Маурицас

Номер патента: 1591484

Опубликовано: 20.05.1995

Авторы: Бумялис, Воробьев, Дебабов, Козлов, Коробицин, Маурицас, Парфенов, Песлякас, Петрова, Пивоваров, Радзявичюс, Ражанас, Стронгин, Янулайтис

МПК: C12N 15/21

Метки: альфа-2, интерферона, рекомбинантного, человека

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНОГО АЛЬФА-2 ИНТЕРФЕРОНА ЧЕЛОВЕКА путем лизирования клеток Pseudomonas putida несущих рекомбинантную плазмиду, обработки полученного лизата полиэтиленимином с последующим фракционированием сернокислым аммонием и очисткой гидрофобной и иммуноаффинной хроматографией, отличающийся тем, что, с целью ускорения и повышения выхода целевого продукта, клетки микроорганизмов лизируют буфером, содержащим 15-20% сахарозы, 5,0-5,5 мМ ЭДТА, 0,15 0,25 М натрия хлористого, 10,0-10,5 мМ фенилметилсульфонилфторида и 0,0045-0,0055% тиодигликоля с рН 6,7-8,2 при температуре 3-5oС, обрабатывают лизат полиэтиленимином до конечной его концентрации 0,25-0,35% гидрофобную хроматографию проводят на фенилсилохроме С-80,...

Номер патента: 1645295

Опубликовано: 30.04.1991

Авторы: Думалакене, Иванаускас, Маурицас, Микалаускене, Тамошюнас

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, в-лимфоцитов, гибридных, животных, клеток, крупного, культивируемых, мusмusсulus, моноклональных, продуцент, против, рогатого, скота, штамм

...связанные белки элюируют0,2 И НС 1-глициповым буфером, элюатнейтрализуют 1 М НаОН и диализируютпротив ФСБ.Иодирование белков клеточной поверхности проводят с помощью лактоперокси;азы, В суспензию клеток5-Ох 0 в 1 мл ФБС добавляют100 мкл лактопероксидазы (2 мг/мп),40 ИБк На 3 и 100 мкл О,ОЗХ Н 0Смесь инкубируют 4 мин, осторожноперемешивая, и опять добавляют00 мкл О,ОЗХ ИО. Через 4 мин инкубации клетки 3 раза проьываютФСБ и лизируют 0,5 Х-ным растворомдезоксихолата натрия на боратномбуфере, рН 8,3, имеюцим 1 мИ РМЯГ(уенилметилсульфонилфторида). Эффективность мечения белков устанавливают с 10 Х-ной трихлоруксусной кислотой (ТХУ). Установлено, что иммуносорбент с М 1 А специфически связывает0,79 Х белков, снятых с НЛ, и 1,36...

Номер патента: 1627557

Опубликовано: 15.02.1991

Авторы: Адомайтене, Велецкайте, Дикинене, Иванаускас, Маурицас, Микалаускене, Тамошюнас

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, белка, вируса, гибридных, животных, клеток, крупного, культивируемых, лейкоза, мusсulus, моноклональных, продуцент, против, рогатого, скота, штамм

...рассевд 1:6. Клонцро 1 ац е клеток проводят в 96-ячеечцых ;латахс иг.пользованием в качестве пи гдющего:лоя макро 1 дгсн мынеь. сеци 11 ическая эффективность 3-го клонирования составляет 9871 1 окоцгерцдц, роноят н ыворотьо мбриоцов кор,в с доба. ление 1О диметпл уь Ьс ксидд, 507 сыор л ки эмбрион.,в крупного рогатогоа .когд при коццс.цтрции 1 х 10 клет кьмл. 1 иэнеспособцость сле; окшдыма после размораживация состав дет ЯОь.Пр,нивка по 10 клеток штамма111.Ч-р 24-Ч 1 сингенцым предобрдботаццьпмышам вызывает у цих обрдзовацедсцитцой опухоли, сопровождающе ся выделением асцитной жидкости г ко лычесгне 1-5 мл. В асцитцо;1 ждкост содержатся специфические моцЛТ к белку р 24 вируса лейкоза КРС, Способность продуцировать мо 1 Л 1...

Номер патента: 918855

Опубликовано: 07.04.1982

Авторы: Дикинене, Куделева, Маурицас, Микалаускене, Нагаева, Тамошюнас, Чапенко

МПК: G01N 33/48

Метки: выделения, животных, иммуносорбент, крови, лейкозно-измененных, лимфоцитов

...(1 фракция), а клетки, обладающие сродством к иммуносор,бенту, сорбировались на колонке (11 фракция).В табл 1 представлены результаты разделения лимфоидных клеток крови больных лейкозом и здоровых животных методом аффинной хроматографии. Таблица 1 Количество элюированных клеток больных лейкозомкоров, 3 Количество элюированных клеток здоровых коров (контроль),о 4 Жизнеспособность,ф Жизнеспособность4 Клетки 98, 92,1+2,8 7,9+2,6 диной АС-Л(ЛЛ), кроличьей АС-К(ЛЛ) фв и бычьей АС-Б(ЛЛ).антисыворотками,приготовленными против лимфоцитовкрови больных лейкозом коров.Получили характеристики Фракционированных клеток.55 1 фракция 27;2-2, 1 11 Фракция 72,8+2,0 Как видно из данных табл. 1, основная масса лимфоцитов больных лейкозом животных...