C12N 5/00 — Недифференцированные клетки человека, животных или растений, например, клеточные линии; ткани; культивирование или сохранение их; питательные среды для них

Номер патента: 1524479

Опубликовано: 15.10.1990

Авторы: Бутенко, Донец, Попов

МПК: C12N 5/00

Метки: видов, генофонда, картофеля, криосохранения, сортов

...стенки так, чтобы фитиль и пакетик прилегали к ней вплотную и фитипь опускался дс дна. В ампул" наиивают 0,2-0,3 мл вьшеуказанного раствора криопротектороь, охлаждают ампулы в ледяной бане, а затем в ирограммнам эаморажнвателе со скорос,ью 0,5 О С/чин. При температуре -4,5 С производит затравку сразу всех ам пул, наход щих я в сиециалъном штативе, путем ирихосвсвеиия их дна к поверхности жидкого азота в течение 0,8 л 0,3 с, Дпя затравки возможно также использование специального устройства. ,ели программный эамараживатепь оснащен и адсонылл стройством, которое позволяет избежать кратковременного нарушения режима в камере замораживания. В обоих случаях апексы отдалены от завы образования и первоначального быстрого рос га кристаллов льда в...

Номер патента: 1601117

Опубликовано: 23.10.1990

Авторы: Дорошенко, Кострикин

МПК: C12N 5/00

Метки: viтrо, винограда, размножения

...в дистил 45лированной воде, высаживают, поливаютводой и накрывают на 6 дн полиэтиленовой пленкой. Пленку приоткрывают нанесколько часов в день, а затем снимают. В дельнейшем растения регулярно поливают и подкармливают смесьюЧеснокова,После того как происходит адаптация растений, появляются один - двановых листа, растения высаживают впленочнье теплицы на солнечном обо 55 греве с неполностью контролируемымиусловиями выращивания: параметры темгпературы, влажности; освещенностискладывались и колебались в зависи 160111740 мости от метеоусловий. Экстремальныеусловия исключают путем регулярных проветриваний и поливов. Таким образом, данные условия приближены к5 естественным условиям среды произ растания полученного посадочного материала.П р...

Номер патента: 1601118

Опубликовано: 23.10.1990

Авторы: Арнао, Бутенко, Донец, Попов

МПК: C12N 5/00

Метки: апикальных, культивирования, меристем, сахарного, тростника

...на питательнойсреде в течение 120 сут. В стерильных условиях растения извлекают изколб и используют из них меристемыразмером 400+50 мкм или размером1250+250 мкм. Сразу после вычленениямеристемы высаживают на питательнуюсреду, включающую минеральные элементы по прописи Г 1 урасиге-Скуга, витамины по прописи Стаба, сахарозу20 г/л, агар 7 г/л, активированныйуголь 10 г/л, кинетин 0,5 мг/л, аденин 40 мг/л и гибберелловую кислоту2 мг/л. Одновременно часть мерйстем 50высаживали по известньм способам.оМеристемы культивируют при 22-24 С,интенсивности освещения 8000 лк и16-часовом фотопериоде в течение30 сут, Полученные результаты представлены в табл, 1.П р и м е р 2, Выращивают исходные растения и изолируют меристемы.как в примере 1, Меристемы...

Номер патента: 1602393

Опубликовано: 23.10.1990

Автор: Гюнтер

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антитела, гибридомы, интерферону, моноклональные, омега, продуцирующей, типа

...среды для клеточной культуры с 10; Суспензию пипеткой подают на пластинки, каждая из которых снабжена48 углублениями (каждое углублениеимеет емкость 0,5 мл), Пластинки инкубируют при 37 С (95% воздуха, 5% двуокиси углерода, насыщение восдяньм паром), По истечении трех дней к каждой культуре прибавляют 0,5 мл среды ГАТ. Из всего 800 исходных культур по истечении 2-3 недель приблизительно 300 культур показывают рост гибридомных клеток. Последую 1 с 1 ий скрининг осуществляют следующимобразом. Надосадочные жидкости по меньшей мере 10-20% слитых гибридомных культур смешивают с одинаковым объемом раствора человеческого интерФерона типа омега(20 антивиральвых ед./мп), инкубируют в течение 90 мин при 37 С и затем исследуют по меньшей мере два...

