C12N 5/00 — Недифференцированные клетки человека, животных или растений, например, клеточные линии; ткани; культивирование или сохранение их; питательные среды для них

Номер патента: 1708835

Опубликовано: 30.01.1992

Авторы: Верховская, Гучок, Луговой, Мамаева, Олейник

МПК: C12N 5/00

Метки: клеточных, консервирования, линий, постоянных

...моно- слой клеток постоянной линии почки теленка (ПТ в хорошем состоянии (клетки эпителиоподобного типа с четко выраженными границами) снимают с поверхности стекла культуральных сосудов смесью растворов версена и типсина в соотношении 4:1 бесцентрифужным методом и берут пробу для определения концентрации и жизнеспособности клеток, К суспензии клеток добавляют криоконсервант пропандносахароль разбавленный питательной средой: 90.- среды 199, 107; сыворотки крупного рогатого скота и 100 мкг/мл канамицина сульфата, до конечного разведения 1;3,5 и концентрации клеток 1,9 х 10 /мл, Клеточйную суспензию разливают в полиэтиленовые ампулы по 1,5 мл и запаивают. Зквилибрацию клеток с криозащитной средой осуществляют 15 - 20 мин при...

Номер патента: 1710576

Опубликовано: 07.02.1992

Авторы: Ионов, Юрин

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, инсулину, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, человека, штамм

...жидкости 30 мкг/мп, в асцитной жидкости 12 мг/мл. Стабильностьпродуцирования антител сохраняется напротяжении 20 пассажей в культуре и 7пассажей на животных, если гибридомаперевивается.Контаминация. Бактерии и грибы. в культурах не обнаружены при длительном наблюдении ипосевах на питательные среды. Заражение микоплазмой не выявлено при окрашивании красителями на ДНК и тимидиновом промечиванин культуральной среды.Консервация клеток.Клетки штаммов замораживают после2 и 3 клонирования на 10 .и 15 пассажахв культуре и после роста в внде.асцитной опухоли в мышах. Криозащитная среда 50% ростовой среды, 40% эмбриональной телячьей сыворотки и 10% диметилсульфокеида,Режим замораживания: клетки в кри-озащитной среде помещают на сутки...

Номер патента: 1710577

Опубликовано: 07.02.1992

Авторы: Ионов, Юрин

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, инсулину, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, человека, штамм

...на мышах, Титр антител в культуральной жидкости составляет 1:128 а в асцитической1:100000.Продуктивность.Концентрация антител, продуцируемых5 штаммом 04 В 8, составляет в культурапьнойжидкости 50 мкг/мл, е асцитной жидкости20 мг/мл, Стабильность продуцированияантител сохраняется на протяжении 20 пассажей в культуре и 7 мпассажей на живо 10 тных, если гибридома перевивается.Контаминация.Бактерии и грибы в культурах не обнаружены при длительном наблюдении и посевах на питательные среды. Заражение15 микроплазмой не выявлено при окрашивании красителями на ДНК и тимидиновомпромечивании культуральной среды.Консервация клеток.Клетки штаммов замораживают после 220 и 3-го клонирования на 10 и 15 пассажах екультуре и после роста в виде...

Номер патента: 1712410

Опубликовано: 15.02.1992

Автор: Злобина

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антигену, антитела, гибридных, железы, клеток, культивируемых, мusсulus, мол, моноклонального, поджелудочной, продуцент, штамм

...Режим замораживания; 1 градус в мин, до -70 С, далее клетки переносят в жидкий азот, Рэзмораживают гибридому при переносе ампулы с клетками изжидкого азота в водяную баню при 37 СЖизнеспособность клеток после хранения в жидком азоте около года не ниже 70%, судя по включению красителя эозина и трипа нового.синего,Использование. штамма иллюстрируется следующими примерами.П р и м е р 1. Гибридому высевают при плотности 5 10 клеток/мл в пластиковый5флакон с минимальной средой Игла, модифицированной Дульбекко, содержащей 10 эмбриональной телячьей сыворотки, 2 пМ 1:глютамина, 100 ед/мл гентамицина и 5 10 М 2-меркаптоэтанола, Клетки культи 20 вируют 3 - 4 дня при 37 ОС в атмосфере с 5% С 02, Далее культуральную жидкость соби-. рают,...

