Способ получения рестриктазы

Номер патента: 1074139

Опубликовано: 30.12.1984

Авторы: Баев, Глатман, Кравец, Кузьмин, Мороз, Солонин, Таняшин

МПК: C12N 15/00

Метки: днк, конструирования, плазмидной, продуцент, рекомбинатной, рестрикции, штамм, эндонуклеазы

...1159-1166).Рестрикционный анализ выделеннойплазмиды р 1 ЬКЧ 7 проводят. с помощьюэндонуклеаз Р 11,ВфИ,Есор .На втором этапе в полученную плазмиду Р 1 йЧ 74 вводят область иммуни-,тета фагас промотором ранних генов Рг и термочувствительным репрессором. Для этого выделяют ДНК фагас 1857 по методу (А,Р. Ка 1 яег,Нояпея 0.8. 1960, /, Мо 1 В 1 о 1392-415),мкг ДНК плазмиды р 1 ЬКЧ 7 и4 мкг ДНК фага 3 с 1 857 инкубируют вбуфере А (2 О мМ Трис-НС 0 рН 7,6,10 мМ МС 12,10 мМ дитиотреитола) сэндонуклеазной рестрикции Вд 1 11Гидролиз проводят в течение часапри 37 С, после чего гидролизат проверяют электрофорезом в О,97 агарозе в ацетатном буфере. ФрагментыДНК фага Л с 1857 (2 мкг) смешивают с линейной ДНК плазмидыр 1 РЧ 7 й (О, 2 мкг), добавляют...

Номер патента: 1430403

Опубликовано: 15.10.1988

Авторы: Дмитриева, Исаенко, Машукова, Царева, Юрченко

МПК: C12N 5/00

Метки: вируса, гриппа, изучения, используемый, качестве, клеток, культивируемых, мини-свиньи, почки, репродукции, тест-системы, штамм

...через 8, третийчерез 6 сут. Ввиду увеличения скорости роста к пятому пассажу клеткипересевают через 3-4 сут. Коэффициентрассева 1/3, В дальнейшем клетки культивируют в монослое с применениемсреды Игла МЕМ, содержащей 107. сывороткикрупного рогатого скота,нативной илиобработанной полиэтиленгликолем.Клетки снимают со стекла смесью 0,027-ного версена (1/2-2/3) и 0,257-ногораствора трипсина (1/2-1/3) беэ центрифугирования, дважды обмыв монослой прогретой до 36,5 С смесью ипроинкубировав в течение 5-10 мин.Далее клетки ресуспендируют в свежей среде и рассевают в сосуды длякультивирования с концентрацией100 тыс. кл. в 1 мл. Пересевы осуществляют через 3-5 сут с кратностьюрассева 1:4-1:5,Полученная линия перевинаемых клеток ПСМ имеет следующие...

Номер патента: 1641885

Опубликовано: 15.04.1991

Авторы: Баранов, Галахарь, Дьяченко, Уфимцева

МПК: C12N 5/00

Метки: vison, гибридных, иммуноглобулина, клеток, культивируемых, легких, мusсulus, мusтеlа, межвидовых, моноклонального, мыши, норки, продуцент, цепей, штамм

...гибридных клеток контролируют при микроскопировании панелей,Из лунок, в которых площадь растущих колоний гибридных клеток достигает 1/3 и более площади лунки, исследуют культуральную среду на присутствие 18 норки или его цепей. Детекцию ТВ норки и его цепей проводятпри помощи иммуноферментного анализас использованием антисывороток к 18норки, его легким и тяжелым цепям.В качестве субстрата использовандиаминобензидин, Каждый иммуноферментный анализ (ЕЭБА) сопровождается калибровкой 18 норки и контролемкалибровкой мышиного 1 я и интактнойкультуральной среды, При первичномотборе выбирали колонии с более высокой продукцией Ь-цепей 18.,40При Ъостоянном контроле уровня испецифичности синтеза Ь-цепей норкипроводили клонирование...

Номер патента: 1669402

Опубликовано: 07.08.1991

Авторы: Адольф, Гюнтер, Норберт, Петер, Рудольф

МПК: C12N 15/20

Метки: интерферона, собачьего

...н,е маленькие части в ледяной банг с помощью 20-секундных ультразвуковых иллпульсов (всего 1 ПО.). ДНК-концы восстанавливают в те еение 2 ч при 14 С л 25 С мкл рЕ; кционной Срвды (50 мМ триСНС 1, О". 75, О мМ М 9 С 12, 1 м",4 д.:тиотреи.е=."а 0 5 мг/мл а":,бул(ина сыворотки кр,геного рогатое О ечеота, по 0,1 мМ ОАТР,5 10 15 20 25 3,. г Е 3 40 45 55 ОСТР, ОСТР, ОТТР с помощью 15 ед большого фрагмента Е,со 1-полимеразы(фрагмента Кленова), После концентрированияпутем осаждения этанолом предварительнообработанную таким образом ДН К разделяют в 1 О/.-ном агароэном геле и ДНК-фрагменты длиной 0,351,0 т.п.о, выделяют иочищают. Примерно в 10-кратном молярномизбытке фрагменты лигируют с разрезанной Яетеа и дефосфорилированной репликативной...

Номер патента: 1112059

Опубликовано: 07.09.1984

Авторы: Дорохина, Коротяев

МПК: C12N 15/00

Метки: вирулентности, вкм, изучения, плазмид, природы, факторов, штамм

...и газа глюкозу, лактозу, мольтозу, маннит, арасбинозу,. галактозу.1 енетические особенности. Штамм Е.со 1.1 ВКМ 11 В применяется в качестве реципиента при конъюгационнойперев,аче , плазмидКонъюг;, ионные скрещивания штамма Е,со 1: ВКМ 20, соцержащего в своем составе конъюгативную плазьпдду РКд 2.1 1, проводили по изВестнОмУ методу. В качестве реципиентов использовапи Е .со 11 С 600 МйЬг 1 едд 1 ос, Е.со 11 СбОО Ба 1 Жг 1 едд 1 ас. Во всех случаях были выявлены трансконъюганты, антибиотикорезистентность, а также способность синтезировать антиген колонизации и колицин которых соответствовали1 2059 О ВНИКНИ Заказ 6419/18 Тираж 521 Ог:. тисное Филиал ППП "Патент", г.Уитород, ул.йроектнал, 4 таковым у дацорцого штамма, (оньюгационный...