Номер патента: 1602866

Опубликовано: 30.10.1990

Авторы: Домогатский, Идельсон, Рудин, Трахт

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, используемый, клеток, коллагену, культивируемых, мusсulus, моноклональных, типа, человеческому, штамм

...канамицина, 5 мкг/мл фунгизона, 0,05 мИ 2-меркаптоэеанела при.37 С в атмосфере 5% углекислого газа. Характеристика полезного продукта штамма. Штамм продуцирует монокло-. нальные антитела - иммуноглобулины мыши класса Х. Эти антитела специфически евязываюшся с человеческими коллагеном 1 Ч типа, с незначительной переюрестной реакцией с коллагеном 1 типа. В пределах чувствительности использованных методов не обнаружено связывание с человеческими альбумином, фибувнойеном, фнбронектином и коллаге нами 1 И. и Ч типов. Присутствие плазмы иреви не влияет на взаимодействие мовокленальных антител с человеческим кэллагеном 1 Ч типа.Клетки штамма консервируют по 1 х х 106 клеток/мл сыворотки крупного рогатого скота с добавлением 10%...

Номер патента: 1602867

Опубликовано: 30.10.1990

Авторы: Домогатский, Идельсон, Рудин, Трахт

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, используемый, клеток, коллагену, культивируемых, мusсulus, моноклональных, типа, человеческому, штамм

...М. Эти антитела специфически связываются с человеческими коллагенами 1 и Т 11 типов, В пределах чувствительности использованных консервация. Клетки штамма консервируют по 1 х 10 клеток/мл сыворотки крупного рогатого скота с добавлением 10% диметилсульфоксида в пластиковых ампулах. Замораживание ампул проводят в коробке из вспененного полистирола с толщиной стенок 1 см. Коробку с ампуо лами оставляют при температуре -70 С и через 1 сут переносят ампулы в жидкий азот для хранения.Размораживание проводят быстро в водяной бане при 37 С Жизнеспособность после размораживания, оцениваемая по включению трипанового синего, составляет не менее 60%.Контаминация. Контаминация бактериями и грибами в культуре не обнаружена при длительном...

Номер патента: 1604848

Опубликовано: 07.11.1990

Авторы: Байтубаев, Булашев, Дмитриев, Касьянов, Муканов, Несмеянов, Ромахов

МПК: C12N 5/00

Метки: brucella, антител, бактериям, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, рода, штамм

...суспензия.Частота пассирования - через 2-3 сут,кратность рассева 1:3-1:4. Посевная55бконцентрация клеток 1-2 х 10 в 1 мл,Максимальная клеточная плотность0,5 мпн/мл.. Культивирование п чиччо.При внутрибрюшинной прививке мышам линии ВА 1 В/с штамм гибридомыобразует опухоль в асцитной форме на9-11 дни. Доза клеток при прививке2 х 10 кл . За 7 дней до введения6гибридомы необходимо инъецировать,животным пристан - 2, 6, 70, 14тетраметилпентадекан в дозе 0,5 млна головку. Штамм сохраняет способность продуцировать специфическиемоноклональные антитела в течение5 пассажей на сингенных мышах (времянаблюдения),Продуктивность штамма.На 3-4 день культивирования гибридомы концентрация МКА составляет45-50 мкг/мл в культуральной среде и8 мг/мл в...

Номер патента: 1604849

Опубликовано: 07.11.1990

Авторы: Байтубаев, Булашев, Дмитриев, Касьянов, Муканов, Несмеянов, Ромахов

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: brucella, антитела, бактериям, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональные, продуцирующий, рода, штамм

...-ние ночи. Полученные антителосодержащие материалы: супернатант и очищенную асцитную жидкость с конечнойконцентрацией иммуноглобулинов 8 мг/млиспользуют как реагенты для излученияспецифичности взаимодействия монАТ40 с тестируемыми антигенами с помощьюРМА и ТИФА,Характеристика полезного продукта,МонАТ относятся к классу 18 С подклассу 2 а. Они специфичны к эпитопу45 кор части полисахаридной цепи ЛПСбруцелл. Константа связывания 0,6 хх 10М.Методы оценки специфичности МКА:реакция микроагглютинации - (РМА) итвердофазный иммунофермвнтный анализ(ТИФА),Контаминация штамма. Контаминантовлинии, включая бактерии, грибы, дрожжи и микоплазму, не обнаружено.Криоконсервация. К осадку гибрид 55ных клеток добавляют .эмбриональнуюсыворотку теленка, а...