Номер патента: 1712411

Опубликовано: 15.02.1992

Авторы: Воеводин, Зоделава, Клоц, Талло

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, иммуноглобулину, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, павианов, продуцент, штамм

...и вирусами:контаминации бактериями, грибами и микроплазмы нет.Один из родительских клеток продуцируют эндогенный ретровирус С-типа мышей;11, Характеристика полезного вещества, продуцируемого штаммом; мон-АТ дО -класса, направленные к классоспецифической детерминанте тяжелых цепей, дО павианов: специфичность оцениваласьиммуноферментным методом и вестернблотин гом.12, Концентрация полезного продухта (моноклональных антител) в среде около 10 мкг/мл, в асцитной жидкости около 10 мг/мл;Титры данных антител при определении с помощью твердоазного иммуноферментного метода около 2 х 10 (среда/ и 2 х 10-6/асцит при концентрации антитенэ 1 мкг/мл.Определение антител можно проводить также иммунофлюоресцентными и радиоимму нологическими методами....

Номер патента: 1712412

Опубликовано: 15.02.1992

Авторы: Панютич, Петевка, Фомин

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антитела, гибридных, еsснеviнiа, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклонального, пирофосфатазе, продуцент, штамм

...пирофосфат, 30 - ,50 мкМ в 0,05 М Трис-НС циллина и стрептомицина, 0,05 мМ меркап буфере, рН 9,0, 0,5 мМ МдС 2 и инкубируют тоэтанола. Клетки культивируют при 37 С в 20 мин при 37 С, Окрашивание лунок учитыатмосфере 5% С 02. Посевная доза 2 10 вают после добавления раствора, содержа- клеток в мл, щего молибдат аммония и малахитовыйДля выращивания гибридомного Штам- зеленый на спектрофотометре при длине ма в асцитной форме пригодны мыши 30 волны 620 нм.ВаЬ/с. Мышам за 7 - 30 дней до инъекции Результаты опыта по определению клеток штамма вводят внутрибрюшинно по специфичности связывания МКА, продуци,5 мл пристана. Клетки инъецируют внутри-руемого клетками штамма РГВ с пирофосбрюшинно по 2 - 5 миллионов в 0,5 мл среды . фатазой Е.со,...

Номер патента: 1717147

Опубликовано: 07.03.1992

Авторы: Белкина, Дерюгина, Леменева, Оловникова, Проскурина, Удалов, Чертков

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антигену, антитела, гибридных, группоспецифическому, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональные, продуцирующий, системы, человека, штамм, эритроцитов

...5 к 1 0 М 2-меркаптоэтанола, 5 О/-ной среды, кондиционированной спленоцитами мыши, антибиотики; 37 С, 6 СО в воздухе.г время роста гибридомы в форме асцитной опухоли 12 сут.Морфология клеток: штамм представ.лен слабо прикрепляющимися к субстрату клетками с обычной для антителопродуцирующих клеток морфологией.Видовая принадлежность штамма; доказана цитогенетическим методом, Кариотип соответствует виду Мцэ птцзсацз. Число хромосом составляет 83-92, генетические маркеры - 1 метацентрическая и 1 большая субметацентрическая хромосомы. Сведения о контаминации линии: контаминация бактериями, грибами, микоплазмами не обнаружена, вирусы не тестированы.Характеристика полезного вещества, продуцируемого штаммом:.анти-Й антитела,...

Номер патента: 1723119

Опубликовано: 30.03.1992

Авторы: Поздеев, Чермашенцев

МПК: C12N 5/00, C12N 5/02

Метки: венесуэльского, вируса, клеток, культивировании, культур, лошадей, питательная, поддерживающая, среда, энцефаломиелита

...жидкости на основе штамма ТСвируса венесуэльского энцефаломиелита из расчета 1 - 10 БОЕ/кл. После адсорбции (40 мин) монослои заливают предлагаемой в заявке поддерживающей питательной средой, После инкубации при 37 С в течение 3 сут образцы с полученной ВСС выдерживают при 37 С 5 сут с последующим тестированием инфекционности на первичной культуре клеток ФЭК под твердым агаровым покрытием,Составы поддерживающих питательных сред приведены в табл. 1.Контрольный состав содержит среду Игла МЕМ Нерез с 2 -ной сывороткой КРС 1 л,Тестирование инфекционного штамма ТСвируса осуществляют для каждого состава питательных сред. После анализа полученных данных получают динамику инактивации штамма ТСвируса в суспензии (фиг,1 - 4).Константы...

