C12N 5/00 — Недифференцированные клетки человека, животных или растений, например, клеточные линии; ткани; культивирование или сохранение их; питательные среды для них

Номер патента: 1358872

Опубликовано: 15.12.1987

Авторы: Белецкая, Сахацкий

МПК: A01K 67/00, C12N 5/00

Метки: пересадки, птиц, ранних, эмбрионов

...обрезают желточную оболочку по наружному краю кольца и за край кольца переносят и укладывают внутренней стороной вверх на сухуюровную поверхность, например на предметное стекло или на дно чашки Петри,После этого проинкубированный в течение 10 - 20 мин в растворе Версена эмбрион шпателем переносят на край подготвленной желточной оболочки эктодермой вниз.Затем осторожно наклоняют предметностекло, эмбрион сползает к центру желточной оболочки и одновременно удаляется раствор Версена, занесенный шпателем вместе с эмбрионом на край желточной оболочки. После этого препарат выдерживают еще несколько секунд для частичного испарения остатков влаги на препарате, а затем за край кольца из фильтровальной бумаги 15 переносят на питательную среду...

Номер патента: 1362746

Опубликовано: 30.12.1987

Авторы: Гончаров, Данилов, Домогатский, Мартынов, Попов, Рудин

МПК: A61K 39/00, C12N 5/00

Метки: антител, вены, гибридных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, мыши, поверхости, пупочной, человка, штамм, эндотелиальных

...антителна 3-4-й день культивирования зависитот посевной дозы и варьирует в диапазоне ат 1 до 10 мкг/мл культуральнойсреды и 10 мг/мл асцитической жидкости. Концентрацию антител определяютиммуноферментным методом.Стабильная продукция антител сохраняется до 20-го пассажа п чдго,Контаминация, Бактерии и грибы вкультуре не обнаружены при длительномнаблюдении и при посевах на питательные среды, Заражение микоплазмой невыявлено при окрашивании красителямина ДНК,Криаконсервирование.Клетки штамма кансервируют па 1 хх 10 клеток/мл коровьей сыворотки сдобавлением 10% диметилсульфоксида впластиковых ампулах, Замораживаниеампул проводят в коробке из вспененного полистирола с толщиной стенок1 см. Коробку с ампулами оставляютпри - 70 С и через...

Номер патента: 1370136

Опубликовано: 30.01.1988

Авторы: Ключко, Цындренко

МПК: C12N 5/00

Метки: гиппокампа, диссоциации, клеток

...через равные промежутки времени добавляют растворы СаГ 1, и МВС 1 , За 5-10 мин до конца процедуры в смесь добавляют 2-102 бычьей сыворотки,Затем ткань подвергают мехаиической диссоциации в растворе А, в который добавляют 0,5-2,6 ммоль СаС 1 0,22-1,1 ммоль МрС 1 , При помощи пастеровской пипетки ткань диссоциируютна отдельные клетки, которые переносят в среду МСИ (минимальная средаИгла) с 2-103 бычьей сыворотки и фиэиологическими концентрациями СаС 12и МяС 1 , В этой среде клетки находятся до 6 ч беэ заметных изменений своих морфологических и электрическиххарактеристик, Часть срезов остаетсяв отмывочном растворе при постоянномпропускании карбогена и температуре20 С и может быть использована дляполучения изолированных клеток в течение...

Номер патента: 1377291

Опубликовано: 28.02.1988

Авторы: Онищенко, Сичинава, Тищенко, Тронько, Турчин, Челнакова

МПК: C12N 5/00

Метки: животных, клеток, коры, надпочечников, человека

...человека.Гиперторифированные железы надпочечников при болезни Иценко-Кушинга и гиперфункциях яеопухолевой природы, удаленные во время операции, очищают от жировой ткани и многократно отмывают от крови, разрезают на 6-.10 частей и снова 5-6 раз отмывают 40 средой 199. Глазными ножницами ткань надпо- чечных желез измельчают до размеров 0,5-1 мм и отмывают средой 199 до 45 получения прозрачной жидкости, после чего заливают смесью среды 199 и 0,257-ного раствора трипсина в соотношении 1: 1 с добавлением 5% бычьей сыворотки и помещают на 12-15 ч в холодильник при 4 С, Не сливая среды, ткань с питательной средой подогревают на водяной бане до 32 С и обрабатывают на магнитной мешалке 2-кратно по 25 мин при 120-140 об/мин. На...