Номер патента: 1611928

Опубликовано: 07.12.1990

Авторы: Исаенко, Немцов, Царева

МПК: C12N 5/00

Метки: arvicola, клеток, мозга, перевиваемых, поксвирусов, репродукции, теrrеsтris, штамм, эмбрионов

...парахС 2 пассажа начинается стабилизация хромосомного набора культуры.Процент нолиплоидных клеток понижается до 277., клетки с 36 хромосомами становятся преобладающим классоми составляют 557. от всей популяцииклеток.На 90-м пассаже модельный класссоставляют клетки с 36 хромосомами(557), доля полиплоидных клеток (6872 хромосомы) равной 117,.Таким образом, кариотип клетоклинии МЭВП псевдодиплоидный, те.сохраняет нормальное диплоидное число (2 п = 36), но структура кариотипа этих клеток отличается от нормы.Культуральные признаки, Средацля культивирования - среда "ИглаМЕЛ, содержащая 107 эмбриональнойсыворотки крупного рогатого скота,0,6 г/л глютамина и 100 ед/мл канамицина. Культивирование проводят при37 С. Посевная доза 1 10 кл/мл....

Номер патента: 1611929

Опубликовано: 07.12.1990

Авторы: Дьяконов, Майджи, Расулев, Тугизов

МПК: C12N 5/00

Метки: деконтаминации, клеточных, линий, микоплазм, перевиваемых, спэв-тк, тимидинкиназодефектных

...перевиваемых клеточных линий СПЭВ-ТК включающий обработку клеток в ростовой среде канамицином, о т л и ч а - ю щ и й с я тем, что, с целью повышения степени деконтаминации, клетки обрабатывают канамицином в конечной концентрации 200-300 мкг/мл среды в сочетании с 5-бром-дезоксиуридином с концентрацией 150- 250 мкг/мл среды и этоннем в конечной концентрации 5-15 мкг/мл среды, при этом обработку проводят с интервалом в 10-12 дней. культивирования. Составитель А,МаныкннТехред М,ХоданичКорректор Л, 1 илипенко Редактор Н.Бобкова Заказ 3812 Тираж 486 Подписное ЬНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям п 1 и ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Производственно-иэдательский комбинат Патент", г.Ужгород;, уя....

Номер патента: 1611930

Опубликовано: 07.12.1990

Авторы: Антропова, Балаян, Кусов, Маркова, Насташенко, Свердлов, Фридлянская, Царев, Чернова

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, белку, вируса, гепатита, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, рекомбинантному, человека, штамм

...Грибы, бактерии,микоплазма отсутствуют.Характеристика полезного вещества, продуцируемого штаммом. Клеткисекретируют иммуноглобулины 18 С 6,взаимодействующие с рекомбинатнымбелком вируса гепатита А и цельнымвирусом в твердофазном иммуноферментном тесте. Эпитоп локализуется на .Фрагменте 171, 40Характеристика биосинтеза полезных продуктов. Титр антител в асцитной жидкости в иммуноферментном тесте при нанесении на твердую Фазу1 мкг/мл рекомбинатного белка виру-8са гепатита А составляет более 10Штамм стабилен около 30 пассажейп ухсго и 2 пассажа п чсго (срокнаблюдения),Криоконсервирование. Клетки замораживают в ростовой кондиционированной среде с 10% ДМСО. Режим замораживания и отогрева обычный для клеточных культур....

Номер патента: 1611931

Опубликовано: 07.12.1990

Авторы: Герус, Дедух

МПК: C12N 5/00

Метки: культивирования, фрагментов, хрящевых

...проводят при 36 С в атмосфере воздуха с1611931 Формула изобретения35 Составитель А.РоманченкоРедактор Н.Бобкова Техред М.Моргентал Корректор А,Обручар Заказ 3813 Тираж 484 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул,Гагарина, 101 обавлением 5 СОг в течение 15 дней со меной среды каждые 48 ч, В течение перЙых двух дней хрящевая ткань сохраняет свою первоначальную структуру. Через пять суток культивирования наблюдается увеличение числа хондробластических клеток.Через десять суток культивирования наблюдается аппозиционный рост хряща, неифференцированные клетки на поверхности хряща пролиферируют...

