 5-10 мин, Адсорбированные на геие ферментные белки удаияютцентрнфугированием,Использование ионообменной смоиы, содержащей группу - Й -(СН) позволяет 30выдеиить не вступившие в реакцию рибокнукиеоизид-дифосфаты и повторно вернутьих в процесс, что повышает выход цеиевогопродукта на 12-14%.1 аП р и м е р 1, 125 мг адеиозин- 35дифосфата (А-Дф) растворяют в 5 мпводы, к раствору прииивают 1,5 ми 1 М тряс-НС 1 (рН 8,1), 0,15 ми...