Номер патента: 1724687

Опубликовано: 07.04.1992

Авторы: Литовченко, Миронова, Попова, Семенова, Хапчаев

МПК: C12N 5/00

Метки: желатиновых, животных, клеток, культивирования, микроносителей

...что в нагретом до 50 С растворе желатины глютаровый альдегид вызывает неравномерное формирование геля с узелковыми уплотнениями темного цвета. Затем полученную смесь охлаждают до 4 - 20 С и выдерживают ее до образования геля (полимеризация), В последующем гель замораживают при (-20) - ( - 25)ОС. Формирование частиц МН производят путем дробления геля в ножевом гомогенизаторе при скорости вращения вала с ножами 100- 250 об/мин в течение 5-7 мин. По своей форме частицы МН представляют ячеистую структуру с размером частиц 0,05 - 2,0 мм и размером ячеек 40-80 мкм,Частицы МН в последующем отмывают последовательно в дистиллированной воде и физиологическом растворе. Передисполь 5 10 15 20 25 30 35 40 зованием МН стерилиэуют автоклавированием,...

Номер патента: 1726511

Опубликовано: 15.04.1992

Авторы: Демчева, Носыркова, Савицкий, Чередникова

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антигенным, антител, гибридных, детерминантам, инсулина, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, общим, свиньи, человека, штамм

...клонируют вполужидком агаре, Клонирование гибридомы повторяли трижды, Клонированную гибридому 6 Е 66 2 А перевивают на мышах5 ВаЬ/с для получения асцитной жидкости,Полученный штамм гибридных клетокпродуцирующий моноклональные антителак общим антигенным детерминантам инсулина человека и свиньи, депонирован в спе 10 циализированой коллекции перевиваемыхсоматических клеток позвоночных Всесоюзной коллекции клеточных культур Институтацитологии АН СССР под М ВСКК (П) 420 Д ихарактеризуется следующими признаками,15 Культуральные свойства. Для выращивания штамма используют культуральныефлаконы. Во флакон с 3 мл среды ОМЕМ,содержащей 10 СПК, 3,5 мМ глютамина,17,5 мкМ пирувата натрия и 50 мМ 2-меркэп 20 тозтанола, засевают 250000 клеток...

Номер патента: 1726512

Опубликовано: 15.04.1992

Авторы: Василов, Втюрина, Литвинова

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, белку, гибридных, глиальному, используемый, кислому, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, фибриллярному, человека, штамм

...16 ч; затем срезы промывали (по 5 мин) в 3 сменах забуференного физиологического раствора, рН 7,3, а затем инкубировали с антисывороткой к иммуноглобулинам мыши, меченным ФИТЦ или пероксидазой. Результаты реакции учитывали в люминесцентном или световом микроскопе в зависимости от природы используемой метки, Для клонирования отбирали гибридомы, которые продуцируют МКА, взаимодействующие с глиальными клетками в виде четкого фибриллярного свечения и не дающие реакций с другими клеточно-тканевыми структурами.Клонирование отобранных гибридом. Культуры гибридом, в супернатантах которых обнаруживаются антитела к ГФКБ, не дающие перекрестных реакций с другими тканевыми антигенами человека, клонировали методом предельных разведений из...

Номер патента: 1727822

Опубликовано: 23.04.1992

Авторы: Безуглый, Гордиенко, Осташко

МПК: A61D 19/04, C12N 5/00, C12Q 1/24 ...