Номер патента: 1613487

Опубликовано: 15.12.1990

Авторы: Глинских, Колесникова, Нефедова, Раскатова, Шмелева

МПК: C12N 5/00

Метки: вирусных, клеток, кролика, медицинских, новорожденного, перевиваемых, почки, препаратов, производства, штамм

...прироста клеток на 3-4 сутки роста 30 пассажа соответствует 4,5- 5,0. На 8 пассаже до 827 популяции составляют клетки с дипплоидным набором хромосом. В процессе культивирования происходит увеличение числа хромосом в клетках. На 25 пассаже число хромосом в клетках варьировапо от 41 до 85. Модальный класс пред 55 ставлен клетками с 66 хромосомами и соответствует 23" Более 507. исследованных мета 11 аз содержит от 66 до 78 хромосом.,тпя 11 рнцорки клеток ПНКна на.цчне ццр у. цых конта мин 1 ггоц ис пфх 1 ъ зут методмешдццы; культур-пассив р ндцц. ц 1 пуснцых 1.1 еток цд первичцо трисиги.11 роцдцц,к клетках почек эмбрио 1 д челове 1, д тд кже реакция гемддсрбций с использованием эрцтроццтов кур, морской свинки и человека. 11 спопьзовдцие...

Номер патента: 1613488

Опубликовано: 15.12.1990

Авторы: Артюшкова, Голиченков, Трошко

МПК: C12N 5/00

Метки: жизнеспособности, крупного, поддержания, рогатого, скота, среда, эмбрионов

...0,42 0,01 50 13, 900,42 Процент развития эмбрионов от морулы да бластоцисты в предлагаемой среде значительно выше, чем в прототипе: Количество эмбрионовбелых беспородных мышей, развившихся с морулы до бластоцисты,7. П р и м е р 1. Эембрионы крупного рогатого скота (КРС) вымывают у донора на стадии морулы раствором ср еды с оста ва, вес . Е:Хлористый натрий 80,34Хлористый калий 2,00Одвозамещенныйфосфат калияДвузамещенный фосАат натрия 13, 73Хлористый магний 0,36ллористьп кальций 0,461. -КГ 0,015Затем эмбрионы инкубируют в той же среде в течение 2-4 ч. Часть вымытых эмбрионов микроскопируют и регистрируют отсутствие морфологических изменений, после чего полноценные эмбрионы трансплантируют самке-реципиенту (корове) . Выход развившихся...

Номер патента: 1445184

Опубликовано: 23.12.1990

Авторы: Андросова, Владимирский, Трахт

МПК: A61K 39/40, C12N 5/00

Метки: антител, вскк, гибридных, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, мyсовастеriuм, моноклональных, тuвеrсulоsis, штамм

...4 мМ Б-глютамина,10 мМ пи"увата а, 100 мкг/мл стрептомицина, 100 мкг/мл пенициллина,аминокислот для базальной среды Игла, витаминов для среды Игла и О 05 мм мер"каптоэтанола и выращивают при 37 Св атмосфере 5%-ной углекислоты. Посевная доза 10 клеток в 1 мл, Через53-4 дня концентрация антител в культуральной жидкости достигает 4555 мкг/мл. 0,95+ 0,05 О,3 .ь 0,02 0,04 + 0,03 с;.г 1 О ,а/Эти результаты свидетельствую о том, что полученные МЕА спе 1 ц.фически взаимодействуют с МусоЪасьегХцш 1 цЪегсц 1 оЫя, что позволяет получить на их основе эцафективгле диагносччческие препараты. 40 формула из обретения тамм гибридных культивируемых клеток животных Мця шаясц 1 пя ВСТЫК (П) И 62 В, используемый для получения моноклональных антител...

Номер патента: 1473352

Опубликовано: 23.12.1990

Автор: Бондарев

МПК: C12N 5/00

Метки: изолированных, микрохирургических, операций, проведения, яйцеклетках

...сопротивления накопителя к эквивалентномусопротивлению нагрузки,ЙнакМок После окончания импульса 13 о(по" ложение "г" клетки 2) Останавливают гидравлический проток через накопитель 3 н снимают электрическое на" пряжение. Далее повторением всех манипуляций производят .проведение мик-рохирургическкк операций над всемв клетками 2 питателя 1.П р и м е р, Требуется провести автоматическую операцию внутриклеточной мвкроинъекцив в клетки диаметром Й=75 мкм, объемом Ч=2,2 10 мкм (2,2 10см), помещенных в Физраст" воре с удельным сопротивлением р =70 Омфсм при й=20 С. Ток пнтателя и накопителя 1 1 о=100 МкА, диаметр выходного Отверстия питателя Й, =120 мкм, диаметр входного отверстия. накопителя Й =120,мкм, Фактор Формы и ориентации длл...