Номер патента: 1377543

Опубликовано: 28.02.1988

Авторы: Красников, Стегний, Шинкаренко

МПК: C12N 5/00, F25D 3/10

Метки: биологических, замораживания, объектов, хранения

...плавучая камера 11, заполненная газом,.сохраняющим свое55агрегатное состояние при температурезамораживания биообъекта, напримергазообразным гелием, На рукоятке 12 50 Д) 1 и посредством натяжной нити(НН) 7 фиксируется в Д 1, которыйпогружается в сосуд Дьюара с жидкимазотом, При необходимости извлеченияопределенного контейнера 3 по маркировке находят соответствующую НН 7,выводят ее иэ-под пружинной защелки9, при этом освобожденный от крепления контейнер всплывает благодаряплавучей камере 11, заполненной газом, сохраняющим свое агрегатноесостояние при температуре эаморажи 1держателя крепится пластина 13 спружинными защелками 9,Устройство работает следующимобразом,Контейнер 3 загружается биоматериалом, закрывается крышкой,...

Номер патента: 1381158

Опубликовано: 15.03.1988

Авторы: Домогатский, Кратасюк, Рохлин, Синицын, Смирнов, Якубов

МПК: A61K 39/00, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, мыши, урокиназе, человека, штамм

...в жидком азоте. Размораживают быстро при 37 С. Жизнеспособность клеток после размораживания составляет 70-807Использование штамма 1 ИС иллюстри. руется следующими примерамиП р и м е р 1. Клетки штамма Е 1 С помещают в пластиковый флакон объемом 75 см по 5 10 клеток в 5 мл5среды КРМ 1-1640 с 107 эмбриональной телячьей сыворотки,107 лошадиной сывороткй, 4 мМ 1,-глутамина, 100 ед/мл пенициллина, 00 мкг/мл стрептомицина, 1 О мМ пирувата натрия, 0,057.меркаптозтанола при 37 С в атмосфена, 100 ед/мл пенициллина, 00 мкг//мл стрептомицина, 10 мМ пируватанатрия, 0,053 меркаптоэтанола приО37 С в атмосфере 57 СО. Посевнаядоза - О клеток в 1 млКлетки пассируют раз в 3-4 дня.Кратность рассева 1:10. Культура суспензионная. Клетки штамма инъециру...

Номер патента: 1384614

Опубликовано: 30.03.1988

Авторы: Домогатский, Кратасюк, Рохлин, Синицын, Смирнов, Якубов

МПК: A61K 39/00, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, мыши, урокиназе, человека, штамм

...Фермента, взаимодействуют с егодвумя молекулярными Формами.Криоконсервирование клеток штамма.2 10 клеток консервируют в 1 млтелячьей эмбриональной сыворотки сдобавлением 10 Х диметилсульфоксидав пластиковых ампулах, Замораживаниеведут по следующей схеме; снижаюто отемпературу до 4 С, а затем по 1 Св мин до -40 С. Клетки хранят в жидком азоте. Размораживают быстро при37 С. Жизнеспособность клеток послеоразмораживания составляет 70-80 Х.Использование штамма 01 С иллюстрируется следующими примерами..П р и м е р 1. Клетки штамма П 1 Спомещают в пластиковый флакон объемом 75 см по 5" 10 клеток в 5 млсреды КРМ 1-1640 с 107. эмбриональнойтелячьей сыворотки, 107, лошадинойсыворотки, 4 мМ Е-глутамина, 100 ед/1384614 Культуральная среда...