Метки: микрохирургических, операций, проведения, эмбрионами, яйцеклетками

...объекта, в частности прозрачная оболочка (зона пеллюцида) яйцеклеток и эмбрионов, не обладает избирательной проницаемостью, в то время как цитоплазматические мембраны клеток, в частности яйцеклеток и бластомеров эмбрионов, обладают избирательной проницаемостью. Это приводит к тому, что при помещении в гипертонические растворь 1 непроницаемь:х через цитоплазматические мембраны качеств, например хлористого натрия, сахарозы осмомолярностью 1.2 - 1,5 М, обьем клеточной массы биологического объекта уменьшается ч 2.5-2 Я1727822 35 40 45 50 5 10 15 20 25 30 позиционеровмикроманипулятора, эмбрионы удерживают микроприсоской. Заточен-. ной микропипеткой с диаметром, сравнимым с размерами внутриклеточной массы, находящейся в гипертоническом...

Номер патента: 1735360

Опубликовано: 23.05.1992

Авторы: Коренева, Пригода

МПК: C12N 5/00

Метки: клеток, млекопитающих, перевиваемых, питательная, среда

...0,5-1,0 ати. Готовая питательная среда должна храниться при 4-6 С, Клетки ВНК(С) суспензионно культивируют в конических колбах емкостью 250 мл при объ еме заполнения 70 мл под резиновыми пробками на термостатируемой качалке (180 об/мин, амплитуда 20 мм) при 35 -0,5 С. Продолжительность каждого пассажа равна 72 ч, всего проведено 29 пассажей. 20 Начальная концентрация клеток в пассажах составила (0,4-0,1) 10 кл/л, средняя конечЯная концентрация клеток равна (2,40,1)х х 10 кл/л, количество жизнеспособных клеток в пассажах на уровне 99 , 25Пропись питательной средыНаименование КонцентраЦИ 1 компонентов-аргинин. 0,115-глутамин 0.584-триптофан 0,015-цистин 0,042Холинхлорид 0,050Фолиевая кислота 0,003Никотинамид 0,003Пиридоксаль НС 0.003Тиамин...

Номер патента: 1735361

Опубликовано: 23.05.1992

Авторы: Белов, Кумпаниец

МПК: C12N 5/00

Метки: воздушной, инокулировании, искусственной, камеры, куриных, оболочку, создания, хориоалантоисную, эмбрионов

...Через 2 с после удара пробойника источник разрежения отключается.Результаты опытов по созданию искусственной воздушной камеры приведены в таблице,Из таблицы видно, что для реал способа оптимальные величины ра ния, времени воздействия его на я также размеры и глубина введения и ника находятся в следующих предел личина разрежения 30 - 90 кПа;действия разрежения до и после1735361 около 2 с; диаметр пробойника 1,8-2 мм; глубина введения 1-2 мм,Предлагаемый способ позволяет увеличить производительность всего процесса инокулирования по сравнению с базовым объектом в 10 раз (100-150 ш/ч), а также дает возможность автоматизировать процесс инокулирования на ХАО,ных эмбрионов на хориоаллантоисную оболочку, включающий выполнение отверстия в...

Номер патента: 1510356

Опубликовано: 07.06.1992

Авторы: Кравченко, Петренко, Сукач

МПК: C12N 5/00

Метки: гепатоцитов, разделения

...до 0 С и измельчалн ножцнна.тн в среде, содержащей 250 мМ сахарозы, 5 мМ КС 1, 1,6 мМ г(аЕ(РО , 0,4 мМ КН. РО+, 0,8 мМ МяС 1 , 1,2 мМ СаГ 1 , 1 Ж сит- бумина (рН 7,4). Кусочки ткаци подвергали вибрацтги н охлажлеттттой саха- розно-солевой среде с частотой 50 Гц(количество жизнеспособных клеток)1007 общее количество клеток 25 и 19,6 Х по известному способу,.т.е вьппе на 443 по предлагаемомуспособу,Жцэнеэкю /с1 ущ, нмоль ЮсФ, нмольО /О кл/мин О/1 О кл/мин Фракция способность,22,74 2, 1 1,33+01 Нижняя 10 93 + 2Верхняя 5 Зл17,74:2,2 11,2 И 0,7 Составитель Л. СабуроваТехред Л,Кравчук Корректор В,Кабаний Редактор Л, Коцдрахица Заказ 1773/ДСИ Тираж 367 ПодписноеВНИИПИ Государсч венного комитета по изобретениям и открытиям прц ГЕНТ СССР...

