C12P 21/02 — с известной последовательностью из двух или более аминокислотных остатков, например глутатиона

Номер патента: 910117

Опубликовано: 28.02.1982

Авторы: Есиказу, Каору, Кейити, Кийотака, Мунеки, Сигеаки, Тецуя, Хейидзиро, Юдзи

МПК: A61K 38/05, C07K 5/065, C07K 5/075 ...

Метки: аминокислоты, дипептидного, присоединения, продукта, производного

...о м (Ч со 4 4 (Ч Ф М Ф а а а а,а, а а о о о о о р оо ое (О О О СЧ (Оа ааа Ю ОО Ч 3 О еоОООО а О (О3 9101 где В - бензилоксикарбонил, пара-ме=токсибенэилоксикарбонил;Й - бензил;Йъ - метокси, этокси"группы;й - 1 или 25 М-замещенную аминодикарбоновую кислоту общей Формулы,101нос-сн,- ск- сокгде значения Я. и и указаны выще, подвергают взаимодействиф со сложным эфиром аминокарбоновой кислоты общей формулыОН 2 О - СК- С - ВЗ Щ) .202где значения К и К указаны выше.При яолярном соотношении исходныхсоединений Формул 11. и Н 1 1:1 - 1:;3,75, в водной среде, в присутствииметаллопротеазы при рН 5,07,2, температуре 10-90 С. Продукты, полученные в процессе реакции, мало растворимы в воде и выпадают в осадок. Кроме30того, предлагаемый способ...

Номер патента: 1585332

Опубликовано: 15.08.1990

Авторы: Митин, Огий, Тертых, Янишпольский

МПК: C12N 11/00, C12P 21/02

Метки: трет-бутилоксикарбонил-лейцин-энкефалина

...компонентов по 0,5 ммоль. Скорость прокачивания растворенных субстратов выбирается так, что карбоксильный компонент полностью гидролиэуется иммобилиэованным ферментом эа время протекания раство ра через проточный реактор, составляет 1 мл/мин. Раствор, содержащий конечные продукты, собирают на выходе проточного реактора и выделяют синтезированный пентапептид следующим образом. К собранному на выходе раствору добавляют 103-ный водный раствод КНЯО и экстрагируют пентапептид в этилацетат. Органический слой отделяют от водного и упаривают. Очистку ко нечного продукта осуществляют на колонке с силикагелем в системе толуол - диоксан - гексан - трифторэтанол - уксусная кислота, 50:40,.15: ф 5:1(А). Полученный продукт выдерживают...

Номер патента: 1441787

Опубликовано: 23.09.1990

Авторы: Алахов, Баранов, Оводов, Рябова, Спирин

МПК: C12P 21/02

Метки: белков, бесклеточной, пептидов, системе, трансляции

...костра (ВМ 7) наматрице ВМЧ РНК 4 в эукариотическойсистеме трансляции из зародьшзей пшеницы в стандартной системе и в установке непрерывного действия.Раствор (А) состоял цэ 20 мИ НЕРЕВ, рН 7,6; 2,1 мИ 11 я(оАс), 115 мИ КоАс, 1 мМ ЛТР, 25 мкИ СТР, 250 мкИ спермцдцнд мкМ Г". Н 3 пейццна с удельной радиоактивностью 24 Ки/ммоль ц 25 мкМ каждой из остальных 19,аминокислот, 3 мп Инкубационной смеси, прцготовлепноц нд растворе (Л), содерждпц 80 пцкомопей 808 рцбосом, 20 пцкомопей ВМ 7 РНК 4, 37 оп.ед. А,д бепкоззой фракции 8100, 150. ед, активности цнгцбитора рцбоцуклеаз из ппдценты человека, 0,1 мкг,пейпептина, О, 1 мкг апротенцна, О, 1 мкг пепстатипа, 0,1 мкг хцмастатица, Кцнетика синтеза белка оболочки в стандартной системе при 25 С...

Номер патента: 1618761

Опубликовано: 07.01.1991

Авторы: Алахов, Баранов, Оводов, Рябова, Спирин

МПК: C12P 21/02

Метки: белков, бесклеточной, пептидов, системе, трансляции

...20 пмоль ВМ 7 РНК 4, 3,7 оп.ед. А о белковой фракции Я 100, 150 ед. активности ин гибитора рибонуклеаз из плаценты человека, О, 1 мкг лейпептина, О, 1 мкг апротенина, 0,1 мкг пепстатина,0,1 мкг химостатина.Кинетика синтеза белка оболочки 50 в стандартной системе при 25 С предоставлена на фиг.2 (кривая 1) .В параллельном эксперименте в установке непреривного действия к 3 мл той же инкубационной смеси непрерывно подается раствор (А) со скоростью 0,6 мл/ч, а продукты реакции отводятся из реакционной смеси с той же скоростью через ультрафильтрационную мембрану ХМ. В результате в камеру, содержащую бесклеточную систему трансляции, непрерывно подаются субстраты реакции (АТР, СТР, аминокислоты) и отводятся из нее продукты реакции (АМР, СПР,...