Номер патента: 1395668

Опубликовано: 15.05.1988

Авторы: Мечетнер, Фаерман, Червонский

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, кишечника, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, теленка, фосфатазе, штамм, щелочной

...инактивируя активный центр,Использование штамма МАМиллюстрируется следующими примерами.П р и м е р 1. Гибридомные клетки помещают в пластиковые флаконы плоплощадью 25 см по 5 х 10 клеток, в5 мл среды ДМЕМ с 10 .-ной эмбриональной телячьей сыворотки, 2 мм глутамина, 100 ед/мл пенициллина и 100 мкг/млпенициллина. Клетки культивируют4 дня при 37 С в атмосфере, содержащей 5% СО, Культуральную среду собирают, центрифугируют 10 мин при800 об,/мин при 4 С. К полученномусупернатанту добавляют Щф из кишечника теленка до конечной концентрации 10 мкг/мл. Полученную смесь используют в качестве ШФАЩФ-реагентадля иммуноферментного анализа,Пластиковые планшеты для микротитрования покрывают очищенным в иммуноаффинной хроматографии альфа-фетопротеином...

Номер патента: 1396162

Опубликовано: 15.05.1988

Автор: Матвеев

МПК: C12N 5/00

Метки: гепатоцитов, культуры, первичной, рыб

...пиг ментов кожи, максимум которого наблюдается через 7-10 мин. Этот момент является наиболее благоприятным для полной гепатэктомии (изоляции печени иэ организма). Изолированную печень помещают на чашку Петри механически измельчают скальпелем и переносят в Физиологический раствор, который вручную или на шейкере встряхивакт в течение 1-2 мин, Кусочки печени почти полностью распадаются при этом на отдельные клетки Оставшиеся тяжи соединительной ткани удаляют, пропуская (Фильтруя) взвесь через мельничцый газ. Полученную суспензию гепатоцитов 3-4 раза промывают физиологическим раствором, Отделение клетокпечени от избытка хелатора и Форменных элементов крови производят с помощью гравитационного осаждения (т.е.отстаиванием в олодильцике) в...

Номер патента: 1347449

Опубликовано: 23.05.1988

Авторы: Бутенко, Воспенникова, Пауков, Решетняк, Фролова, Шамина

МПК: A61K 35/78, C12N 5/00

Метки: papaver, sомnifеruм, алкалоидов, используемый, клеток, культивируемых, мака, штамм

...БО 15,6-26,72 пБО, 7 Н О 6,0-10,30КЗ О, 53-0,90 В а МоО 2 Н 0 0,15-0,30СБО 5 Н О 0,03-0,075СоС 1 п 6 Н,О 0)03-0,075ЕеБО 1 7 НО 25,00-30,00д ЭДТЛ 26, 10-40, 10пиридоксин 0,5-1,0; никотиновая кислота 0,5- 1,0; тиамин 0,05-0, 15; инозит80-120; гидролизат казеина 800-1200;2,4-Л 0,05-0, 15; кинетин 0,05-0, 15;ДЭДТК 4-5; сахароза 2-5; агар-агар 25 пллстинчатый отечественный 0,6-0,8 Х.рН среды 5,6-5,8.оЬШтамм выращивают при 26+1 С н темноте, при влажности 67+37 Продолжительность цикла ныращинания составляет 2 сут, по истечении этого срока биомасса увеличивается по сырой массе н среднем в 8-12 раз. Ее отделяют от среды и для последующего определения 3 ч содержания ялкалоидон высушиваютпои комнатной температуре,С целью качестненного и...

Номер патента: 1402617

Опубликовано: 15.06.1988

Авторы: Арсеньева, Богачева, Ибрагимов, Лабазина, Рохлин, Тоневицкий

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, иммуноглобулинов, легким, моноклональных, цепям, человека

...панели 15 Криоконсервирование, Для длительно- по 2 10 клеток в лунку. Для культииго хранения клетки штамма замораживавирования и селекции гибридов исполь- ют в эмбриональной телячьей сыворотке зуют среду НРМ 1-1640 с добавлением с добавлением 10 диметилсульфоксида, 10 лошадиной и 10% телячьей эмбри- Режим замораживания: 4 С в минуту цоо О о ональной сыворотки, 10 М гипоксанти 4 С, затем 1 С в минуту до -40 С. Пог 7на, 4"10 И аминоптерина и 1,6 10 М сле замораживания клетки переносят тимидина. Гибриды-продуценты клониру-. в жидкий азот, Размораживание - на ют 2 раза методом конечных разведений, водяной бане при 37 С. Жизнеспособвысевая по 1 клетке в лунку содержа- ность клеток после размораживания 70 Фщую 410 клеток селезенки, После...