Номер патента: 1738851

Опубликовано: 07.06.1992

Авторы: Белорусский, Буадзе, Вельчева, Вольф, Егоров, Зуев, Киц, Мостовая, Пухова, Рудаков, Царева, Чурина

МПК: C12N 5/00

Метки: коллагеновых, микроносителей

...на пол-. ученныхых этим способом микро носителях, позволяет достичь величины индекса пролифирации лишь на 4-е сутки 2,3 - 3,0. Кроме того, получают коллаген в виде пленок, которые обладают недостаточным рабочим обьемом, и для более удобного способа использования их необходимо измельчать до требуемых размеров, что я вляется технологически трудновоспроизводимым.Целью изобретения. является повышение качества коллагеновых микроносителей при сокращении длительности процесса,Поставленная цель достигается тем, что согласно способу получения коллагенновых микроносителей, заключающемуся в том. что зольный спилок шкур крупного рогатогоскота подвергают щелочно-солевой обработке в течение 120-144 ч, обрзующуюся. коллагенсодержащую массу...

Номер патента: 1740415

Опубликовано: 15.06.1992

Авторы: Кулаков, Разина, Титова, Храпова

МПК: C12N 5/00

Метки: антигену, антител, близкородственным, возбудителем, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, рsеudомаllеi, рsеudомоnаs, реагирующих, сапа, штамм

...антител к видоспецифическому антигену Р.рзецбоааИе 1,Моноклональные антитела получаютлибо из культуральной жидкости (при культивировании "ин витро"), либо из асцитической жидкости (при культивировании гибридом "ин вива"). Для демонстрации их избирательной (в отношении возбудителя мелиоидоза) специфичности используют метод иммуноферментного анализа, прямой и непрямой иммунофлюоресценции,Иммуноферментный анализ.В качестве антигена на твердой фазе для сравнительного анализа в ИФА используют водно-солевые экстракты из взвесей инактивированных бактерий (двухсуточные культуры либо Р,щаИе либо Р.рзецбощаИе 1, типичных штаммов, обладающих полным набором антигенов, присущих каждому виду), подвергнутых обработке ультразвуком и осветлению...

Номер патента: 1742323

Опубликовано: 23.06.1992

Авторы: Дьяконов, Зубцов, Майджи, Матюгина, Расторопов, Строкина

МПК: A61K 35/16, C12N 5/00

Метки: вирусов, клеток, крови, культивирования, сыворотки, телят

...цитохимии и чувствительности к вирусу щелочной фосфатазы и чувствительность к вирусу Коксаки ВЗ, клетки образуют хороСоставитель В. СвиридоваРедактор И. Дербак Техред М,Моргентал Корректор Н. Ревская Заказ 2261 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул,Гагарина, 101 45 мин при 1,5 тыс, об/мин (известная методика).Сыворотка крови новорожденных телят до первой выпойки молозива контролируется по следующим показателям; общий белок 5 35+15 г/л, содержание у-глобулинов не более 2 от общего количества белка, содержание свободного гемоглобина не более 0,5 г/л.П р и м е р 1. Родившийся теленок осу...

Номер патента: 1742324

Опубликовано: 23.06.1992

Авторы: Булатов, Вайль, Василов, Втюрина, Мартынов, Осипова, Смирнова

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, высокоспецифичных, гибридных, гормону, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, тиреотропному, человека, штамм

...14 - 20 дн.Данные видовой принадлежности, мышиные клетки Ва в/с.Продукция М КА ста бил ьна на и ратяжении 25 пассажей в культуре и 5 пассажей на животных.Характеристика целевого продукта, Штамм гибридных клеток Тпродуцирует моноклональные антитела подкласса 01, высокоспецифичные к ТТГ человека. Специфичность оценивают иммунаферментным методом. УКА не реагируют с Л Г, ФСГ50 55 иммуноглобулинов мыши, коньюгированных с пероксидазой хрена, После трехкратного промывания планшетов фосфаты буфером с Твинв лунки добавляют 0,04 ф-ный раствор о-фенилендиамина в0,2 М фосфэтно-цитратном буфере (рН 5,0) с добавлением 0,012 перекиси водорода, После появления окраски реакцию в лунках останавливают раствором 2 М серной кислоты и проводят регистрацию...