Номер патента: 1705302

Опубликовано: 15.01.1992

Авторы: Баранов, Морозов, Спирин

МПК: C07K 1/02, C12P 21/02

Метки: бесклеточной, генов, препаративной, системе, сопряженной, транскрипциитрансляции, экспрессии

...смесь вносят в резервуар, где и протекает процесс сопряженной транскрипции/трансляции, Для предотвращения остановки процесса из резервуара через полупроницаемую мембрану непрерывно отводят поодукты транскрипции (фосфата, АОР, 6 ОР, СОР, ООР) и трансляции (синтезированный полипептид, АМР, 6 ОР, фосфаты и пирофосфаты). Одновременно в резервуар подают алинокислоты, АТР, 6 ТР, СТР, ОТР для восстановления их исходной концентрации. Синтезированный полипептид собирают на колонке со специфическим сорбвнтом, а продукты транскрипции и трансляции собирают в специальном резервуаре для их последующей регенерации, Способ обеспечивает препаративную экспрессию генов в виде молекул ДНК в течение десятков часов с выходом синтезированного продукта...

Номер патента: 1838411

Опубликовано: 30.08.1993

Авторы: Бриан, Брус

МПК: C12N 15/09, C12N 15/15, C12P 21/02 ...

Метки: белка, днк, зимогенной, плазмидной, рекомбинантной, формы, человека

...типичных эукариотических клеток, включая клетки линии АУ 12, и к векторам экспрессиинастоящего изобретения,30 Клетки 293 были получены из АТСС (подномером СР 1573) в 25-мм -колбе, содер 2жащей сплошной монослой около 5,5 х 10клеток в минимальной поддерживающейсреде Игла (ОЬсо) с 10; термо-инактивиро 35 ванной лошадиной сывороткой, Колбу инкубировали при 37 С, а среду меняли два разав неделю. Среда состояла из ОМЕМ (ОЬсо),дополненной 10 оь околоплодной сывороткой,.теленка, 50 мкг/мл гентамициа, и 1040 мкг/мл витамина К 1, фитонадиона АкваМефитон В Мегс: ЯЬагр В ОоЬпе, Мегс В СоЗлс., ЧЧезт Ропс, РА, 19486). Клетки суб культивировали путем удаления среды, промывания сбалансированным голевым45 раствором Хэнкса (ОЬсо), добавления в течение...

Номер патента: 1839191

Опубликовано: 30.12.1993

Авторы: Баранов, Рябова, Спирин, Ярчук

МПК: C07K 1/02, C12P 21/02

Метки: бесклеточной, полипептидов, системе, трансляции

...с плазмиды, содержащей ген дигидрофолат редуктазы под промотором ЯР 6полимеразы, в бесклеточной прокариотической системе трансляции из Е, со.Получают плазмиду, содержащую ген 5дигидрофолат редуктазы под промоторомЯРб полимеразы,Сопряженную систему транскрипции/трансляции готовят следующим образом. 101 мл реакционной смеси содержит 350мкл ЯЗО экстракта иэ Е. со 1, 0,2 мг тРНК, 0,1мг плазмиды, 20000 О ЯРб полимеразы, 0,1мг пируват киназы, 50 О рибонуклеазногоингибитора иэ плаценты человека, по 5 мкг 15ингибиторов протеаз (леупептина, химостина) и а 2-макроглобулина в буфере А: 50 мМТрисАс, рН 7,5, 14 мМ М 9 Сг, 100 мМ КАс,2 мМ СаАсг, 1 мМ АТР, 0 4 мМ ОТР, 04 мМСТР, 0,4.мМ ОТР, 10 мМ фосфоенолпирувата, 4,0 мМ дитиотреита, 50 мкМ...

Номер патента: 1561510

Опубликовано: 30.07.1994

Авторы: Болдырева, Добрынин, Коробко, Недоспасов, Панина, Турецкая, Филиппов, Чумаков, Шахов

МПК: C12N 1/21, C12N 15/19, C12P 21/02 ...

Метки: escherichia, бактерий, днк, используемая, кодирующая, конструирования, лимфотоксина, плазмидная, полипептид, рекомбинантная, свойствами, человека, штамм

1. Рекомбинантная плазмидная ДНК pLT 9, кодирующая полипептид со свойствами лимфотоксина человека, с мол.м. 2,64 мДа и размером 4,06 т.п.о., содержащаяHind III - Kpn I - фрагмент ДНК плазмиды p 6А23 с тандемом промоторов A2 и A3 ранней области бактериофага T7, геном -лактамазы и терминатором транскрипции фага лямбда размером 3, 4 т.п.о.;Kpn I - Hind III - фрагмент с синтетическим сайтом инициации трансляции и полусинтетическим геном лимфотоксина человека размером 0,64 т.п.о.;генетический маркер - ген -лактамазы, детерминирующий устойчивость клеток E.coli к пенициллиновым антибиотикам;

Номер патента: 1538513

Опубликовано: 20.04.2000

Авторы: Баев, Ежов, Козловский, Кузьмина, Рубцов, Свердлова, Скрябин

МПК: C12P 21/02

Метки: выделения, соматотропина, человека

Способ выделения соматотропина человека, включающий дезинтеграцию клеток биомассы бактерий Escherichia coli, несущих рекомбинантную плазмидную ДНК, обработку полиэтиленимином, фракционирование сульфатом аммония и гельхроматографию, отличающийся тем, что, с целью увеличения степени очистки препарата, дополнительно проводят хроматографию на анионообменной целлюлозе, далее раствор концентрируют и гель-хроматографию проводят дважды, а полученный раствор диализуют и лиофилизируют.