Способ определения активности человеческого лейкоцитарного интерферона

Номер патента: 1665300

Авторы: Лазаревич, Мисенжников

ZIP архив

Текст

(19) (11) РЕСПУБЛИК 33 00, 6 12 й 9/00 51) ТЕ ЗОБ ОПИСАН К АВТОРСКОМУ ВИДЕТЕЛЬС ГОСУДАР.СТВЕННЪ 1 Й КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЪТИЯМПРИ ГКНТ СССР(56) Кондратьева Г.А. и др. Микрометод титрования человеческого интерферона. Сб;(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ ЧЕЛОВЕЧЕСКОГО ЛЕЙКОЦИТАРНОГО ИНТЕРФЕРОНА(57) Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано при провеИзобретение относится к биотехнологии и может быть использовано при проведении научных исследований и в процессе производства человеческого лейкоцитарного интерферона.Цель изобретения - повышение чувствительности и достоверности способа определения активности человеческого лейкоцитарного интерферона.П р и м е р. Исследуемые пробы интерферона последовательно разводят в лунках плашек, смешивают с суспензией клеток(по 4-8 х 10 клеток на 1 лунку), плашки помеща 4ют в С 02 - инкубатор до образования моно- слоя (на 5 - 18 ч), после чего жидкость из плашек сливают и вносят в лунки рабочую дозу вируса ЭММ (по 100 ЦПД 5 о/0,2 мл). дении научных иСследовании и в процессе производства человеческого лейкоцитарного интерферона. Целью изобретения является повышение чувствительности и достоверности способа определения активности человеческого лейкоцита рного интерферона. Указанная цель достигается использованием в качестве индикаторной системы перевиваемых клеток СПЭВ - вируса энцефаломиокардита мышей. При этом индикаторный вирус вносят в клетки после удаления интерферона, а перед учетом результатов клетки промывают изотоническим раствором хлорида натрия и окрашивают 1-ным раствором анилинового красителя с 1-ным раствором ледяной уксусной кислоты. 2 табл,Постановку основного опыта сопровождают контролями клеток(клетки беэ вируса) и развернутым контролем рабочей дозы вируса (без интерферона). После внесения рабочей дозы вируса плашки выдерживают в СО 2-инкубаторе 18 - 24 ч, затем жидкость из плашек сливают, все лунки дважды промывают слабой струей физиологического раствора (рН 7,0) и окрашивают сохранившиеся клетки путем внесения в каждую лунку по 0,1 мл 1 ф,-ного раствора анилинового красителя (например, метиленовой сини, фуксина) с 17 ь ледяной уксусной кислоты, Через 2 - 5 мин краситель сливают, лунки дважды промывают физиологическим раствором и проводят визуальный учет результатов исследования.1665300 Ф о р мул а изобретения Способ определения активности человеческого лейкоцитарного интерферона,включающий обработку перевиваемой Таблица 1 Титрование препаратов человеческого лейкоцитарного интерферона (ЧЛИ) в системах фибробласты эмбриона человека (ФЭЧ) - ВВС и СПЭВ - вирус ЭММ.аблица 2 трование препаратов ЧЛИ на перевиваемых клеках СПЭВ и Л - 41 по защитному действию от вируса ЭММ, Сравнение заявленного способа со способами, включающими использование других индикаторных систем клеток и вирусов, показано в табл, 1 и 2.Коэффициент корреляции 0,86, Как видно из табл. 1 и 2, предлагаемый способ определения активности ЧЛИ позволяет повысить чувствительность, воспроизводимость и достоверность тестирования интерферона, облегчить процедуру обработки и обеспечить воэможность многократного ис пользования плашек. культуры клеток интерфероном. добавление индикаторного вируса и учет результатов, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения чувствительности способа и его 5 достоверности, в качестве культуры клетокиспользуют перевиваемую линию клеток СПЭВ, а в качестве индикаторного вируса используют вирус энцефаломиокардита мышей, при этом добавление индикаторного 10 вируса осуществляют после удаления интерферона из культуры клеток, а перед учетом результатов культуру клеток промывают изотоническим раствором хлорида натрия и окрашивают красителем следующего соста ва; мас.: метиленовая синь или фуксин1, ледяная уксусная кислота 1, дистиллированная вода - до 100.

Смотреть

Заявка

4340413, 08.12.1987

ПЕРМСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ВАКЦИН И СЫВОРОТОК

МИСЕНЖНИКОВ АЛЕКСАНДР ВЕНИАМИНОВИЧ, ЛАЗАРЕВИЧ СВЕТЛАНА НИКОЛАЕВНА

МПК / Метки

МПК: C12N 9/00, G01N 33/00

Метки: активности, интерферона, лейкоцитарного, человеческого

Опубликовано: 23.07.1991

Код ссылки

<a href="https://patents.su/2-1665300-sposob-opredeleniya-aktivnosti-chelovecheskogo-lejjkocitarnogo-interferona.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ определения активности человеческого лейкоцитарного интерферона</a>

Похожие патенты