Номер патента: 1742325

Опубликовано: 23.06.1992

Авторы: Кириллова, Лесных, Мареев, Славянская

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, биотипа, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, холерному, штамм, эльтор, энтеротоксину

...иммуноферментном анализе (ИФА) и реакции преципитации (РП) по Оухтерлонии с ХТ 1310, понейтрализации специфического действияХТ 1310 в тесте кожной проницаемости поКрейгу и нейтрализации цитотоксическогодействия ХТ на овариальные клетки китайского хомячка (СНО), Класс иммунаглобулинов определяют в РП по Оухтерлони или вИФА с "НЬчЫогпа э 0 Ьзотурпц КИ, пзооэе,СаЬ 3 осЬегп" (США).Титр МКА в культуральной жидкости1/265-1/512 (ИФА); в асцитической жидкости 1/51200. (И ФА), 1/16 - 1/32 (РП); нейт-.рализации ХТ 1310 в пробе по Крейгу1/2000; нейтрализации ХТ 1310 на клеткахСН О 1/320 - 1/640,Стабил ьность п родукции антител сохраняется на протяжении пассажей в культуре и пассажей на животных в течение 18мес (срок...

Номер патента: 1742326

Опубликовано: 23.06.1992

Авторы: Андросова, Владимирский, Ильиных, Погуляева, Трахт, Ходун, Шипина

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, воvis, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, мyсовастеriuм, моноклональных, продуцент, штамм

...КРМ 1-1 640 с 20 телячьей эмбриональной сыворотки, 4 мМ-глутимина, 10 мМ пирувата натрия, аминокислотами для базальной среды Игла, витаминами для среды Игла, 0,05 мМ меркаптоэтанола и в атмосфере 5 углекислоты.Для выращивания штамма использу-. ют пластиковую посуду. Посевная доза 100 тыс,кл./мл. Клетки пассируют 1 раз в 3 - 4 дня, ратность рассева 1:10, Культура суспензионная.Культивирование в организме животных,Для выращивания опухоли пригодны мыши ВА.В/с, Свежим мышам за 3 - 30 дней до инъекции штамма вводят внутрибрюшинно по 0,5 мл пристана или вазелина. Штамм инъецируют внутрибрюшинно по 4- 5 10 кл. в среде Игла, Асцит образуется через 20 - 25 дней. Штамм не перевивают.Продуктивность штамма: секреция моноклональных...

Номер патента: 1744107

Опубликовано: 30.06.1992

Авторы: Амбарцумян, Завольная, Казаков, Климович, Машуров, Морозова, Швецова

МПК: C12N 5/00

Метки: f-системы, антигена, антител, видов, гибридных, ему, животных, клеток, крупного, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, против, рогатого, родственных, скота, штамм, эритроцитарного

...и м е р 1. 1 млн клеток штамма после криоконсервации освобождают путем центрифугирования (1000 об/мин в течение 10 мин) от среды криоконсервации; пипеткой (1 мл) распределяют клетки по 200 тыс. в лунки (2 мл) 24-ячеечного планшета (Еочч) на среду ПС, кондиционированную предварительно посеянными макрофагами. План. шет помещают в атмосферу 95% воздуха и 5% СО 2 при абсолютной влажности и 37 С. Через 48 ч клетки из каждой лунки переносят во флаконы Карреля в 4 - 5 мл среды ПС, соблюдая при этом оптимальную посевную дозу 200 - 300 тыс,клеток в 1 мл. При достижении культуральной плотности 600-700 тыс, клеток/мл их рассеивают в свежую среду(ПС) во флаконы. В третьем пассаже ПС заменяют НПС или НПС с добавлением КС,Культуру пассируют до...