Номер патента: 1406432

Опубликовано: 30.06.1988

Авторы: Красников, Стегний, Шинкаренко

МПК: C12N 5/00, F25D 3/10

Метки: биологических, замораживания, объектов, хранения

...Принцип работы предлагаемого устройства заключается в следующем.Размещают рядом два однотипных криобиологических сосуда Дьюара, один из которых, выполняющий роль резервуара 1, заполняют жидким хладагентом, а в другой, используемый как камера 2, помещают кассеты 18 с биологическим материалом, В горловины сосудов вводят пробки 3 и 4 с закрепленными на них трубопроводом 5 и элементами обеспечения подачи, регулирования и распределения хладагента. Введение осевого вентилятора 12 в относительно узкую горловину камеры 2 обеспечивается тем, что лопасти его, навешенные на осях 13, склады 1406432ваются и в таком виде имеют небольшое поперечное сечение. Затем включают блок 20 управления, при этомнагревательный элемент 7 обеспечивает5кипение...

Номер патента: 1413132

Опубликовано: 30.07.1988

Авторы: Балмуханов, Хучуа

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, используемый, клеток, креатинфосфокиназе, культивируемых, мusсulus, митохондриальной, моноклональных, человека, штамм

...кратность рассева 1:5. Культура суспензионная, Клетки культивируют при37 С в атмосфере 5 СО . Дпя выращивания опухоли пригодны мь 1 ши линииВА 1.В/С, которым не менее чем эа тридня до инъекции штамма вводят внутрибрюшинно по 0,5 мл пристана, Штамм6вводят внутрибрюшинно по 31 О клеток на мышь в 1 мл среды КРМ 1-1640.Лсцитная опухоль развивается через15-20 дней,Продуктивность штамма.Секреция МКА на третий день культивирования составляет 50 мкг/млсреды. Содержание МКА в асцитической жидкости 5-10 мг/мл. Стабильнаяпродукция антител сохраняется до 1пассажей 1 п ч 1 ЙГО,(Характеристика полезного продукта.МКА относятся к классу 1 Я О 1, ониспецифически связываются с КФКмит,Контаминация.Бактерии и грибы не обнаруженыпри длительном наблюдении в...

Номер патента: 1414870

Опубликовано: 07.08.1988

Авторы: Левицкий, Логинов, Попович, Рохлин, Сырбу, Черепахин

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, атфазе, гибридных, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, ретикулума, саркоплазматического, сердца, собаки, штамм

...СССР под номером ВСКК(П) 960 и характеризуется следующими признакамиКультуральные признаки, Стандартные условия культивирования - сердца КРМ 1-1640 с 10% донорской телячьейсыворотки, 4 мМ Ь-глутамина 100 мкг/мл канамицина, 0,05 мМ меркаптоэтанола при 37 С в атмосфере 53 СОуДля выращивания штамма используют пластиковую посуду; посевная доза 100 тыс. клеток на 1 мл, клетки пассируют один раз в 3-4 дня, кратность рассева 1:10, Культура суспензионная.Культивирование в организме животных. Для выращивания асцита пригодны мьппи ВАЬВ/с. Мьппам эа 7-15 дн до инъекции клеток штамма вводят внутрибрюшинно по 0,5 мл пристана, Клетки инъецируют внутрибрюшинно по61-Зх 10 клеток в 1 мл среды Игла. Асцит формируется через 12-14 дней,Продуктивность...

Номер патента: 1416509

Опубликовано: 15.08.1988

Авторы: Арсеньева, Богачева, Ибрагимов, Лабазина, Рохлин, Тоневицкий

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, иммуноглобулинов, легким, моноклональных, цепям, человека

...и 1,6 10 М ти"мидина. Гибриды-продуценты клонируют2 раза методом конечных разведений,высевая по 1 клетке в лунку, содержаФщую 4 10 клеток селезенки. Последвух клонирований практически 1007субклонов продуцируют антитела к легким Я -цепям человека. Наиболее продуктивный клон выводят в массовуюкультуру и обозначают 5 В 406"1.Штамм 5 В 4116-1 хранится в Специализированной коллекции перевиваемыхсоматических клеток позвоночных Института цитологии АН СССР под номеромВСКК (П) 73 Р и характеризуется следующими признаками.Культуральные признаки.Среда культивирования: среда КРМ 11640 с добавлением 10 Х телячьей эмбриональной сыворотки, 4 мМ Ь-глутамина, 100 мкг/мл пенициллина,100 мкг/мл стрептомицина, 0,05 мМомеркаптоэтанола при 37 С в...

