Патенты с меткой «рекомбинантного»

Номер патента: 1446154

Опубликовано: 23.12.1988

Авторы: Войтенок, Осипович, Панютич, Циманис

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, белку, гибридных, еsснеriснiа, животных, интерлейкина-2, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, мембранному, моноклональных, препарате, рекомбинантного, человека, штамм

...частично очищенным РИЛ(иммуноферментный анализ).Продукция МКА сохраняется как ми) нимум до 10 пассажей п ч 11 о, В асцитной форме штамм не пассируется более одного раза.Контаминация, Бактерии и грибы в культуре .:не обнаружены при длительном наблюдении и посевах на пита" тельные среды. Заражение микоплазмой не выявлено по характеру включения тимидиновой меткиКриоконсервирование, Для длительного хранения клетки штамма замораживают в эмбриональной телячьей сыво" ротке с добавлением 10 диметилсульфо оксида. Режим замораживания: 1 С в 1 мин до -70 С. После замораживания клетки переносят в жидкий азот, Раэморажйвание - на водяной бале при +3 С. Жизнеспособность клеток послеоразмораживания 70-80 , по окрашиванию трипановым синим,П р...

Номер патента: 1446157

Опубликовано: 23.12.1988

Авторы: Бундулис, Войтенок, Панютич, Скривелис, Циманис

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, белку, гибридных, еsснеriснiа, животных, интерлейкина-2, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, мембранному, моноклональных, препарате, рекомбинантного, человека, штамм

...в препарате РИЛчеловека, Методы оценки сохранения специфичности: тест на связыва" ние МКА с иммобилизованным частично очищенным РИЛ(иммуноферментный анализ), Продукция МКА сохраняется как минимум до 10 пассажей 1 п чдС- то. В асцитной форме штамм не пассируется более одного раза,Контаминация. Бактерии и грибы в культуре не обнаружены при длительном наблюдении и посевах на питательные среды. Заражение микоплаэмой не выявлено по характеру включения тимидиновой метки.. Криоконсервирование. Для длительного хранения клетки штамма замораживают в эмбриональной телячьей сыворотке с добавлением 10 диметилсульфоксида, Режим замораживания;1 С в 1 мин до -70 С, После замораживания клетки переносят в жидкий . азот, Размораживание - на водяной...

Номер патента: 1253141

Опубликовано: 30.10.1990

Автор: Тец

МПК: C12N 15/00

Метки: s-формы, патогенных, рекомбинантного, штамма, эшерихий

...надоса. дочкув жидкость, которая представляф После четвертого, осаждения из бактерий была приготовлена взвесь, содержащая 1,0 1 О клеток в 1 мл. К1,0 мл такой взвеси добавили 1,0 10 1 О 15 20 25 дуру отмынки повторяют 3-5 раэ. Изобработанных таким образом бактерийготовят нэнесь, содержащую 1,092,0 1 О живых клеток н 1 мл. К 1,0 млтакой взвеси добавляют трансдуцирующттй бактеркофаг в концентрации 1,02,0 10 (0,1 мл), после чего смесь инкубируют прк 36,6-37,2 С в водяной бане в течение 40-45 мин а затем при 18-22 С - 120-30 мин, Смесь центрифугируют при 2500-3000 об/мин 20-30 мин при 18-22 С для осаждения бактерий, Надосадочную жидкость, содержащую неадсорбиронанные фаговые частицы, сливают. Осадок ресуспендируют н 0,3-0,4 мл раствора...

Номер патента: 1607690

Опубликовано: 15.11.1990

Авторы: Такао, Хадзиму, Хиратака, Хироси

МПК: C12N 15/28

Метки: некроза, опухоли, рекомбинантного, стабилизации, фактора

...7 сут. При проведении описанного выше испытания в качестве контрольного обраэца используют раствор активного вещества, не содержащий альбумин. Что касается лиофилизированной пробы, то ее растворяют в стерильной дистиллированной воде, после чего испытывают образец на цитотоксическую активность. Испытывают 1 п ч 1.чо или 1.п ч 1.го остаточную активность каждого образца.1П р и м е р 5. К аликвотам добавляют ФНО человека по отдельности в различных концентрациях вещества, которые являются хорошо известными стабилизирующими агентами для растворов обычных физиологически активных веществ, в частности различные аминокислоты, соли металлов и хелатообраэующие агенты. Каждый иэ полученных при этом растворов хранят при 4 С в течение 7 сут,...