Номер патента: 1483946

Опубликовано: 30.12.1990

Авторы: Булычева, Данилевич, Митерев, Новикова

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, клеток, клеточного, культивируемых, лейкозам, лимфоидным, мusсulus, моноклональных, продуцент, ряда, т-лимфоцитам, человека, штамм

...установку при -70 фС, послечего переносят в жидкий азот, Оттаивание производят при 37 С в течение1,5 мин.,Жизнеспособность клетокпри размораживании составляет 7090 Ж.Сведения о контаминантах ликии,Бактерии, грибы, дрожжй и мико- уплазма не обнаружены.П р и и е р 1, Исследование спе"цифичиости. Специфичность МКА вкультуральной жидкости клеток гибридного штамма ВСА(1 Р 12) и асцитнойжидкости к антигеиам мембран различ"ных типок клеток определяют в микро"луночкой модификации реакции непрямой иммунофлюоресценции. На первом этапе реакции.1-2 х 10 живых клеток,прикрепленных к микролунке стеклаили находящихся в микролунке микротитраторной пластины, соединяют с20-30 мкл культуральной жидкости илиасцита в разведении 1:1.0 " 1:200 и инкубируют...

Номер патента: 1496266

Опубликовано: 07.01.1991

Авторы: Алликметс, Аточина, Данилов, Духанина, Молдобаева, Сахаров, Трахт

МПК: C12N 5/00

Метки: ангиотензин, антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, легких, мusсulus, моноклональных, превращающего, продуцент, против, фермента, человека, штамм

...бактериями, грибками н микоплазмой не обнаружена,Использование штамма иллюстрируется следующими примерами.П р и м е р 1. Гибридомные клетки помещают в пластиковый флакон площадью 25 см по 5 10 в 5 мл средыеВРМ 1-1640 с 10/-ной эмбриональнойтелячьей сывороткой, 10 ,-ной лошадиной сывороткой, 4 мМ глютамина,10 мМ пирувата натрия 100 мкг/мл пенициллина, 100 мкг/мл стрептомицииаи 0,03 мМ меркаптоэтанола, клеткикультивируют 3-4 дня при 37 фС в атмосфере, содержащей 5 . СО . Для полу 6чения асцитной опухоли 2-5 1 О гибридомиых клеток вводят в брюшнуюполость мьппей ВАЯВ/С, обработанныхпристаном, Через 2-3 недели собираютасцитную жидкость, и иммуноглобулины осаждают сульфатом натрия. Осадок растворяют в 0,2 М боратном буфере...

Номер патента: 1554368

Опубликовано: 15.01.1991

Авторы: Воронкова, Ермишин

МПК: C12N 5/00

Метки: sоlаnuм, дигаплоидов, картофеля, тuвеrоsiuм

...с Клубни сортов или форм кдигаплоиды которых полдган 1 т нгпсевают в сосуды (объемом с грунтои, заделывая их на цу 3-5 си. Грунт увлажнен, культивирования до иоянлени температура 10-12 С беэ осн астения, после того к ут высоты 5-О см, вы 8-20 С днем, 12-15 С иод 6 ч, освещенност сточник освещения - л:)УГ УЯ)х ЦИТДТЕПЬНЫХ ГРЕД.11 ГЛЬ )Оядиие црЕдЛПГПЕМОГО СПОСО- .,))ЗВОПЯВ 1 :УЩЕС)ВЕЦЦО ПОЕ)ЫСИтЬ ВЫ- х )д дцг.аппо)дои картофеля за счет 311;)чи гель)О О ув:пцчеция количества ся у,ников, об 1 аэу;их кдппус в культу)е.,е 16:О1) ) р М у ссИ З О б р Е т Е Н И я1, Спог Об пол уч.ця дцгд плоидов КДРТОфЕПЯ ЯОсациП) ЦЬРГОЯ 1)ГГЕ) 1 ВКЛЮ- ч;юший выра)дивани растений-доноров цы.;1 ников, изолирование бутонов,...

