Демчева

Номер патента: 1726511

Опубликовано: 15.04.1992

Авторы: Демчева, Носыркова, Савицкий, Чередникова

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антигенным, антител, гибридных, детерминантам, инсулина, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, общим, свиньи, человека, штамм

...клонируют вполужидком агаре, Клонирование гибридомы повторяли трижды, Клонированную гибридому 6 Е 66 2 А перевивают на мышах5 ВаЬ/с для получения асцитной жидкости,Полученный штамм гибридных клетокпродуцирующий моноклональные антителак общим антигенным детерминантам инсулина человека и свиньи, депонирован в спе 10 циализированой коллекции перевиваемыхсоматических клеток позвоночных Всесоюзной коллекции клеточных культур Институтацитологии АН СССР под М ВСКК (П) 420 Д ихарактеризуется следующими признаками,15 Культуральные свойства. Для выращивания штамма используют культуральныефлаконы. Во флакон с 3 мл среды ОМЕМ,содержащей 10 СПК, 3,5 мМ глютамина,17,5 мкМ пирувата натрия и 50 мМ 2-меркэп 20 тозтанола, засевают 250000 клеток...

Номер патента: 1659477

Опубликовано: 30.06.1991

Авторы: Демчева, Мантрова, Папковский, Пономарев, Савицкий, Чередникова

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, животных, клеток, копропорфирину, культивируемых, мusмusсulus, моноклональных, продуцент, штамм

...пассажи 1 раэ в 4-5 дней с подсчетом клеток. Для получения асцита мышам ВаЬ/с эа 7 дней до введения гибридомных клеток вводят 0,5 мл 2,6 10,14-тетраметилпентадекана в/б. На 7 день штамм клеток иньецируют в/б в количестве 500000 клеток в мышь. Асцитную жидкость отбирают на 10-й день, Объем асцита 5-6 мл. Клетки иэ асцита иеревивают новым мышам в течение 9 пассажей беэ заметного изменения титра моноклонэльных антител в асцитной жидкости.Контаминация, Бактерии и грибы в культуре не обнаружены. Тест на микоплаэму отрицателен.Кариологическая характеристика штамма: модальное число хромосом 90. Маркерных хромосом не выявлено.Продуктивность. штамма, Концентрация моноклональных антител в культуральной жидкости на 7-й день культивирования...

Номер патента: 1595903

Опубликовано: 30.09.1990

Авторы: Гаврилова, Демчева, Егоров, Чередникова

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, инсулину, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, штамм

...методу Лоури и в Е 1,1 БА,Криоконсервирование, Клетки штаммаресуспендируют в смеси, содержащей10% ДМСО, 30% Фетальной сыворотки и607. среды ДМЕМ, в концентрации 110клеток на 1 мл, разливают при 4 С впластиковые ампулы, помещают в полиуретановые контейнеры и переносят вхолодильник на -70 С на 18 ч, Затемклетки переносят в жидкий азот надлительное хранение. Размораживаниепроизводится при 37 С в водяной бане.Жизнеспособность клеток оцениваетсяс помощью трипанового синего и составляет 407,Концентрация, Бактерии и грибы вкультуре не обнаружены при длительг ном наблюдении. Тест на микоплазму отрицателен. П р и м е р, Моноклонапьные антитела используют для определения концентрации инсулина методом иммуноферментного анализа. В 96-луночные...

Номер патента: 1562353

Опубликовано: 07.05.1990

Авторы: Демчева, Папковский, Савицкий, Чередникова

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, используемый, клеток, копропорфирину, культивируемых, мusсulus, моноклональных, штамм

...вводят 0,5 мл 2, 6, 10, 14-тетряметилпентядекана в/б. На 7 день штаммклеток инъецируют В/б в количестве500000 клеток в мышь. Асцитную жидкость отбирают на 12-4 день. Объемасцита 4-5 мл. Клетки из асцита перевиваются новым мышам в течение 8 ОО пассажеи без заметного изменениянТИТРЯ МОНОКЛОНЯЛЬНЫХ ЯНТИТЕЛ В ЯСЦИТНОЙ ЖИДКО С Ти еПродуктивность штаьола,Концентрация моноклональных антлтел в культуряльной жидкости на7 день культивирования 100 икг/мл,а в аситной жидкости 10-2 мг/мл приопределении по методу Лоури и методомтвердофязного иммуноферментного анализа.Контаминация: бактерии и грибы вкультуре не обнаружены, Тест на микоплазму отрицателен.Кариологическая характеристикаштамма: модяльное число хромосом 100.Маркерых хромосом не...