C12N 15/20 — интерфероны

Номер патента: 1604164

Опубликовано: 30.10.1990

Авторы: Герхард, Гюнтер, Ингрид, Петер, Рудольф, Эдгар

МПК: C12N 15/20

Метки: гибридного, интерферона, типа

...Гершейиспользуют 2,0 мл 207-ной глюкозы,0,5 мл 27.-ного треонина, 1,0 мл 17-ного лейцина, 1,0 мл 27-ного пролина, 27-ного аргинина, О, 1 мл О, 17-ного тиамина в виде гидрохлорида,.20 мкг/мл ИАК-индоакрнловой кислоты.Добавлением 5 мг/мл 8-метионинаи дальнейшей инкубацией при 37 С втечение 1 ч новосинтезируемые протеины радиоактивно маркируют. Бактерииотделяют цечтрифугированием и в 04164 О200 мкл буфера (ДСН) - додецилсульфата натрия (6,6 мл Фосфата натрияс рН 68 р 2 мМ ЭДТУК, 27 ЛСН, 37 глицерина, 0,027 бромфенолового сине;го, 0,667 2-меркаптоэтанола) в течеоние 5 мин лигируют при 100 С. Пробызатем разделяют в 157-ном полиакриламидном геле (разделительный гель;157. акриламида, 0,47, бисакриламида,375 мМ трис, рН 8,8, 2 мМ ЭДТУК,...

Номер патента: 1642956

Опубликовано: 15.04.1991

Авторы: Адольф, Гюнтер, Норберт, Петер, Рудольф

МПК: C12N 15/20

Метки: интерферона, лошадиного

...Д, Характеристика рекомбинантных фагов,Из 7 гибридизирующихся с человеческим 06-интерфероном рекомбинантныхДНК готовят фаговую ДНК, ДНК переваривают рестриктазами Есой 1, ВавН 1,Н 1 пй 111, Рвй 1, ВК 111, ЯаП, Ява 1 ипутем электрофореза разделяют в0,8 Х-ном агаровом геле, Величинагибридиризувцих фрагментов определяется по способу Саусерна, Положениерестрикционных мест внутри лямбда вставки определяют после частичногорестрикционного переваривания ляибдаЦНК, маркировки правых или левых тупых концов лямбда-ветвей синтетичес 5кими, маркированными Р 32 олигонуклеотидами и электрофореза в 0,457 ном агаровом геле,Стадия Е, Субклонирование геналошадиногою-интерферона,Рестрикционный фрагмент клонаЕ 8-01, который гибридизуется с маркером...

Номер патента: 1669402

Опубликовано: 07.08.1991

Авторы: Адольф, Гюнтер, Норберт, Петер, Рудольф

МПК: C12N 15/20

Метки: интерферона, собачьего

...н,е маленькие части в ледяной банг с помощью 20-секундных ультразвуковых иллпульсов (всего 1 ПО.). ДНК-концы восстанавливают в те еение 2 ч при 14 С л 25 С мкл рЕ; кционной Срвды (50 мМ триСНС 1, О". 75, О мМ М 9 С 12, 1 м",4 д.:тиотреи.е=."а 0 5 мг/мл а":,бул(ина сыворотки кр,геного рогатое О ечеота, по 0,1 мМ ОАТР,5 10 15 20 25 3,. г Е 3 40 45 55 ОСТР, ОСТР, ОТТР с помощью 15 ед большого фрагмента Е,со 1-полимеразы(фрагмента Кленова), После концентрированияпутем осаждения этанолом предварительнообработанную таким образом ДН К разделяют в 1 О/.-ном агароэном геле и ДНК-фрагменты длиной 0,351,0 т.п.о, выделяют иочищают. Примерно в 10-кратном молярномизбытке фрагменты лигируют с разрезанной Яетеа и дефосфорилированной репликативной...