Способ получения препарата тимуса, подавляющего синтез реагинов

(22) Заявлеиб 1 а 0577(21), 2483800/28-13с присоединением заявки Ио(51)М Кл 2 А 61 К 37/00 Государственный комитет СССР по делам изобретений н открытийОпубликовано 150579, Бюллетень ЙУ .18 Дата опубликования описания 0505.79(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕПАРАТА ТИМУСА,ПОДАВЛЯНЫЕГО СИНТЕЗ РЕАГИНОВ1Изобретение относится к Фармацевтической промышленности и касается производства биологических препаратов для лечения аллергических эабо леваний немедленного типа.Известен сйособ получения препарата тимуса, . подавляющего синтезреагинов путем его гомогенизации, диалиэа гомогената, осаждения, очист ки и лиофилиэации (1.Однако известный способ не обеспечивает высокой активности препарат Целью изобретения является повышение активности препарата.Эта цель достигается тем, что диализ гомогената проводят против 2-4 объемов дистиллированной воды, балластные вещества осаждают солями двухвалентной ртути при рН 4,0-5,0, надосадочную жидкость обрабатывают аммиаком и газообразным сероводородом, хроматографируют на карбоксиметилцеллюлозе и диэтиламиноэтилцеллюлозе при рН 5,6-6,0, остаток осаждают солями двухвалентной ртути при рН 6,0-7,0 затем растворяют в дистиллированной воде при рН 1,0- 2,0, нейтрализуют, освобождают от ртути сероводородом, далее надосадочную жидкость подкисляют и обрабатывают газообразным азотом.П р и м е р. 1000 мл гомогенататимуса диализируют против 3 объемовдистиллированной воды. Через 36 часовдиалиэат, содержащий вещества,молекулярный вес которых менее 2 тысяч, что установлено методом гельхроматографии,лиофилизируют и готовятего 10 раствор, рН раствора доводятдо 4,0-5,0 соляной кислотой.Далее добавляют 20 раствор Найс,1,для осаждения балластных веществ.Осадок отбрасывают . Далее подщела" 15 чивают надосадочную жидкость доРН 8,0-8,5 и пропускают через неегазообразный сероводород для удаления ионов ртути и сорбируют балластные вещества, не удаленные послеосаждения ионами ртути при указанныхусловиях, с помощью КМ-целлюлозыи ДЕАЕ-целлюлозы. После отделенияКМ- и ДЕАЕ-целлюлозы надосадочнуюжидкость подкисляют и пропускаютгазообразный азот для удаления избытка сероводорода, с помощью которогобыли ранее удалены ионы ртути из надосадочной жидкости. Затем доводятрН надосадочной жидкости до 6,0 иосаждают активную фракцию (неполипеп662103 100 "17 0 едлагае Следовательно, активн гаемого препарата выше и. 5-20 раз,. Предлагае получить преп стью,предл ного в мый способ позволяет арат с высокой актив рмула изобретения соб поляющегомогеннзажденият л ицельюата, диотив 2 учения препарата тиму синтез реагинов .путе ации, диализа гомогеочйстки и лиофилиз ч а ю щ и й с я тем повышения активности ализ гомогената прово 4 объемов дистиллиров Спподалего гта, оции,что,пре пардят пр аан" Составитель С,Малютинаактор Е,Зубистова Техред И.АсталошКорректорМ.Пожо. аэ, 2539/4 Тираж 671 . Подписи ЦНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушсхая наб., д.4/5лиалППП Патент, г.ужгород, ул. Проехтная, 4 3.тидную) повторным добавлением ионов ртути при рН б,Осадок (неполипептидную фракцию) освобождают от ионов ртути сероводородом и от избытка сероводорода с помощью подкисления и пропускания газообразного азота и лиофилизируют. Б Надосадочную жидкость также освобождают от ионов ртути сероводородом и от сероводорода подкислением и пропусканием газообразного азота, лиофилизируют. 10Повышение активности препарата по сравнению с исходным подтверждает. ся следующими данными. 4Исходный диалиэабельный препарат угнетает синтез реагинов при введении доз от 100 мкг до 500 мхг на крысу весом 230-250 г, При этом концентрация препарата определялась по белку (метод Лоури). Аналогичный, результат достигается введением 100 мхг очищенного препарата (по весу), что при определении но Лоури составляет лишь 5-17 мкг. Сравнительные данныеприведеныв таблице. ной воды, балластные вещества осаж:дают солями двухвалентной ртутипри рН 4,0-5,0, надосадочную жидкост обрабатывают аммиаком и газообразным сероводородом, хроматографируют на карбоксиметилцеллюлоэе и дизтиламиноэтилцеллюлоэе при рН 5,6-6,О, солями двухвалентной ртути при рН 6,0-7,0, затем растворяют. в диС- тиллйрованной воде при рН 1,0-2,0, :нейтрализуют, освобождают от ртути сероводородом, далее надосадочную :ккдкость подкисляют и обрабатывают газообразным азотом.Источники информации, принятые во внимание при экспертизе1. Авторское свидетельство СССР З 459227, кл. А 61 К 35/46, 1972.