Номер патента: 1745767

Опубликовано: 07.07.1992

Авторы: Одинцова, Хоменко

МПК: C12N 5/00

Метки: yessoensis, двустворчатого, клеток, мizuснорестеn, моллюска, эмбриональных

...для концентрирования в небольшом обьеме.Обработку эмбрионов проводят 0,1- ным раствором коллагеназы (производство ТИБОХ ДВО АН СССР) в течение 1 ч при 10 С. Полученную массу пипетируют в течение 1 мин для разделения оставшихся агрегатог на отдельные клетки, центрифугируя (2 тыс. об/мин, 10 мин), промывают дважды в стерильной морской воде с антибиотиками (пенициллин 500 ед/мл, гентамицин 40 мкг/мл), а затем переводят в питательную среду (гентамицин 40 мкг/мл).В качестве питательной среды используют стандартную среду Лейбовича, которая содержит большие концентрации аминокислот, что характерно и для гемолимфы морских моллюсков, К среде добавляют таурин (25 мг/л); глюкозамин 50(мл/л), глютамин (100 мг/л), эмбриональную...

Номер патента: 1747483

Опубликовано: 15.07.1992

Авторы: Галагуза, Жалко-Титаренко, Пархоменко, Тимохина, Фролов

МПК: C12N 5/00, C12N 7/02

Метки: бактерий, цитотоксичности

...выражении, что значительно точнее (контроль). Для использованной органной 10 известного. Точность предлагаемого способа культуры кишечника мыши д составляет составляет 100%, известного 40%, Кроме то 270 д: . го, для осуществления способа не требуетсяЗатем в четыре опытные пробирки с дорогостоящихреактивовиоборудования,онидентичной культурой вносят суспензию отличается простотой, так как включает семь штамма Я.бузептегае720/69(Институт Па несложных технических приемов и занимает стера) в концентрации 5 10 КОЕ/мл, инку,75+ 0,51 на 1 определение (известный спобируютв термостате при 37 С в течение 30 соб - 32 технически сложных приема и мин, центрифугируют и находят минималь,52 0,57 сут соответственно).ное ускорение, йри котором происходит...

Номер патента: 1747484

Опубликовано: 15.07.1992

Авторы: Войтенок, Колесникова, Лях, Мисуно, Панютич, Петевка, Шидловская

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, гибридных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulusl, моноклональных, некроза, опухолей, рекомбинантному, фактору, человека, штамм

...После отмывания инкубируют с меченными пероксидазой к иммуноглобулинам мыши энтителами в разведении 1:2000 на ФСБ-БСА в течение 1 ч, Ферментную реакцию проводят в течение 10 мин. Раствор субстрата представляет собой 0,1 М цитратный буфер (рН 4,7) с 0,6 мг/млортофенилендиамина гидрохлорида и 0,01 % перекиси водорода. Реакцию останавливают через 10 мин 1 М серной кислотой и учитывают на спектрофотометре с вертикальным лучом при длине волны 492 нм,Результаты эксперимента по изучению специфичности связывания МКА, продуцируемого клетками штамма 10 ГИ, с антигенами, иммобилизированными на пластике, представлены в табл.1,Результаты исследований свидетельствуют о более высокой специфичности МКА, продуцируемых клетками штамма 1 ОРИ по...

Номер патента: 1751200

Опубликовано: 30.07.1992

Авторы: Деревянко, Кокоревская, Пастенес, Радюхин

МПК: C12N 5/00

Метки: гепатоцитов, искусственной, контура, первичных, печени, фиксации, экстракорпорального

...первичных гепатоцитов для экстракорпорального контура искусственной печени, включающий посадку гепатоцитов на поверхность носителя, о.тл ич а ю щ и й с я тем, что, с целью уменьшения травматизации клеток и поддержания полноценного массообмена гепатоцитов и среды, в качестве носителя используют пенистый открытопористый гидрофильный полиуретан. Составитель И. ТарееваРедактор Н, ШвыдкаяТехред М,Моргентал Корректор Т, Палий Заказ 2664Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035; Москва, Ж. Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул,Гагарина, 101 полиуретан, непосредственно на поверхность которого фиксируют гепатоциты,Сущность заключается в...