Номер патента: 1622398

Опубликовано: 23.01.1991

Авторы: Бука, Бундулис, Грен, Звиргзда, Циманис

МПК: C12N 15/00, C12P 21/00

Метки: бактериальных, выделения, интерлейкина-2, клеток, рекомбинантного

...на Фреичпрессе при давлении 700 атм. Полученную суспенэию центрифугируют 30 минпри 12000 об./мин на центрифуге. Осадок ресуспенднруют и по 3-4 раза промывают сначала буфером А с последующим цеитрифугированием в описанномрежиме, затем буфером А, содержащим2 М мочевину, и буфером А, содержащим4 М мочевину, Осадок суспендируют в40 мл буфера А, содержащего 27 додецилсульфата натрия, при перемещивании растворяют, прогревают 2 мин прио60 С, охлаждают до комнатной температуры и тестируют иммунохнмическимили биологическим методом.Раствор рИЛнаносят на колонку2 ч К 100/100 с себадексом 0-100,уравновешенную 50 ммоль трис-НС 1(рН 8,5) с добавками 5 ммоль ДТТ,1 ммоль бенилметилсульфонилбторидаи 17. додецилсульфат натрия. Фракции,содержащие...

Номер патента: 1630602

Опубликовано: 23.02.1991

Авторы: Такао, Хироси, Юнити

МПК: A61K 37/02, C12N 15/28

Метки: некроза, опухоли, рекомбинантного, фактора

...чего получают клеточный экстракт, содержащий человеческий ФНО. Экстракт имеет активность5,2.10 И/мл, а содержащийся в немчеловеческий ФНО имеет удельную активность 4,2 104 И/мл.К экстракту прибавляют стептомицин в таком количестве, чтобы получить конечную концентрацию 0,7 мас.Х//объем для получения осадка нуклеиновых кислот. После удаления осадка1630602 Нхя ТЬк 11 е Бег Акс 1 11 е А 1 а Ча 1 Бек Тук 61 п Тйк Ьув Ча 1 Аяп Ъец Ьеа Бег А 1 а 11 е Ьув Бег Рго Суя С 1 п Агс 1 61 ц Тйг Рко 61 ц 61 у Я 1 а 61 ц А 1 а Ьуя Рхо Тгр Туг С 1 и Рго 11 е Туг Ьеи С 1 у С 1 у Ча 1 РЬе 61 п Ьео 61 о Ьув 61 у Х Агу Рхо Аяр Туг Ъец Аьр РЬе А 1 а 61 а Бег 61 у 61 п Ча 1 Туг РЬе61 у 11 е Х 1 е ЪХа Ьеа,мированных плазмидой, кодирующей ФНОсо следующей...

Номер патента: 1698285

Опубликовано: 15.12.1991

Авторы: Башкис, Бумялис, Вилутис, Григишкис, Пунтежис, Римкявичене, Янулайтис

МПК: C12N 1/04

Метки: species, интерферона, консервирования, продуцента, рsеudомоnаs, рекомбинантного, штамма

...Ч(-1)О культуру готовят к консервированию,Для этого в стерильных условиях центрифугируют 400 мл культуральной среды.,осадок клеток ресуспендируют в 200 мл свежей среде указанного состава, добавляютантибиотики и 200 мл стерильного раствора 15;4-ного глицерина, Полученную суспензию клеток разливают по 1 мл вгластмассовые пробирки типа Эппендорфемкостью 1,5 мл. Емкость с пробиркамипомещают в холодильник глубокого ох.лаждения при -20 С на 22-24 ч, а потомперемещают в кельвинэтор и хранят притемпературе (-7075) - (-19 б)С в течение1,5 года.Динамику биосинтеза рекомбинэнтного аинтерферона определяют иммуннымметодом.Результаты экспериментальных исследований приведены в табл,1 и.отображенына чертеже, где нэ графике 5 исходного варианта отмечены...

Номер патента: 1575576

Опубликовано: 07.07.1993

Авторы: Аммосов, Беляев, Дмитриев, Зарвина, Мезенко, Микрюков, Миронова, Путинцева, Рукавишников, Рябинин, Сабиров, Самуков, Семенова, Синяков, Черный

МПК: A61K 39/29, C12N 15/00

Метки: вируса, ген, гепатита, днк, кодирующая, конструирования, осповакцины, плазмидная, рекомбинантная, рекомбинантного, штамм, экспрессирующий

...включает 3 стадии: во-первых, сорбцию антител к НВЯАЕ 50 на носителе; во-вторых, связывание антигена с закрепленными антителами при иякубации пробы с носителем и, в третьях, проявление связавшегося а антигена инкубацией с меченными 55 йодомиммуяоглобулинами против НВБАЕ, Для анализа используют полистирольные планшеты для имунологи" ческих реакций.Ленинградский завод медпрепаратов), Таким образом твердофазным носителем служат стенкилунок планшета.Для сорбции антител в каждую лунку планщеты наносят по 30 мкл раствора иммуноглобулинов против НВЯАя сконцентрацией 0,02 мг/мп в 0,02 Мнатрийфосфатном буфере рН 1,8 и иякубируют при комнатной температурев течение 2-3 ч, Лунки промывают3 раза забуференным Физиологическимраствором ,ЗФР) -...