Номер патента: 1420020

Опубликовано: 30.08.1988

Авторы: Ветрова, Сидоренко

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антигену, антител, в-лимфоцитов, гидридных, дифференцировочному, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, человека, штамм

...действии ингибитора ИаГ.Культуральные признаки.Среда культивирования - средаКРМ 1-1640 с 107-ной донорской телячьей сыворотки, 4 мМ Ь-глутамина,100 мкг/мл гентамицина при 37 С и ватмосфере 57. СО. Для выращиванияштажа используют пластиковую илистеклянную посуду, посевная доза -100 тыс. кл/мл, клетки пассируютодин раз в 3-4 дня, кратность рассева - 1:10. Культура суспензионная.Для выращивания асцита используютмышей линии ВАЬВ/с, Мьппам за 730 дней до инъекции клеток штаммавводят внутрибрюшинно по 0,5 мл пристана. Клетки иньецируют внутрибрюшинно по 2 - 5 х 10 клеток в 5 мл сре 6цы Игла, Асцит Формируется через12-14 дней.Продуктивность штамма.Секреция МКА на 3 - 4 день культиви рования п чго составляет 15-20 мкг/мл культуральной среды...

Номер патента: 1421953

Опубликовано: 07.09.1988

Авторы: Вырвич, Пясецкий, Тельнюк

МПК: C12N 5/00, F25D 3/10

Метки: биологических, замораживания

...8могут быть заполнены промежуточнымжидким теплоносителем и содержатьяе менее двух пайет. К полости 3 подключен узел 10 подачи газообразного,хладагента,Устройство работает следующим образом.Пайеты 9 с эмбрионами размещаются в рабочих. каналах 8 не менее двухв каждом. Затем включаются испаритель узла 10 подачи и газообразный 2 эта энергия в виде излучения поступает в рабочие каналы 8 и замораживает эмбрионы в пайетах 9 до заданной температуры. По окончании циклазамораживания подача хладагента прекращается, пайеты 9 с биоматериаломпереносятся в хранилище, а устройство готово к следующему циклу, 1 з,п.ф-лы, 2 ил,2хладагент через полость 3 для ввода поступает в нечетные вертикальные каналы 5, в кольцевой канал 7, а затем через четные...

Номер патента: 1421954

Опубликовано: 07.09.1988

Авторы: Красников, Стегний, Шинкаренко

МПК: C12N 5/00, F25D 3/10

Метки: биологического, замораживания, ступенчатого

...элемент 27. С целью облегчения работы с контейнером 12, заполненным биоматериалом, в средней его части с диаметром большим диаметра центральной трубки 15 пробки вставлена сетчатая трубка 28; крепящаяся .к дну контейнера 12.Устройство работает следующим об-,40 разом.В горловину сосуда Дьюара 1 вводится теплораспределительный стакан 3, в который для замораживания биоматериала посредством держателя 11 помещают контейнер 12, Подпружиненные створки 5 стакана 3 при введении контейнера 12 благодаря имеющимся скосам трубок 8 несколько раздвигаются, прижимая и удерживая контейнер ,50 12 в необходимом положении. Последний вводят в теплораспределительный стакан 3 так, чтобы держатель 11 на-. ходился против зазора 10,...

Номер патента: 1425542

Опубликовано: 23.09.1988

Авторы: Бачинский, Децина, Кондрахин, Распопина

МПК: C12N 5/00, G01N 33/48

Метки: клеточных, культур, питательных, ростовой, сред, характеристики

...токсичности и ростовых своиств сырья 9 титательньтх сред и Добавок к ним,255424ние ИП, , равное 0,3, что свидетельствует о токсичности этой пита 50О5тательной среды ( --- (0,25). ЭтаИП,величина также удовлетворительносогласуется с экспериментальным значением ИППриведенные данные подтверждаютприменимость предлагаемого способадля определения ростовых характеристик питательных сред,314П р и м е р. Измеряют содержание карбонильных соединений в анализируемой питательной среде по их реакции с 2,4-динитрофенилгидразином. Для этого в пробирку, содержащую 0,6 мл анализируемой среды, добавляют 0,5 мл 0,27.-ного раствора 2,4- .динитрофенилгидразина в 1 н раствора соляной кислоты, затем 2 мл 0,4 н. ИаОН, Пробу выдерживают оба раза при комнатной...