Номер патента: 1627557

Опубликовано: 15.02.1991

Авторы: Адомайтене, Велецкайте, Дикинене, Иванаускас, Маурицас, Микалаускене, Тамошюнас

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, белка, вируса, гибридных, животных, клеток, крупного, культивируемых, лейкоза, мusсulus, моноклональных, продуцент, против, рогатого, скота, штамм

...рассевд 1:6. Клонцро 1 ац е клеток проводят в 96-ячеечцых ;латахс иг.пользованием в качестве пи гдющего:лоя макро 1 дгсн мынеь. сеци 11 ическая эффективность 3-го клонирования составляет 9871 1 окоцгерцдц, роноят н ыворотьо мбриоцов кор,в с доба. ление 1О диметпл уь Ьс ксидд, 507 сыор л ки эмбрион.,в крупного рогатогоа .когд при коццс.цтрции 1 х 10 клет кьмл. 1 иэнеспособцость сле; окшдыма после размораживация состав дет ЯОь.Пр,нивка по 10 клеток штамма111.Ч-р 24-Ч 1 сингенцым предобрдботаццьпмышам вызывает у цих обрдзовацедсцитцой опухоли, сопровождающе ся выделением асцитной жидкости г ко лычесгне 1-5 мл. В асцитцо;1 ждкост содержатся специфические моцЛТ к белку р 24 вируса лейкоза КРС, Способность продуцировать мо 1 Л 1...

Номер патента: 1630709

Опубликовано: 28.02.1991

Авторы: Глагоцкая, Глеба, Самойлов, Сидоров, Шевченко

МПК: A01H 4/00, C12N 5/00

Метки: выявления, гибридизации, полученных, растений-регенерантов, соматической, средi, цибридов

...в 3-4 кратной повторностях. Результаты измерений заносят в таблицу. Интенсивность флю- оресценции протопластов Б.рппаС 1 яесцш измеряют указанным способом.Затем измеряют интенсивность флюорес изобретения Способ выявления цибридов средирастений-регенерантов, полученныхпри соматической гибридизации, вклю 40 чающий идентификацию хлоропластов,характерных для растений-доноров,о т л и ч а ю .щ и й с я тем, что,с целью упрощения технологии выявле-,ния цибридов и сокращения длительнос45 ти процесса, для идентификации выделяют протопласты родительских форми растений-регенерантов и проводят.измерение интенсивности флюоресценции их хлорофилла, по которой ведутотбор цибридов,Ъценции хлорофилла протопластов...

Номер патента: 1630711

Опубликовано: 28.02.1991

Авторы: Виестурс, Гертнере, Калниня, Кондратович, Трейманис, Эисимонте

МПК: A01H 4/00, C12N 5/00

Метки: азалий, культивирования, питательного, приготовления, растительных, рододендронов, субстрата, тканей

...помещают 0,25 г суьстрата и заливают 4 мл дистилЛированной воды. 11 робирки закрывают ватными пробками и автоклавируют при 0,11 МИа в течение 15 мин. 11 осле автоклавирования в стерильных условиях на субстрат высаживают декапитированные микрочеренки с 4 меж доузлиями, полученные от асептичес-кой культуры рододендронов. Через 5 недель культивирования при 23-25 й,в 16-часовом фотопериоде с интенсивностью освещения 3 клк, оценивают количество, длину вновь образовавшихся микропобегов, Повторность 20- кратная.П р и м е р 2. Все приемы и операции осуществляют аналогично примеру 1. Также исследуют возможность культивирования на питательном субстрате, содержащем в качестве носителя целлюлозу различной пористости, В исследования вовлекают...