Номер патента: 1830081

Опубликовано: 23.07.1993

Авторы: Брайан, Нилс, Стэнли, Хармут

МПК: C12N 15/52, C12N 15/84

Метки: активированного, белка, рекомбинантного, человека

...10 Х, 1 мкл лигазы Т 4 ДНК ( 500 ед) и 82 мкл Н 2 О при 16"С втечение ночи, Сшитая ДНК представляет собой желаемую плаэмиду рзч 2- Н РС 8.Клетки Е,соИ К 12 ЙР ,Вйе В) превращают в компетентные клетки для трансформации в соответствии с процедурой, описанной для Е.соИ К 12 НВ 101, Сшитую ДНК, полученну;о как описано выше, используют для трансформации данньх клеток, а аликвоты трансформантов высеваот на чашки с 1-агаром, содержащим 100 мкг/мл ампициллина, Затем чашки инкубируют при 37"С, Трансформанты Е,соИ К 12 КВ 1/рзч 2-Н РС 8 исследуют путем анализа их ДНК, Получают ДНК плазмидь рзч 2- НРС 8 из трансформантов,50 мкг плаэмиды рзч 2-НРС 8 растворяют в 10 мкл реакционного буферного раствора 1 ОХ Н 1 пд И 1, 5 мкл (50 ед) фермента Ни( 1 И...

Номер патента: 1591484

Опубликовано: 20.05.1995

Авторы: Бумялис, Воробьев, Дебабов, Козлов, Коробицин, Маурицас, Парфенов, Песлякас, Петрова, Пивоваров, Радзявичюс, Ражанас, Стронгин, Янулайтис

МПК: C12N 15/21

Метки: альфа-2, интерферона, рекомбинантного, человека

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНОГО АЛЬФА-2 ИНТЕРФЕРОНА ЧЕЛОВЕКА путем лизирования клеток Pseudomonas putida несущих рекомбинантную плазмиду, обработки полученного лизата полиэтиленимином с последующим фракционированием сернокислым аммонием и очисткой гидрофобной и иммуноаффинной хроматографией, отличающийся тем, что, с целью ускорения и повышения выхода целевого продукта, клетки микроорганизмов лизируют буфером, содержащим 15-20% сахарозы, 5,0-5,5 мМ ЭДТА, 0,15 0,25 М натрия хлористого, 10,0-10,5 мМ фенилметилсульфонилфторида и 0,0045-0,0055% тиодигликоля с рН 6,7-8,2 при температуре 3-5oС, обрабатывают лизат полиэтиленимином до конечной его концентрации 0,25-0,35% гидрофобную хроматографию проводят на фенилсилохроме С-80,...

Номер патента: 1839446

Опубликовано: 27.04.1996

Авторы: Беляев, Вульфсон, Гаврюченкова, Громова, Коршунов, Куликов, Леонова, Мальцев, Мелехов, Михлин, Морозов, Хрущева, Цуканова

МПК: C07K 14/62

Метки: белка, последовательность, проинсулина, рекомбинантного, содержащего

...М,й-диметакрилата этиленгликоля (ДМЭГ)с 2-гидрокси-диэтиламинопропилметакрилатом (ГДЭПМ) с сорбцией белка 0,007- 0,013 М уксусной кислотой, содержащей 0,15-0,30 М ацетата натрия, и элюцией рБПИ 0,8-1,1 М уксусной кислотой, При этомсорбент, получивший наименование ДЕАПСферанит-ОН, получают радикальной сополимеризацией ДМЭГ с ГДЭПМ в присутствии наряду с водным раствором хлористого натрия 11-13 от массы моно 5 10 152030 й,й-диэтиламиноэтилметакрилата с Н,М- метилен-бис-акриламилом в присутствии персульфата аммония и 0,3-3,0 н. водного раствора хлористого натрия.Процесс идет в узком диапазоне всех перечисленных условий, изменение которых приводит к ухудшению условий разделения.П р и м е р 1. На колонку (9 х 45 см), содержащую 3 л...