Номер патента: 1428765

Опубликовано: 07.10.1988

Авторы: Богомолова, Коптяева, Унанов, Юминова

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, вирусу, выявления, клеток, кори, культивируемых, человека, штамм

...цитоплазме 90-95% клеток хронически инфицированной культуры ВСКК(П)8 1 ДМФА определяется антиген вируса кори ЗОв виде мелких и крупных гранул. Хранят в замороженном состоянии в присутствии среды 199 с 10% сывороткикрупного рогатого скота и 10% глицерина.35П р и м е р. Клетки ВСКК(П)81 Дкультивируют в среде 199 с добавлением 10% сыворотки крупного рогатогоскота в 1-литровых матрасах. Клеткипересевают каждые 4-6 дней в соотношении, 1:3, Начиная с 2-3-го пассажа зараженной культуры количествоантигенсодержащих клеток стабилизи -руется на уровне 90-95%, и клеткииспользуют для приготовления препаратов для МФА, С этой целью клеткис поверхности матраса снимают механически и суспендируют в среде 199таким образом, чтобы...

Номер патента: 1430403

Опубликовано: 15.10.1988

Авторы: Дмитриева, Исаенко, Машукова, Царева, Юрченко

МПК: C12N 5/00

Метки: вируса, гриппа, изучения, используемый, качестве, клеток, культивируемых, мини-свиньи, почки, репродукции, тест-системы, штамм

...через 8, третийчерез 6 сут. Ввиду увеличения скорости роста к пятому пассажу клеткипересевают через 3-4 сут. Коэффициентрассева 1/3, В дальнейшем клетки культивируют в монослое с применениемсреды Игла МЕМ, содержащей 107. сывороткикрупного рогатого скота,нативной илиобработанной полиэтиленгликолем.Клетки снимают со стекла смесью 0,027-ного версена (1/2-2/3) и 0,257-ногораствора трипсина (1/2-1/3) беэ центрифугирования, дважды обмыв монослой прогретой до 36,5 С смесью ипроинкубировав в течение 5-10 мин.Далее клетки ресуспендируют в свежей среде и рассевают в сосуды длякультивирования с концентрацией100 тыс. кл. в 1 мл. Пересевы осуществляют через 3-5 сут с кратностьюрассева 1:4-1:5,Полученная линия перевинаемых клеток ПСМ имеет следующие...

Номер патента: 1433976

Опубликовано: 30.10.1988

Авторы: Вишневецкий, Мирошников

МПК: C12N 5/00

Метки: клеток, культивируемых, млекопитающих, роста, стимуляции

...,и 10 Е стерильной лошадиной сыворотки ,(ростовая среда й" 2).30Перед разливом в матрасы в ростовую среду с клетками добавляют лиофи 1 пизированный препарат альфа-фетопротеин, разведенный на 2 мл того же раствора из расчета 1 ампула эмбриональ,ного белка на 250 мл среды. Матрасы ;,помещают в термостат и клетки выращи- . вают в общепринятых условиях.П р и м е р 2. В гинекологическом отделении больницы в стерильные баночки получают эмбриональный материалот абразий на сроках 8-10 недель беременности. Производят отбор и из" мельчение кожно-мьппечной ткани зародьппей для извлечения фибробластов. Ткань неоднократно тщательно промывают раствором Хенкса с добавлением антибиотиков и подвергают трипсинизации до полного ее расслоения, Из...