Номер патента: 1751201

Опубликовано: 30.07.1992

Авторы: Вахтин, Гужова, Каминская, Трусова, Федорова

МПК: C12N 5/00

Метки: выявления, гипертермией, используемый, клеток, крыс, лечению, опухолей, особенностей, ра-22, рабдомиосаркомы, устойчивых, штамм

...вычисленные по кривым выживаемости клеток после нагрева, равны при термальнойобработке 43 С 9,8 мин, при термальнойобработке 44 С 12,5 мин, при термэльнойобработке 45 С 13,5 мин.15 Особенностью штамма также являетсявысокая радиоустойчивость клеток. Значение До, определенное по кривой выживаемости клеток после их облучения вдиапазоне доз 1-10 Гр, равно 2,4 Гр.20 П р и м е р 1. Для изучения динамикиутраты термоустойчивыми опухолевымиклетками способности метастазировать после их нагревания при 45 С в течение 10, 20и 30 мин суспензию одиночных опухолевых25 клеток (концентрация клеток 1 млн/мл) всреде Игла помещали на водяную баню втермостат (точность нагрева +0,1 С) при45 С нэ 10, 20 и 30 мин, после нагрева клетки выдерживали 1 ч при...

Номер патента: 1751202

Опубликовано: 30.07.1992

Авторы: Баранов, Бурдов, Глобенко, Давыдова, Иванющенков, Кирюхин, Кожаева, Молчанова, Спирин, Худяков

МПК: C12N 5/00

Метки: алье, антитела, вируса, гибридных, животных, клеток, компоненту, культивируемых, мusсulus, моноклональные, продуцирующий, штамм, ящура

...Через 10 дней супернатанты гибридных клонов тестировали на наличие антител в ИФА. Позитивные клоны составляли 5 - 70 от общего количества гибридных клеток, Эти клоны дважды субклонировали методом лимитирующих разведений, Отобранный стабильный клон с наивысшим титром антител обозначали М 7 ГПЯА 5-89 и депониРовали во Всесоюзной коллекции клеточных культур (г, Ленинград) под регистрационным М ВСКК(П) 476 Д,Подученный штамм имеет следующие1 морфологические и культуральные признаки.Морфологические признаки.Клетки круглые, различной величины,Ядра занимают большую часть клетки,Кариология культуры,Кариотип соответствует виду (мышиный), Модальный класс 84 16;6), 86 10), 588 (16%) хромосом, Модальный класс дляродительской миеломной...

Номер патента: 1752762

Опубликовано: 07.08.1992

Авторы: Макин, Суслов, Шереметьев

МПК: C12N 5/00

Метки: слияния, эритроцитов

...отмывают и смешивают с 0,5-5 мМ раствором хлористого кальция, после чего в указанную смесь добавляют хлористый лантан до конечной концентрации 0,30 - 0,35 мм. 1 табл. качестве агентов слияния используют моноиодуксусную кислоту, хлористый кальций ихлористы й лантан.(Способ осуществляют следующим образом.иеаЪСвежезаготовленную кровь донора центрифугируют при 2000 9 в течение 5 мин,плазму убирают, а эритроциты трижды отмывают физиологическим раствором с последующим центрифугированием,К 1,0 мл осадка отмытых эритроцитовдобавляется 9 мл моноидоуксусной кислотыдо конечной концентрации 812 мМ, приготовленной на забуференном физиологическом растворе и инкубируют в течение 30мин при 37 С. После инкубации эритроциты.дважды отмывают от...

Номер патента: 1752763

Опубликовано: 07.08.1992

Авторы: Гервазиева, Климович, Крутецкая, Овсянникова, Пашкова, Полищук, Самойлович

МПК: C12N 5/00

Метки: musculus, антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, моноклональных, продуцент, человека, штамм

...продуцируемых первичными культурами гибридом, в табл 3 - выявление дЕ с помощью двухдетерминантного твердофазного иммуноферментного анализа, в табл, 4 - титры МКАТ,продуцируемых клетками штамма 8 Е/4 Ф 4при выращивании в среде с низким содержанием сыворотки, в табл, 5- титры МКАТ, продуцируемых клетками штамма Е/4 Ф 4, в культуральной среде и в асцитической жидкости,в табл. 6 - содерджание ц Е в образцах сыворотки крови человека, определенное в двухдетерминантном иммунометрическом тесте с помощью меченых МКАТ Е/4 Ф 4, в табл. 1 - содержание 9 Е в образцах сыворотки крови человека, определенное в двухдетерминантном иммунометрическом тесте с помощью МКАТ Е/4 Ф 4, иммобилизованных на твердой фазе, в табл. 8 - выявление цЕ-антител против...