Номер патента: 1631072

Опубликовано: 28.02.1991

Авторы: Баринский, Грибенча, Клюшник, Свешников, Северин, Фуралев

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, белку, бешенства, вируса, гибридных, гликопротеидному, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, структурному, штамм

...животных.В брюшную полость мышей линииВаТЬ/с, предварительно сенсибилизированных за 1-2 недели внутрибрюшинной инъекцией 0,3-0,5 мл минерального масла 2, 4, 10, 14 тетраметилГпентадеканом, вводят гибридные клетки, Время образования опухолей 912 сут; на протяжении десяти пассажей наблюдается 100%-ная перевиваемость асцитов.Морфология клеток.Культура состоит из слабо прикреп -ляющихся к субстрату округлых клетокразличной величины с крупными ядрами, Цитоплазма имеет вид тонкогоободка.Кариология.Кариотип соответствует виду (мышиный), С помощью окраски по С-методу три маркерные хромосомы, привнесенные в эту линию от родительскоймиеломной линии.Продуктивность штамма.Итамм гибридомы Крив-С 5 продуцирует моноклональные антитела...

Номер патента: 1631073

Опубликовано: 28.02.1991

Авторы: Баринский, Василенко, Грибенча, Клюшник, Свешников, Северин

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, белку, бешенства, вируса, гибридных, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, нуклеопротеидному, структурному, штамм

...(1 МФЛ), атакде в непрямой реакции иммуноФермецтцого анализа (НИФА) как в куль -туре клеток, так и в отпечатках головного мозга заражецного бегпенствомживотного.Класс иммуноглобулинов1 тамм гибридных клеток Крив-Л 7секретирует антитела класса Тг-;-1,Криоконсервирование, Клетки КривЛ 7 замораживают ца 8 пассажа,Общее количестг,о ампул 20 по 23 млн клеток, Криозащитцая среда с25 507. эггбриоггальггой телячьей сыворотки и 107.;ггСО-дгзметггзгсульФоксида,Выживаемость при размораживании 60707,.Контаминация. Бактерии, грибыи дрожжи це об 1 гаружены,Использование штамма цллгострируется следугогпгпг примером.В культуральцые матрасы вместимостью 250-500 мл засевают гибрцд 35цые к:гетки Крив-Л 7 в концентрации100-150 тыс/мл в...

Номер патента: 1631074

Опубликовано: 28.02.1991

Авторы: Андреев, Гусев, Язова, Якименко

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: альфа, антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, против, фетопротеина, человека, штамм

...Пассирование прово 15 дят один раз в 3-4 дня той же дозойклеток (без подсчета клеток их рассеивают из одного флакона на три).Титр антител в культуральной средепри определении иммуноферментным ме 20 тодом 2110 .Для культивирования 1.п ,1 о мышам БАЕВ/с, сенсибилизированнымпристаном (0,5 мл внутрибрюшинно) за7 дней до прививки гибридом, вводят25 внутрибрюшинно О 10 - 10 клетокб 7штамма С 9-8 ч в 2 мл среды КР.11 с гентамицином, Асцитическую жидкость забирают у живых мышей по мере ее накопления, повторяя забор асцита уодной и той же мыши не менее 3 раз.Асцитный штамм перевивают на свеюк6Фмышей (510 - 10клеток на мышь),проводя не более трех пассажей. В пулах асцитов, полученных От разныхживотных и в разных взятиях титр антител при...

Номер патента: 1631075

Опубликовано: 28.02.1991

Авторы: Андреев, Гусев, Язова, Якименко

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: альфа, антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, продуцент, против, фетопротеина, человека, штамм

...2 мл среды НРИ 1 с гентамицином. Асцитическую жидкость забирают у живых мьпдей по мере ее накопления, повторяя забор асцита у одной и той же мыши не менее 3 раз, Асцитный штамм перевивают на свежих мышей( 10 - 10 клеток на мышь), проводяг, 6 7не более трех пассажей. В пулах асцитов, полученныхот разных животных ц в разных взятиях, титр антител приопределении иммуноферментным методом достигает значения 10Модальное число хромосом 79.Продуктивность штамма. В 1 млкультуральной среды содержится неболее 10-20 мкг антител, а в асцитической жидкости не менее 5 кг/мл антител.Контаминация. Контаминация бактериями и грибами в штамме не обнаружена.Криоконсервирование, Клетки штамма ресуспендируют в среде для замораживания, состоящей нз...