Номер патента: 1433977

Опубликовано: 30.10.1988

Авторы: Денисова, Желудов, Климович, Пашкова, Самойлович, Сирота

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, пероксидазе, хрена, штамм

...условия культивирования штамма следующие; температура 37 С, воздушная атмосфера при выращивании клеток в герметично закрытых флаконах или атмосфера с 7,57 СО в5 воздухе со 1007-ной влажностью при выращивании в открытой системе. Питательной средой служит смесь среды Игла в оригинальной прописи или в модификации Дульбекко (903) и сыворотки крупного рогатого скота (107).Культура представляет собой взвесь одиночных клеток или рыхлых агрегатов по 4-16 и более клеток, легко раэъединяющихся при встряхивании. Оптимальная посевная доза - 2 х 105 клеток в 1 мп среды. Для поддержания культуры в пролиферирующем состоянии клетки рассевают 2 раза в неделю с коэффициентом 1:2 - 1:4. Максимальная плотность культуры с сохранением6...

Номер патента: 1433978

Опубликовано: 30.10.1988

Авторы: Богомолова, Коптяева, Унанов, Юминова

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, вирусу, выявления, используемый, клеток, кори, культивируемых, человека, штамм

...- создание штамма культивируемых клеток человека, хронически инфицированных вирусом кори.Штамм используется в качестве субстрата при использовании метода флю оресцирующих антител (МФА) для выявления антител к вирусу кори.Штамм депонирован в специализированной коллекции перевиваемых клеток при Институте цитологии АН СССР под номером ВСКК(П) 79 Д.Штамм ВСКК(П) 79 Д получен путем заражения клеток НЕрвирусом кори, штамм Ленинград- при множественности инфекции 0,001 .ТЦД /клетка. Единичные клетки, выкившие;,после пер. вичного заражения дали начало хронически инфицированной культуре. Использование клеток ВСКК(П) 79 Д Культуральные свойства, 25позволяет стандартизировать и ускаТип роста смешанный, перевивка рить получение результатов...

Номер патента: 1433979

Опубликовано: 30.10.1988

Авторы: Банников, Гельштейн, Крутовских, Трояновский, Чипышева

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, используемый, кератину, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, человека, штамм

...число хромосом - 51.Характеристика полезного продукта.МКА относятся к классу 1 яС 2 Ь(Н).В реакции иммуноблоттинга с кератинами из культуры клеток НеЬа и срезов органов человека МКА реагируютодной полосой с кератином м.м. 46 К 0(й. 17),Контаминация.ьактерии и грибы в культуре придлительном наблюдении и посевах напитательные среды не обнаружены.Криоконсервирование. Клетки штамма ресуспендируют в эмбриональнойтелячьей сыворотке, содержащей 107.диметилсульфоксида в концентрации61-Зх 10 клеток в 1 мл, разливают в стерильные пластиковые ампулы при 4 Си замораживают в жидком азоте по программе со снижением температуры нао1 С в минуту с последующим переносомв жидкий азот, Размораживание: 1 минпри 37 С.Клетки разводят в 5-10 млполной среды,...

Номер патента: 1437392

Опубликовано: 15.11.1988

Авторы: Катковская, Мекшенков, Серегина

МПК: C12N 5/00

Метки: в-лимфоцитов, гибридных, используемый, клеток, культивируемых, человека, штамм

...50 мкг/мллипополисахарида из Е.со 1 и Роедееа Мгояеп (РММ) в разведении 1:100и инкубируют 48 ч при 37 С, в атмосфере 57 СО. Обработку РйМ и липополисахаридом проводят для активацииЛПК и увеличения частоты слияния,2 10 клеток НСИ.ТК .6410 с, находящихся в середине логаримической фазыроста смешивают с 2 10 .ЛПК. Смесь7клеток трижды отмывают от РСБ, центрифугируя их при 160 ц. После центрифугирования супернатант удаляютполностью и к осадку добавляют 1 мл457-ного (ПЧ) ПЭГ (м.м. = 4000).ПЭГ добавляют постепенно, осторожновзвешивая в нем клеточный осадок.Процедура добавления ПЭГ занимает1 мин, Еще 1 мин клетки инкубируют сПЭГ при комнатной температуреЗатемк инкубационной смеси медленно постенке центрифужной пробирки добавляют 1 мл КРМ...

Номер патента: 1437393

Опубликовано: 15.11.1988

Авторы: Бундулис, Войтенок, Панютич, Скривелис, Циманис

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, интерлейкину-2, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, рекомбинантному, человека, штамм

...не пассируетсяболее одного раза.Контаминация, Бактерии и грибы вкультуре не обнаружены при длительном наблюдении и посевах на питатель.ные среды. Заражение микоплаэмой невыявлено при окрашивании красителямина ДК Н и по характеру включения тимидиновой метки,Криоконсервирование, Для длительного хранения клетки штамма замораживают в эмбриональной телячьейсыворотке с добавлением 107 диметилсульфоксида. Режим заморажния: 1 С/минОдо -70 С. После замораживания клеткипереносят в жидкий азот. Размораживание - на водяной бане при 37 С.Жизнеспособность клеток после размораживания 70-807. по окрашиванию трипановым синим.Использование штамма иллюстрируется следующими примерами.П р и м е р 1. Гибридомные клеткипомещают в стеклянный флакон объемом50...

Номер патента: 1442545

Опубликовано: 07.12.1988

Авторы: Воеводин, Зоделава, Клоц, Оганян, Размадзе

МПК: A61K 39/395, C12N 5/00

Метки: антител, гибридных, животных, иммуноглобулинов, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, моноклональных, обезьян, цепям, человека, штамм

...иммуноферментным методом, Стабильная продукция антител сохраняется в течение 10 пассажей п ч.тго.50Характеристика полезного продукта. МКА относятся к классу 1 я 62 а, они взаимодействуют с общей "приматовой" детерминантой % -цепи иммуноглобулинов человека и обезьян. МКА преципитируют иммуноглобулины человека в присутствии ПЭГ(реакции встречной и радиальной иммунодиффузии). Контаминация, Контаминация бактериями, грибами и микоплазмой не обнаружена.бКриоконсервирование 5-6 10 клеток замораживают по программе в жидком азоте. Среда консервирования - эмбриональная телячья сыворотка и диметилсульфоксид. Жизнеспособность клеток после размораживания 90%,П р и м е р 1. Навески иммуноглобулинов 18 С, 18 А и 18 М в количестве 15 мкг на...

Номер патента: 1446154

Опубликовано: 23.12.1988

Авторы: Войтенок, Осипович, Панютич, Циманис

МПК: C12N 5/00

Метки: антител, белку, гибридных, еsснеriснiа, животных, интерлейкина-2, используемый, клеток, культивируемых, мusсulus, мембранному, моноклональных, препарате, рекомбинантного, человека, штамм

...частично очищенным РИЛ(иммуноферментный анализ).Продукция МКА сохраняется как ми) нимум до 10 пассажей п ч 11 о, В асцитной форме штамм не пассируется более одного раза.Контаминация, Бактерии и грибы в культуре .:не обнаружены при длительном наблюдении и посевах на пита" тельные среды. Заражение микоплазмой не выявлено по характеру включения тимидиновой меткиКриоконсервирование, Для длительного хранения клетки штамма замораживают в эмбриональной телячьей сыво" ротке с добавлением 10 диметилсульфо оксида. Режим замораживания: 1 С в 1 мин до -70 С. После замораживания клетки переносят в жидкий азот, Раэморажйвание - на водяной бале при +3 С. Жизнеспособность клеток послеоразмораживания 70-80 , по окрашиванию трипановым синим,П р...

Номер патента: 1446155

Опубликовано: 23.12.1988

Авторы: Карабаев, Сайб

МПК: A01H 5/10, C12N 5/00

Метки: кукурузы, культуры, растений-регенерантов, тканей

...растений для различных генотипов кукурузы на среде М 6 с 40 мг/л триптофана, 1 мг/л аденина, 0,1 мг/л 2,4-Д приведен в табл. 1.Таким образом, осуществление способа возможно при использовании в среде регенерации 40 мг/л, триптофана, 1 мг/л аденина и 0,1 мг/л 2,4-Д (нижняя граница заявленного интервала концентраций компонентов),П р и м е р 2. Морфогенные каллусы пересаживают на среду М 6, со" держащуюмг/л тиамина, Зсахарозы, 1 агара, 50 мг/л триптофана, 5 мг/л аденина 0,2 мг/л 2,4-Д, и культивируют на свету при 27 С при 16-часовом фотопериоде.Через 1-2 недели наблюдается формирование зачатков побегов, причем со .значительно большей частотой, чем на среде регенерации (пример 1). Частота регенерационных событий также зависит от генотипа...