Номер патента: 1632973

Опубликовано: 07.03.1991

Авторы: Белоусова, Лобова, Миронова, Носач, Преображенская

МПК: C12N 5/00, C12N 5/02

Метки: аденовирусов, антигена, крупного, рогатого, скота

...колбах.Культуру на уровне 100 пассажаготовят по примеру 1, но используютна четвертые сутки после эксплантации, когда формируется монослой.При заражении вводят аденовирус 1-госеротипа, штамм Воч 1 пес множественностью 0,1 ТЦД о/клетку, адсорбцию проводят в течение 90 минпри 37 С, Все последующие процедуоры осуществляют по примеру 1. Сборвируса проводят через 96 ч. Титр аденовируса равен 4,5 1 я ТЦДьр/мл, чтоне ниже титра вируса, полученногов параллельных опытах на первичнойкультуре клеток почек эмбриона коровы. П р и м е р 5. Получение антигена аденовируса КРС 1 подгруппы (1-й сер отип) пр оводя т на линии п ер евиваемых клеток почек теленка Таурус, выращенных в роллерах. Культуру на уровне 100 пассажа готовят по...

Номер патента: 1638160

Опубликовано: 30.03.1991

Авторы: Барышников, Дубинкин, Кадагидзе, Короткова, Тупицын

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: l-продуцент, антигена, антител, гибридных, животных, клеток, культивируемых, лейкоза, лимфобластного, мusсulus, моноклональных, общего, острого, против, штамм

...45 см в 5 мл среды заливают по 5 10 клеток штамма. Пассаж 1 раз в 2-3 дня той же дозой. Штамм выращивают при 37 С на среде МЕМ в модификации Дульбекко, содержащей 150 телячьей эмбриональной или оленьей сь 1 воротки, 2 мМ глютамина, 0,1 мг/мл гентамицина. Титр антител определяют в непрямой реакции поверхностной иммунофлюоресценции на живых лимфоцитах крови, В качестве источника антител используют культуральную жидкость, Титр антител в культуральной жидкости 1:50,5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Для выращивания штамма в виде асцитной опухоли пригодны самки мыши линии ВАВ/С. Интактным мышам за 7-14 дней до прививки опухоли вводят внутрибрюшинно раздражитель (вазелин), клетки штамма иньецируют внутрибрюшинно по 10 клеток7 на мышь в 4,0 мл...

Номер патента: 1640156

Опубликовано: 07.04.1991

Авторы: Дегтярев, Костюк, Кочетков

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, бактериофага, гибридных, днк, животных, зависимой, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, рнк-полимеразе, штамм

...из крупных округлых клеток с крупными ядрами и тонким ободком цитоплазмы.Ядрьппки крупные, по 1-2 в ядре.Культуральнйе признаки. Среда для 5культивирования - среда ДИЕМ сыворотка эмбриона коровы (10%), сыворотка новорожденных телят (10%),глютамин (2 ммоль), пируват натрия(0,05 ммоль), пенициллин/стрептоцимин (1000 ед./мл). Характер ростастационарная суспензия. Метод снятиявстряхивание. Частота пассирования -2-3 раза в неделю. Посевная доза150 тыс. клеток на 1 мл. Кратностьрассева 5-10 раз.Контаминация, Бактерии, грибы и микоплазмы не обнаружены.Культивирование т.п чиччо. Культурапрививается и растет в виде асцитыв перитональной полости мьппей ВАЯВ/С,За 7 дней до введения клеток мьппамреципиентам вводят по 0,5 мл пристана, Асцит...

Номер патента: 1640157

Опубликовано: 07.04.1991

Авторы: Дегтярев, Костюк, Кочетков

МПК: C12N 5/00, C12P 21/08

Метки: антител, бактериофага, гибридных, днк, животных, зависимой, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, рнк-полимеразе, штамм

...признаки. Среда длякультивирования - среда ДМЕМ: сыворочка эмбриона коровы (10 ), сыворотка новорожденных телят (10 .), глютамин (2 ммоль), пируват натрия (1 ммоль), 2-меркаптоэтанол (0,05 ммоль), пеницилин/стрептомицин (1000 ед/мл).Характер роста - стационарная суспензия. Метод снятия - встряхнвание.Частота пассирования 2-3 раза в неделю. Посевная доза 150 тыс. клеток на 1 мл. Кратность рассева 5-10 раз.Контроль контаминаций. Бактерии, грибы и микоплазмы не обнаружены,Культура прививается и растет в виде асцита в перитонеальной полости мьппей БАЕВ/С, За 7 дней до введения клеток мышам-реципиентам вводят по 0,5 мл пристана. Асцит образуется через 10-15 сут после введения 1-5 млн клеток.Продуктивность штамма. Первичная...